检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2013年第11期40卷 50-53页

作者：刘朝霞刘永刚毕可东周顺崔尚金青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本研究从临床发病猪采集病料,以PK15传代细胞进行病毒分离,通过PCR、血液凝集试验(HA)和电镜鉴定为1株猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),命名为BQ-C。对分离的毒株进行测序,结果显示该毒株与GenBank登录的PPV BQ株同源性为100%。为... 详细信息

本研究从临床发病猪采集病料,以PK15传代细胞进行病毒分离,通过PCR、血液凝集试验(HA)和电镜鉴定为1株猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),命名为BQ-C。对分离的毒株进行测序,结果显示该毒株与GenBank登录的PPV BQ株同源性为100%。为获得该毒株结构蛋白VP2基因的表达产物,将VP2基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+),得到表达重组质粒。经双酶切和测序鉴定,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE结果表明,获得的重组蛋白分子质量约为71.5ku,与预期大小相符。Western blotting结果显示获得的重组蛋白能与PPV阳性血清特异性结合,表明重组蛋白具有良好的反应原性。结果表明,本研究成功分离了1株PPV BQ-C株,且表达的VP2重组蛋白可用于PPV血清学诊断和疫苗的研发。

关键词：猪细小病毒重组VP2蛋白原核表达反应原性

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猪圆环病毒2型引起相关肠炎疾病的研究进展

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动物医学进展 2013年第10期34卷 92-95页

作者：袁婧魏萍刘长明东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)已成为世界范围内影响养猪业发展的重要疾病。由猪圆环病毒2型(PCV-2)引发的肠炎是PCVAD的症状之一,临床表现为生长仔猪腹泻、生长发育迟缓或体重减轻;在淋巴组织和肠组织中可检测到大量的PCV-2病原,并出现特... 详细信息

猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)已成为世界范围内影响养猪业发展的重要疾病。由猪圆环病毒2型(PCV-2)引发的肠炎是PCVAD的症状之一,临床表现为生长仔猪腹泻、生长发育迟缓或体重减轻;在淋巴组织和肠组织中可检测到大量的PCV-2病原,并出现特征性组织学病变。试验证实,PCV-2单独感染或与其他病原混合感染可引发肠炎,经口服途径攻毒感染是引发PCV-2相关肠炎疾病的一种重要感染途径。因此,PCV-2是生长仔猪肠道疾病的一种致病因子,应予以足够重视。论文对PCV-2相关肠炎在临床表现、组织病理学特征、多病原混合感染对其影响、临床诊断以及防控措施等方面的研究进展进行综述,以期对PCV-2相关肠炎疾病的深入研究提供参考。

关键词：猪圆环病毒2型肠炎诊断

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野鸭源禽网状内皮组织增生症病毒的分离与鉴定

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畜牧兽医学报 2013年第8期44卷 1277-1282页

作者：姜莉莉祁小乐高玉龙邓小芸柴洪亮张礼洲贠炳岭秦立廷王永强高宏雷王笑梅华育平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001 东北林业大学野生动物资源学院哈尔滨150040 辽宁医学院畜牧兽医学院锦州121001

利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒(REV)长末端重复序列(LTR)的特异性引物作为检测引物,对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测。阳性样品经DF1培养增殖,进行病毒的分离,经PCR和间接免疫荧光(IFA)方法鉴定,确定分离到2株REV... 详细信息

