检索结果-内蒙古大学图书馆

口腔颌面外科杂志 2022年第1期32卷 60-63页

作者：李心照康非吾上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔颌面外科上海200072

破骨细胞作为骨代谢过程中唯一一个具有骨吸收功能的细胞,其功能异常会引起骨代谢类疾病。细胞融合是破骨细胞形成过程中的重要过程,对于破骨细胞生物学功能的发挥至关重要。本文通过列举一些在破骨细胞融合过程中的相关因子及其影响因... 详细信息

破骨细胞作为骨代谢过程中唯一一个具有骨吸收功能的细胞,其功能异常会引起骨代谢类疾病。细胞融合是破骨细胞形成过程中的重要过程,对于破骨细胞生物学功能的发挥至关重要。本文通过列举一些在破骨细胞融合过程中的相关因子及其影响因素,阐明其在融合过程中可能的相关分子机制,旨在为治疗破骨细胞相关的骨代谢疾病提供新的治疗靶点。

关键词：破骨细胞细胞融合影响因素分子机制

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口腔遗传病与罕见病生物样本库建设及相关样本保存编码专家共识

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中华口腔医学杂志 2023年第8期58卷 749-758页

作者：阮文彦张燕丽郑树国孙瑶范志朋宋亚玲孙宏晨王文梅代杰文赵震锦张婷婷陈栋潘永初蒋月桂王旭东郑黎薇朱庆林何淼许宝山贾仲林韩冬段小红第四军医大学口腔医院口腔罕见病与遗传病门诊/口腔生物学教研室、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔医学重点实验室西安710032 北京大学口腔医学院·口腔医院预防科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081 同济大学口腔医学院·附属口腔医院口腔种植科、上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 首都医科大学口腔医学院、全牙再生与口腔组织功能重建北京市重点实验室北京100050 武汉大学口腔医(学)院、口颌系统重建与再生全国重点实验室、口腔生物医学教育部重点实验室、口腔医学湖北省重点实验室武汉430079 吉林大学口腔医院口腔病理学教研室长春130021 南京大学医学院附属口腔医院·南京市口腔医院口腔黏膜病科南京210008 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院第一门诊、辽宁省口腔疾病重点实验室沈阳110002 天津医科大学口腔医院口腔颌面外科天津300070 郑州大学第一附属医院口腔综合科郑州450052 南京医科大学附属口腔医院口腔正畸科、江苏省口腔疾病研究重点实验室、江苏省口腔转化医学工程研究中心南京210029 西安交通大学口腔医院牙体牙髓病科西安710004 四川大学华西口腔医院儿童口腔科、口腔疾病研究国家重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心成都610041 第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔医学重点实验室西安710032 武汉大学口腔医(学)院儿童口腔科武汉430079 中山大学附属口腔医院口腔颌面外科·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州510080 四川大学华西口腔医院唇腭裂外科、口腔疾病研究国家重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心成都610041 北京大学口腔医学院·口腔医院修复科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081

口腔遗传病与罕见病生物样本极其珍贵,收集保存此类样本有助于阐明此类疾病的发病机制以及提高诊治水平,而针对此类疾病生物样本库的标准化建设是实现这些目的的重要基石。目前有关口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的文献信息非常少,... 详细信息

口腔遗传病与罕见病生物样本极其珍贵,收集保存此类样本有助于阐明此类疾病的发病机制以及提高诊治水平,而针对此类疾病生物样本库的标准化建设是实现这些目的的重要基石。目前有关口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的文献信息非常少,也缺乏口腔颌面部来源生物样本分类及其编码的标准或建议,不利于口腔专病生物样本库的标准化和信息化建设。本文总结了口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的背景、必要性、原则和要点。在全国生物样本标准化技术委员会出台的团体标准《人类生物样本分类与编码》基础上,新增76种口腔颌面部来源生物样本的编码建议,以期实现口腔颌面部来源生物样本分类与编码的标准化,推动口腔专病特别是口腔遗传病与罕见病生物样本库的智慧化建设,提升我国口腔遗传病与罕见病的整体研究水平。

关键词：口腔医学生物样本库罕见病遗传病标准化信息化专家共识

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牙周炎训练免疫驱动CD11c阳性脂肪组织巨噬细胞加剧肥胖相关代谢紊乱

牙周炎训练免疫驱动CD11c阳性脂肪组织巨噬细胞加剧肥胖相关代谢...

