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中华口腔正畸学杂志 2016年第4期23卷 211-215页

作者：蒋兆霞华咏梅同济大学口腔医学院口腔正畸学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心200072

目的模拟正畸力作用下,观察不同浓度硫化氢（Hydrogen Sulfide,H2S）对人牙周膜细胞成骨相关因子Runx2表达的影响.方法对人牙周膜细胞分别施加5％循环张力0、6、12、24、48h,通过Real-time PCR及Western blot检测成骨因子Runx2的基因... 详细信息

目的模拟正畸力作用下,观察不同浓度硫化氢（Hydrogen Sulfide,H2S）对人牙周膜细胞成骨相关因子Runx2表达的影响.方法对人牙周膜细胞分别施加5％循环张力0、6、12、24、48h,通过Real-time PCR及Western blot检测成骨因子Runx2的基因及蛋白表达;观察加力与不加力时不同浓度H2S对Runx2基因表达的影响.并通过Western blot检测p38-MAPK信号蛋白的变化.结果加力后Runx2基因表达升高,在加力24 h时最高;不论加力与否,H2S浓度为50 μM时促进成骨因子Runx2升高作用最明显;加力24 h,H2S浓度为50 μM时,检测信号蛋白p38-MAPK磷酸化水平明显升高.结论在模拟正畸力作用下,H2S可引起人牙周膜细胞成骨因子Runx2表达升高,并且p38-MAPK信号通路参与H2S引起人牙周膜细胞成骨因子Runx2表达升高这一过程.

关键词：硫化氢人牙周膜细胞循环张力成骨分化 p38-MAPK信号通路

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数字化无牙颌个别托盘制作在全口义齿修复实验教学中的探索

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科技创新导报 2018年第19期15卷 195-196页

作者：李家苏俭生同济大学口腔医学院及附属口腔医院口腔修复教研室上海200072 上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

为了探索数字化无牙颌个别托盘制作在口腔修复实验教学中的应用,文章通过数字化扫描及3D打印技术制作全口义齿个别托盘建立数字化教学模式,与传统教学方式进行比较,评价数字化个别托盘在全口义齿修复数字化教学中的应用效果。建立了数... 详细信息

为了探索数字化无牙颌个别托盘制作在口腔修复实验教学中的应用,文章通过数字化扫描及3D打印技术制作全口义齿个别托盘建立数字化教学模式,与传统教学方式进行比较,评价数字化个别托盘在全口义齿修复数字化教学中的应用效果。建立了数字化个别托盘制作的教学方法,与传统教学方法比较,该教学模式能显著提高学生对数字化技术的兴趣,加深学生对数字化及传统制作过程的理解,巩固学生的理论知识及临床操作能力。因此,数字化个别托盘制作教学模式在一定程度上能够改善全口义齿修复实验教学的效果。

关键词：数字化个别托盘 3D打印技术

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血小板衍生生长因子-BB对骨髓间充质干细胞多向分化及自噬相关蛋白表达的影响

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同济大学学报（医学版） 2022年第2期43卷 165-173页

作者：李琳蔡宇艺何江峰扈梓悦葛剑平同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院牙体牙髓病教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的观察血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)多向诱导分化以及自噬相关蛋白表达的影响;建立异位牙髓再生模型,探讨PDGF-BB对再生牙髓样组织中自... 详细信息

目的观察血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)多向诱导分化以及自噬相关蛋白表达的影响;建立异位牙髓再生模型,探讨PDGF-BB对再生牙髓样组织中自噬相关蛋白表达的影响。方法体外分离鉴定大鼠BMSCs,随机分为4组,每组培养基中分别加入0、10、50、100 ng/mL PDGF-BB,通过CCK-8、Transwell、qRT-PCR及细胞免疫荧光染色技术,检测不同浓度PDGF-BB对BMSCs增殖、迁移、多向诱导分化及自噬相关蛋白表达的影响,确定PDGF-BB趋化BMSCs细胞归巢的最佳工作浓度范围。依据是否放入PDGF-BB,将试验大鼠随机分为两组:对照组(Collagen TypeⅠ),PDGF-BB诱导组(50 ng/mL PDGF-BB+Collagen TypeⅠ),将PDGF-BB联合Collagen TypeⅠ支架移植入经过根管预备后的离体牙根管内,并移植于大鼠腹部皮下。分别于术后2、4个月,采用免疫组化染色技术观察异位再生牙髓样组织的再生效果及其自噬相关蛋白ATG5和LC3的表达。结果CCK-8结果显示,BMSCs增殖活性随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);Transwell结果显示,细胞迁移数随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);qRT-PCR结果显示,OPN、Runx2、MAP2、β-Ⅲ-tubulin mRNA表达量随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05),当PDGF-BB浓度达到100 ng/mL时,mRNA表达量达到最大值;细胞免疫荧光染色结果显示,ATG5和LC3阳性细胞数量随PDGF-BB浓度升高递增,50 ng/mL PDGF-BB诱导后,ATG5和LC3阳性细胞数最大;术后4个月PDGF-BB诱导组得到的再生牙髓样组织形态与天然人牙髓组织相近,其ATG5、LC3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs增殖,对BMSCs具有显著趋化作用。PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs向成骨细胞及神经细胞分化,并促进自噬相关蛋白的表达。联合使用PDGF-BB可以有效获得内源性BMSCs迁移,促进大鼠体内牙髓样组织异位再生,及自噬相关蛋白表达。

