检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物科学 2018年第4期35卷 14-20页

作者：王兴童孟兴佟相慧陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150069

目的培育MHC单倍型无特定病原体单倍型鸭。方法以国家禽类实验动物种子中心培育并保存的无特定病原体(SPF)麻鸭为基础,根据位于主要组织相容性复合体(MHC)核心区域的鸭抗原处理相关转运体分子(TAP)双拷贝基因(Tap1和Tap2)的多态性,分别... 详细信息

目的培育MHC单倍型无特定病原体单倍型鸭。方法以国家禽类实验动物种子中心培育并保存的无特定病原体(SPF)麻鸭为基础,根据位于主要组织相容性复合体(MHC)核心区域的鸭抗原处理相关转运体分子(TAP)双拷贝基因(Tap1和Tap2)的多态性,分别利用Tap1基因组短串联重复序列(STR)、TAP2的肽结合区序列以及Tap2全基因组序列的基因型分型,连续选育主要组织相容性复合体(MHC)单倍型SPF鸭。结果 F0代和F1代鸭的STR结果完全一致;F2和F3代鸭的Tap1和Tap2基因组序列完全纯合。连续6个世代的Tap2基因组序列分析,B3群鸭有2个位点发生突变,B1、B2和B4遗传学稳定。结论成功建立了4个MHC单倍体型SPF鸭群B1、B2、B3和B4,为深入开展鸭的免疫遗传学研究提供了实验动物支撑条件。

关键词：鸭主要组织相容性复合体无特定病原体单倍体型抗原处理相关转运体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PFT-α对鸡传染性喉气管炎病毒侵染宿主细胞的影响

引用

安徽农业科学 2018年第5期46卷 87-90页

作者：孙邦耀邵昱昊高琦李海刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽呼吸道病创新团队黑龙江哈尔滨150069

[目的]研究抑癌基因p53小分子抑制剂PFT-α对ILTV侵染宿主细胞的影响。[方法]用PFT-α处理LMH(鸡肝癌细胞),通过结晶紫染色技术检测细胞感染ILTV 24 h后的细胞死亡情况,通过流式细胞术检测PFT-α对ILTV吸附、进入LMH细胞的影响,通过倒... 详细信息

[目的]研究抑癌基因p53小分子抑制剂PFT-α对ILTV侵染宿主细胞的影响。[方法]用PFT-α处理LMH(鸡肝癌细胞),通过结晶紫染色技术检测细胞感染ILTV 24 h后的细胞死亡情况,通过流式细胞术检测PFT-α对ILTV吸附、进入LMH细胞的影响,通过倒置荧光显微镜和高内涵细胞筛选系统检测PFT-α对ILTV在细胞间扩散的影响。[结果]结晶紫染色表明,PFT-α促进了ILTV感染后的细胞死亡,流式细胞术结果表明,PFT-α对ILTV吸附细胞没有影响,但是促进了ILTV进入细胞。同时,倒置荧光显微镜和高内涵细胞筛选系统检测结果表明,PFT-α对ILTV在细胞间扩散没有影响。[结论]研究初步检测了PFT-α对ILTV侵染LMH细胞过程的影响,为进一步研究ILTV与宿主互作过程提供了理论补充。

关键词：传染性喉气管炎病毒病毒吸附病毒进入病毒扩散

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白基因的新城疫病毒感染性克隆的构建及病毒拯救

引用

中国兽医学报 2018年第5期38卷 841-845页

作者：张赫南福龙鲁会军解长占张萍张金勇庄忻雨田明尧步志高金宁一解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130122 吉林大学动物医学学院吉林长春130062 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

应用反向遗传技术对新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）LaSota株感染性克隆PBRN—FL质粒进行操作，构建插入欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）ORF5基因的重组质粒LaSota-ORF5并进行病毒拯救及鉴定。依据GenBank所发表的欧洲型PRRSVLV株ORF5序列，设计引物扩增0RF5片段，通过PBRN—FL质粒上P和M基因间的PmeI酶切住点插入目的片段，构建重组质粒LaSota—ORF5。采用磷酸钙转染法将重组质粒和PCI—NP、PCI-P、PCI—L等3种辅助质粒共转染BSR—T7／5／细胞拯救病毒并对其分别进行RT-PCR、间接免疫荧光（IFA）和Western blot（WB）试验鉴定。结果显示：拯救病毒的RT-PCR产物测序结果正确，IFA出现绿色荧光，WB试验条带大小符合预期，证明GP5蛋白有效表达。结果表明：成功构建并拯救得到重组病毒rLaSota-GP5，为制备表达PRRSVGP5蛋白的重组NDV疫苗奠定基础。

