检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2018年第4期40卷 347-349页

作者：王淑杰段贵鑫刘永刚何海娟姜成刚王刚涂亚斌蔡雪辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/流行病学与病原监测研究创新团队黑龙江哈尔滨150069 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000 黑龙江省农业科学院畜牧研究所黑龙江哈尔滨150086

为了检测2015年12月黑龙江省萝北市某猪场2只发病猪的病原,本研究将发病猪迫杀后无菌采集的脑组织于血平板培养基上划线进行细菌分离培养,结果显示在血平板培养基上形成灰白色、半透明、边缘整齐的带有草绿色狭窄溶血环的光滑型圆形小菌... 详细信息

为了检测2015年12月黑龙江省萝北市某猪场2只发病猪的病原,本研究将发病猪迫杀后无菌采集的脑组织于血平板培养基上划线进行细菌分离培养,结果显示在血平板培养基上形成灰白色、半透明、边缘整齐的带有草绿色狭窄溶血环的光滑型圆形小菌落,初步鉴定为革兰氏阳性双球及短链球菌。经猪链球菌(***)种PCR鉴定及血清凝集试验分型鉴定该菌为***血清31型,其毒力基因型为gdh+、mrp-、ef-、sly-、89KPaI-,将其命名为15LB12株。经MLST分型分析,其等位基因图谱为1、35、2、7、1、52、28,经与ST型数据库比对,显示其为ST421。小鼠致病性试验显示,该***可导致小鼠发病及死亡,死亡率为12.5%,并且其可突破血脑屏障引起化脓性脑炎。本研究为了解***的遗传多样性、微进化和毒力提供了新的数据。

关键词：猪链球菌血清型分离鉴定 ST分型

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内质网应激抑制冠状病毒TGEV复制的分子机制研究

内质网应激抑制冠状病毒TGEV复制的分子机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第六次学术研讨会

作者：薛美符芳马艳龙张鑫李亮冯力刘平黄中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV)属于alpha冠状病毒家族成员,其感染导致新生仔猪的水泻和脱水,是引起规模化养猪场新生仔猪腹泻性死亡的重要原因,给我国养猪业造成了严重的经济损失。冠状病毒的复制与细胞... 详细信息

传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV)属于alpha冠状病毒家族成员,其感染导致新生仔猪的水泻和脱水,是引起规模化养猪场新生仔猪腹泻性死亡的重要原因,给我国养猪业造成了严重的经济损失。冠状病毒的复制与细胞内质网(ER)密切相关。内质网作为蛋白质折叠和翻译后修饰的重要场所,是病毒复制和成熟的必需细胞器。病毒感染后,细胞内合成大量的病毒蛋白,从而增加内质网的负担,进而增加了未折叠蛋白和错误折叠蛋白的堆积。因此,病毒感染后通常会诱发内质网应激。然而,病毒诱导的内质网应激如何影响病毒复制和调节宿主对病毒感染的天然免疫应答仍未完全清楚。本研究表明,TGEV感染在体外和体内能够诱导内质网应激和激化内质网应激未折叠的蛋白质反应(the unfolded protein response,UPR),内质网应激抑制TGEV复制。尽管TGEV感染激活了所有三种UPR途径(ATF6,IRE1和PERK)。通过siRNA基因静默、特异性抑制剂或过表达基因功能试验表明,病毒触发的内质网应激抑制TGEV复制主要通过激活PERK,激活的PERK导致磷酸化eIF2α并激活其下游信号通路。PERK-eIF2α信号通路制剂TGEV复制通过磷酸化的eIF2α介导的抑制总体蛋白质翻译。除了通过下调蛋白翻译直接抑制病毒产生之外,PERK-eIF2α途径激活NF-κB,然后促进I型IFN产生,导致TGEV抑制。总之,我们的研究结果表明,冠状病毒TGEV感染诱发的PERK-eIF2α通路负调控TGEV复制,并且通过调控宿主的天然免疫应答来影响病毒复制。该研究阐明了内质网应激抑制TGEV复制的分子机制,为研发抗冠状病毒药物靶点和制定抗病毒新策略提供了重要理论依据。

关键词：内质网应激未折叠蛋白反应蛋白激酶R样ER激酶传染性胃肠炎病毒干扰素

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弓形虫氨基肽酶的协同作用及功能性特征

弓形虫氨基肽酶的协同作用及功能性特征

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第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会