关键词：牙髓再生血小板衍生生长因子-BB 多向分化细胞自噬细胞归巢

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骨保护素基因敲除对老年小鼠关节软骨的影响

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口腔颌面外科杂志 2016年第4期26卷 251-255页

作者：张立立孙瑶同济大学口腔医学院基础教研室上海200072 同济大学附属口腔医院种植科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:研究骨保护素(osteoprotegerin,OPG)在老年小鼠关节软骨增龄性变化中的作用及意义。方法 :取鼠龄为1年的骨保护素基因敲除(opg-knockout,Opg-KO)型小鼠和野生型(wildtype,WT)小鼠的长骨组织,分别进行X-ray、micro-CT检查,并行组织... 详细信息

目的:研究骨保护素(osteoprotegerin,OPG)在老年小鼠关节软骨增龄性变化中的作用及意义。方法 :取鼠龄为1年的骨保护素基因敲除(opg-knockout,Opg-KO)型小鼠和野生型(wildtype,WT)小鼠的长骨组织,分别进行X-ray、micro-CT检查,并行组织学染色观察关节软骨组织形态学的改变;行甲苯胺蓝染色,观察关节软骨蛋白聚糖的改变;行免疫组化染色,观察关节软骨Ⅱ型胶原表达情况。结果:与WT小鼠相比,Opg-KO小鼠关节表面粗糙,边缘性骨赘增多,软骨下骨的骨密度增高,关节软骨表面扁平塌陷,软骨细胞明显减少,排列紊乱,蛋白聚糖显著丢失,Ⅱ型胶原表达明显减少。结论:Opg-KO小鼠发生了严重骨关节炎,骨保护素对于维持老年小鼠关节软骨结构的完整有重要作用。

关键词：骨保护素关节软骨 Ⅱ型胶原

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YAP在牙釉质发育中的作用及机制研究

YAP在牙釉质发育中的作用及机制研究

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中华口腔医学会口腔预防医学专业委员会第23次口腔预防学术会议

作者：颜燕宏同济大学口腔医学院口腔预防医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的牙釉质发育不全严重影响患者的牙齿功能和身心健康,本课题探索YAP在牙釉质发育中的作用及可能机制。方法成釉细胞经成釉分化诱导后基因芯片分析与成釉相关的信号通路;Realtime-PCR、Western blot、基因芯片检测分析YAP过表达成釉细... 详细信息

目的牙釉质发育不全严重影响患者的牙齿功能和身心健康,本课题探索YAP在牙釉质发育中的作用及可能机制。方法成釉细胞经成釉分化诱导后基因芯片分析与成釉相关的信号通路;Realtime-PCR、Western blot、基因芯片检测分析YAP过表达成釉细胞成釉相关基因的表达;Mi cro-CT、扫描电镜、透射电镜和能量散射谱观察分析YapK327M/K327M小鼠牙釉质。结果测序发现成釉细胞的成釉分化与Hippo-YAP信号通路显著相关;YAP过表达后,磷酸化YAP显著降低且入核,促进成釉细胞分化。YapK327M/K327M小鼠较野生型切牙长,色白;切牙牙釉质厚,釉柱排列、牙釉质微量元素和分布不同,矿化程度高。基因芯片分析发现YAP过表达促进成釉细胞成釉分化可能与CTGF和Amelogenin相关;并上调CTGF和Amelogenin的表达。结论 YAP参与成釉细胞分化,CTGF和Amelogenin可能在这一过程中发挥作用。

关键词： YAP 牙釉质成釉细胞分化

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核壳结构介孔二氧化硅负载地塞米松磷酸钙在活髓保存中的效应研究

