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中华口腔医学会第15次全国口腔黏膜病学学术大会暨第13次全国口腔中西医结合学术大会

作者：郭艺婷韩文豪何园同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔黏膜科·上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海第十人民医院消化内科同济大学生命科学与技术学院

目的:口腔扁平苔藓(OLP)是一种常见的口腔黏膜疾病,其病因和发病机制尚不清楚。许多研究提示,微生物在OLP发病过程中发挥重要作用。本课题组前期研究发现,OLP患者口腔颊黏膜病损部位的菌群构成发生了显著变化,产黑普氏菌(Prevotella mel... 详细信息

目的:口腔扁平苔藓(OLP)是一种常见的口腔黏膜疾病,其病因和发病机制尚不清楚。许多研究提示,微生物在OLP发病过程中发挥重要作用。本课题组前期研究发现,OLP患者口腔颊黏膜病损部位的菌群构成发生了显著变化,产黑普氏菌(Prevotella melaninogenica,Pm)的构成比显著增加,且Pm可侵入OLP病损组织的上皮及固有层中。口腔角质形成细胞作为口腔黏膜的第一道物理防线,在OLP中可能直接与Pm相互作用。因此,本研究旨在探讨Pm对口腔角质形成细胞的影响。方法:将Pm与人口腔角质形成细胞系(HOK)共培养,建立Pm-HOK共培养模型,通过入侵-存活实验检测Pm在HOK细胞内的胞内存活情况,利用Transwell小室上皮渗透性实验观察Pm对HOK单层细胞渗透性的影响,通过qRT-PCR、Western Blot和细胞免疫荧光方法检测闭锁小带蛋白-1(zonula occludin-1,ZO-1)的表达情况。将原代人口腔角质形成细胞与Pm共培养0,4 h和24 h后,提取总RNA进行转录组测序,分析差异表达基因并进行基因本体(Gene Ontology,GO)分析。选择差异表达基因肌球蛋白轻链激酶(Myosin light chain kinase,MLCK)并采用qRT-PCR方法对其在Pm-HOK共培养模型中的表达情况进行验证;用MLCK抑制剂ML-7预处理HOK细胞后再将其与Pm共培养,检测HOK细胞上皮渗透性及ZO-1的表达变化。结果:Pm可入侵并在HOK细胞胞内存活,存活时长达72小时;Pm与HOK细胞共培养后,上皮渗透性呈时间和感染复数(MOI)依赖性增加(P<0.05)。HOK细胞ZO-1的m RNA和蛋白表达水平随Pm共培养时长和MOI的增加而降低(P<0.05)。转录组测序及GO分析结果主要富集在肌动蛋白连接(actin binding),两细胞间紧密连接(bicellular tight junction),肌动蛋白收缩纤维(contractile actin filament bundle)以及肌动蛋白-肌球蛋白(actin-myosin)等与肌动蛋白-肌球蛋白相关的条目下;MLCK是两个共培养组中共同的上调表达的差异表达基因。选择MLCK在Pm-HOK共培养模型中进行验证,其表达在对照组和Pm共培养组之间存在显著性差异(P<0.05);利用MLCK抑制剂ML-7预处理HOK细胞,可明显缓解Pm造成的上皮渗透性增加,且ZO-1表达升高(P<0.05)。结论:Pm可使HOK细胞上皮渗透性增加,紧密连接破坏并造成胞内感染;MLCK可能是Pm调节HOK细胞紧密连接和上皮屏障的关键基因;Pm-HOK细胞共培养模型有望成为研究OLP发病机制的细胞模型。

关键词：口腔扁平苔藓产黑普氏菌肌球蛋白轻链激酶上皮屏障功能转录组测序

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上颌种植支抗结合颌间牵引在青少年骨性Ⅲ类错[牙合]患者中的应用及疗效评价

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口腔医学 2021年第3期41卷 231-236页

作者：陈旭李博晟张京剧上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院正畸科上海200072

目的对上颌骨发育不足的骨性Ⅲ类患者,在恒牙列期矫治过程中,上颌骨植入种植体进行颌间牵引,探讨其疗效及作用机制。方法在恒牙早期进行的正畸矫治中,应用上颌骨种植支抗+Ⅲ类颌间牵引,纠正Ⅲ类错[牙合],分析矫治前后的头影测量指标变化... 详细信息

