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解剖学报 2008年第2期39卷 160-164页

作者：管英俊于丽岳炳德高海玲陈燕春张皓云潍坊医学院组织学与胚胎学教研室潍坊261042

目的观察成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内源性细胞的增殖和存活情况。方法对ALS转基因鼠进行BrdU注射,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光染色技术检测脊髓内细胞的增殖、分布和存活情况。结果成年ALS鼠脊髓... 详细信息

目的观察成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内源性细胞的增殖和存活情况。方法对ALS转基因鼠进行BrdU注射,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光染色技术检测脊髓内细胞的增殖、分布和存活情况。结果成年ALS鼠脊髓的中央管、灰质、白质均可检测到BrdU阳性细胞,经常可检测到形状相似、成对出现的细胞。在灰质内,BrdU阳性细胞主要分布于脊髓前角。在白质内,BrdU阳性细胞散在分布。前角ALS鼠脊髓内BrdU阳性细胞数量较野生型鼠多。BrdU末次注射后1d、14d均可检测到BrdU阳性细胞,但细胞数量逐渐减少,28d ALS鼠脊髓内仍可检测到少量BrdU阳性细胞,主要分布于中央管部位。增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞的分布和变化规律与BrdU阳性细胞一致。在95d龄ALS鼠(BrdU末次注射1d后),脊髓中Nestin阳性细胞较野生型鼠多,多数Nestin阳性细胞分布于脊髓前角,某些细胞呈BrdU/Nestin双标阳性。在BrdU注射后14d、28d脊髓中,未检测到BrdU/Nestin双标阳性细胞。结论神经退行性病变可激活ALS转基因鼠脊髓的细胞增殖,且细胞存活可达28d。

关键词：肌萎缩脊髓侧索硬化症脊髓细胞增殖 BrdU标记免疫荧光染色转基因鼠

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成年肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓增殖细胞的分化

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解剖学报 2009年第5期40卷 715-719页

作者：于丽管英俊高海玲陈燕春赵春艳杜红梅张皓云岳炳德潍坊医学院组织学与胚胎学教研室潍坊261053

目的探讨成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内增殖细胞的类型及分化情况。方法对ALS转基因鼠发病期进行BrdU标记,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光双标及三标染色技术检测ALS转基因鼠病变进展过程中脊髓内增殖... 详细信息

目的探讨成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内增殖细胞的类型及分化情况。方法对ALS转基因鼠发病期进行BrdU标记,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光双标及三标染色技术检测ALS转基因鼠病变进展过程中脊髓内增殖细胞的分化情况。结果成年ALS转基因鼠发病期脊髓的中央管、灰质、白质均未检测到BrdU/DCX双标记阳性细胞和BrdU/NeuN双标记阳性细胞。灰质、白质和中央管周围检测到大量NG2阳性细胞,阳性细胞数量随病变进展逐渐减少,NG2阳性细胞多呈BrdU阳性表达;可检测到少量BrdU/A2B5双标记阳性细胞;ALS转基因鼠发病期脊髓BrdU/GFAP双标记阳性细胞较多,部分双阳性细胞呈Nestin阳性,而野生型鼠脊髓内未检测到BrdU/GFAP双标记阳性细胞。结论神经退行性病变激活ALS转基因鼠脊髓内源性增殖细胞向神经胶质细胞方向分化,未检测到向神经元方向分化,内源性增殖细胞尚不能有效地促进退行性病变的修复。

关键词：肌萎缩脊髓侧索硬化症脊髓分化免疫荧光转基因鼠

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胰岛素基因增强结合蛋白1基因修饰的神经干细胞向胆碱能神经元分化的实验研究

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解剖学报 2007年第2期38卷 144-147页

作者：刘佳梅陈东孟晓婷吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室长春130021 广东医学院组织学与胚胎学教研室东莞523808

目的探讨大鼠胰岛素基因增强结合蛋白1(Islet-1)基因是否有诱导神经干细胞(NSCs)向胆碱能运动神经元分化的能力。方法用Islet-1基因重组逆转录病毒载体转导NSCs后,用免疫荧光组织化学染色方法检测Islet-1在NSCs内的表达;体内、体外实验... 详细信息

