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载microRNA-15b-5p壳聚糖纳米粒子的制备及其对大鼠BMSCs成骨分化影响的初步研究

口腔颌面外科杂志 2020年第6期30卷 348-355页

作者：刘扬吴珺华上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072

目的:探讨microRNA(miR)-15b-5p对大鼠来源骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的调控功能,并构建壳聚糖/miR-15b-5p纳米粒子,研究该纳米粒子对于大鼠BMSCs成骨分化的影响。方法:提取大鼠原代BMSCs并... 详细信息

目的:探讨microRNA(miR)-15b-5p对大鼠来源骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的调控功能,并构建壳聚糖/miR-15b-5p纳米粒子,研究该纳米粒子对于大鼠BMSCs成骨分化的影响。方法:提取大鼠原代BMSCs并诱导其成骨分化,检测miR-15b-5p在成骨分化过程中的表达变化。再在大鼠BMSCs中过表达miR-15b-5p并诱导其成骨分化,检测其成骨分化能力。进一步采用离子交联法制备不同质量比的壳聚糖/miR-15b-5p纳米粒子并表征其性能,将纳米粒子体外转染BMSCs及体内应用后,检测其成骨分化能力。其中,对照组不经任何处理,使用成骨分化诱导的为诱导组,过表达miR-15b-5p并成骨诱导的为转染诱导组。结果:在大鼠BMSCs成骨分化过程中,miR-15b-5p表达上调;过表达miR-15b-5p并诱导成骨后,其成骨相关基因(RUNX2、OPN、OCN等)表达高于诱导组和对照组;当壳聚糖/miR-15b-5p质量比为20∶1时,纳米粒子包封率达到(98.55±0.10)%,其形态均一,平均粒径为(156.6±9.0)nm,表面电荷为(47.0±0.5)mV。荧光检测显示壳聚糖/miR-15b-5p纳米粒子成功进入胞质。体内、外试验显示运用纳米粒子后,BMSCs成骨分化能力提高。结论:miR-15b-5p能够有效促进大鼠BMSCs成骨分化;使用壳聚糖纳米粒子负载miR-15b-5p能够促进大鼠BMSCs成骨分化及体内骨缺损修复。

关键词：壳聚糖 miR-15b-5p 纳米粒子基因载体骨髓间充质干细胞成骨分化

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外泌体对老龄小鼠骨髓间充质干细胞衰老影响的初步研究

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口腔颌面外科杂志 2020年第3期30卷 137-143页

作者：吴晓恋傅稼耀武文婧谢培进吴珺华上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072

目的:初步探讨外泌体(exosome)对老龄小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老的影响。方法:提取年轻小鼠BMSCs来源的外泌体,作用于老龄小鼠BMSCs,并观察其衰老现象的改变;分别提取年轻小鼠和老龄小鼠BMSC... 详细信息

目的:初步探讨外泌体(exosome)对老龄小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老的影响。方法:提取年轻小鼠BMSCs来源的外泌体,作用于老龄小鼠BMSCs,并观察其衰老现象的改变;分别提取年轻小鼠和老龄小鼠BMSCs来源的外泌体,进行基因芯片分析,初步筛选并验证表达差异性较大的微小RNA(microRNAs,miRNAs)在老龄小鼠BMSCs衰老过程中的作用。结果:年轻小鼠BMSCs来源的外泌体作用于老龄小鼠BMSCs后,其衰老情况得到明显改善。芯片分析结果显示,miR-199a-3p和miR-214-3p表达的差异性最为明显,其中老龄小鼠BMSCs转染miR-199a-3p-mimics后,可明显缓解其衰老状态。结论:年轻小鼠BMSCs来源的外泌体可明显减缓老龄小鼠BMSCs的衰老情况,外泌体中所含的miR-199a-3p可能在缓解细胞衰老过程中起到了重要的调节作用,但其具体机制有待进一步研究。

关键词：衰老外泌体骨髓间充质干细胞微小RNA

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添加氧化石墨烯对义齿基托树脂细胞毒性及抗菌性能影响的研究

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口腔颌面修复学杂志 2020年第3期21卷 129-135页

