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动物医学进展 2003年第1期24卷 58-61页

作者：郑宝亮宋铭忻王秀荣路义鑫东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

旋毛虫病由于其对人、畜危害严重历来被人们所重视 ,其免疫防制是当今国内外学者研究的重要方向。通过对旋毛虫几种抗原的对比研究 ,排泄 /分泌抗原效果最好 ,它具有双重的免疫学功能 ,成为众多学者研究的热点 ,人们对排泄 /分泌抗原成... 详细信息

旋毛虫病由于其对人、畜危害严重历来被人们所重视 ,其免疫防制是当今国内外学者研究的重要方向。通过对旋毛虫几种抗原的对比研究 ,排泄 /分泌抗原效果最好 ,它具有双重的免疫学功能 ,成为众多学者研究的热点 ,人们对排泄 /分泌抗原成分进行了大量研究。作为蛋白质其主要成分是三种糖蛋白 (分子量分别为4.5万 ,4.9万 ,5.3万 ) ,他们可以发生免疫学交差反应。目前人们已经获得了编码这三种蛋白的基因序列 ,并通过分子生物学技术对其基因进行克隆和表达 ,将表达蛋白用于旋毛虫病的防制。本文介绍了旋毛虫排泄 /分泌抗原的组成成分与功能 ,以及检测抗原和免疫原方面研究状况。

关键词：旋毛虫旋毛虫病排泄/分泌抗原制备检测抗原免疫原

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鸡白细胞介素15基因在昆虫细胞中的高效表达

鸡白细胞介素15基因在昆虫细胞中的高效表达

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会

作者：独军政刘胜旺陈怀涛孔宪刚甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

本实验用HindⅢ/Pst从重组质粒pPoChIL-15上切下外源片段mChIL-15基因,定向亚克隆到经同样酶切处理的杆状病毒转移载体pMelBacB中,经酶切、PCR和序列测定鉴定后,与杆状病毒线形化DNA(Bac-N-BlueDNA)共转染Sf9昆虫细胞,经三轮蚀斑纯化,... 详细信息

本实验用HindⅢ/Pst从重组质粒pPoChIL-15上切下外源片段mChIL-15基因,定向亚克隆到经同样酶切处理的杆状病毒转移载体pMelBacB中,经酶切、PCR和序列测定鉴定后,与杆状病毒线形化DNA(Bac-N-BlueDNA)共转染Sf9昆虫细胞,经三轮蚀斑纯化,成功构建了重组杆状病毒rBac-ChIL-15,用该重组病毒感染处于对数生长期的Sf9细胞,在不同的感染时间收取样品,然后进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组病毒感染Sf9细胞后24小时已表达rChIL-15,96小时表达量达到高峰,重组蛋白分子量约为22kDa,占细胞总蛋白的25%左右。

关键词：鸡白细胞介素15基因重组杆状病毒表达

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鸡细胞因子作为治疗制剂和疫苗佐剂的研究进展

鸡细胞因子作为治疗制剂和疫苗佐剂的研究进展

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会

作者：独军政陈怀涛刘胜旺孔宪刚甘肃农业大学动物医学院甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

细胞因子是机体感染疾病或接种疫苗后决定免疫应答类型和程度的小分子蛋白质,作为天然治疗剂和佐剂有一定的应用潜力。随着鸡细胞因子基因的成功克隆,其在临床疾病中的应用成为可能。鸡的免疫系统与哺乳动物相似,因而鸡可能成为研究哺... 详细信息

细胞因子是机体感染疾病或接种疫苗后决定免疫应答类型和程度的小分子蛋白质,作为天然治疗剂和佐剂有一定的应用潜力。随着鸡细胞因子基因的成功克隆,其在临床疾病中的应用成为可能。鸡的免疫系统与哺乳动物相似,因而鸡可能成为研究哺乳动物细胞因子的动物模型。本文主要就鸡细胞因子作为治疗制剂和疫苗佐剂的最新进展作了综述。