作者：郑君曹世诺张朝霞贾洪林中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

近年来,氨基肽酶作为一种有效的药物靶位已经在很多抗寄生虫药物的研究中得到了应用,其中,M1、M17以及M18家族的天冬氨酰氨基肽酶就作为理想的药物靶点应用到了抗疟原虫的药物研究中。弓形虫与疟原虫同属于顶复门原虫,在弓形虫的基因组... 详细信息

近年来,氨基肽酶作为一种有效的药物靶位已经在很多抗寄生虫药物的研究中得到了应用,其中,M1、M17以及M18家族的天冬氨酰氨基肽酶就作为理想的药物靶点应用到了抗疟原虫的药物研究中。弓形虫与疟原虫同属于顶复门原虫,在弓形虫的基因组中存在着10个氨基肽酶的同源编码基因,这些基因在

关键词：弓形虫氨基肽酶特异性底物功能性特征

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水貂阿留申病诊断技术的进展

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中国兽医杂志 2018年第11期54卷 58-60页

作者：李俚胡哲孙金辉关东嵩方孟颀王晓钧路义鑫东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 哈尔滨海关黑龙江哈尔滨150028 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 大庆海关黑龙江大庆163311

水貂阿留申病(AMD)是由水貂阿留申病毒(AMDV)引起的一种能够引起自身免疫紊乱的慢性进行性传染病。引起该病的病毒可感染各个年龄段的水貂,依据感染毒株类型的不同,病症呈多样性。对新生仔貂而言,AMDV引起的死亡率几乎可达到100%;而对... 详细信息

水貂阿留申病(AMD)是由水貂阿留申病毒(AMDV)引起的一种能够引起自身免疫紊乱的慢性进行性传染病。引起该病的病毒可感染各个年龄段的水貂,依据感染毒株类型的不同,病症呈多样性。对新生仔貂而言,AMDV引起的死亡率几乎可达到100%;而对于成年水貂,该病通常引起水貂的持续感染,并表现为终生病毒血症、高蛋白血症、动脉血管炎和由病毒抗体复合体诱导的肾小球肾炎及肝炎等。临床上还没有能够防治AMD的有效疫苗和药物,因此目前防控该病的手段主要为水貂新引入前的检疫、场址的彻底消毒,以及感染貂群中病畜的扑杀。大多数情况下,水貂感染AMD后没有典型的临床症状,确诊主要依赖于实验室的检测。本文对近年来国内外AMD的主要诊断方法及特点进行综述,以期为新水貂引入前的检疫、环境消毒效果的评价及感染貂场AMD的防控提供方法依据。

关键词：水貂阿留申病诊断技术持续感染阿留申病毒病毒血症临床症状消毒效果肾小球肾炎

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鸭坦布苏病毒E蛋白特异性抗原表位鉴定及Epitope-ELISA血清学诊断方法建立

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畜牧兽医学报 2017年第10期48卷 1958-1968页

作者：李晨曦白小飞邵周伍林张青山刘明张云中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

旨在建立鸭坦布苏病毒(DTMUV)的特异性血清学诊断方法。本研究以纯化的单克隆抗体1A5为固相筛选分子,利用噬菌体展示技术鉴定DTMUV囊膜(E)蛋白的特异性抗原表位,并利用DNAStar分析抗原表位序列在DTMUV中保守性和与其他黄病毒的E蛋白相... 详细信息

旨在建立鸭坦布苏病毒(DTMUV)的特异性血清学诊断方法。本研究以纯化的单克隆抗体1A5为固相筛选分子,利用噬菌体展示技术鉴定DTMUV囊膜(E)蛋白的特异性抗原表位,并利用DNAStar分析抗原表位序列在DTMUV中保守性和与其他黄病毒的E蛋白相应位点的氨基酸序列相似性。结果成功筛选到DTMUV E蛋白的一个线性抗原表位_(87)YAEYI_(91),该抗原表位在DTMUV中具有高度的保守性,无氨基酸位点差异,而与其他黄病毒E蛋白相应位点的氨基酸序列不具有相似性。Dot-Blotting结果表明表位_(87)YAEYI_(91)与DTMUV阳性血清具有良好的亲和性,而与JEV、DENV、WNV等黄病毒阳性血清间不出现交叉反应,可见抗原表位_(87)YAEYI_(91)为DTMUV所特有的抗原表位。利用DTMUV特异性抗原表位87YAEYI_(91)建立Epitope-ELISA血清学诊断方法并对126份鸭血清样品进行检测,以中和试验作为标准进行比较,结果显示Epitope-ELISA检测方法的相对特异性为100%,相对敏感度为96%,并且Epitope-ELISA与其他黄病毒血清间不出现交叉反应性,表明本研究建立的Epitope-ELISA检测方法是一种特异的、灵敏的ELISA血清学诊断方法。