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：陈思艺钱春兰吴珺华同济大学附属口腔医院口腔修复科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所同济大学附属上海市第十人民医院内分泌与代谢病科

目的:牙周炎训练免疫对代谢疾病的影响尚未引起临床医生的足够重视,且相关基础研究存在一定的局限性。基于此,本研究旨在牙周炎训练免疫对肥胖相关代谢紊乱的影响及其潜在机制。材料与方法:体内实验,24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂... 详细信息

目的:牙周炎训练免疫对代谢疾病的影响尚未引起临床医生的足够重视,且相关基础研究存在一定的局限性。基于此,本研究旨在牙周炎训练免疫对肥胖相关代谢紊乱的影响及其潜在机制。材料与方法:体内实验,24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后被随机分为两组:单次注射牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖组(lps组,n=12)和牙周炎训练免疫组(ti组,n=12),TI组丝线结扎小鼠上颌第二磨牙1周后去除丝线,此时给予两组高糖高脂饮食,第6周腹腔注射LPS,1周后检测两组小鼠的葡萄糖耐量和胰岛素耐量。第8周收样,通过硬组织切片观察牙周情况,通过HE染色观察胰腺、肝、肾等代谢靶器官的病变情况,筛选出关键组织附睾脂肪,期间定期监测小鼠体重、血糖等指标。进一步延长小鼠牙周炎时间(丝线结扎3周),将48只7周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后随机分为四组:HFD组、LPS组、N-LIP组和TI组并进行相应处理,第12周收集四组小鼠血清检测血糖、血脂指标,并收集附睾脂肪组织进行转录组学检测,筛选差异基因及通路。体外实验,收集丝线结扎1周的牙周炎小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)并在不同刺激下培养,通过rt-qPCR检测巨噬细胞分型相关基因表达水平的变化。结果:ti组与TI组小鼠表现出更明显的肥胖体型和体重增加,空腹血糖受损更为显著,且葡萄糖和胰岛素调节能力更差。硬组织切片结果显示,ti组牙槽骨吸收更为严重。HE染色结果提示,ti组胰岛萎缩、肝脂肪变性、肾小体结构紊乱等病变和炎性浸润更重,且在附睾脂肪可见脂肪细胞体积显著增大、炎细胞浸润和由脂肪组织巨噬细胞(ATMs)形成的冠状结构,提示附睾脂肪组织是牙周炎代谢损害的主要靶器官。rt-qPCR结果提示牙周炎训练免疫后BMDM中F4/80、CD11c表达上调,而CD206下调。免疫荧光染色结果提示,LPS组和TI组附睾脂肪组织中的CD11c阳性ATMs比例显著上调。转录组测序结果提示两组动物附睾脂肪组织间差异基因主要富集到糖酵解、胰岛素以及FoxO通路等。结论:牙周炎训练免疫可能通过驱动CD11c阳性ATMs形成冠状结构,上调附睾脂肪炎症水平并导致全身性炎性反应,从而加剧肥胖相关的代谢紊乱。本研究的发现为牙周炎与代谢疾病之间的联系提供了新的见解,但需要进一步的研究来验证这些发现,并探索潜在的治疗策略。

关键词：牙周炎训练免疫脂肪组织巨噬细胞肥胖代谢紊乱

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上颌窦底提升术后成骨效果的影响因素

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中华口腔医学杂志 2020年第1期55卷 56-61页

作者：罗容春叶颖同济大学口腔医学院·附属口腔医院口腔种植科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心 200072

种植义齿是牙列缺损和牙列缺失的有效修复方法。在上颌后牙区,严重的牙周炎或根尖周炎可造成较大范围的骨质破坏,患牙拔除后还可导致上颌窦的不断气化,造成剩余牙槽嵴骨量不足。上颌窦底提升术是增加上颌后牙区垂直骨量的常规治疗技术,... 详细信息

