检索结果-内蒙古大学图书馆

重组马传染性贫血病病毒核心蛋白抗原在 A GID 和ELISA中应用的评价

中国预防兽医学报 1999年第4期21卷 281-283页

作者：孔宪刚陶伟英刘永刚张宝山刘胜旺卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

用昆虫杆状病毒表达系统获得的马传染性贫血病病毒（ＥＩＡＶ）核心蛋白（Ｇａｇ）和Ｐ２６蛋白，作为免疫琼脂双扩散（ＡＧＩＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）抗原。对７６份已知马传贫非特异性血清进行检... 详细信息

用昆虫杆状病毒表达系统获得的马传染性贫血病病毒（ＥＩＡＶ）核心蛋白（Ｇａｇ）和Ｐ２６蛋白，作为免疫琼脂双扩散（ＡＧＩＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）抗原。对７６份已知马传贫非特异性血清进行检查，同时与市售ＡＧＩＤ和ＥＬＩＳＡ试剂盒作比较。证明，用表达蛋白作抗原的ＡＧＩＤ和ＥＬＩＳＡ检测结果均为阴性反应，而用市售ＡＧＩＤ试剂盒检查有５４份马血清出现非特异性反应，市售ＥＬＩＳＡ试剂盒检查也出现了非特异性反应，ＯＤ值比表达抗原ＥＬＩＳＡ高３５倍。初步证明在ＡＧＩＤ和ＥＬＩＳＡ法中，表达抗原优于常规马传贫病毒抗原。

关键词： EIAV 马传染性贫血病杆状病毒 ELISA 核心蛋白

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鸡贫血病毒山东分离株全基因克隆

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中国预防兽医学报 1999年第5期21卷 335-338页

作者：陈奖励辛九庆宋秀龙周方红杨雨辉章金刚 王祯修 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

设计了ＣＡ５、ＣＡ６和ＣＡ７、ＣＡ８两对引物，分别扩增鸡贫血病毒（ＣＡＶ）山东分离株ＳＪ１的１５Ｋｂ和０８ＫｂＤＮＡ片段。并将这两个片段分别克隆至ｐＵＣ１１９和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉ... 详细信息

设计了ＣＡ５、ＣＡ６和ＣＡ７、ＣＡ８两对引物，分别扩增鸡贫血病毒（ＣＡＶ）山东分离株ＳＪ１的１５Ｋｂ和０８ＫｂＤＮＡ片段。并将这两个片段分别克隆至ｐＵＣ１１９和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（ＳＫ＋）载体质粒，最后一起克隆到ｐＱＥ３２载体质粒上，使两个片段前后连接成一个全长的病毒ＤＮＡ。用该质粒转染ＭＤＣＣ ＭＳＢ１细胞，经免疫荧光抗体法和ＥＬＩＳＡ检测到ＣＡＶ病毒，结果证明我们得到了一个ＣＡＶ感染性全基因克隆。

关键词： CAV PCR 克隆转染

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因免疫对鸡的保护作用

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中国预防兽医学报 1999年第4期21卷 250-253页

作者：陈洪岩江国托杨奇伟陈奖励张宝山刘胜旺卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将鸡传染性支气管炎病毒肾型Ｔ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ连接于ｐｃＤＮＡ３的ＨｉｎｄＩＩＩ与ＢａｍＨＩ位点之间构建含有ＣＭＶ启动子及ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的鸡传染性支气管炎病毒Ｓ１蛋白真核表... 详细信息

将鸡传染性支气管炎病毒肾型Ｔ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ连接于ｐｃＤＮＡ３的ＨｉｎｄＩＩＩ与ＢａｍＨＩ位点之间构建含有ＣＭＶ启动子及ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的鸡传染性支气管炎病毒Ｓ１蛋白真核表达质粒。实验证明，ＳＰＦ鸡肌注免疫后血清ＩｇＧ抗体逐渐升高，至第３５日龄左右达到高峰，攻毒后血清ＩｇＧ抗体先下降而后升高，血清ＩｇＧ抗体升高幅度不及ＩＢ油苗免疫组。质粒ＤＮＡ免疫鸡攻毒后有４０％的鸡可耐过强毒的攻击，说明Ｓ１基因在体内获得了表达并使鸡产生了一定的免疫力。

