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2024年第21次颞下颌关节病学及牙合学研讨会

作者：卢铭轩黄金银孙吉宇邹丹妮张琪刘伟才同济大学附属口腔医院口腔修复科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所华东师范大学心理与认知科学学院上海市脑功能基因组学重点实验室

目的:本研究旨在探讨底丘脑旁核（PSTN）神经元在急性血压升高时引发的痛觉钝化中的作用及其神经机制。材料和方法:采用6只12周龄雄性C57BL/6J小鼠,通过皮下注射去甲肾上腺素建立急性高血压模型,监测血压升高期间颌面机械痛阈变化。向... 详细信息

目的:本研究旨在探讨底丘脑旁核（PSTN）神经元在急性血压升高时引发的痛觉钝化中的作用及其神经机制。材料和方法:采用6只12周龄雄性C57BL/6J小鼠,通过皮下注射去甲肾上腺素建立急性高血压模型,监测血压升高期间颌面机械痛阈变化。向小鼠双侧PSTN注射红藻氨酸损伤神经元,3天后记录小鼠血压变化。另24只C57BL/6J小鼠分为激活组、抑制组和对照组,向双侧PSTN注射带有化学遗传元件的AAV病毒,3周后腹腔注射CNO,激活或抑制PSTN神经元,记录各组小鼠血压及颌面和躯干痛阈变化。抑制CFA咬肌炎性疼痛模型小鼠的PSTN神经元,记录颌面痛阈变化。使用Vglut2::H2B小鼠,通过cfos免疫荧光染色,鉴定响应急性血压升高的PSTN神经元类型。通过在体钙成像技术记录小鼠在颌面或足底机械痛瞬时刺激下的PSTN神经元实时活性变化。此外,化学遗传激活或抑制PSTN神经元,记录血压,躯干机械痛阈和热痛阈变化;抑制CFA足底炎性疼痛小鼠模型的PSTN神经元,记录躯干痛阈的变化。最后,在Vglut2-cre小鼠双侧PSTN注射不同荧光标记的顺行AAV9,标记PSTN神经元向全脑的投射纤维。结果:在C57BL/6J小鼠中,急性血压升高引发颌面机械痛阈升高,血压恢复至基线后痛阈也随之恢复。损伤PSTN神经元后小鼠血压显著升高;激活PSTN神经元显著降低颌面部机械痛阈,但血压稳态未见明显改变;抑制PSTN神经元显著升高血压,颌面部机械痛阈,并显著逆转CFA咬肌炎症性疼痛模型小鼠的痛阈降低。急性血压升高诱导PSTN神经元cfos表达增加。在小鼠受到颌面或足底机械痛刺激时,PSTN神经元活性显著增强。激活PSTN神经元未显著改变血压,但显著降低躯干机械痛阈和热痛阈;抑制PSTN神经元显著升高血压和躯干机械痛阈,并显著逆转CFA躯干炎症性疼痛模型小鼠的痛阈。相关性分析表明,抑制PSTN神经元,血压升高与痛阈升高呈正相关。环路示踪显示,PSTN神经元投射至脑桥疼痛感受中心臂旁核和延髓心血管调控中心孤束核-迷走神经背侧复合体。结论:急性血压升高诱导痛觉钝化,PSTN神经元在调控急性高血压相关的痛觉钝化和维持血压稳态中发挥关键作用。

关键词：底丘脑旁核急性高血压口颌面痛觉痛觉钝化神经机制

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DNA甲基化转移酶Dnmt3b调控颞下颌关节骨关节炎的表观遗传研究初探

DNA甲基化转移酶Dnmt3b调控颞下颌关节骨关节炎的表观遗传研究初探

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2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会

作者：周玥陈默李智毛剑周学东王佐林同济大学口腔医学院和附属口腔医院牙体牙髓教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心四川大学华西口腔医学院口腔疾病研究国家重点实验室哥伦比亚大学颅面再生医学中心

目的:颞下颌关节骨关节炎是在口腔医学领域较为常见的退行性关节疾病。本课题通过研究DNA甲基化转移酶Dnmt3b在颞下颌关节骨关节炎中的作用,深化表观遗传对颞下颌关节骨关节炎发病与修复机制的认识,拟寻求颞下颌关节骨关节炎治疗的新靶... 详细信息