作者：吴雨宸刘凯苏俭生同济大学口腔医学院·附属口腔医院口腔修复科上海200072 上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:研究添加不同浓度的氧化石墨烯对义齿基托树脂的细胞毒性及抗菌性能的影响。方法:将质量分数0.25wt.%、0.5wt.%、1wt.%的氧化石墨烯分别添加到义齿基托树脂中作为实验组,无添加的基托树脂作为对照组。应用扫描电镜及傅里叶红外光... 详细信息

目的:研究添加不同浓度的氧化石墨烯对义齿基托树脂的细胞毒性及抗菌性能的影响。方法:将质量分数0.25wt.%、0.5wt.%、1wt.%的氧化石墨烯分别添加到义齿基托树脂中作为实验组,无添加的基托树脂作为对照组。应用扫描电镜及傅里叶红外光谱仪对各组样品进行形貌及理化表征检测;采用CCK-8法检测各组对小鼠成纤维细胞L929增殖的影响及细胞毒性分级,采用活/死细胞双染色法检测各组对L929细胞活性的影响;采用薄膜密贴法检测各组对变形链球菌、伴放线放线杆菌和白色念珠菌的抗菌率,并应用扫描电镜观察各组样品表面3种菌的粘附生长情况。结果:扫描电镜可见添加浓度为0.25wt.%和0.5wt.%的氧化石墨烯可在基托树脂中均匀分散;与对照组相比,各实验组对L929细胞的增殖和活性均无显著影响(P> 0.05);各实验组对变形链球菌、伴放线放线杆菌和白色念珠菌均有显著抗菌作用(P<0.05),且随氧化石墨烯添加浓度增加,抗菌作用增强(P<0.05);扫描电镜可见各实验组表面菌形态变形甚至死亡。结论:添加0.5wt.%氧化石墨烯的义齿基托树脂无细胞毒性,且对变形链球菌、伴放线放线杆菌和白色念珠菌具有显著抗菌作用。

关键词：氧化石墨烯义齿基托树脂细胞毒性抗菌性

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茶黄素-3,3′-双没食子酸酯对骨质疏松的作用及机制初探

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口腔颌面外科杂志 2020年第4期30卷 206-210页

作者：艾泽馨李家吴洋欧于淼李生娇上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室上海200072 上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院.同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072

目的:探究茶黄素-3,3′-双没食子酸酯(theaflavin-3,3′-digallate,TF3)对骨质疏松的作用及其机制。方法:建立小鼠去卵巢(ovariectomy,OVX)骨质疏松模型,注射剂量为1 mg/kg和10 mg/kg的TF3,3个月后取股骨进行微型CT(Micro-CT)分析。体... 详细信息

目的:探究茶黄素-3,3′-双没食子酸酯(theaflavin-3,3′-digallate,TF3)对骨质疏松的作用及其机制。方法:建立小鼠去卵巢(ovariectomy,OVX)骨质疏松模型,注射剂量为1 mg/kg和10 mg/kg的TF3,3个月后取股骨进行微型CT(Micro-CT)分析。体外应用过氧化氢(H2O2)建立MC3T3-E1细胞氧化应激模型,并分别加入0、1、10μmol/L的TF3,检测TF3对细胞活性、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和抗氧化基因表达的影响。结果:Micro-CT分析结果表明,TF3能降低骨质疏松的骨小梁丢失程度,且随TF3的剂量增加,效果越明显。进一步的体外实验结果表明,加入H2O2后,MC3T3-E1的细胞活性明显降低,ROS含量明显增加;而同时加入TF3后,ROS水平明显下降,抗氧化基因Nrf2及其下游的HO-1、CAT表达水平增加,且随TF3浓度增加,效果越明显。结论:TF3可以降低OVX引起的骨丢失程度,其作用可能与TF3具有细胞氧化损伤的保护作用有关。

关键词：茶黄素-3,3′-双没食子酸酯 MC3T3-E1细胞氧化应激骨质疏松

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巨噬细胞极化与骨组织再生关系的研究进展

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口腔颌面外科杂志 2020年第3期30卷 187-190页

作者：梁蓓蕾王佐林上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院种植科上海200072

骨组织再生是一个依靠多系统相互协作的过程,免疫系统的作用可能是骨修复材料获得成功的关键因素之一。巨噬细胞作为第1批到达的免疫细胞,是炎症和免疫过程中与异物反应的关键介质,并具有响应局部微环境中的信号极化为不同功能表型细胞... 详细信息