关键词：鸭坦布苏病毒抗原表位交叉反应性 Epitope-ELISA

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抗猪SIgA SC片段单克隆抗体的制备及鉴定

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中国预防兽医学报 2018年第5期40卷 455-458页

作者：高冉刘建波陈建飞时洪艳张鑫石达曹丽艳董素凤冯力黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪消化道团队黑龙江哈尔滨150069 辽宁省重大动物疫病应急中心辽宁沈阳110161

为获得抗猪分泌型IgA(SIgA)的单克隆抗体(MAb),本研究以纯化的SIgA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出1株稳定分泌抗SIgA SC片段的杂交瘤细胞株,命名为2F9。MAb亚类鉴定结果显示其亚类为IgG1... 详细信息

为获得抗猪分泌型IgA(SIgA)的单克隆抗体(MAb),本研究以纯化的SIgA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出1株稳定分泌抗SIgA SC片段的杂交瘤细胞株,命名为2F9。MAb亚类鉴定结果显示其亚类为IgG1/κ链。杂交瘤细胞培养上清液和腹水的效价分别为1∶200和1∶16 000。Western blot鉴定显示该MAb能够识别天然SIgA蛋白;IFA显示该MAb可以识别真核细胞表达的SIgA SC蛋白。抗猪SIgA SC片段的MAb制备,为建立一系列猪消化道病原的特异性SIgA诊断方法及研究黏膜免疫提供了重要工具,具有广阔的应用前景。

关键词： SIgA 单克隆抗体 SC片段

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畜禽疫病防控用SPF猪的开发

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实验动物与比较医学 2018年第4期38卷 245-249页

作者：高彩霞辛畅陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150069

本文就SPF猪在畜禽疫病防控研究中的重要性和国内外研究现状进行了阐述,分析了目前存在的问题,介绍了培育标准化SPF猪种群常用的方法,并探讨了SPF猪的应用前景,旨在为畜禽疫病防控研究用实验动物的开发提供一定的理论指导。

关键词：畜禽疫病防控 SPF猪开发

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弓形虫ATG6基因敲除虫株的构建及其生长特性鉴定

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中国预防兽医学报 2017年第11期39卷 886-890,896页

作者：李昭然曹世诺王铭陈运通贾洪林中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

酵母ATG6蛋白是磷脂酰基醇-3激酶(PI3K)复合物Ⅰ的组成成分,在自噬起始阶段促进自噬小体的形成。为研究弓形虫ATG6同源蛋白(Tg ATG6)生物学功能,本研究首先构建进化树对Tg ATG6基因进行同源性分析,并通过构建稳定表达红色荧光的(ATG6-m ... 详细信息

酵母ATG6蛋白是磷脂酰基醇-3激酶(PI3K)复合物Ⅰ的组成成分,在自噬起始阶段促进自噬小体的形成。为研究弓形虫ATG6同源蛋白(Tg ATG6)生物学功能,本研究首先构建进化树对Tg ATG6基因进行同源性分析,并通过构建稳定表达红色荧光的(ATG6-m Cherry)虫株,以检测Tg ATG6的亚细胞定位情况。通过CRISPR/Cas9技术制备Tg ATG6基因缺失虫株,采用流式细胞术对该虫株的生长特性进行检测。实验结果显示,Tg ATG6基因在进化关系上与植物来源的ATG6同源关系较近。Tg ATG6在虫体内呈弥散分布,经16 h饥饿诱导后,该蛋白在弓形虫体内发生聚集。经序列分析显示,成功获得了两种Tg ATG6基因缺失虫株(ΔTg ATG6-1和ΔTg ATG6-2)。在ΔTg ATG6-2虫株中,Tg ATG6基因开放阅读框的593~612位点之间插入了226 bp外源序列,而在ΔTg ATG6-2中,不能够有效扩增靶序列,表明两种突变虫株的Tg ATG6基因均被有效插入失活。此外,该基因的缺失可能影响了虫株侵入宿主细胞的能力。Tg ATG6基因缺失株的成功制备为进一步研究Tg ATG6蛋白功能奠定了基础。