种植义齿是牙列缺损和牙列缺失的有效修复方法。在上颌后牙区,严重的牙周炎或根尖周炎可造成较大范围的骨质破坏,患牙拔除后还可导致上颌窦的不断气化,造成剩余牙槽嵴骨量不足。上颌窦底提升术是增加上颌后牙区垂直骨量的常规治疗技术,应用这一技术可以扩大种植修复的适应证,其术后的成骨效果关系到种植义齿的长期预后。临床中不同病例术后的实际成骨效果不同,研究表明上颌窦的解剖及病理因素、手术术式及是否植骨、种植体突入上颌窦的高度、种植体植入时机、骨移植物的选择及组织工程技术的应用、患者的全身状况等均可能影响术后成骨效果。本文就上颌窦底提升术后窦内成骨效果的影响因素作一综述,以期为种植临床工作提供参考。

关键词：牙种植上颌窦骨生成

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血小板衍生生长因子-BB对骨髓间充质干细胞多向分化及自噬相关蛋白表达的影响

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同济大学学报（医学版） 2022年第2期43卷 165-173页

作者：李琳蔡宇艺何江峰扈梓悦葛剑平同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院牙体牙髓病教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的观察血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)多向诱导分化以及自噬相关蛋白表达的影响;建立异位牙髓再生模型,探讨PDGF-BB对再生牙髓样组织中自... 详细信息

目的观察血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)多向诱导分化以及自噬相关蛋白表达的影响;建立异位牙髓再生模型,探讨PDGF-BB对再生牙髓样组织中自噬相关蛋白表达的影响。方法体外分离鉴定大鼠BMSCs,随机分为4组,每组培养基中分别加入0、10、50、100 ng/mL PDGF-BB,通过CCK-8、Transwell、qRT-PCR及细胞免疫荧光染色技术,检测不同浓度PDGF-BB对BMSCs增殖、迁移、多向诱导分化及自噬相关蛋白表达的影响,确定PDGF-BB趋化BMSCs细胞归巢的最佳工作浓度范围。依据是否放入PDGF-BB,将试验大鼠随机分为两组:对照组(Collagen TypeⅠ),PDGF-BB诱导组(50 ng/mL PDGF-BB+Collagen TypeⅠ),将PDGF-BB联合Collagen TypeⅠ支架移植入经过根管预备后的离体牙根管内,并移植于大鼠腹部皮下。分别于术后2、4个月,采用免疫组化染色技术观察异位再生牙髓样组织的再生效果及其自噬相关蛋白ATG5和LC3的表达。结果CCK-8结果显示,BMSCs增殖活性随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);Transwell结果显示,细胞迁移数随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);qRT-PCR结果显示,OPN、Runx2、MAP2、β-Ⅲ-tubulin mRNA表达量随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05),当PDGF-BB浓度达到100 ng/mL时,mRNA表达量达到最大值;细胞免疫荧光染色结果显示,ATG5和LC3阳性细胞数量随PDGF-BB浓度升高递增,50 ng/mL PDGF-BB诱导后,ATG5和LC3阳性细胞数最大;术后4个月PDGF-BB诱导组得到的再生牙髓样组织形态与天然人牙髓组织相近,其ATG5、LC3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs增殖,对BMSCs具有显著趋化作用。PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs向成骨细胞及神经细胞分化,并促进自噬相关蛋白的表达。联合使用PDGF-BB可以有效获得内源性BMSCs迁移,促进大鼠体内牙髓样组织异位再生,及自噬相关蛋白表达。

关键词：牙髓再生血小板衍生生长因子-BB 多向分化细胞自噬细胞归巢

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底丘脑旁核神经元参与急性高血压诱发痛觉钝化的神经机制

底丘脑旁核神经元参与急性高血压诱发痛觉钝化的神经机制

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2024年第21次颞下颌关节病学及牙合学研讨会

作者：卢铭轩黄金银孙吉宇邹丹妮张琪刘伟才同济大学附属口腔医院口腔修复科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所华东师范大学心理与认知科学学院上海市脑功能基因组学重点实验室

目的:本研究旨在探讨底丘脑旁核（PSTN）神经元在急性血压升高时引发的痛觉钝化中的作用及其神经机制。材料和方法:采用6只12周龄雄性C57BL/6J小鼠,通过皮下注射去甲肾上腺素建立急性高血压模型,监测血压升高期间颌面机械痛阈变化。向... 详细信息

