检索结果-内蒙古大学图书馆

上海口腔医学 2021年第4期30卷 355-359页

作者：徐方芳蒋备战同济大学口腔医学院和附属口腔医院儿童口腔医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:研究DKK1对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)感染人牙髓细胞生物学行为的影响。方法:使用改良酶组织块法分离培养人牙髓细胞并通过免疫荧光染色鉴定细胞来源;通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验、茜素红染色、荧光定量PCR等... 详细信息

目的:研究DKK1对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)感染人牙髓细胞生物学行为的影响。方法:使用改良酶组织块法分离培养人牙髓细胞并通过免疫荧光染色鉴定细胞来源;通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验、茜素红染色、荧光定量PCR等实验检测DKK1对LPS感染人牙髓细胞的生物学行为的变化。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:免疫荧光结果显示分离的细胞来源与间充质细胞一致;CCK-8结果显示DKK1对LPS感染下的牙髓细胞增殖并无显著影响;Transwell实验结果显示,DKK1对LPS感染下的牙髓细胞迁移具有促进作用;茜素红与荧光定量PCR结果显示,DKK1可显著促进LPS感染下牙髓细胞的细胞分化。结论:DKK1对LPS感染下的人牙髓细胞的迁移和分化具有一定的促进作用,推测其与Wnt/β-catenin信号通路的抑制相关。

关键词：牙髓细胞脂多糖 Wnt/β-catenin信号通路细胞迁移细胞分化

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基于单细胞转录组测序研究CD8+耗竭T细胞（CD8+Tex）在口腔扁平苔藓中的作用

基于单细胞转录组测序研究CD8+耗竭T细胞（CD8+Tex）在口腔扁平苔...

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中华口腔医学会口腔黏膜病学专业委员会第16次学术大会暨中西医结合专业委员会第14次学术大会

作者：陈鑫吴鑫文何园同济大学附属口腔医院黏膜科同济大学口腔医学院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学研究所同济大学生命科学与技术学院

目的:在单细胞水平上揭示正常口腔黏膜和口腔扁平苔藓（OLP）黏膜的异质性,描绘OLP的免疫微环境,探索T淋巴细胞的分子特征,研究CD8Tex在OLP发病机制中的作用,为OLP的治疗手段提供理论依据。方法:对3例正常口腔黏膜和3例OLP患者的口腔黏... 详细信息

目的:在单细胞水平上揭示正常口腔黏膜和口腔扁平苔藓（OLP）黏膜的异质性,描绘OLP的免疫微环境,探索T淋巴细胞的分子特征,研究CD8Tex在OLP发病机制中的作用,为OLP的治疗手段提供理论依据。方法:对3例正常口腔黏膜和3例OLP患者的口腔黏膜进行单细胞测序,在进行质量控制、去除批次效应、降维聚类后,根据标记基因将所有细胞进行定义注释。提取T细胞进行亚群聚类注释、细胞比例分析、差异表达基因分析和细胞通讯分析。采用免疫组织化学染色、免疫荧光染色和qRT-PCR技术对CD8Tex在OLP中的功能进行验证。结果:通过标记基因将正常口腔黏膜和OLP口腔黏膜中的所有细胞定义为13种细胞,并将其中的T细胞进一步聚类为10个亚群,包括CD4幼稚T细胞、调节性T细胞、滤泡辅助性T细胞、CD4组织驻留记忆T细胞、CD8幼稚T细胞、CD8组织驻留记忆T细胞、CD8效应记忆T细胞、CD8终末分化效应记忆T细胞、γδT细胞、CD8Tex。细胞比例分析结果显示正常口腔黏膜中几乎不存在CD8Tex,而OLP患者中CD8Tex数量显著升高。基因表达分析结果表明,相比于正常口腔黏膜,OLP患者的CD8Tex中细胞毒基因如颗粒酶B（GZMB）的表达显著下降。通过细胞通讯分析发现OLP中CD8Tex和其他细胞亚群之间的互作数量和互作强度下降。随后通过免疫组织化学染色、免疫荧光染色和qRT-PCR实验进一步证实了OLP中CD8Tex的存在。结论:本研究揭示了正常口腔黏膜和OLP口腔黏膜在细胞组成上存在异质性。CD8Tex在OLP中的数量显著增加,但其释放GZMB的能力下降,且与其他细胞亚群之间相互作用的数量和强度减弱,,效应功能趋于耗竭状态,不能及时清除病原体,导致OLP迁延不愈。CD8Tex可能在OLP发病机制中发挥着免疫抑制作用,表明CD8Tex可能是治疗OLP的潜在免疫靶点,为OLP的后续研究提供新方向。