关键词： S1基因基因免疫传染性支气管炎 IBV 鸡

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禽流感疫苗

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中国预防兽医学报 1999年第5期21卷 398-400页

作者：马文军于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

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分子修饰的重组百日咳毒素S1亚单位的生物学和免疫学特性

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中国免疫学杂志 1999年第4期15卷 151-154页

作者：于康震 Burnette W N Kaslow H R Yilma T D 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室美国加利福尼亚大学兽医学院

目的：对重组杆状病毒表达的经多种信号序列修饰的天然和变异百日咳毒素（ＰＴ）Ｓ１亚单位（ｒＳ１）的生物学及免疫学特性作出评价。方法：应用生物化学和免疫学技术与方法对这些ｒＳ１的酶活性、分泌性和免疫原性等做了系统鉴定。结... 详细信息

目的：对重组杆状病毒表达的经多种信号序列修饰的天然和变异百日咳毒素（ＰＴ）Ｓ１亚单位（ｒＳ１）的生物学及免疫学特性作出评价。方法：应用生物化学和免疫学技术与方法对这些ｒＳ１的酶活性、分泌性和免疫原性等做了系统鉴定。结果：ｒＳ１变异子无可检出的酶活性；所有ｒＳ１均不能由细胞分泌，可从细胞膜组分中大量检出，但不能从可溶性胞浆蛋白组分或细胞培养上清中检出；ｒＳ１分子内部含有３个疏水性区域；ｒＳ１虽不能与Ｂ寡聚体结合形成ＰＴ全毒素，但均能诱导抗ＰＴ免疫应答。结论：这些ｒＳ１极可能以膜蛋白形式存在，其非分泌性与分子内部的疏水性区域有关；所有ｒＳ１均保持其免疫原性。

关键词：百日咳毒素 S1亚单位生物学特性免疫应答

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接种La Sota疫苗雏鸡外周器官中CD4^+T细胞的来源及其作用

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中国兽医学报 1999年第3期19卷 212-214页

作者：刘胜旺陈洪岩李一经陈立君孔宪刚卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学兽医系哈尔滨血液病研究所

切除胸腺的２日龄雏鸡，接种抗鸡Ｔ细胞表面分子ＣＤ４的单克隆抗体，于１２日龄时以ＬａＳｏｔａ疫苗免疫。然后，在不同的日龄分别用ＦＡＣＳ、ＭＴＴ及间接ＥＬＩＳＡ测定脾脏和外周血中ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞亚类数量、脾Ｔ... 详细信息

切除胸腺的２日龄雏鸡，接种抗鸡Ｔ细胞表面分子ＣＤ４的单克隆抗体，于１２日龄时以ＬａＳｏｔａ疫苗免疫。然后，在不同的日龄分别用ＦＡＣＳ、ＭＴＴ及间接ＥＬＩＳＡ测定脾脏和外周血中ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞亚类数量、脾Ｔ淋巴细胞转化功能及病毒特异的血清ＩｇＧ抗体的动态变化。结果，胸腺切除鸡Ｔ淋巴细胞亚类数量、转化功能及病毒特异的血清ＩｇＧ抗体的动态变化均不同于对照组鸡。提示ＬａＳｏｔａ疫苗免疫鸡外周器官中增加的ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞可能来源于胸腺外途径，并对抗体的产生具有辅助功能。

关键词：新城疫疫苗 LaSota疫苗 CD4^+细胞雏鸡

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鸡传染性支气管炎病毒华南分离株核蛋白基因的序列测定及同源性分析

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中国兽医学报 1999年第4期19卷 324-326页

作者：刘思国江国托康丽娟刘忠贵卢景良刘明春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 沈阳农业大学畜牧兽医学院

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）核蛋白基因序列，设计并合成１对引物。应用这对引物，以ＲＴ ＰＣＲ特异性扩增出华南分离株（ＨＮ株）的核蛋白基因，基因产物大小为１５ｋｂ，与设计相符。对 ... 详细信息

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）核蛋白基因序列，设计并合成１对引物。应用这对引物，以ＲＴ ＰＣＲ特异性扩增出华南分离株（ＨＮ株）的核蛋白基因，基因产物大小为１５ｋｂ，与设计相符。对ＨＮ株部分核蛋白基因进行序列测定，并与标准毒株Ｈ５２、Ｍ４１、Ｂｅａｕ和Ｇｒａｙ的核蛋白基因进行同源性比较，结果表明，ＨＮ株与Ｈ５２、Ｍ４１、Ｂｅａｕ和Ｇｒａｙ株的核酸同源性分别为８５％、８４％８４％和８６％。由此可以看出，ＨＮ株与标准毒株在核蛋白基因上存在一定的差异。