目的:本研究旨在探讨底丘脑旁核（PSTN）神经元在急性血压升高时引发的痛觉钝化中的作用及其神经机制。材料和方法:采用6只12周龄雄性C57BL/6J小鼠,通过皮下注射去甲肾上腺素建立急性高血压模型,监测血压升高期间颌面机械痛阈变化。向小鼠双侧PSTN注射红藻氨酸损伤神经元,3天后记录小鼠血压变化。另24只C57BL/6J小鼠分为激活组、抑制组和对照组,向双侧PSTN注射带有化学遗传元件的AAV病毒,3周后腹腔注射CNO,激活或抑制PSTN神经元,记录各组小鼠血压及颌面和躯干痛阈变化。抑制CFA咬肌炎性疼痛模型小鼠的PSTN神经元,记录颌面痛阈变化。使用Vglut2::H2B小鼠,通过cfos免疫荧光染色,鉴定响应急性血压升高的PSTN神经元类型。通过在体钙成像技术记录小鼠在颌面或足底机械痛瞬时刺激下的PSTN神经元实时活性变化。此外,化学遗传激活或抑制PSTN神经元,记录血压,躯干机械痛阈和热痛阈变化;抑制CFA足底炎性疼痛小鼠模型的PSTN神经元,记录躯干痛阈的变化。最后,在Vglut2-cre小鼠双侧PSTN注射不同荧光标记的顺行AAV9,标记PSTN神经元向全脑的投射纤维。结果:在C57BL/6J小鼠中,急性血压升高引发颌面机械痛阈升高,血压恢复至基线后痛阈也随之恢复。损伤PSTN神经元后小鼠血压显著升高;激活PSTN神经元显著降低颌面部机械痛阈,但血压稳态未见明显改变;抑制PSTN神经元显著升高血压,颌面部机械痛阈,并显著逆转CFA咬肌炎症性疼痛模型小鼠的痛阈降低。急性血压升高诱导PSTN神经元cfos表达增加。在小鼠受到颌面或足底机械痛刺激时,PSTN神经元活性显著增强。激活PSTN神经元未显著改变血压,但显著降低躯干机械痛阈和热痛阈;抑制PSTN神经元显著升高血压和躯干机械痛阈,并显著逆转CFA躯干炎症性疼痛模型小鼠的痛阈。相关性分析表明,抑制PSTN神经元,血压升高与痛阈升高呈正相关。环路示踪显示,PSTN神经元投射至脑桥疼痛感受中心臂旁核和延髓心血管调控中心孤束核-迷走神经背侧复合体。结论:急性血压升高诱导痛觉钝化,PSTN神经元在调控急性高血压相关的痛觉钝化和维持血压稳态中发挥关键作用。

关键词：底丘脑旁核急性高血压口颌面痛觉痛觉钝化神经机制

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与产黑普氏菌共培养的口腔角质形成细胞转录组测序揭示MLCK参与OLP中的上皮屏障功能破坏

与产黑普氏菌共培养的口腔角质形成细胞转录组测序揭示MLCK参与OL...

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中华口腔医学会第15次全国口腔黏膜病学学术大会暨第13次全国口腔中西医结合学术大会

作者：郭艺婷韩文豪何园同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔黏膜科·上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海第十人民医院消化内科同济大学生命科学与技术学院

目的:口腔扁平苔藓(OLP)是一种常见的口腔黏膜疾病,其病因和发病机制尚不清楚。许多研究提示,微生物在OLP发病过程中发挥重要作用。本课题组前期研究发现,OLP患者口腔颊黏膜病损部位的菌群构成发生了显著变化,产黑普氏菌(Prevotella mel... 详细信息