关键词：口腔扁平苔藓单细胞测序 CD8+耗竭T细胞

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下颌第二磨牙远中深牙周袋的成因和治疗研究进展

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同济大学学报（医学版） 2022年第3期43卷 436-441页

作者：黄诗惠罗礼君同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院牙周病科·上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

由于解剖因素以及下颌第三磨牙的影响,下颌第二磨牙远中处的口腔卫生难以维护,易导致牙周炎症的发生从而形成深牙周袋。机械清创对此处的疗效往往不佳,因此需要进一步的治疗。现存多种改善下颌第二磨牙远中深牙周袋的治疗方法:冠切除术... 详细信息

由于解剖因素以及下颌第三磨牙的影响,下颌第二磨牙远中处的口腔卫生难以维护,易导致牙周炎症的发生从而形成深牙周袋。机械清创对此处的疗效往往不佳,因此需要进一步的治疗。现存多种改善下颌第二磨牙远中深牙周袋的治疗方法:冠切除术、引导骨组织再生术等,但对于不同方法的临床治疗效果仍有争议。本文就下颌第二磨牙远中深牙周袋的形成原因、治疗方法及其效果进行综述,以期为下颌第二磨牙远中深牙周袋的治疗提供理论基础。早期拔除下颌第三磨牙有利于下颌第二磨牙远中牙周状况的改善,引导骨组织再生术有利于下颌第二磨牙远中深牙周袋的愈合。

关键词：下颌第二磨牙牙周袋下颌第三磨牙引导骨组织再生术

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TOM40介导牙髓成纤维细胞线粒体呼吸链蛋白转运调控牙髓炎症的作用和机制研究

TOM40介导牙髓成纤维细胞线粒体呼吸链蛋白转运调控牙髓炎症的作...

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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第17次牙体牙髓病学学术会议

作者：刘肖晨李兆扬张旗同济大学口腔医学院/附属口腔医院牙体牙髓病学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的 :探究牙髓炎中线粒体外膜转位因子的表达变化及其通过影响牙髓成纤维细胞(DPFs)线粒体呼吸功能调控牙髓炎症发展的机制。方法:1、构建大鼠磨牙牙髓炎模型,苏木素-伊红(HE)染色观察炎症浸润和牙髓坏死面积;免疫组化染色观察细胞凋... 详细信息

目的 :探究牙髓炎中线粒体外膜转位因子的表达变化及其通过影响牙髓成纤维细胞(DPFs)线粒体呼吸功能调控牙髓炎症发展的机制。方法:1、构建大鼠磨牙牙髓炎模型,苏木素-伊红(HE)染色观察炎症浸润和牙髓坏死面积;免疫组化染色观察细胞凋亡水平、促炎因子IL-1β、TNF-α及DNA氧化损伤标志物8-OHDG表达情况。2、体外培养人来源的DPFs并以脂多糖(LPS)进行炎性刺激,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)及western blot检测IL-1β、TNF-α及促凋亡因子Bax、Bak的表达情况,TMRE探针、DCFH-DA探针和三磷酸腺苷(ATP)试剂盒检测检测线粒体呼吸功能变化;qPCR检测呼吸链核心蛋白的m RNA表达变化;western blot分别检测全细胞和线粒体中呼吸链蛋白的表达情况;高分辨荧光成像(HIS-SIM)观察呼吸链蛋白在线粒体内外的分布情况。3、转录组测序(RNA-seq)筛选炎症牙髓线粒体内外膜转位因子的差异表达基因,并通过qPCR和western blot进行验证。体外炎性刺激DPFs,qPCR、western blot及免疫荧光(IF)检测各内外膜转位因子的表达变化。4、分别构建TOM40过表达和敲减DPFs并通过LPS炎性刺激,qPCR及western blot检测IL-1β、TNF-α、Bax和Bak的表达情况,TMRE探针、DCFH-DA探针和ATP试剂盒检测线粒体呼吸功能。结果:1、体内模型中,随着暴露时间延长,炎症浸润面积增加,牙髓坏死面积增大,细胞凋亡增多,IL-1β、TNF-α及8-OHDG表达升高。2、体外DPFs细胞中,随着LPS浓度增加,IL-1β、TNF-α、Bax和Bak的m RNA和蛋白表达升高,线粒体膜电位下降,ROS升高,ATP产生减少。呼吸链核心蛋白的mRNA表达及在全细胞中的蛋白水平未见明显差异,但在线粒体中含量显著减少;HIS-SIM荧光成像显示呼吸链蛋白与线粒体共定位减少。3、RNA-seq结果显示:线粒体内外膜转位因子中,TOM40特异性表达下调,qPCR及western blot及体外DPFs中验证结果与之一致。4、在TOM40敲减的DPFs中,IL-1β、TNF-α、Bax和Bak表达上升,线粒体膜电位下降,ROS表达升高,ATP产生减少;TOM40过表达的DPFs中,IL-1β、TNF-α、Bax、Bak表达下调,线粒体膜电位回升,ROS表达减少,ATP产生增加。结论:DPFs中TOM40表达下调造成其呼吸链蛋白转运障碍、线粒体呼吸功能受损,进而导致牙髓炎症浸润。