骨组织再生是一个依靠多系统相互协作的过程,免疫系统的作用可能是骨修复材料获得成功的关键因素之一。巨噬细胞作为第1批到达的免疫细胞,是炎症和免疫过程中与异物反应的关键介质,并具有响应局部微环境中的信号极化为不同功能表型细胞亚型(M1/M2)的能力。这些巨噬细胞极化亚型的衍生信号几乎持续存在于骨组织生成全过程中。了解巨噬细胞及其极化,并探讨各极化亚型在骨组织再生过程中的作用,有助于以免疫调节功能为出发点的骨生物材料的研究开发。

关键词：巨噬细胞极化骨组织再生

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低氧状态下HIF-1α对骨细胞凋亡的影响

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口腔颌面外科杂志 2020年第6期30卷 369-375页

作者：宋熙雯唐燚宋朝卉胡秀洪超越蔡昀康非吾上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔颌面外科上海200072

目的:探究低氧状态下低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨细胞凋亡的影响。方法:用氯化钴(cobalt dichloride,CoCl2)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测CoCl2对MLO-Y4细胞增殖活性... 详细信息

目的:探究低氧状态下低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨细胞凋亡的影响。方法:用氯化钴(cobalt dichloride,CoCl2)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测CoCl2对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;Hoechst 33342及TUNEL染色检测CoCl2处理后的MLO-Y4细胞的凋亡情况;利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹(Western blot)和细胞免疫荧光检测CoCl2作用下MLO-Y4细胞表达HIF-1α与凋亡相关因子Caspase-3及Bcl-2的情况;检测HIF-1αsiRNA转染对MLO-Y4细胞表达HIF-1α和促凋亡相关因子Caspase-3的影响。结果:200μmol/L CoCl2作用24 h后,MLO-Y4细胞的增殖率显著下降,并呈浓度和时间依赖性。200μmol/L CoCl2作用24 h可上调MLO-Y4细胞HIF-1α的表达,并促进MLO-Y4骨细胞凋亡;siHIF-1α转染后,MLO-Y4细胞HIF-1α表达下降,促凋亡基因Caspase-3也表现为相同的下降趋势,骨细胞凋亡减少。结论:HIF-1α在体外化学模拟低氧条件下,可促进骨细胞凋亡。

关键词：氯化钴骨细胞 HIF-1α 细胞凋亡

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骨折愈合过程中蛋白聚糖增龄性变化

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口腔生物医学 2020年第1期11卷 19-23页

作者：范琪琪周梦琪孙瑶同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院种植科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:通过建立小鼠股骨骨折模型,探讨蛋白聚糖的增龄性变化对骨折愈合的影响。方法:取2月龄及9月龄C57BL/6J小鼠,分别建立右侧股骨骨折模型,术后7 d收样,组织学染色观察其骨折愈合情况,实时定量PCR检测Col2、Col10、Sox9、Mmp9等软骨形... 详细信息

目的:通过建立小鼠股骨骨折模型,探讨蛋白聚糖的增龄性变化对骨折愈合的影响。方法:取2月龄及9月龄C57BL/6J小鼠,分别建立右侧股骨骨折模型,术后7 d收样,组织学染色观察其骨折愈合情况,实时定量PCR检测Col2、Col10、Sox9、Mmp9等软骨形成相关基因及Dmp1、Vcan、Dcn、Bgn等蛋白聚糖相关基因表达情况。结果:成功构建了小鼠股骨骨折模型,组织学染色可见9月龄小鼠骨折后骨痂形成较2月龄小鼠差;实时定量PCR结果显示,骨折愈合过程中9月龄小鼠Col10、Sox9、Mmp9等软骨形成相关基因和Dmp1、Vcan、Dcn、Bgn等蛋白聚糖相关基因较2月龄小鼠低(P<0.05)。结论:在骨折愈合过程中,衰老小鼠蛋白聚糖表达较低,提示可能与骨折增龄性愈合减缓相关。

关键词：骨折衰老蛋白聚糖软骨

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基于循证医学PICOS模式的案例教学法在《口腔种植学》教学中的应用

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重庆医学 2020年第10期49卷 1718-1720页