关键词：新城疫病毒 LaSota GP5蛋白病毒拯救

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达禽流感病毒HA蛋白及传染性法氏囊病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建

引用

中国预防兽医学报 2017年第11期39卷 865-869页

作者：唐猛陈普成高立柳金雄潘俊慧王笑梅姜永萍陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为构建同时表达禽流感病毒(AIV)HA蛋白及传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(r HVT),本研究以本实验室构建的连续覆盖火鸡疱疹病毒(HVT)全基因组的5个重组粘粒(p Fos A、p Fos B、p Fos C、p Fos D和p Fos E)为基础,利用... 详细信息

为构建同时表达禽流感病毒(AIV)HA蛋白及传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(r HVT),本研究以本实验室构建的连续覆盖火鸡疱疹病毒(HVT)全基因组的5个重组粘粒(p Fos A、p Fos B、p Fos C、p Fos D和p Fos E)为基础,利用猪捷申病毒2A蛋白的编码序列,将HA基因和VP2基因串联,并克隆于p CAGGs载体中,构建重组质粒p CA-HA-2A-VP2。利用Gateway LR克隆技术,将重组质粒中的HA-2A-VP2的表达盒(Pec-HA-2A-VP2-POLYA)插入到p Fos C粘粒中HVT片段的复制非必需区HVT053与HVT054基因之间,构建重组粘粒p Fos C-5354-HA-VP2。将p Fos A、p Fos B、p Fos D、p Fos E和p Fos C-5354-HA-VP2 5个重组粘粒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),制备表达HA蛋白及VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(r HVT-5354-HA-VP2)。将重组病毒在CEF中连续传至20代后,通过PCR、间接免疫荧光和western blot鉴定分析,结果显示HA与VP2基因能够在重组病毒中稳定存在并正确表达;生长动力学结果表明,重组病毒在CEF中的增殖效率与野生型病毒HVT无显著差异。该重组病毒的制备为研制AIV-IBDV-马立克病毒三联苗奠定了基础。

关键词：重组粘粒重组火鸡疱疹病毒三联苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猫杯状病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定

引用

中国预防兽医学报 2017年第12期39卷 1017-1021页

作者：程晨曦刘家森胡晓亮刘永相蒋艳妹刘晓晓曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为制备抗猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白VP1的单克隆抗体(MAb)及鉴定其表位,本研究以原核表达的重组VP1-E蛋白(aa427~aa524)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合制备杂交瘤细胞;以纯化的FCV-2280病毒粒子作为检测抗原,采用... 详细信息

为制备抗猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白VP1的单克隆抗体(MAb)及鉴定其表位,本研究以原核表达的重组VP1-E蛋白(aa427~aa524)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合制备杂交瘤细胞;以纯化的FCV-2280病毒粒子作为检测抗原,采用间接ELISA检测方法筛选杂交瘤细胞株,分析杂交瘤细胞所分泌的抗体亚型、中和活性及所识别的抗原表位等。结果表明,获得两株稳定分泌抗FCV VP1-E MAbs的杂交瘤细胞E2F1和E2F6,抗体均为IgG1亚型,轻链为κ链。杂交瘤细胞分泌的抗体无中和活性。Western blot结果显示,两种抗体可以特异性识别FCV-2280,表明其针对的抗原表位为线性表位。两株MAb识别VP1-E序列均为^(467)YICGSLQRAWG^(477)。生物信息学分析显示该抗原表位在FCV VP1蛋白中相对保守。该MAb为建立特异性强、灵敏度高的FCV的检测方法奠定基础。

关键词：猫杯状病毒 VP1-E蛋白原核表达单克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

宿主microRNA在重要胞内菌感染中的作用研究进展

引用

中国预防兽医学报 2017年第11期39卷 952-956页

作者：宗树成许达宋甲宝胡森步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

胞内寄生菌能够在机体细胞中定植并长期生存，其生长在体内受到不利条件的影响时会启动一系列的适应性调节机制来抵抗这些胁迫因素以达到生存目的，胞内菌这些适应性调节机制往往会导致宿主机体发生疾病。

关键词： microRNA 宿主适应性调节机制感染机体细胞内寄生菌胁迫因素发生疾病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

非洲猪瘟病毒结构蛋白基因重组痘苗病毒的构建及鉴定

引用

中国预防兽医学报 2017年第10期39卷 789-793页

作者：张会雷刘任强张敏敏王喜军葛金英温志远步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种猪的传染病,发病率和死亡率几乎达100%,是尚未传入我国的重要的猪烈性病。为研制安全有效的ASF储备疫苗,本研究利用本实验室改造的痘苗病毒(VV),将ASFV的结构蛋白P72和P54或CD2v和P30的... 详细信息