目的对上颌骨发育不足的骨性Ⅲ类患者,在恒牙列期矫治过程中,上颌骨植入种植体进行颌间牵引,探讨其疗效及作用机制。方法在恒牙早期进行的正畸矫治中,应用上颌骨种植支抗+Ⅲ类颌间牵引,纠正Ⅲ类错[牙合],分析矫治前后的头影测量指标变化,探讨牵引对上下颌骨及牙列的影响。结果治疗后患者的Ⅲ类错[牙合]得到明显改善,前牙均达到正常覆[牙合]覆盖。X线头影测量分析显示SNA角增加1.58°,ANB角减小1.62°,面中份长度Co-A距离增加3.07 mm,[牙合]平面逆时针旋转6.06°,Wits值增加7.51 mm;治疗期间,前后面高均有显著增加,前后面高比和下颌平面角保持稳定。结论对于上颌骨发育不足的骨性Ⅲ类青少年患者,利用种植支抗结合固定矫治器进行颌间牵引,可以在一定程度上改善骨性错[牙合]。尽管患者已在恒牙列期,对上颌骨的前方牵引力仍可促进患者上颌骨发育,同时远移下牙弓,促进[牙合]平面逆时针旋转,纠正患者的咬合关系,改善患者面型。相比传统的前方牵引,结合骨性支抗的Ⅲ类牵引对患者的垂直骨面型影响较小。但对于上前牙暴露不足的患者,在矫治器设计时要充分考虑上下前牙的暴露量,注意避免重力牵引使下前牙过长的副作用。

关键词：种植支抗骨性Ⅲ类错[牙合] 颌间牵引

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不同咬合记录方式制作后牙单冠的咬合适合性研究

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口腔医学 2021年第9期41卷 810-815页

作者：谢培进刘伟才王灿叶俊吴珺华同济大学口腔医学院/附属口腔医院修复科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的评估不同咬合记录方式在后牙单冠修复体咬合适合性方面的差异。方法选择10例拟后牙单冠修复的患者,利用5种不同的咬合记录方式分别制作5个单冠。实验分组:以Co组(Artex CR+O-Bite咬合记录)为参照,其他4种咬合记录方式为实验组,包括3... 详细信息

目的评估不同咬合记录方式在后牙单冠修复体咬合适合性方面的差异。方法选择10例拟后牙单冠修复的患者,利用5种不同的咬合记录方式分别制作5个单冠。实验分组:以Co组(Artex CR+O-Bite咬合记录)为参照,其他4种咬合记录方式为实验组,包括3s组(3Shape TRIOS 3静态咬合记录)和3d组(3Shape TRIOS 3动态咬合记录)、Ka组(KaVo ARCUS digma)、Pr组(Dentograf)。通过患者满意度评分,T-scanⅢ咬合记录分析仪记录咬合时间(occlusion time,OT)和咬合分离时间(disocclusion time,DT)及医师椅旁调牙合时间来评价单冠修复体咬合的适合性。结果5种咬合记录方式在制作后牙单冠的患者满意度评分、ΔOT和ΔDT值以及医师椅旁调牙合时间上都没有统计学差异(P>0.05)。结论后牙单冠制作时,多种结合下颌运动的咬合记录方式都可以取得良好的临床效果。

关键词：咬合适合性咬合记录下颌运动

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LincRNA-EPS对脂多糖诱导的小鼠牙周膜细胞炎症因子表达的影响