目的:口腔扁平苔藓(OLP)是一种常见的口腔黏膜疾病,其病因和发病机制尚不清楚。许多研究提示,微生物在OLP发病过程中发挥重要作用。本课题组前期研究发现,OLP患者口腔颊黏膜病损部位的菌群构成发生了显著变化,产黑普氏菌(Prevotella melaninogenica,Pm)的构成比显著增加,且Pm可侵入OLP病损组织的上皮及固有层中。口腔角质形成细胞作为口腔黏膜的第一道物理防线,在OLP中可能直接与Pm相互作用。因此,本研究旨在探讨Pm对口腔角质形成细胞的影响。方法:将Pm与人口腔角质形成细胞系(HOK)共培养,建立Pm-HOK共培养模型,通过入侵-存活实验检测Pm在HOK细胞内的胞内存活情况,利用Transwell小室上皮渗透性实验观察Pm对HOK单层细胞渗透性的影响,通过qRT-PCR、Western Blot和细胞免疫荧光方法检测闭锁小带蛋白-1(zonula occludin-1,ZO-1)的表达情况。将原代人口腔角质形成细胞与Pm共培养0,4 h和24 h后,提取总RNA进行转录组测序,分析差异表达基因并进行基因本体(Gene Ontology,GO)分析。选择差异表达基因肌球蛋白轻链激酶(Myosin light chain kinase,MLCK)并采用qRT-PCR方法对其在Pm-HOK共培养模型中的表达情况进行验证;用MLCK抑制剂ML-7预处理HOK细胞后再将其与Pm共培养,检测HOK细胞上皮渗透性及ZO-1的表达变化。结果:Pm可入侵并在HOK细胞胞内存活,存活时长达72小时;Pm与HOK细胞共培养后,上皮渗透性呈时间和感染复数(MOI)依赖性增加(P<0.05)。HOK细胞ZO-1的m RNA和蛋白表达水平随Pm共培养时长和MOI的增加而降低(P<0.05)。转录组测序及GO分析结果主要富集在肌动蛋白连接(actin binding),两细胞间紧密连接(bicellular tight junction),肌动蛋白收缩纤维(contractile actin filament bundle)以及肌动蛋白-肌球蛋白(actin-myosin)等与肌动蛋白-肌球蛋白相关的条目下;MLCK是两个共培养组中共同的上调表达的差异表达基因。选择MLCK在Pm-HOK共培养模型中进行验证,其表达在对照组和Pm共培养组之间存在显著性差异(P<0.05);利用MLCK抑制剂ML-7预处理HOK细胞,可明显缓解Pm造成的上皮渗透性增加,且ZO-1表达升高(P<0.05)。结论:Pm可使HOK细胞上皮渗透性增加,紧密连接破坏并造成胞内感染;MLCK可能是Pm调节HOK细胞紧密连接和上皮屏障的关键基因;Pm-HOK细胞共培养模型有望成为研究OLP发病机制的细胞模型。

关键词：口腔扁平苔藓产黑普氏菌肌球蛋白轻链激酶上皮屏障功能转录组测序

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鼠李糖乳杆菌GG通过肠-血轴改善高脂血症背景下牙周骨再生

鼠李糖乳杆菌GG通过肠-血轴改善高脂血症背景下牙周骨再生

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中华口腔医学会牙周病学专业委员会第16次牙周病学学术会议

作者：黄悦臻葛叡扬钱俊陆江月乔丹陈日新姜涵崔迪张婷王南南何莎莎王敏闫福华南京大学口腔医学研究所南京大学医学院附属口腔医院中华口腔医学会第七届牙周病学专业委员会南京大学医学院附属口腔医院南京市口腔医院同济大学附属口腔医院牙周科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所

牙周骨再生仍是临床面临的难题,而高脂血症会加重牙槽骨吸收。近期的文献报道,益生菌可以增加骨量,因此,我们旨在明确鼠李糖乳杆菌GG (LGG)在牙周炎伴高脂血症背景下对牙周骨再生的影响。我们用Sprague Dawley大鼠构建了牙周炎、高脂血... 详细信息

牙周骨再生仍是临床面临的难题,而高脂血症会加重牙槽骨吸收。近期的文献报道,益生菌可以增加骨量,因此,我们旨在明确鼠李糖乳杆菌GG (LGG)在牙周炎伴高脂血症背景下对牙周骨再生的影响。我们用Sprague Dawley大鼠构建了牙周炎、高脂血症和牙周骨缺损模型(n=36),并进行LGG灌胃6周(随后处死大鼠)。