目的探讨大鼠胰岛素基因增强结合蛋白1(Islet-1)基因是否有诱导神经干细胞(NSCs)向胆碱能运动神经元分化的能力。方法用Islet-1基因重组逆转录病毒载体转导NSCs后,用免疫荧光组织化学染色方法检测Islet-1在NSCs内的表达;体内、体外实验观察导入Islet-1基因的NSCs向乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性细胞分化的情况。结果在体外分化实验中观察到,转导Islet-1基因的NSCs向胆碱能运动神经元分化的细胞数明显多于对照组;体内移植实验发现,导入Islet-1基因的NSCs在体内可以向ChAT阳性细胞分化。结论Islet-1基因有诱导NSCs向胆碱能运动神经元分化的能力。

关键词：胰岛素基因增强结合蛋白1基因神经干细胞重组逆转录病毒载体胆碱能神经元基因转导大鼠

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安石榴苷改善小鼠细菌性肠炎及调节肠道菌群的实验研究

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中草药 2022年第10期53卷 3044-3052页

作者：黄淑芸许萍洪宗元钟树志皖南医学院组织胚胎学教研室安徽芜湖241002

目的研究安石榴苷对细菌性肠炎的改善作用及对肠道菌群的影响。方法45只BALB/c小鼠采用致病性大肠杆菌O 101建立细菌性肠炎模型,给予安石榴苷或头孢克肟干预7 d,给药过程中观察各组小鼠的体征并计算每天的疾病活动指数(disease activity... 详细信息

目的研究安石榴苷对细菌性肠炎的改善作用及对肠道菌群的影响。方法45只BALB/c小鼠采用致病性大肠杆菌O 101建立细菌性肠炎模型,给予安石榴苷或头孢克肟干预7 d,给药过程中观察各组小鼠的体征并计算每天的疾病活动指数(disease activity index,DAI)与体质量变化率;给药结束后取肠组织及肠道内容物,苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠肠组织的病理改变;免疫组化法检测小鼠小肠组织黏膜中闭锁连接蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)和紧密连接蛋白(Occludin)的表达;测定小鼠肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性;qRT-PCR法检测小鼠肠壁炎症相关因子核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(nucleotide binding oligomerization domain 2,NOD2)、核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)mRNA的表达;ELISA法检测小鼠血清中脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、TNF-α和IL-6水平;16S rDNA高通量测序法检测小鼠肠道菌群多样性和丰度。结果与模型组比较,安石榴苷组小鼠DAI评分显著降低(P<0.01);小肠黏膜充血、水肿明显减轻;小肠上皮中ZO-1和Occludin蛋白表达显著增多(P<0.01);肠壁MPO活性显著降低(P<0.01);肠壁NOD2、NF-κB p65、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);血清LPS、TNF-α和IL-6水平显著减少(P<0.01);肠道厚壁菌门(Firmicutes)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)和Clostridiales-unclassified相对丰度显著升高(P<0.01),变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、Muribaculaceae和脱硫弧菌科(Desulfovibrionaceae)菌群相对丰度显著降低(P<0.05、0.01)。结论安石榴苷能够改善致病性大肠杆菌O 101诱导的肠炎,减轻小鼠肠壁的炎症反应,保护肠黏膜屏障,其机制可能与调节肠道菌群有关。

关键词：安石榴苷细菌性肠炎肠道菌群肠黏膜屏障炎症反应

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海洛因依赖对大鼠睾丸表皮生长因子、β-内啡肽阳性细胞及血清卵泡刺激素的影响

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解剖学报 2010年第4期41卷 545-549页

作者：郭斌梁文妹贵阳医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550004

目的探讨海洛因依赖对大鼠睾丸表皮生长因子(EGF)、β-内啡肽(β-EP)阳性细胞的影响和血清卵泡刺激素(FSH)的变化。方法成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别... 详细信息

目的探讨海洛因依赖对大鼠睾丸表皮生长因子(EGF)、β-内啡肽(β-EP)阳性细胞的影响和血清卵泡刺激素(FSH)的变化。方法成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取睾丸组织。采用免疫组织化学SABC法、细胞计数、图像分析方法及放射免疫测定技术进行研究。结果 1.与正常及盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠睾丸EGF阳性细胞免疫染色强度有所增强,平均灰度值明显低于正常及盐水对照组,但细胞数量有所减少(P<0.05)。2.海洛因依赖组大鼠睾丸β-EP阳性细胞数量有所减少(P<0.05),免疫染色强度较正常对照组和盐水对照组有所减弱,平均灰度值逐渐增高(P<0.05)。3.放射免疫测定结果表明,血清FSH在第10天水平较低,第17天有所增高。结论海洛因依赖期间,大鼠睾丸EGF阳性细胞的分泌功能增强,β-EP阳性细胞的分泌功能减弱,两者细胞数量均有所减少,血清FSH分泌量有所改变。提示,睾丸内分泌细胞在海洛因依赖期间可能参与了机体神经内分泌的调节过程。

