检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医杂志 2001年第3期37卷 49-50页

作者：仇华吉童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

当前，由于现代兽医防疫技术和饲养管理措施的广泛应用，一些严重威胁养猪业发展的烈性传染病(如猪瘟等)已在全球范围内基本得到遏制，有些国家甚至已经消灭了几种重要疫病(如伪狂犬病等)。但随着集约化养猪业的发展，那些原本不太引入... 详细信息

当前，由于现代兽医防疫技术和饲养管理措施的广泛应用，一些严重威胁养猪业发展的烈性传染病(如猪瘟等)已在全球范围内基本得到遏制，有些国家甚至已经消灭了几种重要疫病(如伪狂犬病等)。但随着集约化养猪业的发展，那些原本不太引入注目的疾病其危害性逐渐显现出来，这就是繁殖障碍、呼吸障碍和消化障碍等3大类疾病，其中以流产、木乃伊和死产为主要特征的繁殖障碍，给现代养猪业提出了严峻挑战。1 病毒性疾病：引起繁殖障碍的主要原因繁殖障碍是一类综合征候群，包括：不育、空怀、屡配不孕和反复发情、胚胎死亡和消溶、死胎、木乃伊胎和畸形胎、流产、死产和产弱仔等等，广义上也包括公猪的生殖机能异常(生殖道感染、性欲丧失、精液异常等)。本文旨在讨论母猪繁殖障碍的有关问题。导致母猪繁殖障碍的因素主要有两类：第一类是引起生殖道原发性感染的病原，占流产、木乃伊和死产的30%～40%左右，第二类是毒素、环境和营养等非传染性因素，约占60%～70%［1］。见表1。尽管非传染性因子占重要比例，但传染性因子(尤其是病毒)更加令人关注。据认为，引起母猪繁殖障碍的病毒有十几种，其中影响较大的有伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)和猪瘟病毒(HCV)［2］。这些病毒虽然理化性质不一，临床症状各异，但它们均可通过胎盘感染胎儿，进而影响其发育和存活，感染结局主要取决于病毒特性以及感染母猪所处的妊娠阶段。

关键词：猪群病毒性疾病繁殖障碍

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NDV La Sota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的主要特异性血清抗体动态变化规律比较

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中国预防兽医学报 2001年第3期23卷 199-202页

作者：孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉陈杰曲鲁江刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨15001 东北农业大学动物医学院

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒(NDV)特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明 ,V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前 3天左右出现 ,但除高峰期 (1周左... 详细信息

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒(NDV)特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明 ,V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前 3天左右出现 ,但除高峰期 (1周左右 )外 ,其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota疫苗免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgG抗体水平高于V4免疫鸡 ,IgG抗体高峰较V4免疫鸡提前约 2周出现 ,攻毒后 ,LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著 ,而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。

关键词：新城疫血清抗体疫苗免疫鸡攻毒鸡

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检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法的建立

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中国预防兽医学报 2001年第1期23卷 23-25页

作者：孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉孔宪刚刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

本试验以新城疫病毒 (NDV)感染的鸡胚尿囊液经差速离心 ,庶糖密度梯度离心提纯的NDV为包被抗原 ,以纯化的鸡IgG、IgM及IgA免疫兔 ,制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG、IgM及IgA ,分别建立了检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法 ... 详细信息

本试验以新城疫病毒 (NDV)感染的鸡胚尿囊液经差速离心 ,庶糖密度梯度离心提纯的NDV为包被抗原 ,以纯化的鸡IgG、IgM及IgA免疫兔 ,制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG、IgM及IgA ,分别建立了检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法 ,抗原最适包被量为 1.34μg/孔。酶标兔抗鸡IgG、IgM、IgA的最佳稀释度分别为 1∶40 0 ,1∶40 0 ,1∶10 0 ;血清样品检测IgG时 ,最适工作浓度为 1∶40 0 ,检测IgM时为 1∶5 0。该方法具有特异性强、灵敏度度、快速简便等优点 ,适合于对各类新城疫特异性抗体的动态监测和大批检测。

关键词：新城疫病毒 IgG IgM IgA 间接ELISA 检测方法

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鸡CD4蛋白基因的克隆及其mRNA在淋巴器官中的表达

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中国兽医学报 2001年第5期21卷 482-484页

作者：刘胜旺孔宪刚丁忠庆刘永刚童光志马云燕中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞 ,应用 RT-PCR对这些免疫器官中鸡 CD4分子 m RNA的表达进行了研究。同时 ,用 RT-PCR对鸡脾淋巴细胞 CD4分子 c DNA进行了克隆和序列测定。结果表明 ,在上述器官中 ... 详细信息

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞 ,应用 RT-PCR对这些免疫器官中鸡 CD4分子 m RNA的表达进行了研究。同时 ,用 RT-PCR对鸡脾淋巴细胞 CD4分子 c DNA进行了克隆和序列测定。结果表明 ,在上述器官中 ,法氏囊淋巴细胞不表达鸡 CD4分子 m RNA,其他器官中均有表达。通过序列分析表明 ,本试验扩增得到的基因为编码鸡

关键词： CD4基因克隆mRNA 淋巴器官表达鸡

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重组逆转录病毒介导的neo^R基因在公鼠生殖系细胞的转移

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中国兽医学报 2001年第6期21卷 573-575页

作者：王凤阳张守峰赵君池海英孟庆文扈荣良殷震解放军军需大学军事兽医研究所吉林长春130062 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

将感染滴度为 10 6cfu/ m L、携带新霉素磷酸转移酶 (neo R)基因的重组逆转录病毒与台盼蓝、polybrene按一定比例配制成注射液 ,单侧睾丸注入 14～ 16日龄公鼠曲细精管以体内感染精原干细胞 ,进行重组逆转录病毒 -精原干细胞介导的基... 详细信息