核壳结构介孔二氧化硅负载地塞米松磷酸钙在活髓保存中的效应研究

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中华口腔医学会口腔预防医学专业委员会第24次口腔预防学术年会

作者：颜燕宏同济大学口腔医学院口腔预防医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的探索核壳结构介孔二氧化硅负载地塞米松磷酸钙在活髓保存中的作用。方法合成核壳结构介孔二氧化硅负载地塞米松磷酸钙(MSN@na-HAp-DEX),通过透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、能谱分析(EDS)和紫外-可见吸收光谱测量... 详细信息

目的探索核壳结构介孔二氧化硅负载地塞米松磷酸钙在活髓保存中的作用。方法合成核壳结构介孔二氧化硅负载地塞米松磷酸钙(MSN@na-HAp-DEX),通过透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、能谱分析(EDS)和紫外-可见吸收光谱测量分析理化性能表征;CCK-8检测MSN@na-HAp-DEX对牙髓干细胞活力的影响;SEM观察牙髓干细胞在MSN@na-HAp-DEX表面粘附及形态;将牙髓干细胞与MSN@na-HAp-DEX共培养,Realtime-PCR分析成牙本质及炎症相关基因(DSPP、DMP-1、ALP、IL-1β和TNF-α)的mRNA表达水平,茜素红、ALP染色分析对体外牙髓干细胞分化能力调控;建立小鼠直接盖髓模型,评价MSN@na-HAp-DEX盖髓效果。结果 TEM观察到MSN@na-HAp-DEX的外壳层为介孔二氧化硅,内核为na-HAp;SEM见该材料为均一的纳米球形,比表面积为893.7m2/g,直径大小在20-40nm之间;XRD和EDS结果证明材料合成成功;紫外荧光色谱分析发现MSN@na-HAp-DEX的负载量约为22.9%;CCK8及SEM结果提示该材料具有良好的生物相容性,能促进细胞生长、黏附和渗入到材料中;Realtime-PCR、茜素红、ALP染色分析显示该材料具有良好的促牙本质分化性能和抗炎作用;体内直接盖髓动物模型,发现该材料可促进牙本质桥形成,炎症反应小。结论成功合成了MSN@na-HAp-DEX材料,可能为将来盖髓材料提供新思路。

关键词：介孔二氧化硅地塞米松磷酸钙活髓保存

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XP-endo Shaper和ProTaper Next对弯曲根管成形能力及微裂纹形成的影响

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上海口腔医学 2023年第3期32卷 225-229页

作者：封菲曹立群张旗同济大学口腔医学院牙体牙髓病学教研室上海牙组织再生与修复工程技术研究中心上海200072 上海市口腔医院牙体牙髓病科上海市颅颌面发育与疾病重点实验室上海200031

目的:运用显微CT(Micro-CT)评价ProTaper Next(PTN)和XP-endo Shaper(XPS)对弯曲根管成形能力及微裂纹形成的影响。方法:收集16颗2个独立近中根管的下颌磨牙,共32个根管,弯曲度为25°~35°。采用2种新型镍钛器械(PTN和XPS)进行... 详细信息

目的:运用显微CT(Micro-CT)评价ProTaper Next(PTN)和XP-endo Shaper(XPS)对弯曲根管成形能力及微裂纹形成的影响。方法:收集16颗2个独立近中根管的下颌磨牙,共32个根管,弯曲度为25°~35°。采用2种新型镍钛器械(PTN和XPS)进行预备,记录预备时间。预备前、后用Micro-CT扫描,并进行三维重建,对根管偏移、轴中心率、体积增加量、管/根宽度比和微裂纹发生率进行分析。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:预备后XPS组在距根尖1、3、5、7 mm水平根管偏移较PTN组小,在1、3、7 mm水平轴中心率较PTN高,具有统计学差异(P<0.05),轴中心率在5 mm水平两者无显著性差异(P>0.05)。XPS组预备时间显著少于PTN组(P<0.05)。2种器械预备后体积增加量、管/根宽度比无显著差异(P>0.05)。2种器械预备后均无新裂纹产生。结论:PTN与XPS均能安全、有效预备下颌磨牙重度弯曲根管,而XPS在预备成形方面具有更好的中心定位性及更高的预备效率。

关键词：新型镍钛器械弯曲根管根管预备成形能力微裂纹

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小鼠骨髓间充质干细胞衰老相关mRNA-miRNA分析

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中华老年口腔医学杂志 2023年第3期21卷 129-136页