关键词：敲除 ATG6 自噬弓形虫

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马立克病病毒感染鸡红细胞6种免疫相关因子转录水平的鉴定

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动物医学进展 2018年第12期39卷 49-53页

作者：牛胜李欣张宁宁官保张鼎 Ali Raza Jahejo 马海利郝卫芳高文伟赵宇军高诗敏李桂兰李建慧闫芳高荣琨毕玉海韩凌霞田文霞山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 太原市动物疫病预防控制中心山西太原030024 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了探究在感染马立克病病毒(MDV)后羽髓中病毒增殖情况以及红细胞中免疫相关因子的免疫应答反应,将4日龄雏鸡腹腔注射MDV超强毒株MD5,在攻毒后不同时间进行羽毛和血样采集,通过实时荧光定量PCR检测羽髓病毒载量和红细胞中6种免疫相关... 详细信息

为了探究在感染马立克病病毒(MDV)后羽髓中病毒增殖情况以及红细胞中免疫相关因子的免疫应答反应,将4日龄雏鸡腹腔注射MDV超强毒株MD5,在攻毒后不同时间进行羽毛和血样采集,通过实时荧光定量PCR检测羽髓病毒载量和红细胞中6种免疫相关基因的mRNA表达水平。结果显示,在攻毒后第7天检测到MDV拷贝,并且14天检测到的拷贝数显著高于其他检测时间;与第14天对照组相比,攻毒组COX2的表达显著上调(P<0.05),而在第22天COX2的表达整体高于第14天(P<0.05);在第14和22天,PTGER4、HPGDS和GSTA3在攻毒组中的表达量显著低于对照组(P<0.05);与之相反,在第14天和第22天,PTGR1在攻毒组中的表达量显著高于对照组(P<0.05);第14天攻毒组的Ex-FABP表达水平显著低于对照组,而在第22天攻毒组显著高于对照组(P<0.05)。这表明感染MDV后红细胞中6种免疫基因发生显著的免疫应答,并且红细胞可能通过调节相关的免疫反应而在MDV感染过程中发挥一定的免疫调控作用。

关键词：红细胞马立克病病毒免疫转录表达

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2017年河南省病死猪常见病原分布调查

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中国动物检疫 2019年第1期36卷 15-18,84页

作者：赵胜杰王靖飞闫若潜靳冬曹伟伟胡明明曾邦权赵美雪班付国河南省动物疫病预防控制中心河南郑州450000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 山西省动物疫病预防控制中心山西太原030000 云南省动物疫病预防控制中心云南昆明650000

为了解河南省病死猪常见病原分布规律,采用横断面研究方法,对2017年河南省病死猪常见病原分布情况进行调查。以病死猪聚集地——无害化处理厂为采样单元,按病死猪体重进行分层抽样,采集不同阶段病死猪的扁桃体、淋巴结、肺脏、肝脏、脾... 详细信息

为了解河南省病死猪常见病原分布规律,采用横断面研究方法,对2017年河南省病死猪常见病原分布情况进行调查。以病死猪聚集地——无害化处理厂为采样单元,按病死猪体重进行分层抽样,采集不同阶段病死猪的扁桃体、淋巴结、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏等样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、副猪嗜血杆菌(HPS)和弓形虫(TP)的病原学检测,并对检测结果进行时间、空间和群间分布分析。结果显示:共检测样品526份,未检出FMDV、TGEV和PEDV,其他7种病原的检出率在0.76%～58.17%之间;春夏季节检出的病原种类较多,检出率也较高,秋冬季较少;不同区域病原种类分布情况差异较大,豫西检出病原种类最少,豫中检出病原种类最多,不同区域内各病原检出率差异较大;不同体重猪群的病原种类数量有差异,体重越小,检出病原种类越多。调查结果表明,河南省常见猪病病原复杂,不同区域、不同季节、不同生长阶段猪群的病原流行情况并不一致,需通过加强监测,制定相应的防控措施。

关键词：病死猪病原学检测流行特点病原分布调查

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