目的:颞下颌关节骨关节炎是在口腔医学领域较为常见的退行性关节疾病。本课题通过研究DNA甲基化转移酶Dnmt3b在颞下颌关节骨关节炎中的作用,深化表观遗传对颞下颌关节骨关节炎发病与修复机制的认识,拟寻求颞下颌关节骨关节炎治疗的新靶点。方法:采用免疫组化染色检测DNA甲基化转移酶Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b在颞下颌关节髁突软骨内的表达。通过关节盘穿孔构建颞下颌关节骨关节炎的动物模型,免疫组化染色观察分析Dnmt3b在正常与骨关节炎的颞下颌关节髁突软骨中表达水平的差异。利用条件性基因敲除小鼠模型以及HE染色、番红O染色、免疫组织化学染色等方法,研究在缺乏Dnmt3b表达的情况下,相对于同窝对照小鼠,颞下颌关节髁突软骨组织变性及破坏的程度,以及软骨细胞的异常改变。体外分离培养原代髁突前软骨干细胞,检测分析Dnmt3b过表达或低表达对软骨细胞分化过程的影响。采用荧光素酶报告基因试验、免疫荧光染色及免疫组化染色检测Dnmt3b表达水平改变后细胞内Wnt/β-catenin信号通路的变化情况,探讨Dnmt3b与Wnt/β-catenin信号通路之间的相关性。通过在大鼠颞下颌关节腔内注射碘乙酸钠化学试剂,诱导大鼠颞下颌关节骨关节炎的发生,同时局部注射Dnmt3b过表达慢病毒悬液,观察软骨厚度、软骨细胞外基质及软骨细胞分化相关标志物的改善情况。结果:免疫组化染色结果显示Dnmt3b在软骨细胞分化过程中呈差异性表达,并且与正常对照组相比,Dnmt3b在颞下颌关节骨关节炎的髁突软骨中表达明显下降。相对于同窝对照小鼠,条件性Dnmt3b基因敲除小鼠罹患颞下颌关节骨关节炎,软骨细胞过度增殖和异常肥大分化。在体外髁突软骨细胞的分化过程中,Dnmt3b过表达促进ColⅡ的表达,抑制Col X的表达;Dnmt3b低表达抑制ColⅡ的表达,促进Col X的表达。同时,Dnmt3b过表达抑制β-catenin的核转录;Dnmt3b低表达促进β-catenin的核转录。碘乙酸钠诱导大鼠颞下颌关节骨关节炎的发生,局部注射Dnmt3b具有明显的治疗效果。结论:Dnmt3b参与调控软骨细胞的分化,对维持颞下颌关节软骨的稳定具有重要的作用,局部注射Dnmt3b可有效减轻颞下颌关节骨关节炎的病损。

关键词： DNA甲基化转移酶颞下颌关节骨关节炎 Wnt/β-catenin信号通路

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脂多糖诱导高迁移率族蛋白B1在人牙髓细胞中转位的研究

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临床口腔医学杂志 2021年第8期37卷 464-468页

作者：颜燕宏彭前姚超兰冬梅崔春同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院儿童口腔医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 同济大学医学院附属上海市第十人民医学院口腔科上海200072 安徽理工大学医学院安徽合肥232001 华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心湖北武汉430030

目的:观察低浓度脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导人牙髓细胞(human dental pulp cells, hDPCs)中高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)在细胞中的转位及其hDPCs细胞活性的影响。方法:采用原代组织块培养法,培养人牙髓细胞,取第3~6代细胞用于实验。分别用含不同质量浓度(0、10、50、100、500、1 000 ng/mL)LPS的培养液培养hDPCs 3 d,采用CCK-8法检测细胞活性;100 ng/mL LPS刺激hDPCs后,免疫荧光检测0 h、6 h、12 h及24 h HMGB1在hDPCs中的表达定位,RT-PCR检测各时间点hDPCs细胞TNF-α,IL-1及HMGB1的mRNA表达,ELISA试剂盒分析细胞上清中HMGB1的含量。结果:低浓度LPS刺激hDPCs后,细胞活性并无明显改变,提示hDPCs具有抵抗低浓度LPS的能力。RT-PCR结果示LPS浓度在10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL时,IL-1和HMGB1的mRNA水平无显著变化;500 ng/mL和1 000 ng/mL时,TNF-α、IL-1和HMGB1的mRNA水平显著上调。免疫荧光示LPS诱导后,在6 h、12 h及24 h均可见hDPCs细胞浆中HMGB1的表达,ELISA结果示HMGB1能分泌到细胞上清中。结论:低浓度LPS可对hDPCs活性基本无影响,且可诱导HMGB1在hDPCs中从细胞核转位到细胞浆,并释放到细胞外。