关键词：鸡病毒 IBV 核蛋白基因核苷酸序列同源性

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伪狂犬病流行现状及我国应采取的防制措施

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中国兽医学报 1999年第1期19卷 1-2页

作者：童光志陈焕春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室华中农业大学畜牧兽医学院

１伪狂犬病的流行现状伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ，Ａｕｊｅｓｚｋｙ′ｓｄｉｓｅａ－ｓｅ）在自然条件下能感染猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠、野猪、貂、熊、狐等动物。除猪以外，其他动物感染伪狂犬病病毒后，具有发热、奇痒... 详细信息

１伪狂犬病的流行现状伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ，Ａｕｊｅｓｚｋｙ′ｓｄｉｓｅａ－ｓｅ）在自然条件下能感染猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠、野猪、貂、熊、狐等动物。除猪以外，其他动物感染伪狂犬病病毒后，具有发热、奇痒和急性脑脊髓炎等典型症状，均为致死...

关键词：伪狂犬病病毒病流行现状防制措施

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鸡白细胞介素-2 cDNA克隆

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南京农业大学学报 1999年第2期22卷 80-84页

作者：李祥瑞金红卢景良南京农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

用哺乳动物细胞表达克隆系统克隆了鸡ＩＬ－２ｃＤＮＡ。以ＣｏｎＡ（２０μｇ／ｍＬ）诱导ＳＰＦ鸡脾脏淋巴细胞，第２０小时收集细胞，提取ｍＲＮＡ，以ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍｆｏｒｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅ... 详细信息

用哺乳动物细胞表达克隆系统克隆了鸡ＩＬ－２ｃＤＮＡ。以ＣｏｎＡ（２０μｇ／ｍＬ）诱导ＳＰＦ鸡脾脏淋巴细胞，第２０小时收集细胞，提取ｍＲＮＡ，以ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍｆｏｒｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒合成ｃＤＮＡ，定向连结于穿梭质粒ｐＳＶ·ＳｐｏｒｔⅠ，构建ｃＤＮＡ文库。将文库分组提取重组质粒，转染ＣＯＳ－７细胞，表达ｃＤＮＡｓ。以淋巴细胞增殖试验检测表达产物ＩＬ－２活性。经过３轮筛选，获得１４个具有ＩＬ－２活性的克隆。选择其中４个进行酶切分析，结果显示这４个ｃＤＮＡ大小分别为１．５，１．０，０．８和０．８ｋｂ。

关键词：鸡白细胞介素-2 cDNA 克隆

来源：评论

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猪生殖-呼吸道综合征病毒CH-1_株N基因的原核表达

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中国预防兽医学报 1999年第1期21卷 35-37页

作者：仇华吉童光志郭宝清王柳张绍杰王玫蔡雪晖于力刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室

将ＰＲＲＳＶＣＨ１ａ株Ｎ基因用ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ双酶切从重组质粒ｐＵＣ１８ＯＲＦ７切下后，插入到原核表达载体ｐＢＶ２２０的ＰＲ、ＰＬ启动子下游，得到重组表达质粒ｐＢＶ２２０ＯＲＦ７。转化了ｐＢＶ２２０ＯＲＦ... 详细信息

将ＰＲＲＳＶＣＨ１ａ株Ｎ基因用ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ双酶切从重组质粒ｐＵＣ１８ＯＲＦ７切下后，插入到原核表达载体ｐＢＶ２２０的ＰＲ、ＰＬ启动子下游，得到重组表达质粒ｐＢＶ２２０ＯＲＦ７。转化了ｐＢＶ２２０ＯＲＦ７的大肠杆菌ＪＭ８３经诱导培养后，用ＳＤＳＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达产物。结果表明ＰＲＲＳＶＣＨ１ａ株的Ｎ基因在原核载体上得到高效表达，表达产物占菌体总蛋白的１５３％。表达蛋白可望成为有价值的ＰＲＲＳ诊断抗原。

关键词：猪 PRRS病毒 N蛋白原核表达

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