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口腔颌面外科杂志 2021年第1期31卷 1-8页

作者：叶远舟刘凯王雅冰苏俭生上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔修复科上海200072

目的:探究基因间区长链非编码RNA-EPS(long intergenic noncoding RNA,lincRNA-EPS)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的小鼠牙周膜细胞(mouse periodontal ligament cells,mPDLCs)炎症因子表达的影响。方法:使用CRISPR/Cas9技术构建lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠。分离培养野生型及lincRNA-EPS基因敲除型mPDLCs,并进行免疫荧光鉴定。制备纳米粒材料,搭载lincRNA-EPS过表达质粒,并测定转染效率。设立5个实验组:野生型对照组(WT组)、野生型刺激组(WT+LPS组)、敲除型对照组(KO组)、敲除型刺激组(KO+LPS组)和挽救实验组(KO+LPS+lincRNA-EPS组)。在WT+LPS组、KO+LPS组及KO+LPS+lincRNA-EPS组中添加100 ng/mL的LPS,刺激6 h,其中,在KO+LPS+lincRNA-EPS组中提前加入lincRNA-EPS过表达质粒进行转染。WT组及KO组不做处理。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各实验组炎症因子cxcl10、cxcl12、cxcl14、IL-1α、IL-6 mRNA的表达量。应用酶联免疫吸附测定技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组炎症因子cxcl10、IL-1α、IL-6的蛋白水平。结果:成功构建了lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠模型;搭载lincRNA-EPS过表达质粒的纳米粒成功转染了mPDLCs,转染效率接近20%;在无LPS刺激的状态下,KO组的炎症因子表达水平较低,且与WT组无差异(P>0.05),lincRNA-EPS基因的缺失不会导致mPDLCs炎症因子基础表达量的改变;LPS刺激6 h后,KO+LPS组和WT+LPS组相较于各自的对照组,各个炎症因子的表达均上调(P<0.05),且KO+LPS组相较于WT+LPS组,各炎症因子表达上调更为显著(P<0.05),说明lincRNA-EPS缺失的mPDLCs受到LPS刺激时,更易引发强烈的炎症因子表达;KO+LPS+lincRNA-EPS组相较于KO+LPS组,炎症因子的表达量下调(P<0.05),可见外源性lincRNA-EPS的转入在一定程度上抑制了炎症因子的表达。结论:lincRNA-EPS对LPS诱导的mPDLCs炎症因子表达起负向调控作用。

关键词：基因间区长链非编码RNA 脂多糖牙周炎小鼠牙周膜细胞

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长链非编码RNA-EPS对小鼠牙釉质发育的影响

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口腔颌面外科杂志 2021年第5期31卷 272-277页

作者：郝晨笛苏俭生上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔修复科上海200072

目的:利用基因间长链非编码RNA-EPS(long intergenic non-coding RNA-EPS,lincRNA-EPS)基因敲除小鼠模型研究lincRNA-EPS对牙釉质发育的影响。方法:应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分析方法鉴定lincRNA-EPS基因敲除小鼠的基因型;微型CT(micro-CT)检测8周龄lincRNA-EPS基因敲除小鼠和野生型小鼠下颌磨牙区的形态;扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察下颌磨牙区釉质的微观结构;X线及X射线能谱分析(energy dispersive X-ray spectroscopy,EDX)检测釉质矿化程度的改变;体视显微镜下分离PN0.5小鼠下颌第一磨牙牙胚;实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术检测其釉质发育相关基因AMELX、ENAM、AMBN、AMTN的mRNA表达量。结果:与野生型小鼠相比,micro-CT图像显示lincRNA-EPS基因敲除小鼠下颌磨牙舌侧出现大面积釉质缺损,舌侧牙尖磨耗成凹坑状;SEM结果显示,lincRNA-EPS基因敲除小鼠釉质结构紊乱,釉柱内羟基磷灰石晶体间存在间隙;lincRNA-EPS基因敲除小鼠下颌磨牙牙胚中,AMELX、ENAM、AMBN、AMTN的mRNA表达量较野生型小鼠显著降低,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:LincRNA-EPS的缺失导致釉质发育相关基因表达下调,并引起牙釉质结构的紊乱,最终导致了釉质结构的缺损,证明lincRNA-EPS在牙釉质发育过程中具有重要作用。

关键词：长链非编码RNA-EPS 釉质发育基因敲除小鼠牙齿表型

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间充质干细胞膜包被的仿生纳米载体的构建及其对巨噬细胞极化基因表达影响的研究

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口腔颌面外科杂志 2021年第6期31卷 342-348页

作者：李家琳苏俭生上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔修复科上海200072

目的:构建间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)膜包被的仿生纳米载体,负载姜黄素,探究其对巨噬细胞极化基因表达的影响。方法:利用脂质体挤压器将干细胞膜囊泡与载有姜黄素的聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic),PL... 详细信息