利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒(REV)长末端重复序列(LTR)的特异性引物作为检测引物,对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测。阳性样品经DF1培养增殖,进行病毒的分离,经PCR和间接免疫荧光(IFA)方法鉴定,确定分离到2株REV,分别来自于针尾鸭和绿头鸭,将分离病毒分别命名为DBYR1101和DBYR1102。克隆2个病毒株的主要保护性抗原基因gp90,并进行序列分析。结果显示,2个分离株gp90基因氨基酸相似性为99.5%;DBYR1101 gp90基因与REV 3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95.7%、94.2%和98.2%;DBYR1102 gp90基因与REV 3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95.2%、93.7%和97.7%;与中国早期南方分离株HA9901的氨基酸序列相似性分别为94.7%和94.2%;与中国北方分离株氨基酸序列相似性为99.2%～100%。核苷酸遗传进化分析表明,2个野鸟源REV分离株与现有的东北分离株亲缘关系较近,趋于形成1个北方分离群;与SNV株亲缘关系最远;与170A株亲缘关系较远;与美国和中国台湾地区的某些分离株相似性较高。该研究首次自野鸭体内分离到REV,丰富了REV流行病学资料,同时提醒我们重视野生鸟类迁徙在疾病传播中所扮演的角色,为深入研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定基础。

关键词：野鸟禽网状内皮组织增生病病毒分离鉴定

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鸭坦布苏病毒鸭胚成纤维细胞适应病毒编码基因序列测定及分析

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中国预防兽医学报 2013年第10期35卷 791-794页

作者：李云霞刘晓丽张玥韩宗玺邵昱昊刘胜旺孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

为研究鸭坦布苏病毒(DTMUV)Du/CH/LSD/110128在鸭胚成纤维细胞(DEF)的适应性及变异情况,本研究将Du/CH/LSD/110128接种DEF,测定各代病毒的TCID50,表明DTMUV分离株已适应DEF,并在72 h产生明显的细胞病变(CPE),自F8代起病毒适应DEF,其F10... 详细信息

为研究鸭坦布苏病毒(DTMUV)Du/CH/LSD/110128在鸭胚成纤维细胞(DEF)的适应性及变异情况,本研究将Du/CH/LSD/110128接种DEF,测定各代病毒的TCID50,表明DTMUV分离株已适应DEF,并在72 h产生明显的细胞病变(CPE),自F8代起病毒适应DEF,其F10代病毒滴度为104.4TCID50/0.1 mL左右。对细胞适应毒F10代的DTMUV进行编码区基因测序并分析,结果表明Du/CH/LSD/110128细胞适应毒与DTMUV参考病毒株同源性在98%以上;其推导氨基酸序列与亲本病毒氨基酸序列差异不显著,仅存在10个氨基酸差异位点,主要在NS1和NS3蛋白,与鸡源、鸭源及鸽源病毒分别具有21个、14个、16个差异位点,这些差异位点主要存在于E蛋白、NS1蛋白和NS5蛋白。

关键词：鸭坦布苏病毒细胞适应序列分析氨基酸差异

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猪B7-H4的克隆鉴定与单克隆抗体制备

猪B7-H4的克隆鉴定与单克隆抗体制备

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第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议

作者：刘培欣李涛彭金美田志军刘恒贵中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

B7家族分子是T细胞免疫应答的重要调控分子之一,在抗病毒和抗肿瘤免疫应答中发挥重要的免疫调节作用.B7-H4分子是新发现的B7家族成员之一,在人和小鼠中研究表明,它对T细胞免疫应答具有负调控功能.目的:克隆鉴定猪B7-H4基因,研究该分子... 详细信息

B7家族分子是T细胞免疫应答的重要调控分子之一,在抗病毒和抗肿瘤免疫应答中发挥重要的免疫调节作用.B7-H4分子是新发现的B7家族成员之一,在人和小鼠中研究表明,它对T细胞免疫应答具有负调控功能.目的:克隆鉴定猪B7-H4基因,研究该分子在猪体内的分布情况,并制备该分子的单克隆抗体.方法:用人B7-H4基因序列在GeneBank上进行Blast搜索猪B7-H4的EST序列,采用PCR方法从猪PBMC中扩增B7-H4分子;通过荧光定量PCR方法检测该分子在猪不同组织器官中的分布情况;利用GST融合方法将B7-H4的胞外区进行原核表达和纯化后免疫小鼠,利用经典杂交瘤技术将免疫小鼠脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,然后用稳定表达猪B7-H4的HEK293细胞系通过免疫荧光试验筛选阳性杂交瘤细胞.