关键词：骨再生高脂血症鼠李糖乳杆菌

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不同咬合记录方式制作后牙单冠的咬合适合性研究

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口腔医学 2021年第9期41卷 810-815页

作者：谢培进刘伟才王灿叶俊吴珺华同济大学口腔医学院/附属口腔医院修复科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的评估不同咬合记录方式在后牙单冠修复体咬合适合性方面的差异。方法选择10例拟后牙单冠修复的患者,利用5种不同的咬合记录方式分别制作5个单冠。实验分组:以Co组(Artex CR+O-Bite咬合记录)为参照,其他4种咬合记录方式为实验组,包括3... 详细信息

目的评估不同咬合记录方式在后牙单冠修复体咬合适合性方面的差异。方法选择10例拟后牙单冠修复的患者,利用5种不同的咬合记录方式分别制作5个单冠。实验分组:以Co组(Artex CR+O-Bite咬合记录)为参照,其他4种咬合记录方式为实验组,包括3s组(3Shape TRIOS 3静态咬合记录)和3d组(3Shape TRIOS 3动态咬合记录)、Ka组(KaVo ARCUS digma)、Pr组(Dentograf)。通过患者满意度评分,T-scanⅢ咬合记录分析仪记录咬合时间(occlusion time,OT)和咬合分离时间(disocclusion time,DT)及医师椅旁调牙合时间来评价单冠修复体咬合的适合性。结果5种咬合记录方式在制作后牙单冠的患者满意度评分、ΔOT和ΔDT值以及医师椅旁调牙合时间上都没有统计学差异(P>0.05)。结论后牙单冠制作时,多种结合下颌运动的咬合记录方式都可以取得良好的临床效果。

关键词：咬合适合性咬合记录下颌运动

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LincRNA-EPS对脂多糖诱导的小鼠牙周膜细胞炎症因子表达的影响

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口腔颌面外科杂志 2021年第1期31卷 1-8页

作者：叶远舟刘凯王雅冰苏俭生上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔修复科上海200072

目的:探究基因间区长链非编码RNA-EPS(long intergenic noncoding RNA,lincRNA-EPS)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的小鼠牙周膜细胞(mouse periodontal ligament cells,mPDLCs)炎症因子表达的影响。方法:使用CRISPR/Cas9技术构建lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠。分离培养野生型及lincRNA-EPS基因敲除型mPDLCs,并进行免疫荧光鉴定。制备纳米粒材料,搭载lincRNA-EPS过表达质粒,并测定转染效率。设立5个实验组:野生型对照组(WT组)、野生型刺激组(WT+LPS组)、敲除型对照组(KO组)、敲除型刺激组(KO+LPS组)和挽救实验组(KO+LPS+lincRNA-EPS组)。在WT+LPS组、KO+LPS组及KO+LPS+lincRNA-EPS组中添加100 ng/mL的LPS,刺激6 h,其中,在KO+LPS+lincRNA-EPS组中提前加入lincRNA-EPS过表达质粒进行转染。WT组及KO组不做处理。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各实验组炎症因子cxcl10、cxcl12、cxcl14、IL-1α、IL-6 mRNA的表达量。应用酶联免疫吸附测定技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组炎症因子cxcl10、IL-1α、IL-6的蛋白水平。结果:成功构建了lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠模型;搭载lincRNA-EPS过表达质粒的纳米粒成功转染了mPDLCs,转染效率接近20%;在无LPS刺激的状态下,KO组的炎症因子表达水平较低,且与WT组无差异(P>0.05),lincRNA-EPS基因的缺失不会导致mPDLCs炎症因子基础表达量的改变;LPS刺激6 h后,KO+LPS组和WT+LPS组相较于各自的对照组,各个炎症因子的表达均上调(P<0.05),且KO+LPS组相较于WT+LPS组,各炎症因子表达上调更为显著(P<0.05),说明lincRNA-EPS缺失的mPDLCs受到LPS刺激时,更易引发强烈的炎症因子表达;KO+LPS+lincRNA-EPS组相较于KO+LPS组,炎症因子的表达量下调(P<0.05),可见外源性lincRNA-EPS的转入在一定程度上抑制了炎症因子的表达。结论:lincRNA-EPS对LPS诱导的mPDLCs炎症因子表达起负向调控作用。

关键词：基因间区长链非编码RNA 脂多糖牙周炎小鼠牙周膜细胞

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