目的:构建间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)膜包被的仿生纳米载体,负载姜黄素,探究其对巨噬细胞极化基因表达的影响。方法:利用脂质体挤压器将干细胞膜囊泡与载有姜黄素的聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic),PLGA]纳米粒结合,构建MSCs膜包被的仿生纳米载体。应用透射电镜表征形貌。体外考察其稳定性和药物释放规律。将材料与RAW264.7巨噬细胞共培养,探究材料的细胞毒性及巨噬细胞极化相关基因的表达水平。结果:成功构建MSCs膜包被的仿生纳米载体,电镜下见均匀核-壳球形结构。粒径由包裹前(183.2±0.8)nm转变为(204.2±3.7)nm。体外稳定性良好,24 h累积药物释放55.37%。实验组M2型巨噬细胞相关基因IL-10、Arg1、CD206表达升高,M1型巨噬细胞相关基因iNOS、IL-1β降低。结论:本实验成功构建干细胞膜包被的仿生纳米载体,能有效地促进M2型巨噬细胞相关基因表达。

关键词：细胞膜仿生纳米载体巨噬细胞

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用于简单病例无托槽隐形矫治器制作的3D打印模型精度研究

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中华口腔正畸学杂志 2021年第4期28卷 184-187页

作者：李晶韩高峰王硕周彦恒北京大学口腔医学院·口腔医院正畸科国家口腔疾病临床医学研究中心口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室100081 同济大学附属口腔医院正畸科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心200072

目的应用数字化的诊疗设计和3D打印制作无托槽隐形矫治器从而解决简单牙列不齐等问题。评价基于数字光处理技术3D打印牙列模型的精确性,论证该数字化正畸流程可行性。方法通过选取轻度间隙不调、扭转等不同类型的简单不齐病例20例,3shap... 详细信息

目的应用数字化的诊疗设计和3D打印制作无托槽隐形矫治器从而解决简单牙列不齐等问题。评价基于数字光处理技术3D打印牙列模型的精确性,论证该数字化正畸流程可行性。方法通过选取轻度间隙不调、扭转等不同类型的简单不齐病例20例,3shape Trios全称“口内扫描”获得牙列信息后应用3shape Ortho Analyzer软件进行排牙设计并导出各阶段步骤模型数据用于3D打印和压制无托槽矫治器;在85个上下领牙列数字化设计模型和对应3D打印模型上选取对应左右中切牙、尖牙和磨牙的牙冠高度、牙冠宽度尖牙和磨牙间牙弓宽度、牙弓长度分别进行软件及手工测量。采用组内相关系数(ICC)对重复测量信度进行评估;采用配对t检验分析两种模型在各测量指标上有无差异以检验模型精确性。结果软件测量数字化设计模型和手工测量3D打印实体模型结果的ICC均>0.95,测量者应用软件及手工测量的可重复性均较高。两种模型在除外牙冠高度的其他各测量指标上的一致性高,配对t检验结果P>0.05,整体偏差范围在(-0.01±0.12)mm至(0.11±0.31)mm之间。结论基于数字光处理技术以10μm层厚精度3D打印的牙列模型精确性较高,可用于临床简单病例隐形矫治器制作。

关键词： 3D打印牙列模型数字化模型隐形矫治器

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长链非编码RNA在干细胞成骨分化中作用机制的研究进展

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口腔生物医学 2021年第3期12卷 205-210页

作者：胡琮佼孙瑶同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院种植科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

在骨相关疾病治疗和骨组织工程中,干细胞作为成骨细胞的主要来源发挥着重要作用。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)可调控细胞周期、增殖代谢及谱系分化。随着高通量测序等研究技术的发展,lncRNA被发现可广泛参与干细胞的成... 详细信息

在骨相关疾病治疗和骨组织工程中,干细胞作为成骨细胞的主要来源发挥着重要作用。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)可调控细胞周期、增殖代谢及谱系分化。随着高通量测序等研究技术的发展,lncRNA被发现可广泛参与干细胞的成骨调节。miRNA海绵作用是lncRNA调控成骨最经典的机制,近年来有关RNA结合蛋白、DNA甲基化等作用机制的研究愈加深入。此外,众多经典成骨信号通路,如Wnt/β-catenin、TGF-β/Smads等在lncRNA调控成骨中的作用也逐渐被验证,两者共同展现了lncRNA在骨代谢和骨再生治疗中的潜在靶标性。本文将就lncRNA在干细胞成骨分化中的作用机制及相关信号通路做一综述。