关键词：表皮生长因子 β-内啡肽卵泡刺激素海洛因依赖睾丸免疫组织化学大鼠

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CD3和CD20阳性细胞在人胎腭扁桃体的发育

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解剖学报 2011年第1期42卷 110-113页

作者：胡蓉苏敏黄悦李红许庭良姜俸蓉贵阳医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550004

目的探讨T、B细胞在人胎儿腭扁桃体内的发育情况。方法收集9～20周因故终止妊娠胎儿腭扁桃体22例,采用免疫组织化学方法,以细胞表面分化群(CD)抗体(CD3和CD20)染色分别显示T细胞和B细胞,用BioMiaspro图像分析软件对免疫反应阳性细胞进... 详细信息

目的探讨T、B细胞在人胎儿腭扁桃体内的发育情况。方法收集9～20周因故终止妊娠胎儿腭扁桃体22例,采用免疫组织化学方法,以细胞表面分化群(CD)抗体(CD3和CD20)染色分别显示T细胞和B细胞,用BioMiaspro图像分析软件对免疫反应阳性细胞进行计数,有关数据做统计学分析。结果妊娠9周时,胎儿腭扁桃体原基内已可见少量CD20阳性细胞和CD3阳性细胞,分布于黏膜上皮下方的间充质内。14周时,CD20阳性细胞数量显著增多,部分聚集于初级淋巴小结,其他的散在分布于弥散淋巴组织和隐窝上皮内;此时CD3阳性细胞仍较少,但隐窝上皮出现少量CD3阳性细胞浸润。17周时,初级淋巴小结增多。20周时,CD3阳性细胞显著增多,在固有层淋巴组织内散在分布或聚集成群。随着胎龄增加,两种阳性细胞逐渐增多(P<0.05或P<0.01),但CD20阳性细胞占多数(P<0.05)。结论胎儿腭扁桃体内出现T细胞和B细胞迁入的最早时间是第9周;胎儿腭扁桃体内初级淋巴小结的形成发生于第14周。

关键词： T细胞 B细胞 CD3 CD20 腭扁桃体免疫组织化学人胎

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小鼠睾丸支持细胞对人脐带间充质干细胞增殖能力的影响

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解剖学报 2013年第3期44卷 334-338页

作者：张芬熙洪艳梁文妹贵阳医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550004

目的探讨睾丸支持细胞(SCs)对体外培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖能力的影响。方法体外分离培养并鉴定hUCMSCs和SCs;Transwell-insert系统共培养SCs和hUCMSCs(共培养组);普通DMEM-F12培养基培养的hUCMSCs作为对照(对照组);添加细... 详细信息

目的探讨睾丸支持细胞(SCs)对体外培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖能力的影响。方法体外分离培养并鉴定hUCMSCs和SCs;Transwell-insert系统共培养SCs和hUCMSCs(共培养组);普通DMEM-F12培养基培养的hUCMSCs作为对照(对照组);添加细胞因子(白细胞介素-3,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)的DMEM-F-12培养基培养的hUCMSCs作为阳性对照(细胞因子组)。用流式细胞术、免疫细胞化学等方法检测SCs对hUCMSCs增殖、细胞周期、表面标记分子表达的影响,透射电镜观察细胞超微结构。结果与对照组相比,共培养组和细胞因子组hUCMSCs增殖明显加快,以共培养组尤为显著(P<0.05);共培养组和细胞因子组hUCMSCs表面分子CD29和CD105阳性率均增高;细胞周期分析显示,共培养组G0/G1期细胞数与对照组相比无明显改变,而细胞因子组略有减少。透射电镜观察对照组与共培养组细胞均呈现原始细胞的超微结构特点。结论SCs共培养可促进hUCMSCs增殖,且共培养后仍保持其干细胞特性。

关键词：脐带间充质干细胞支持细胞共培养体外培养免疫组织化学流式细胞术小鼠

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海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区、伏隔核神经元P物质和神经肽Y表达的影响

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解剖学报 2012年第2期43卷 150-154页

作者：梁文妹李一欣黄智谢莉韩晶夏白娟洪艳胡赟贵阳医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550004

