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Zfp260对MC3T3-E1细胞体外成骨分化及增殖、迁移影响的实验研究

口腔颌面外科杂志 2024年第6期34卷 421-426页

作者：吴军王佐林上海市同济口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

目的:探究锌指蛋白260(zinc-finger protein 260,Zfp260)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1 cells)体外成骨分化及增殖、迁移的影响。方法:体外培养并诱导MC3T3-E1细胞成骨分化,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测诱导7、14 d后Zfp260的表达量变化。用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染MC3T3-E1细胞,并通过RT-qPCR测定Zfp260的敲降效率及敲降组与对照组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、人骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)等成骨生物标志物表达量的变化。通过Transwell、细胞划痕实验检测敲降Zfp260后MC3T3-E1细胞迁移能力的变化。通过CCK8实验检测敲降Zfp260后MC3T3-E1细胞增殖能力的变化。结果:体外诱导MC3T3-E1细胞成骨分化后,Zfp260的表达量明显上调(P<0.05)。使用siRNA敲降Zfp260后,ALP及BMP2的表达量明显下调(P<0.05)。Transwell及细胞划痕实验证明敲降Zfp260后,MC3T3-E1细胞的迁移能力受到抑制。CCK8实验证明敲降Zfp260后,MC3T3-E1细胞的增殖能力增加。结论:Zfp260可促进MC3T3-E1细胞的成骨分化。

关键词：锌指蛋白260 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞成骨分化

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牙种植体周骨吸收的免疫学机制及研究进展

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口腔颌面外科杂志 2024年第6期34卷 413-420页

作者：何叶泓范震上海市同济口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

种植体作为异物植入颌骨后,机体免疫系统与骨骼系统之间相互调节与适应,从而促进种植体周骨结合及骨改建,然而异物反应平衡的失调可能导致种植体周的骨丧失。本文总结了可能引发种植体周免疫反应并导致骨吸收的相关因素,包括种植体周微... 详细信息

种植体作为异物植入颌骨后,机体免疫系统与骨骼系统之间相互调节与适应,从而促进种植体周骨结合及骨改建,然而异物反应平衡的失调可能导致种植体周的骨丧失。本文总结了可能引发种植体周免疫反应并导致骨吸收的相关因素,包括种植体周微生物感染、种植体过载、不良的全身状况及种植体材料的生物磨损等。破骨细胞是目前已知的人体中唯一能导致骨吸收的细胞,因此本文以其生成为线索,梳理了巨噬细胞极化、核因子-κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/核因子-κB受体激活因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)通路、核因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)通路等调节该过程的关键通路及因子。本综述讨论了种植体周骨丧失的免疫机制,为理解骨结合概念及从免疫角度治疗种植体周骨丧失提供了思路。

关键词：牙种植体骨吸收骨免疫骨结合

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仿生结构理念在骨组织工程支架构建中的应用

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口腔颌面外科杂志 2025年第2期35卷 142-144页

作者：王云王佐林上海市同济口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

骨组织工程(bone tissue engineering,BTE)支架的成分、孔径、孔隙率、机械性能等对骨再生的影响已被广泛研究。然而,目前关于其多尺度结构设计影响骨再生的研究仍不充分。基于仿生技术的发展,通过模仿天然材料的多尺度结构来改善BTE支... 详细信息

骨组织工程(bone tissue engineering,BTE)支架的成分、孔径、孔隙率、机械性能等对骨再生的影响已被广泛研究。然而,目前关于其多尺度结构设计影响骨再生的研究仍不充分。基于仿生技术的发展,通过模仿天然材料的多尺度结构来改善BTE支架的机械性能和生物学活性以促进骨再生,是一种有前景的策略。因此,本文综述了近年来仿生结构材料在BTE支架中的研究进展,并讨论了未来发展的机遇和挑战,旨在为设计出性能更优越的BTE支架提供灵感。

关键词：骨组织工程骨组织工程支架骨再生仿生结构材料

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高尔基体应激反应在骨代谢中的研究进展

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口腔颌面外科杂志 2025年第1期35卷 59-62页

作者：牛萍萍孙瑶上海市同济口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

在哺乳动物的生长发育和损伤修复过程中,细胞器在受到来自机体内部或外界干扰时,通过一系列复杂的调控机制实现自我调节,以维持细胞稳态,这一过程被称为细胞器应激反应。高尔基体是细胞内一个关键的细胞器,不仅参与细胞内蛋白加工修饰... 详细信息