关键词：长链非编码RNA 骨髓间充质干细胞牙周膜干细胞成骨分化骨再生

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种植体间距与种植体周炎关系的实验研究

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口腔颌面外科杂志 2021年第3期31卷 142-149页

作者：胡佳慧王海丞黄洁周笑天王佐林上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔种植科上海200072

目的:探究不同种植体间距与种植体周炎发生的关系。方法:拔除6只比格犬的双侧下颌第二前磨牙至第一磨牙,拔牙后8周在数字化外科导板辅助下行种植术。每侧植入连续的4枚种植体,种植体间距分别设置为1、2、3 mm,共3个组别。术后2周和3个... 详细信息

目的:探究不同种植体间距与种植体周炎发生的关系。方法:拔除6只比格犬的双侧下颌第二前磨牙至第一磨牙,拔牙后8周在数字化外科导板辅助下行种植术。每侧植入连续的4枚种植体,种植体间距分别设置为1、2、3 mm,共3个组别。术后2周和3个月时记录种植体周临床牙周指数,术后3个月时采集种植体龈周菌斑行16S rRNA基因测序,分别于术后1、2、3个月时拍摄X线平行投照根尖片进行影像学测量;术后3个月时进行取材,制作硬组织切片并行Van Gieson(VG)染色,用SPSS 25.0软件作统计学分析。结果:1 mm组的种植体周探诊深度(probing depth,PD)、探诊出血(bleeding on probing,BOP)阳性率、菌斑指数(plaque index,PI)均明显高于2 mm组和3 mm组;1 mm组中,满足PI≥2的检测位点数最多,且符合种植体周炎诊断标准的PD≥5 mm或BOP阳性检测位点数明显高于其他2组。菌斑群落结构分析显示,1 mm组密螺旋体属(Treponema)、坦纳菌属(Tannerella)和普氏菌属(Prevotella)的相对丰度较3 mm组更高。X线片结果显示,1 mm组边缘骨吸收(marginal bone resorption,MBR)与嵴顶骨吸收(crestal bone resorption,CBR)明显大于其他2组。组织学观察结果显示,3组中,1 mm组骨嵴顶高度较其他2组明显降低。2 mm组与3 mm组比较,以上指标的差异均无统计学意义。结论:相对于2 mm组和3 mm组,1 mm组PI最高,且发生了明显的骨吸收和软组织炎症,而2 mm组和3 mm组没有发生明显的骨吸收。因此,1 mm的种植体间距更容易发生种植体周炎。

关键词：种植体间距种植体周炎动物模型数字化外科导板骨吸收

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初级纤毛在长骨生长板分布规律的小鼠实验研究

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口腔颌面外科杂志 2021年第5期31卷 265-271页

作者：丁允鹏陶狄坷张帅孙瑶上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔种植科上海200072

目的 :探究长骨发育过程中初级纤毛在生长板的分布规律。方法 :对1、4周龄和8周龄的小鼠股骨切片进行免疫荧光染色,分析初级纤毛在生长板的分布规律;培养生长板软骨细胞并诱导其肥大化,研究该过程中初级纤毛的改变;通过无血清饥饿法提... 详细信息

目的 :探究长骨发育过程中初级纤毛在生长板的分布规律。方法 :对1、4周龄和8周龄的小鼠股骨切片进行免疫荧光染色,分析初级纤毛在生长板的分布规律;培养生长板软骨细胞并诱导其肥大化,研究该过程中初级纤毛的改变;通过无血清饥饿法提高有纤毛软骨细胞比例后诱导软骨细胞肥大化,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)和免疫荧光染色检测肥大软骨细胞标志物的表达。结果:1、4周龄小鼠的有纤毛软骨细胞主要分布在静息层、增殖层和前肥大层,肥大层有初级纤毛细胞显著减少;在体外诱导软骨细胞肥大化后,有纤毛细胞比例降低;提高有纤毛细胞比例后诱导软骨细胞肥大化,肥大软骨细胞标志性基因COL10、Prg4表达降低。结论 :初级纤毛主要分布在生长板静息层、增殖层和前肥大层,肥大层软骨细胞初级纤毛减少;通过无血清饥饿法提高有纤毛细胞比例能够降低肥大软骨细胞标志性基因的表达。

关键词：初级纤毛生长板软骨细胞

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