关键词：鸡细胞因子治疗制剂疫苗佐剂

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鸡白细胞介素15的研究进展

鸡白细胞介素15的研究进展

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会

白细胞介素15(IL-15)是1994年发现的一种能促进细胞生长和分化的细胞因子,主要由天然免疫细胞产生。它与白细胞介素2(IL-2)有相似的生物学活性,但其结构和组成与IL-2毫无相似之处。已有的研究表明,鸡细胞因子在功能活性方面与人类和哺... 详细信息

白细胞介素15(IL-15)是1994年发现的一种能促进细胞生长和分化的细胞因子,主要由天然免疫细胞产生。它与白细胞介素2(IL-2)有相似的生物学活性,但其结构和组成与IL-2毫无相似之处。已有的研究表明,鸡细胞因子在功能活性方面与人类和哺乳动物的细胞因子相似,尤其是IL-2与干扰素d均具有较强的免疫增强作用。鸡IL-15是一种新发现的且与IL-2活性相似的细胞因子,作为疫苗佐剂研究的重要候选细胞因子有巨大潜力。本文主要围绕鸡IL-15的发现、基因及蛋白结构、受体及生物学特性等作一综述。

关键词：鸡白细胞介素15 分子特征受体生物学特性

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猪圆环病毒诊断技术研究进展

猪圆环病毒诊断技术研究进展

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第十次学术研讨会

作者：全艳平张亚非崔尚金赵玉军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病诊断与流行病学中心(哈尔滨) 兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 沈阳农业大学畜牧兽医学院(沈阳) 哈尔滨市科技情报研究所(哈尔滨) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病诊断与流行病学中心(哈尔滨) 兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

各国兽医工作者,进行了大量的实践研究,建立了多种高特异性的病毒学、免疫学和分子生物学诊断方法,如病毒分离、PCR技术、原位杂交技术、免疫组化技术、免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验等.本文就目前国内外PCV的诊断检测技术研究进展进... 详细信息

各国兽医工作者,进行了大量的实践研究,建立了多种高特异性的病毒学、免疫学和分子生物学诊断方法,如病毒分离、PCR技术、原位杂交技术、免疫组化技术、免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验等.本文就目前国内外PCV的诊断检测技术研究进展进行综述.

关键词：猪圆环病毒猪断奶后多系统衰竭综合症诊断技术

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新城疫分子流行病学研究进展

新城疫分子流行病学研究进展

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第十次学术研讨会

作者：刘文斌崔尚金蔡阳赵玉军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病诊断与流行病学中心(哈尔滨) 兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 沈阳农业大学畜牧兽医学院(沈阳) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病诊断与流行病学中心(哈尔滨) 兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 吉林农业大学动物科学技术学院(长春)

本文首先阐述了新城疫病毒分子流行病学研究的重要意义,然后介绍了三种分子流行病学研究方法,以期掌握我国新城疫的流行规律.

关键词：新城疫分子流行病学抗原变异系统发育进化树

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部分省市猪群猪流感的血清学调查及猪流感病毒的分离与鉴定

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动物医学进展 2003年第3期24卷 67-72页

作者：李海燕于康震辛晓光李雁冰蔡雪辉杨焕良毕英佐王自振中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 华南农业大学动物科学学院广东广州510642 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

对黑龙江、吉林、辽宁、安徽、山东、内蒙、河南、河北、江苏、安徽、浙江、湖北、福建、广东、海南、上海等省、市猪群进行了猪流感的血清学和病原学调查研究。从 130 6份猪鼻棉拭子样品和死亡猪肺、气管样品中分离到 39株H3N2亚型猪... 详细信息

对黑龙江、吉林、辽宁、安徽、山东、内蒙、河南、河北、江苏、安徽、浙江、湖北、福建、广东、海南、上海等省、市猪群进行了猪流感的血清学和病原学调查研究。从 130 6份猪鼻棉拭子样品和死亡猪肺、气管样品中分离到 39株H3N2亚型猪流感病毒 ,12株 H1亚型猪流感病毒及其它亚型猪流感病毒 ,病毒粒子在透射电镜下呈现典型的正粘病毒特征 ,有囊膜和纤突 ,多为椭圆形、圆形、或杆形 ,直径约 80～ 12 0 nm。对 1997- 2 0 0 1年 3895份猪血清的血清学调查结果表明 ,近年中国多个地区猪群存在抗SWTN77(H1)、SWCO77(H3)、DKAT6 9(H1)、TKUK6 3(H3)流感病毒抗体 ;1998年来自河北的猪血清中抗 SWTN77阳性率高达 33.3% ;1999年来自内蒙的猪血清中抗 TKUK6 3和SWCO77阳性率分别为 13.3%和 2 6 .7% ;2 0 0 0- 2 0 0 1年调查的所有省市的猪群中均存在抗SWCO77抗体 ,阳性率从 3.2 %～ 10 0 %。说明近年我国猪群中