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种猪的传染病,发病率和死亡率几乎达100%,是尚未传入我国的重要的猪烈性病。为研制安全有效的ASF储备疫苗,本研究利用本实验室改造的痘苗病毒(VV),将ASFV的结构蛋白P72和P54或CD2v和P30的基因分别插入到VV基因组中,构建了同时表达P72和P54的重组VV(rVV-P72-P54)以及同时表达CD2v和P30的重组VV(rVV-CD2v-P30)。Western blot和间接免疫荧光试验表明外源基因在重组病毒感染的细胞中均能够正确表达。这两株重组病毒在体外细胞培养中的增殖效率与亲本病毒无显著差异。该研究为进一步的动物免疫实验奠定了基础。

关键词：非洲猪瘟病毒重组痘苗病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细菌sRNA代谢调控的研究进展

引用

中国预防兽医学报 2017年第1期39卷 80-84页

作者：许达宗树成胡森步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

一些非编码RNA（Non—coding RNA，ncRNA）如siRNA和miRNA等的发现，拓展了人们对ncRNA的认识。SmallRNA（sRNA）作为ncRNA的一类，能够调控细菌多种代谢过程，使细菌能够适应环境的改变。

关键词：代谢调控细菌 miRNA siRNA 代谢过程适应环境非编码

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达绿色荧光蛋白的复制缺陷型西尼罗病毒的构建

引用

中国预防兽医学报 2017年第6期39卷 427-430页

作者：李伟马乐郭立平王晓磊步志高华荣虹中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为构建表达绿色荧光蛋白(GFP)的复制缺陷型西尼罗病毒(WNV),本研究参考NY99株WNV基因组序列,分段合成除结构蛋白基因外的其它基因组序列,以及插入缺失的结构蛋白基因位置的gfp报告基因序列,并按WNV基因组顺序克隆于pCI-neo载体中,构建含... 详细信息

为构建表达绿色荧光蛋白(GFP)的复制缺陷型西尼罗病毒(WNV),本研究参考NY99株WNV基因组序列,分段合成除结构蛋白基因外的其它基因组序列,以及插入缺失的结构蛋白基因位置的gfp报告基因序列,并按WNV基因组顺序克隆于pCI-neo载体中,构建含有GFP基因的WNV复制子重组质粒pWNVrep-GFP;同时构建表达WNVC蛋白的重组质粒pCAG-WNV-C。将pWNVrep-GFP和pCAG-WNV-C共转染稳定表达WNVprM-E蛋白的W-92细胞系进行WNV粒子包装及病毒粒子拯救。结果显示转染细胞能够表达GFP,将转染细胞培养液接种BHK-21细胞后,能感染细胞并且表达GFP,westernblot可以检测到分子质量为42ku的NS1蛋白条带。然而,感染BHK-21细胞的培养液不能再感染BHK-21细胞,表明拯救的病毒只具有一次感染能力,为复制缺陷型病毒。WNV阳性血清能中和拯救病毒对BHK-21细胞的感染,该复制缺陷型病毒为WNV中和抗体检测和疫苗评价提供了相关的技术平台。

关键词：西尼罗病毒复制子细胞系复制缺陷型病毒中和抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

狐狸源伪狂犬病毒HB1变异株的分离鉴定及遗传演化分析

引用

中国预防兽医学报 2017年第2期39卷 107-110页

作者：贾文亮刘大飞刘春国刘鑫曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

本实验室于2012年在河北地区某狐狸场的疑似感染伪狂犬病死亡狐狸中分离到一株伪狂犬病毒(PRV),命名为HB1株,并对其进行了PCR鉴定和特异性血清的间接免疫荧光鉴定。扩增及测序得到的PRV的gC和gE基因序列。与欧美参考株相比,该分离株gE... 详细信息

本实验室于2012年在河北地区某狐狸场的疑似感染伪狂犬病死亡狐狸中分离到一株伪狂犬病毒(PRV),命名为HB1株,并对其进行了PCR鉴定和特异性血清的间接免疫荧光鉴定。扩增及测序得到的PRV的gC和gE基因序列。与欧美参考株相比,该分离株gE基因编码的氨基酸序列共存在19个替换和2个插入;其gC基因编码的氨基酸序列共存在27个替换,及在第63~69位存在一个GAAASTPA的连续8个氨基酸插入,这与国内近5年来猪群流行的变异株一致。本研究表明PRV变异株也在狐狸群内流行。

关键词：狐狸伪狂犬病毒遗传演化分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：