关键词：线粒体呼吸链 Bax 核心蛋白 RNA Bak 线粒体膜电位牙髓炎症牙髓成纤维细胞 TOM40

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巨噬细胞极化在糖尿病合并根尖周炎中作用的研究

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口腔医学研究 2021年第5期37卷 412-417页

作者：孙熹张旗同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院牙体牙髓科上海200072 上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:探究巨噬细胞极化在糖尿病合并根尖周炎中作用,及高糖环境对巨噬细胞极化影响。方法:8周龄雄性Wistar大鼠(对照组)和GK大鼠(糖尿病组)构建根尖周炎模型,2周、4周取材。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察根尖炎症浸润;免... 详细信息

目的:探究巨噬细胞极化在糖尿病合并根尖周炎中作用,及高糖环境对巨噬细胞极化影响。方法:8周龄雄性Wistar大鼠(对照组)和GK大鼠(糖尿病组)构建根尖周炎模型,2周、4周取材。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察根尖炎症浸润;免疫组化观察炎症因子表达;免疫荧光观察巨噬细胞极化情况。体外培养Raw264.7小鼠巨噬细胞系,高浓度葡萄糖(40 mmol/L)处理,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR)检测巨噬细胞极化及炎症因子相关mRNA表达水平。结果:建模4周,与对照组相比,糖尿病组根尖炎症浸润增多,促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6增多,抗炎因子IL-10减少(P<0.05);M2型巨噬细胞占总巨噬细胞比值(CD206/CD68)减少,巨噬细胞iNOS表达增多,凋亡细胞数目增多(P<0.05)。高糖处理Raw264.7小鼠巨噬细胞系,iNOS mRNA表达升高,CD206表达降低,CD68表达无明显差异;TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达升高,IL-10 mRNA表达降低(P<0.05)。结论:糖尿病所致高糖环境通过影响巨噬细胞极化,促进炎性浸润,加重根尖周炎。

关键词：根尖周炎糖尿病巨噬细胞极化

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硫化氢促进炎症微环境中正畸力作用下的牙周组织成骨分化

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口腔生物医学 2022年第1期13卷 20-25页

作者：赵逸王月华咏梅廖崇珊同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院正畸科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的:研究外源性硫化氢(H2S)对牙周炎大鼠正畸牙移动中骨形成和炎症微环境中人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化的影响。方法:将48只SD大鼠随机分为对照组、正畸治疗(OT)组、牙周炎正畸治疗(P+OT)组、牙周炎正畸+硫氢化钠(NaHS,H2S供体)(P+OT... 详细信息