将感染滴度为 10 6cfu/ m L、携带新霉素磷酸转移酶 (neo R)基因的重组逆转录病毒与台盼蓝、polybrene按一定比例配制成注射液 ,单侧睾丸注入 14～ 16日龄公鼠曲细精管以体内感染精原干细胞 ,进行重组逆转录病毒 -精原干细胞介导的基因转移研究。注射后 45 d,采集公鼠精液 ,进行精液品质与 PCR检测。结果表明 ,在优化的注射条件下 ,曲细精管内注射重组逆转录病毒后 ,不会干扰小鼠精子的正常发育能力 ,并能够将外源基因整合到精子基因组 ,从而首次通过重组逆转录病毒成功地实现了 neo

关键词：重组逆转录病毒 neo^R基因生殖系细胞基因转移小鼠

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马传染性贫血病毒基因组部分转录图谱

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病毒学报 2001年第3期17卷 245-249页

作者：刘相冬张宝山孔宪刚王滨有孙成群刘永刚周家喜王凯波刘建华哈尔滨医科大学公共卫生学院黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

以马传贫驴白细胞弱毒和驴强毒分别接种培养细胞和试验动物 ,分别在体外和体内条件下 ,对病毒的各种转录产物进行克隆和序列分析。通过与病毒基因组的序列进行比较 ,用实验的方法绘制出了两株病毒在相应试验条件下的转录图谱 ,确定了各... 详细信息

以马传贫驴白细胞弱毒和驴强毒分别接种培养细胞和试验动物 ,分别在体外和体内条件下 ,对病毒的各种转录产物进行克隆和序列分析。通过与病毒基因组的序列进行比较 ,用实验的方法绘制出了两株病毒在相应试验条件下的转录图谱 ,确定了各拼接产物的外显子构成以及拼接供体和拼接受体位点的具体位置。发现两种病毒在外显子 3的上游拼接受体位点 (SA2 )的位置与已报道的EIAV毒株均不相同。

关键词：马传染性贫血病毒转录图谱拼接位点拼接信号病毒基因组

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鸡贫血病病毒长春株VP3基因的克隆及序列分析

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中国兽医学报 2001年第6期21卷 546-548页

作者：宋秀龙章金刚常国权陈奖励中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 解放军军需大学动物科技系吉林长春130062

采用 PCR扩增方法成功克隆了鸡贫血病病毒 (CAV)长春分离株的 VP3基因 ,并进行了核苷酸序列测定。通过与 TK5 80 3、SJ1株进行序列比较 ,发现长春分离株 VP3基因与 TK5 80 3仅有 1个碱基差异 ,而氨基酸序列完全相同 ;与山东 SJ1株有 3... 详细信息

采用 PCR扩增方法成功克隆了鸡贫血病病毒 (CAV)长春分离株的 VP3基因 ,并进行了核苷酸序列测定。通过与 TK5 80 3、SJ1株进行序列比较 ,发现长春分离株 VP3基因与 TK5 80 3仅有 1个碱基差异 ,而氨基酸序列完全相同 ;与山东 SJ1株有 3个碱基差异和

关键词：鸡贫血病病毒 VP3基因基因克隆序列分布

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鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2重组DNA疫苗的构建

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中国预防兽医学报 2001年第2期23卷 81-84页

作者：姜永厚陈奖励宋秀龙童光志孔宪刚刘忠贵东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

利用已克隆到的新城疫D2 6株F基因和鸡IL_2基因 ,经过载体改建 ,将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上 ,经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL_2的重组质粒。

关键词：新城疫 F基因鸡IL-2 重组DNA疫苗

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含LacZ重组逆转录病毒的制备及其在NIH_3T_3细胞的表达

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中国预防兽医学报 2001年第5期23卷 329-331页

作者：王凤阳孟庆文扈荣良池海英张茂林于康震殷震解放军军需大学全军基因工程实验室吉林长春130062 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

构建了含有 3.7kbLacZ的重组逆转录病毒载体 ,转染包装细胞系PA317后 ,经G418筛选 ,得到了G418抗性的产毒细胞系 ,用收获的含有重组逆转录病毒粒子的浓缩病毒上清 ,感染NIH3T3细胞 ,经X_gal染色检测 ,发现表达了LacZ的NIH3T3细胞呈蓝色。

关键词：重组逆转录病毒 LacZ NIH3T3细胞基因表达外源基因转基因

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新城疫病毒F_(48)E_9株P基因的克隆及鉴定

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中国预防兽医学报 2001年第4期23卷 262-265页

作者：王海艳曹殿军闫丽辉刘培欣曲鲁江李红梅柴迎梅张庆玲内蒙古农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 新疆农业大学畜牧分院

根据NDVP蛋白己知基因序列设计合成了一对引物PU/PL ,利用RT_PCR扩增出了F4 8E9株P基因 12 72bp的片段 ,将该片段克隆到pMD18_TVector上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子。为... 详细信息

根据NDVP蛋白己知基因序列设计合成了一对引物PU/PL ,利用RT_PCR扩增出了F4 8E9株P基因 12 72bp的片段 ,将该片段克隆到pMD18_TVector上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子。为了更充分证实所得阳性质粒的可靠性 ,采用Sanger’s双脱氧末端终止法对阳性重组子从 5’端进行核苷酸序列测定 ,获得了F4 8E9株P基因片段 5’端的基因序列 ,利用DNASIS分析软件 ,将F4 8E9株与LaSota株的相应序列进行比较 ,其核苷酸序列同源性为 83 7%。至此 ,我们获得了F4

关键词：新城疫病毒 P蛋白基因克隆

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