关键词：猪群猪流感血清学调查流感病毒分离鉴定

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猴天花在美暴发

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畜牧兽医科技信息 2003年第7期19卷 63-页

作者：安同庆仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

"非典恐慌"尚未完全平息的美国,西尼罗病在24个州卷土重来,而且中西部地区又暴发了"猴天花".这是西半球首次发现人感染猴天花的病例.

关键词：天花病例痘疹天花疫苗猴痘病毒啮齿类动物野生动物土拨鼠天花病毒痘病毒

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马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株及其亲本驴强毒株长末端重复序列(LTR)的启动子活性比较

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病毒学报 2002年第4期18卷 342-347页

作者：周家喜孔宪刚张宝山刘胜旺刘丽玲孙成群刘相东刘永刚杨威中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将马传染性贫血病毒驴强毒(donkey adaptedequineinfectiousanemiavirus,D AEIAV)、马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒(donkeyleukocyteattenuatedEIAV,DLAEIAV)及EIAVWyoming株的全长长末端重复序列(LTR)分别克隆到报告基因载体pCAT Basicvector中,获得重组质粒p D A LTR CAT、p DLA LTR CAT及p Wyo LTR CAT。将这3个重组质粒分别体外转染EIAV阴性健康驴的白细胞,比较这三者LTR启动报告基因CAT表达的基础活性和在tat pcDNA3共转染条件下激活活性的差异。结果表明:在驴白细胞中,DLAEIAVLTR启动CAT表达的活性略高于D AEIAVLTR;而与EIAVWyoming株LTR比较,DLAEIAV与D AEIAV二者LTR启动CAT表达的活性都较低。在有共转染重组表达质粒tat pcDNA3条件下,D AEIAV、DLAEIAV及EIAVWyoming株LTR起始CAT表达的活性都得到提高,分别提高了4 8倍、6 0倍和3 2倍。上述结果提示,LTR可能是体现DLAEIAV驴白细胞适应性的因素,不一定是影响其毒力减弱的根本原因。

关键词：马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株亲本驴强毒株长末端重复序列启动子活性比较

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猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株非结构基因的分子克隆及其基因特征的研究

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 81-87页

作者：刘光清薛强仇华吉蔡雪晖童光志郭宝清中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;... 详细信息

对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;与LV株的核苷酸同源性分别为 5 4%、6 3.3%。ORF1编码两个聚合蛋白 ,其中ORF1a编码的聚合蛋白经裂解后产生 6个成熟的非结构蛋白 (Nsp1α、Nsp1β、Nsp2_5 ) ,以Nsp2的变异性最为显著 ,它与LV株的氨基酸同源性为 41%。ORF1b编码的聚合蛋白经裂解后 ,产生 4个成熟的非结构蛋白 (RdRpCP2_4) ,其中RdRp为病毒的复制酶 ,CP4表现出较大的变异性 ,与LV株的氨基酸同源性为 48%。在ORF1a_ORF1b的衔接区有保守的庚核苷酸滑动序列和拟节结构 ,它们是核糖体移码翻译所必需的结构。在基因组末端存在非编码区 ,其中 5’NCR长 190nt,比LV株 5’NCR短 31nt,其核苷酸同源性为 6 1%。 3’NCR长 15 1nt,比LV株 3’NCR长 37nt,保守性稍高 ,其与VR2 332株和LV株的核苷酸同源性分别为 95 .4%和 78.2 %。在 3’NCR末端有一个poly(A)尾巴 ,长 2 0nt。在Poly(A)尾上游有保守的八核苷酸序列 ,是复制酶识别并结合的区域。

关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒 CH-1a株非结构基因分子克隆基因特征序列分析非结构蛋白编码区

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