目的:研究外源性硫化氢(H2S)对牙周炎大鼠正畸牙移动中骨形成和炎症微环境中人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化的影响。方法:将48只SD大鼠随机分为对照组、正畸治疗(OT)组、牙周炎正畸治疗(P+OT)组、牙周炎正畸+硫氢化钠(NaHS,H2S供体)(P+OT+NaHS)组,通过显微CT扫描、骨钙素(OCN)免疫组化染色和碱性磷酸酶(ALP)染色观察牙周炎状态下正畸牙张力侧的骨形成,通过实时定量RT-PCR检测牙周炎状态下正畸张力侧牙周组织中成骨相关因子的表达。体外实验分为对照组、张力(T)组、脂多糖(LPS)+T组、LPS+T+NaHS组,通过ALP和茜素红染色观察LPS诱导的hPDLCs在张力下的成骨分化,通过实时定量RT-PCR检测炎症环境中张力作用下hPDLCs成骨相关因子的表达。结果:体内实验发现P+OT+NaHS组张力侧骨组织参数高于P+OT组(P<0.05);与P+OT组相比,P+OT+NaHS组中Col1、Alp和Ocn成骨相关基因及蛋白表达也显著增加(P<0.05)。体外实验表明,与LPS+T组相比,LPS+T+NaHS组的ALP和茜素红染色较深,OD值较高(P<0.05),COL1、ALP、OCN表达均显著增加(P<0.05)。结论:NaHS可维持牙周组织中的骨矿物质密度,且上调受炎症抑制的成骨因子的mRNA表达,促进炎症微环境下正畸力诱导的骨形成。H2S可能在促进牙周炎环境下正畸牙的骨形成方面具有重要意义。

关键词：硫化氢牙周炎正畸力成骨牙周膜细胞

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Hedgehog信号通路在咀嚼力缺乏牙槽骨中的表达变化

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口腔颌面外科杂志 2022年第1期32卷 7-13页

作者：张帅扈梓悦牛萍萍孙瑶上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔种植科上海200072

目的:观察发育过程中咀嚼力缺乏对小鼠下颌牙槽骨改建的影响,并探讨Hedgehog信号通路在该过程中的表达变化。方法:选取3周龄C57BL/6J雄性小鼠,将其随机分为2组,分别通过正常饮食(hard diet,HD)和软食(soft diet,SD)喂养1周和3周,取小鼠... 详细信息

目的:观察发育过程中咀嚼力缺乏对小鼠下颌牙槽骨改建的影响,并探讨Hedgehog信号通路在该过程中的表达变化。方法:选取3周龄C57BL/6J雄性小鼠,将其随机分为2组,分别通过正常饮食(hard diet,HD)和软食(soft diet,SD)喂养1周和3周,取小鼠下颌骨,应用micro-CT扫描及组织学染色法[HE染色、Goldner三色染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、免疫荧光染色]对骨改建情况进行分析。选取下颌磨牙区牙槽骨并提取RNA,行实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR),研究Hedgehog信号通路在骨改建中的变化情况。结果:喂养1周后,软食组小鼠根分叉区牙槽骨量即出现显著降低;喂养3周后,其骨量丢失进一步加重。组织学染色结果发现,软食组根方1/2区域牙槽骨矿化程度显著降低,矿化区域显著减少,且破骨活动显著增强。Hedgehog信号通路下游分子Smoothened(SMO)、Patched1(PTCH1)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(glioma-associated oncogene homolog 1,GLI1)表达上调。结论:下颌骨发育过程中,咀嚼刺激不足表现为牙槽骨量降低,Hedgehog通路相关分子SMO、PTCH1、GLI1、IFT88表达均上调,提示Hedgehog信号通路在该过程中起重要作用。

关键词： Hedgehog信号通路咀嚼力骨改建软食

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初级纤毛调节干细胞分化介导骨发育的研究进展

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口腔生物医学 2022年第4期13卷 255-260页

作者：张蕾陶狄坷孙瑶同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔种植科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

初级纤毛作为信号传感器,存在于大多数哺乳动物细胞表面,干细胞表面的初级纤毛通过感知化学、机械、生物等多种信号感在维持细胞干性、介导细胞谱系分化过程中发挥重要作用。初级纤毛结构或功能异常可导致纤毛病,导致颅颌面发育异常、... 详细信息

初级纤毛作为信号传感器,存在于大多数哺乳动物细胞表面,干细胞表面的初级纤毛通过感知化学、机械、生物等多种信号感在维持细胞干性、介导细胞谱系分化过程中发挥重要作用。初级纤毛结构或功能异常可导致纤毛病,导致颅颌面发育异常、长骨发育障碍等骨骼相关表型异常。本文旨在整合初级纤毛在骨骼系统发育相关干细胞领域内的相关研究工作,聚焦于初级纤毛对骨骼发育相关干细胞的精细调控作用,以期为干细胞治疗及组织工程再生提供一个新的潜在治疗靶点。