关键词：猪 B7-H4分子原核表达单克隆抗体

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鉴别猪伪狂犬病毒强弱毒的高效纳米PCR检测试剂盒及初步应用

鉴别猪伪狂犬病毒强弱毒的高效纳米PCR检测试剂盒及初步应用

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2013年中国畜牧兽医学会养猪学分会学术研讨会

作者：马兴杰仇铮崔宇超崔尚金中国农科院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

目的:建立了鉴别猪伪狂犬病毒(PRV)强弱毒高效纳米PCR检测方法,并对相关条件进行优化,组装了试剂盒.方法:根据PRV保守序列设计引物,建立纳米PCR检测PRV强弱毒方法,进行敏感性、特异性试验,试剂盒的组装及评估试验.结果:特异性试验表明... 详细信息

目的:建立了鉴别猪伪狂犬病毒(PRV)强弱毒高效纳米PCR检测方法,并对相关条件进行优化,组装了试剂盒.方法:根据PRV保守序列设计引物,建立纳米PCR检测PRV强弱毒方法,进行敏感性、特异性试验,试剂盒的组装及评估试验.结果:特异性试验表明本试剂盒对于PRV能够扩增出431(gB)、316(gE)和202bp(gG)的目的片段,对于PRV-Bartha-K61能够扩增出431和202bp的目的片段,其他对于猪捷申病毒、猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、非洲猪瘟病毒等均未扩增出条带,敏感性试验表明纳米PCR方法比常规PCR方法敏感100-1000倍,最低核酸拷贝数检出量可以达到101copy/μL数量级.利用两种不同方法对攻毒小鼠检出时间的比较试验结果显示,纳米PCR可以在第3天检测到病毒核酸,而普通PCR在第4天才能检出.试剂盒的批内、批间检测结果无明显差异,稳定性良好.-20℃至少可保存12个月.在对中国黑龙江、吉林等7个省份的临床送检的110份样品进行检测,检测结果显示PRV强毒阳性率为53％,阴性率为47％,未发现有弱毒感染.结论:鉴别PRV强弱毒纳米PCR试剂盒的研制,对PRV感染的早期检测、野毒株和疫苗株的鉴别、疾病控制等都有重要意义,而且也可以用于其他动物PRV感染的检测和早期诊断.

关键词：猪伪狂犬病毒纳米PCR技术检测试剂盒效果评估

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关于嵴病毒的综述

关于嵴病毒的综述

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2013年中国畜牧兽医学会养猪学分会学术研讨会

作者：马兴杰王晓玲崔尚金中国农科院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

本文概括了当前关于嵴病毒的知识,包括分类学,生物学和病毒特征以及包括了感染的所有方面,包括传染病学,临诊图片,宿主差异,实验室诊断,以及提出了为解决问题和展望.即基于小核糖核酸病毒和已知嵴病毒种的多样性谱系的位置,在自然界、... 详细信息

本文概括了当前关于嵴病毒的知识,包括分类学,生物学和病毒特征以及包括了感染的所有方面,包括传染病学,临诊图片,宿主差异,实验室诊断,以及提出了为解决问题和展望.即基于小核糖核酸病毒和已知嵴病毒种的多样性谱系的位置,在自然界、其他农场和野生动物宿主身上很有可能有更多的一目前还不知道一嵴病毒种.这些调查研究能够帮助理解病毒种和宿主种的谱系.另外,在人体和蝙蝠体内新发现的类似嵴病毒以及它们与嵴病毒的关系的分类学地位应当被决定.反遗传学研究的补充也能帮助确认嵴病毒之间的联系.