在哺乳动物的生长发育和损伤修复过程中,细胞器在受到来自机体内部或外界干扰时,通过一系列复杂的调控机制实现自我调节,以维持细胞稳态,这一过程被称为细胞器应激反应。高尔基体是细胞内一个关键的细胞器,不仅参与细胞内蛋白加工修饰、脂类代谢及囊泡转运等生理活动,还在离子稳态、应激反应中发挥着重要作用。骨代谢是一个维持骨骼健康的重要且复杂的过程,涉及成骨细胞、破骨细胞等多种细胞的协同作用。在这一过程中,高尔基体的应激反应有助于维持骨骼细胞的内稳态和生理功能。本文综述了高尔基体应激反应的研究进展,包括结构、功能、触发因素、信号转导途径,以及对骨组织细胞功能的影响,旨在为骨疾病的治疗提供新的思路。

关键词：高尔基体细胞器应激反应糖基化骨代谢

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空间转录组技术的进展及其在骨研究中的应用

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口腔颌面外科杂志 2024年第2期34卷 143-145页

作者：陈永亮王佐林同济大学附属口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

骨组织中细胞的结构和功能异质性与其空间位置密切相关。空间转录组(spatial transcriptomics)技术能够同时获得组织内空间单元的位置信息和转录组变化。近年来,空间转录组技术的迅速发展使组织器官的高分辨率和高通量转录组分析得以实... 详细信息

骨组织中细胞的结构和功能异质性与其空间位置密切相关。空间转录组(spatial transcriptomics)技术能够同时获得组织内空间单元的位置信息和转录组变化。近年来,空间转录组技术的迅速发展使组织器官的高分辨率和高通量转录组分析得以实现,并不断应用于骨骼系统的研究中。本文就空间转录组技术的进展及其在骨研究中的应用作一综述。

关键词：空间转录组下一代测序骨髓微环境间充质干细胞

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机械力刺激对骨代谢影响的研究进展

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口腔颌面外科杂志 2024年第5期34卷 393-396页

作者：姜雪王佐林同济大学附属口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

机械力刺激对骨代谢的影响受到学者们的广泛关注。随着科学研究的深入,研究的焦点逐渐转向更为细化的层面。学者们试图从多个角度探讨这一问题,包括不同力学性质、力学强度、力的频率、细胞类型及分子机制对骨代谢的影响。近年来研究热... 详细信息

机械力刺激对骨代谢的影响受到学者们的广泛关注。随着科学研究的深入,研究的焦点逐渐转向更为细化的层面。学者们试图从多个角度探讨这一问题,包括不同力学性质、力学强度、力的频率、细胞类型及分子机制对骨代谢的影响。近年来研究热点集中于如何通过改变机械力刺激或者针对特定细胞类型及某种感受器来调整骨代谢水平。鉴于这一过程的复杂性,本文旨在综述机械力刺激对骨代谢影响的相关最新研究进展,以期为进一步研究提供参考。

关键词：机械力骨代谢成骨

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小核仁RNA宿主基因在间充质干细胞成骨分化中作用机制的研究进展

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口腔颌面外科杂志 2024年第4期34卷 306-309页

作者：黄洁王佐林同济大学附属口腔医院口腔种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

骨愈合和骨再生是维持骨稳态的复杂生理过程,其中间充质干细胞作为成骨细胞的主要来源在其中发挥着重要作用。研究表明,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)广泛参与调节间充质干细胞的成骨分化,其中小核仁RNA宿主基因(small nuc... 详细信息

骨愈合和骨再生是维持骨稳态的复杂生理过程,其中间充质干细胞作为成骨细胞的主要来源在其中发挥着重要作用。研究表明,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)广泛参与调节间充质干细胞的成骨分化,其中小核仁RNA宿主基因(small nucleolar RNA host gene,SNHG)作为近年来新发现的一类非编码基因家族,可通过多种途径调控间充质干细胞成骨分化,有望成为骨代谢和骨再生治疗中的新靶点。因此,本文旨在总结SNHG家族基因在间充质干细胞成骨过程中的作用机制。

关键词：骨再生小核仁RNA宿主基因长链非编码RNA

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TDP-43对LPS刺激下小鼠牙龈成纤维细胞影响的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2024年第4期34卷 268-275页