作者：单铮男李生娇郑章龙姜吉蕊李家同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 同济大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室上海200072 同济大学附属口腔医院口腔修复教研室

目的骨髓间充质干细胞(BMSC,Bone marrow mesenchymal stem cells)是来源于骨髓腔并具有多项分化潜能的干细胞。衰老损害了骨髓间充质干细胞的多向分化特性,导致与年龄相关的骨质流失,其关键调控因子仍不清楚。方法从Gene Expression O... 详细信息

目的骨髓间充质干细胞(BMSC,Bone marrow mesenchymal stem cells)是来源于骨髓腔并具有多项分化潜能的干细胞。衰老损害了骨髓间充质干细胞的多向分化特性,导致与年龄相关的骨质流失,其关键调控因子仍不清楚。方法从Gene Expression Omnibus数据库下载mRNA(GSE44403)和microRNA(GSE57127)的表达数据集。R软件鉴定差异表达基因(DEG,Differentially expressed genes)和microRNAs(DEM,Differentially expressed microRNAs)。使用MiRTarbase预测DEM的靶点,并将DEM的靶基因与DEG取交集。用David数据库对获得的重叠基因进行功能富集化分析。利用Cytoscape进行PPI网络构建、Hub基因和重要模块的鉴定以及mRNA-miRNA调控网络的可视化。构建体外衰老细胞模型,RT-qPCR验证筛选的关键基因及相关microRNA。结果在年轻和老年小鼠之间共鉴定出1917个差异mRNA和197差异microRNA。选择了miR-690、miR-494-3p、miR-181a、miR-142-5p、miR-188和miR-34b等前20个调控异常的DEM作为关键microRNAs。DEG与DEM靶点的重叠基因主要集中在PI3K-Akt信号通路、ErbB信号通路和EGFR信号通路中。在构建的PPI网络中,筛选出TOP10中的Hub基因(包括mTOR、Insr、GSK3b和Ppp2ca)和顶端模块。通过miRNA-mRNA调控网络及RT-qPCR验证结果,确定了miR-34b-5p-Insr重要调控对。结论本研究发现衰老小鼠的间充质干细胞中存在miR-34b-5p-Insr重要调控对,可成为调控衰老BMSC细胞功能的潜在靶点。

关键词： MicroRNAs 间充质干细胞衰老生物信息学分析

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新型水凝胶负载脂肪间充质干细胞用于治疗双膦酸盐相关颌骨骨坏死

新型水凝胶负载脂肪间充质干细胞用于治疗双膦酸盐相关颌骨骨坏死

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第十一次全国口腔修复学学术会议

作者：宁浩然苏俭生同济大学口腔医学院和附属口腔医院修复教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的:利用一种新型水凝胶负载大鼠脂肪间充质干细胞(rat adipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs)用于治疗双膦酸盐相关颌骨骨坏死(Bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw,BRONJ)。方法:利用改性的结兰胶包封rADSCs,体外仿生构建细胞三维培养微环境,观察rADSCs的形态及活力,以及加入Bmp-2对碱性磷酸酶(ALP)活性,成骨和成血管指标RANKL、OPN、VEGF表达的影响。建立大鼠BRONJ模型,通过水凝胶将rADSCs输送到缺损部位,2周后进行组织病理学观察,Micro-CT检测分析。

关键词：双膦酸盐间充质干细胞骨坏死水凝胶

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水凝胶三维培养大鼠脂肪间充质干细胞

水凝胶三维培养大鼠脂肪间充质干细胞

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第十二次全国口腔修复学学术会议

作者：宁浩然苏俭生同济大学口腔医学院和附属口腔医院修复教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的:利用一种新型水凝胶三维培养大鼠脂肪间充质干细胞(ratadipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs),观察其活力,增殖,分化。方法:利用改性的结兰胶包封rADSCs,体外仿生构建细胞三维培养微环境,观察rADSCs的形态及活力,增殖能... 详细信息

目的:利用一种新型水凝胶三维培养大鼠脂肪间充质干细胞(ratadipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs),观察其活力,增殖,分化。方法:利用改性的结兰胶包封rADSCs,体外仿生构建细胞三维培养微环境,观察rADSCs的形态及活力,增殖能力。通过ELISA测定VEGF,IGF-1在三维培养中3,7,10天的分泌。以及加入BMP-2后培养3,7,10天对成骨指标COL-I,ALP,Runx2,OCN表达的影响。结果:体外三维培养1,3,7,14天,活死染色结果显示,水凝胶中大部分细胞呈绿色荧光,仅少部分呈

关键词：间充质干细胞三维培养水凝胶

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