关键词：初级纤毛骨骼干细胞骨发育损伤修复信号传导

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载锶纳米钛表面促进骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的体外研究

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口腔颌面外科杂志 2022年第5期32卷 278-283页

作者： Shahrzad Hosseinijenab 王静文苏俭生张磊上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072

目的:研究钛种植体载锶纳米表面的生物学效应,及其对骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用。方法:以纯钛(titanium,Ti)片为对照组(control-Ti),用氢氧化钠(NaOH)水热处理纯钛片后获... 详细信息

目的:研究钛种植体载锶纳米表面的生物学效应,及其对骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用。方法:以纯钛(titanium,Ti)片为对照组(control-Ti),用氢氧化钠(NaOH)水热处理纯钛片后获得纳米组(nanometric-Ti, nm-Ti),用Sr(OH)2水热处理纯钛片获得载锶(strontium,Sr)纯钛组(Sr-Ti),将纯钛片先后以NaOH、Sr (OH)_(2)两步法水热处理获得载锶纳米组(nm/Sr-Ti)。通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)、X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)和X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)技术等检测各组表面性能。采用双侧卵巢切除术(ovariectomy,OVX)建立骨质疏松大鼠模型,10周后提取BMSCs,通过CCK-8法和实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)评价各组钛表面对正常及骨质疏松大鼠BMSCs成骨能力的影响。结果:与control-Ti组相比,nm-Ti组和nm/Sr-Ti组表面均呈现成簇片状纳米结构,Sr-Ti组和nm/Sr-Ti组表面负载Sr离子。CCK-8结果显示,正常及骨质疏松大鼠BMSCs在各组钛片表面均呈现良好的黏附和增殖能力,其中nm/Sr-Ti组细胞增殖最活跃。RT-qPCR结果显示,nm-Ti组和nm/Sr-Ti组成骨基因OCN、OPN及BMP-2表达随时间推移升高,且与对照组相比,差异显著。在骨质疏松大鼠模型中,nm/SrTi组显著促进了BMSCs早期BMP-2的表达。结论:载锶纳米钛表面有利于BMSCs的黏附、增殖和分化,并可能对骨质疏松大鼠的种植体周围骨整合有促进作用。

关键词：钛种植体纳米表面锶离子骨质疏松成骨分化

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钛表面纳米形貌介导的巨噬细胞极化对骨髓间充质干细胞的影响

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口腔颌面外科杂志 2022年第6期32卷 329-335页

作者：王静文张磊苏俭生上海牙组织修复与再生工程技术研究中心同济大学口腔医学院同济大学附属口腔医院口腔修复教研室上海200072

目的:探究钛表面纳米形貌介导的巨噬细胞极化对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响。方法:选用机械加工的纯钛片作为对照组(control-Ti组);将180℃下水热反应12 h后的纯钛片作为纳米组(nm-Ti组)。通过... 详细信息

目的:探究钛表面纳米形貌介导的巨噬细胞极化对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响。方法:选用机械加工的纯钛片作为对照组(control-Ti组);将180℃下水热反应12 h后的纯钛片作为纳米组(nm-Ti组)。通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)和水接触角测试其表面性能,细胞学实验检测其生物相容性,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测RAW264.7巨噬细胞极化的相关基因和BMSCs成骨相关基因的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞炎症相关因子的分泌水平。结果:经过水热处理后,钛片表面形成纳米形貌,且具有良好的亲水性。相比于control-Ti组,nm-Ti组表面细胞增殖和黏附更为活跃。ELISA结果显示,随时间增加,nm-Ti组分泌白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的水平显著升高(P<0.01)。M2极化标志物Arg-1和M1极化标志物iNOS均随时间递增而增多,以Arg-1增多为主,经白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)刺激后,nm-Ti组的Arg-1表达显著增多(P<0.01),iNOS表达降低(P<0.05)。巨噬细胞条件培养液培养BMSCs后,nm-Ti组成骨相关基因骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达量比正常培养时减少,IL-4刺激培养后,BMP-2和ALP表达均有所升高。结论:钛表面纳米形貌能够影响巨噬细胞极化方向,进而影响BMSCs的成骨分化能力。

关键词：钛种植体纳米形貌巨噬细胞极化骨整合

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