关键词：脂多糖人牙髓细胞 HMGB1 转位

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支配不同咀嚼肌的初级运动神经元在三叉神经中脑核团和三叉神经运动核团中的空间分布

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口腔颌面外科杂志 2017年第5期27卷 305-314页

作者：林晨官璐韩雯斐苏俭生孟博同济大学口腔医学院·口腔医院修复教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 华东师范大学脑功能基因组学教育部重点实验室上海市脑功能基因组学重点实验室上海200062

目的:研究三叉神经运动核团(trigeminal motor nucleus,Mo5)和三叉神经中脑核团(mesencephalic trigeminal nucleus, Me5)对小鼠不同咀嚼肌的调控分布。方法:将8~12周龄C57BL/6小鼠分6组,每组3只,分别注射逆行性荧光示踪剂(Fluorogold,FG)到其颧肌、颞肌、咬肌、二腹肌前腹、翼内肌中,并以胸锁乳突肌作为对照组。通过荧光染色,显微镜下观察小鼠的三叉神经相关核团对于调控不同咀嚼肌群的表达及空间分布。结果:咬肌、颞肌和颧肌标记的初级运动神经元细胞出现在Me5和Mo5,翼内肌和二腹肌前腹标记只出现在Mo5,胸锁乳突肌注射后,在Me5和Mo5中均无标记神经元。结论:Mo5并没有关于升降颌肌群严格的空间分布,Me5并没有标记全部升颌肌群。

关键词：三叉神经中脑核三叉神经运动核咀嚼肌

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磨牙咬合升高对小鼠短期内焦虑情绪的影响

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口腔颌面外科杂志 2015年第6期25卷 400-406页

作者：尚琳苏俭生韩雯斐孟博同济大学口腔医学院.口腔医院修复教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 华东师范大学脑功能基因组学教育部重点实验室上海市脑功能基因组学重点实验室上海200062

目的:建立磨牙咬合升高小鼠模型,观察其短期内焦虑样情绪及臂旁核、杏仁核中神经元激活水平的变化。方法 :8周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为2组:假手术组和咬合升高组。造模后连续记录体重及进食量;于第1天、第3天、第7天及第14天,行高... 详细信息

目的:建立磨牙咬合升高小鼠模型,观察其短期内焦虑样情绪及臂旁核、杏仁核中神经元激活水平的变化。方法 :8周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为2组:假手术组和咬合升高组。造模后连续记录体重及进食量;于第1天、第3天、第7天及第14天,行高架十字迷宫测试、旷场测试、新环境抑制进食测试、社交探索测试等焦虑样情绪相关的行为学检测;免疫荧光染色观察小鼠杏仁核中央区Fos蛋白表达水平。结果:磨牙区咬合升高对小鼠体重、进食量及基础活动能力并无短期影响。在处理后7、14 d,咬合升高组小鼠焦虑样行为明显增加。与假手术组相比,咬合升高导致小鼠臂旁核、杏仁核神经元激活水平升高。结论:磨牙区咬合升高会导致小鼠短期内焦虑样情绪水平增加。

关键词：咬合升高焦虑行为

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底丘脑旁核：三叉神经系统中潜在的前运动神经元群

底丘脑旁核：三叉神经系统中潜在的前运动神经元群

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第20次全国颞下颌关节病学及HE学研讨会暨第七届亚洲颞下颌关节学术大会

作者：卢铭轩徐明邹丹妮张琪刘伟才同济大学口腔医学院口腔医院修复教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心华东师范大学心理与认知科学学院上海市脑功能基因组学重点实验室

目的:本研究旨在明确底丘脑旁核(parasubthalamic nucleus,PSTN)作为三叉神经系统潜在的感觉运动调控中心,其输入性上游投射及其输出性下游投射,探索PSTN在支配涉及咬合,咀嚼肌,颞下颌关节的下颌运动调控中潜在的作用。材料和方法:选取...

目的:本研究旨在明确底丘脑旁核(parasubthalamic nucleus,PSTN)作为三叉神经系统潜在的感觉运动调控中心,其输入性上游投射及其输出性下游投射,探索PSTN在支配涉及咬合,咀嚼肌,颞下颌关节的下颌运动调控中潜在的作用。材料和方法:选取6-8周龄C57BL/6J雄性小鼠,在小鼠双侧三叉神经运动核(trigeminal motor nuclei,Vmo)分别注射绿色或红色荧光标记的霍乱毒素B亚基。

关键词：

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