作者：许慧琳苏俭生同济大学附属口腔医院口腔修复科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

目的:探究TARDNA结合蛋白-43(TARDNA binding protein-43,TDP-43)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的炎症微环境中小鼠牙龈成纤维细胞(mouse gingival fibroblasts cells,MGFs)的影响。方法:分离培养野生型C57BL/6J小鼠的牙龈成纤维细胞。设置不同浓度及处理时间的LPS刺激,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术检测相关炎症因子的mRNA表达量,筛选出最佳处理条件。对细胞进行免疫荧光染色,观察炎症微环境下MGFs中TDP-43的变化。使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染技术敲低MGFs中的TDP-43,并测定转染效率。设置3个实验组:阴性对照组(NC组)、LPS诱导对照组(NL组)和TDP-43敲低+LPS诱导组(SL组)。利用RT-qPCR技术检测部分炎症因子、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、黏附相关因子mRNA的表达情况。应用蛋白质印迹法(western blotting)检测部分炎症因子、黏附相关因子蛋白表达情况。使用天狼星红染色法探究细胞内胶原沉积情况。结果:最佳LPS刺激的浓度为100 ng/mL,时间为6 h;在无LPS刺激的状态下,MGFs中的TDP-43基本在细胞核内,LPS刺激后,TDP-43出现在细胞核和细胞质中;成功使用siRNA转染MGFs构建敲低TDP-43的细胞模型,转染效率接近50%;在LPS刺激下,TDP-43敲低的实验组(SL组)与对照实验组(NL组)相比,炎症因子、基质金属蛋白酶、黏附相关因子mRNA的表达量出现下调(P<0.05),且部分黏附相关蛋白及炎症因子蛋白的表达量也显著下调;在胶原沉积方面,SL组和NL组相较于NC组都有减少(P<0.05),但NL组和SL组差异不大,无统计学意义(P>0.05)。结论:当LPS诱导MGFs处于炎症微环境时,TDP-43出现由核内向核外移动的趋势;且TDP-43对LPS诱导的MGFs炎症微环境下炎症因子、黏附相关因子及基质金属蛋白酶表达起正向调控作用,对胶原沉积的影响不明显。

关键词： TDP-43 脂多糖牙周炎小鼠牙龈成纤维细胞

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LincRNA-EPS对RANKL和LPS诱导RAW264.7细胞破骨分化影响的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2024年第3期34卷 163-169页

作者：张栩王雅冰苏俭生同济大学附属口腔医院口腔修复科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所上海200072

目的:探究长链非编码RNA-EPS(long non-coding RNA-EPS,lincRNA-EPS)对核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7细胞破骨分化的影响。方法:构建过表达lincRNA-EPS的RAW264.7细胞株和阴性对照株,然后用RANKL诱导法和LPS诱导法(RANKL预刺激后行LPS诱导)同时进行破骨分化诱导,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase staining,TRAP staining)观察产生破骨细胞数量和形态的差异,鬼笔环肽染色评估所产生破骨细胞功能的差异,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测诱导后破骨相关基因mRNA表达量的差异。结果:成功构建过表达lincRNA-EPS的RAW264.7细胞株和阴性对照株;不论是RANKL法诱导还是LPS法诱导,lincRNA-EPS过表达株和阴性对照株的细胞增殖情况均无显著差异(P>0.05);LPS法诱导下,TRAP染色显示lincRNA-EPS过表达株分化出的破骨细胞数量显著少于阴性对照株(P<0.05),鬼笔环肽染色显示lincRNA-EPS过表达株产生的F-肌动蛋白环体积显著小于阴性对照株,RT-q PCR显示linc RNA-EPS过表达株的破骨相关基因TRAP、CTSK、DC-STAMP、ATP6v0d2 mRNA表达均显著低于阴性对照株(P<0.05);但在RANKL法诱导下,二者各项表达均无显著差异(P>0.05)。结论:lincRNA-EPS的过表达对LPS诱导的破骨分化有明显的抑制作用,而且对诱导出的破骨细胞功能也起到负向调节作用,但lincRNA-EPS过表达对RANKL诱导的破骨分化及产生的破骨细胞的功能无显著影响。

关键词：长链非编码RNA 牙周炎破骨分化脂多糖

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中性粒细胞与牙周炎关系的研究进展

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口腔医学 2024年第4期44卷 292-296页

作者：王雪奎孙瑶同济大学附属口腔医院种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

牙周炎是一种常见的口腔慢性炎症,宿主因素是其致病机制之一。作为数目最多的免疫细胞,中性粒细胞可影响牙周免疫稳态,其数量或功能改变可通过多种机制加重牙周炎症,基于中性粒细胞的牙周炎干预措施在动物实验中展现出较好的牙周炎治疗... 详细信息

牙周炎是一种常见的口腔慢性炎症,宿主因素是其致病机制之一。作为数目最多的免疫细胞,中性粒细胞可影响牙周免疫稳态,其数量或功能改变可通过多种机制加重牙周炎症,基于中性粒细胞的牙周炎干预措施在动物实验中展现出较好的牙周炎治疗前景。本文综述了中性粒细胞在牙周炎中作用的研究进展,并总结展望目前靶向中性粒细胞的治疗手段,以期为牙周炎防治提供新的视角。

关键词：中性粒细胞牙周炎免疫治疗

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