检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2002年第3期24卷 237-250页

作者：孙庆申蔡雪晖童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）于1987年首先暴发于美国，然后迅速向世界各地蔓延。该病病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），1991年在荷兰首次分离到，以后在美国、加拿大、欧洲国家、中国以及日本陆续分离到。根据形态学及生化特性... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）于1987年首先暴发于美国，然后迅速向世界各地蔓延。该病病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），1991年在荷兰首次分离到，以后在美国、加拿大、欧洲国家、中国以及日本陆续分离到。根据形态学及生化特性将其归入动脉炎病毒科，该病毒为有囊膜的单股正链RNA病毒，含有8个读码框。

关键词：细胞免疫 PRRVS感染分子基础猪繁殖呼吸综合征

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鸡新城疫病毒F48E9株血凝素神经氨酸酶基因免疫诱导免疫保护的初步研究

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中国农业科学 2002年第12期35卷 1565-1569页

作者：刘胜旺孔宪刚童光志马云燕卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室国家兽医生物技术重点实验室哈尔滨150001

将我国新城疫病毒标准强毒F4 8E9株的血凝素神经氨酸酶基因克隆于真核表达载体 pcDNA3 中 ,进行鉴定后筛选阳性质粒。将此阳性质粒进行大量法提取并纯化后作为基因疫苗以每只鸡 10 0 μg的剂量肌肉接种 4 5日龄SPF鸡 ,并以 pcDNA3 空... 详细信息

将我国新城疫病毒标准强毒F4 8E9株的血凝素神经氨酸酶基因克隆于真核表达载体 pcDNA3 中 ,进行鉴定后筛选阳性质粒。将此阳性质粒进行大量法提取并纯化后作为基因疫苗以每只鸡 10 0 μg的剂量肌肉接种 4 5日龄SPF鸡 ,并以 pcDNA3 空质粒作为对照。结果表明 ,新城疫基因疫苗能够诱导机体产生新城疫病毒特异的血清IgG抗体反应 ,但产生抗体所需的时间较长 ,抗体滴度的增加较为缓慢。人工接种新城疫强毒后 ,基因疫苗免疫组 4 / 6的鸡得到保护 ,而且保护鸡具有明显的抗体反应 ,2只鸡未得到保护 ,但其死亡时间明显迟于对照组鸡 ,死亡鸡具有典型的新城疫病毒感染鸡的病理形态学变化。

关键词：鸡新城疫F48E9病毒血凝素神经氨酸酶基因疫苗

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猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核蛋白基因在原核系统中的高效表达与初步应用

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中国预防兽医学报 2002年第6期24卷 401-404页

作者：周艳君童光志薛强仇华吉王云峰赵永刚王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中 ,经鉴定后得到重组质粒pET30a_N ,将此重组质粒转化到受体菌BL2 1中 ,用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导 ,并在不同诱导时间进行采样 ,经处理后做S... 详细信息

将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中 ,经鉴定后得到重组质粒pET30a_N ,将此重组质粒转化到受体菌BL2 1中 ,用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导 ,并在不同诱导时间进行采样 ,经处理后做SDS_PAGE、Western_blot分析 ,并以此为包被抗原进行ELISA检测 ,结果发现以终浓度为 1mmol/L的IPTG进行诱导 ,4小时后表达可达到高峰 ,其大小约为 2 3kD ,薄层扫描结果表明该蛋白表达量约占菌体蛋白总量的 32 % ,该蛋白不仅与PRRSV阳性血清能发生特异性反应 ,而且可被PRRSV抗N蛋白单抗所识别 ,证实此大量表达的蛋白为核蛋白。将此表达产物应用ProBondTM纯化系统进行纯化 ,其纯度可达到 91% ,纯化后的蛋白以 5 0 μg/孔包被 96孔板 ,检测来自不同地区送检的猪血清 ,同时以全病毒ELISA为对照 ,结果发现二者的符合率高达 93.3% ,而应用该蛋白进行检测其反应更为敏感 ,且背景低 ,制备过程简单 ,这将为今后应用该蛋白作诊断抗原检测PRRSV奠定了基础。

关键词：猪 CH-1a株核蛋白基因原核系统应用 PRRSV 繁殖呼吸综合征病毒基因表达

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禽用基因工程疫苗的研究进展及应用前景

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中国家禽 2002年第19期24卷 3-9页

作者：童光志兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 150001

疫苗研究的历史回顾原始疫苗自然强毒苗:仅限非致死性病原,如口蹄疫,牛痘,一些疱疹病毒病等.自然弱毒苗:火鸡疱疹病毒,伪狂犬病,传染性喉气管炎等.

关键词：禽基因工程疫苗应用现状发展

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CD4和CD8分子在细胞免疫中的作用及其与PRRSV感染的关系

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 151-152页

作者：孙庆申蔡雪晖童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

CD4和CD8是T细胞的两个重要的细胞表面标志。

关键词： CD4 CD8 细胞免疫 PRRSV 分子结构细胞免疫感染机理

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新城疫病毒的反遗传操作技术研究进展

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中国预防兽医学报 2002年第5期24卷 392-394,345页

作者：闫丽辉曹殿军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

鸡新城疫（ND）是由NDV引起的鸡和火鸡的急性高度接触性传染病，是严重危害养鸡业的最重要的疾病之一，我国每年因此造成的损失极其严重。尽管常规疫苗基本控制了该病的大规模毁灭性流行，但并没有使ND得到根本控制。