目的探讨海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)神经元P物质(SP)、神经肽Y(NPY)表达的影响,为进一步揭示海洛因依赖的中枢机制提供重要的原位形态学资料。方法成年雄性SD大鼠55只,随机分为海洛因依赖组、生理盐水对照组及... 详细信息

目的探讨海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)神经元P物质(SP)、神经肽Y(NPY)表达的影响,为进一步揭示海洛因依赖的中枢机制提供重要的原位形态学资料。方法成年雄性SD大鼠55只,随机分为海洛因依赖组、生理盐水对照组及正常对照组。建立海洛因依赖模型,并分别于第10、17、24、31、38天取脑组织,免疫组织化学SABC法显示VTA、NAc区神经元SP、NPY免疫反应细胞并用图像分析法测定平均灰度值。结果海洛因依赖组VTA、NAc区的SP、NPY免疫反应细胞与生理盐水及正常对照组比较,免疫反应强度明显减弱、染色变浅。平均灰度值测定,海洛因依赖组各时间点大鼠VTA、NAc区的SP、NPY免疫反应细胞平均灰度值均高于正常对照组及生理盐水对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实验结果提示,海洛因依赖使VTA、NAc区SP、NPY的分泌受到抑制,可能导致内源性阿片肽的分泌受影响,SP、NPY可能是药物依赖形成机制中的关键信号分子。

关键词：海洛因依赖中脑腹侧被盖区伏隔核 P物质神经肽Y 免疫组织化学大鼠

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海洛因戒断与复吸对大鼠结肠5-羟色胺和P物质表达的影响

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解剖学报 2011年第4期42卷 527-531页

作者：李一欣梁文妹胡赟夏白娟洪艳韩晶谢莉贵阳医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550004

目的探讨海洛因戒断、脱毒和复吸期间5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)在大鼠结肠表达的变化。方法将正常雄性SD大鼠35只,随机分为实验组15只、盐水对照组15只和正常对照组5只,实验组大鼠又分戒断组(HWG)、脱毒治疗组(MDG)和复吸组(HRG)。取... 详细信息

目的探讨海洛因戒断、脱毒和复吸期间5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)在大鼠结肠表达的变化。方法将正常雄性SD大鼠35只,随机分为实验组15只、盐水对照组15只和正常对照组5只,实验组大鼠又分戒断组(HWG)、脱毒治疗组(MDG)和复吸组(HRG)。取正常对照组、盐水对照组及实验组大鼠的结肠组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究。结果戒断组和复吸组大鼠结肠内的5-HT-、SP-免疫反应(IR)细胞的平均灰度值低于正常及盐水对照组,免疫反应细胞计数增多,差异有统计学意义(P<0.05)。脱毒治疗组与正常及盐水对照组比较,大鼠结肠内的5-HT-、SP-IR细胞的平均灰度值及细胞计数差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在海洛因戒断、复吸期间,结肠分泌5-HT、SP增多;美沙酮脱毒治疗后,5-HT、SP的表达与正常组差异无显著性,提示结肠分泌的5-HT、SP参与了海洛因戒断、脱毒和复吸期间机体的调节。

关键词：海洛因戒断复吸结肠 5-羟色胺 P物质免疫组织化学大鼠

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海洛因依赖期间大鼠下颌下腺EGF及IL-2阳性细胞的免疫组织化学研究

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解剖学报 2007年第6期38卷 731-735页

作者：胡赟梁文妹贵阳医学院组织学与胚胎学教研室贵阳550004

目的观察海洛因依赖对大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及白细胞介素2(IL-2)阳性细胞形态及功能的影响。方法正常SD大鼠,随机分为空白对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、... 详细信息

目的观察海洛因依赖对大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及白细胞介素2(IL-2)阳性细胞形态及功能的影响。方法正常SD大鼠,随机分为空白对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38d取下颌下腺组织。用免疫组织化学SABC法、图像分析及细胞计数方法进行研究。结果1.与空白对照组相比,盐水对照组大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及强度均无明显改变。2.海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的免疫反应增强,细胞数量明显增加(P<0.05)。图像分析结果显示,在整个海洛因依赖期间,EGF、IL-2阳性细胞的平均灰度值始终低于空白组及盐水对照组(P<0.05)。***与IL-2在大鼠下颌下腺内分泌细胞中有共存现象。结论在海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及反应强度均发生了规律性改变,提示大鼠下颌下腺分泌的EGF及IL-2参与了机体对海洛因依赖的调节过程。

关键词：表皮生长因子白细胞介素2 海洛因依赖下颌下腺免疫组织化学大鼠

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