作者：王方王佐林同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院种植科/上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的探讨循证医学PICOS(研究对象、干预措施、对照措施、结局指标、研究设计方案)模式下案例教学法(CBL)在《口腔种植学》教学中的应用效果。方法将80名口腔医学专业学生按照随机数字表法分为PICOS-CBL组和以授课为基础的学习(LBL)组,每... 详细信息

目的探讨循证医学PICOS(研究对象、干预措施、对照措施、结局指标、研究设计方案)模式下案例教学法(CBL)在《口腔种植学》教学中的应用效果。方法将80名口腔医学专业学生按照随机数字表法分为PICOS-CBL组和以授课为基础的学习(LBL)组,每组40名。以理论知识及病例分析考试比较两组考核成绩,以调查问卷形式评估教学满意度。结果 PICOS-CBL、LBL组理论考试平均成绩分别为(86.20±7.79)、(76.63±12.19)分,病例分析考试平均成绩分别为(85.75±6.58)、(76.18±9.28)分,PICOS-CBL组理论和案例分析成绩均高于LBL组,差异有统计学意义(P<0.05);且PICOS-CBL组对教学效果表现出更高的满意度,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论以PICOS模式为基本框架,在循证医学理念指导下,通过对案例教学中的问题设置进行结构化分解,可提高在问题设计、小组讨论、问题解答等教学环节上的严谨性和规范化程度,更有助于案例教学法的标准化开展。

关键词：循证医学 PICOS模式案例教学法口腔种植学

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深度学习在口腔颌面部影像诊断领域的研究进展

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中华口腔医学研究杂志（电子版） 2021年第3期15卷 185-188页

作者：佘杨杨陈洁玉高峰江静薇张敏葛雅平中山大学附属第六医院口腔科广州510655 中山大学附属第六医院结直肠外科广州510655 中山大学附属口腔医院光华口腔医学院广东省口腔医学重点实验室广州510055 同济大学附属口腔医院种植科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

以深度学习(deep learning)为代表的人工智能(AI)可用于解决现实生活中的问题,并已应用于社会的各个领域,AI在口腔颌面部的研究也非常出色。本文将综述有关深度学习应用于口腔颌面部影像诊断领域的研究进展。

关键词：人工智能深度学习口腔颌面部影像诊断

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低氧状态下骨细胞参与破骨细胞形成的作用机制研究

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华西口腔医学杂志 2019年第5期37卷 463-468页

作者：朱杰唐燚吴情纪映辰康非吾同济大学附属口腔医院·同济大学口腔医学院口腔颌面外科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的探究低氧状态下骨细胞对破骨细胞形成的作用及其机制。方法用去铁胺甲磺酸(DFO)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测DFO对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;采用DFO处理后的MLO-Y4细胞培养液制备条件培养基诱导RA... 详细信息

目的探究低氧状态下骨细胞对破骨细胞形成的作用及其机制。方法用去铁胺甲磺酸(DFO)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测DFO对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;采用DFO处理后的MLO-Y4细胞培养液制备条件培养基诱导RAW264.7细胞分化,行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测;利用实时荧光定量聚合酶链反应、细胞免疫荧光和蛋白质印迹(Western blot)检测DFO作用下MLO-Y4表达低氧诱导因子(HIF)-1α与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的情况;检测HIF-1α siRNA转染对MLO-Y4表达HIF-1α和RANKL的影响。结果 100 μmol·L^-1 DFO作用24 h时MLO-Y4增殖活性升高,之后随着时间延长细胞增殖活性下降(P<0.01)。加入可溶性RANKL后,低氧组可见破骨细胞形成明显增加(P<0.001)。100 μmol·L^-1 DFO作用下,HIF-1α mRNA表达稳定,RANKL mRNA的表达随时间明显变化,24 h时最高(P<0.01);HIF-1α、RANKL蛋白表达升高(P<0.01)。低氧状态下siHIF-1α转染可降低HIF-1α和RANKL的表达(P<0.01),破骨细胞减少(P<0.01)。结论低氧状态下MLO-Y4可通过上调HIF-1α的蛋白水平促进RANKL的生成,进而加速RAW264.7细胞向破骨细胞分化。

关键词：去铁胺甲磺酸低氧诱导因子-1α 核因子κB受体活化因子配体

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