关键词：新城疫病毒反遗传操作技术鸡疾病防治

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猪白细胞介素-10的分子克隆与序列测定

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 113-115页

作者：兰文升童光志仇华吉王云峰周艳君郭海龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

从LPS活化的猪外周血单个核细胞 (PBMC)提取总RNA ,用RT_PCR方法扩增出猪白细胞介素_10 (IL_10 )的编码基因 ,将其连接到pUC18质粒上 ,然后进行BamHI和HindIII双酶切鉴定筛选阳性克隆 ,序列分析结果表明该基因开放阅读框由5 2 8个核苷... 详细信息

从LPS活化的猪外周血单个核细胞 (PBMC)提取总RNA ,用RT_PCR方法扩增出猪白细胞介素_10 (IL_10 )的编码基因 ,将其连接到pUC18质粒上 ,然后进行BamHI和HindIII双酶切鉴定筛选阳性克隆 ,序列分析结果表明该基因开放阅读框由5 2 8个核苷酸组成 ,推测产生的编码产物由 175个氨基酸组成。猪IL_10基因与人、大鼠和小鼠基因序列的同源性分别为84%、79%和 79% ,与国外报道的猪IL_10基因序列完全一致。

关键词：猪白细胞介素-10 分子克隆序列测定

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核衣壳蛋白及“六碱基规则”在新城疫病毒复制中的作用

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中国预防兽医学报 2002年第3期24卷 235-236页

作者：柴迎梅曹殿军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

新城疫病毒（NDV）属于副粘病毒科副粘病毒亚科肋腺炎病毒属。是一种有囊膜的单股负链RNA病毒，病素养RNA包裹于核有壳结构中，病毒粒子含有6种结构蛋折核衣壳蛋白NP（nucleocapsid protein）、磷蛋白P（phosphopprotein)、基质蛋白M(m... 详细信息

新城疫病毒（NDV）属于副粘病毒科副粘病毒亚科肋腺炎病毒属。是一种有囊膜的单股负链RNA病毒，病素养RNA包裹于核有壳结构中，病毒粒子含有6种结构蛋折核衣壳蛋白NP（nucleocapsid protein）、磷蛋白P（phosphopprotein)、基质蛋白M(matrix protein）、融合蛋白F（fusion protein）、血凝素-神经氨酸酶HN（Hemagglutinin-Neuraminidase）和RNA 依赖的RNA聚合酶L，其中NP、P、L外加上几种细胞的蛋白组成转录复合体。转录复合体中的核衣壳蛋白与RNA结合的，它们共同组成螺旋的核认壳芯，在转录和复制中充当模板。核衣壳芯中核衣壳蛋白（NP）又是最主要结构蛋白，对病毒基因组RNA有保护作用，然而只有当NP、P、L这三种蛋白同时存在时才具有很高转录酶活性。在核衣壳芯中，病毒基因组的长度只有是6的倍数时，每一个核衣壳蛋白恰好与6个碱基结构结合，复制才能达到最高效率，这就是所谓的“六碱基规则”（the Rule of Six）。所以核衣壳蛋白是理解“六碱基规则”的关键，也是理解病毒基因组合成机理的关键，为促进该领域研究的进展，特将新城疫核衣壳的结构、功能以及与“六碱基规则”的关系综述如下。

关键词：核衣壳蛋白 “六碱基规则” 新城疫病毒病毒复制形态结构 RNA基因组

来源：评论

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猪繁殖与呼吸综合征病毒的持续感染

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中国预防兽医学报 2002年第4期24卷 316-318页

作者：刘光清仇华吉蔡雪晖童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PPRS)是由PRRSV引起的以繁殖母猪的生殖障碍和仔猪的呼吸道症状为特征的病毒性传染病。该病虽然是一种新发现的传染病，但却已给养猪业造成了严重的经济损失。目前... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PPRS)是由PRRSV引起的以繁殖母猪的生殖障碍和仔猪的呼吸道症状为特征的病毒性传染病。该病虽然是一种新发现的传染病，但却已给养猪业造成了严重的经济损失。目前，对该病的防制一直不尽人意，因为PRRSV可在猪群中持续存在并感染，很难彻底消灭。更有甚者，当猪群的群体免疫水平低下，还会造成PRRS的再度发和流行。

关键词：猪繁殖呼吸综合症病毒持续感染

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EIAV反式激活蛋白(TAT)基因的分子克隆与序列测定

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中国兽医学报 2002年第2期22卷 128-130页

作者：周家喜张宝山刘永刚孔宪刚刘胜旺孙成群刘相东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

以马传染性贫血病毒 (EIAV)疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物 ,在病毒繁殖期提取细胞总 RNA,反转录后使用特异引物扩增病毒基因组拼接产物。将扩增产物克隆、测序并与基因组全序列比较 ,确定了编码 EIAV反式激活蛋白(TAT)的转录产物及阅读框... 详细信息

以马传染性贫血病毒 (EIAV)疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物 ,在病毒繁殖期提取细胞总 RNA,反转录后使用特异引物扩增病毒基因组拼接产物。将扩增产物克隆、测序并与基因组全序列比较 ,确定了编码 EIAV反式激活蛋白(TAT)的转录产物及阅读框架 ,发现至少有 2种拼接产物编码 TAT。比较 2种阅读框架 ,以保守序列作为模板扩增得到完整的编码 EIAV反式激活蛋白的基因。

关键词：马传染性贫血病毒反式激活蛋白拼接产物测序 TAT 基因分子克隆序列

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