关键词：嵴病毒病毒特征实验室诊断防治效果

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腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的效力评价

腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：孙元秦华洋袁晋王春花赵碧波李素罗玉子仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可... 详细信息

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可诱导高水平的猪瘟特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,免疫攻毒的保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗C株相当。系统评价显示,该疫苗初步具备了理想猪瘟疫苗的特征。本研究对该腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒rAdV-SFV-E2以三种免疫途径(肌肉、皮下、滴鼻)在猪体上的免疫效果进行了比较。选取21头5周龄左右猪瘟抗体及抗原均为阴性的健康仔猪,将所有仔猪随机分成A、B、C和D四组,其中A、B、C三组分别经肌肉、皮下和滴鼻方式注射5×106TCID50rAdV-SFV-E2,D组分别经三种途径免疫5×106TCID50rAdV-SFV-empty。免疫后3周以同种疫苗、同样途径和剂量进行加强免疫。加强免疫后4周,所有猪用猪瘟病毒石门株进行攻毒。研究结果显示,皮下免疫组诱导的体液免疫水平较其他途径免疫组较高。在攻毒前,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为46.28%、51.66%和31.94%。皮下免疫组与滴鼻免疫组在攻毒前的抗体水平比较上差异显著(p<0.05)。攻毒后3d,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为54.28%、62.39%和39.35%。皮下免疫组与肌肉免疫组、滴鼻免疫组间差异显著(p<0.05)。在细胞免疫方面,皮下免疫组诱导了高水平的特异性的淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-4的分泌,与rAdV-SFV-empty免疫组及肌肉和滴鼻免疫组之间差异显著(p<0.05)。本研究进一步证实了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗作为一种理想猪瘟疫苗的可能性,将会对猪瘟的防控起到重要的作用。

关键词：猪瘟嵌合载体疫苗免疫途径效力

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猪圆环病毒基因组复制机制的研究进展

猪圆环病毒基因组复制机制的研究进展

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张辉唐青海刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

1引言圆环病毒科(Circoviridae)是由多种非囊膜动物病毒成员组成,其基因组为很小的单链、闭合环状DNA,通过双链中间体复制[1]。猪圆环病毒(PCVs)基因组含2个主要开放阅读框(ORFs),其中ORF1即rep基因编码35.7ku的Rep蛋白,它与病毒复制相... 详细信息

1引言圆环病毒科(Circoviridae)是由多种非囊膜动物病毒成员组成,其基因组为很小的单链、闭合环状DNA,通过双链中间体复制[1]。猪圆环病毒(PCVs)基因组含2个主要开放阅读框(ORFs),其中ORF1即rep基因编码35.7ku的Rep蛋白,它与病毒复制相关[2];ORF2即cap基因编码27.8ku的Cap蛋白,该蛋白是病毒唯一的衣壳蛋白,具有良好的免疫原,能够诱导机体产生中和抗体,属于保护性抗原[3]。此外,ORF3编码与宿主细胞凋亡有关的蛋白,其与病毒致病性有关[4-5]。在圆环病毒科

关键词： PCV 复制起始基因组回文序列子代病毒滚环复制反向重复序列猪圆环病毒宿主细胞蛋白圆环病毒科

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猪鼻支原体的分离鉴定及其对巴马猪的致病性试验

猪鼻支原体的分离鉴定及其对巴马猪的致病性试验

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：危艳武张志慧黄立平刘建波吴洪丽刘丹李胜斌王一平张辉夏伟刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

1引言猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis,Mhr)是引起猪多发性浆膜炎、肺炎、心包炎、胸膜炎、关节炎、中耳炎等疾病的主要病原,该病在猪群中发病率高,死亡率低。临床上Mhr常与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)等混合... 详细信息

1引言猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis,Mhr)是引起猪多发性浆膜炎、肺炎、心包炎、胸膜炎、关节炎、中耳炎等疾病的主要病原,该病在猪群中发病率高,死亡率低。临床上Mhr常与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)等混合感染,造成严重的猪呼吸道综合征,致使断奶仔猪的死亡率显著升高,给我国养猪业造成巨大的经济损失。2006年台湾学者Lin等[1]报道Mhr

关键词：猪鼻支原体 SEP 肠系膜淋巴结间质性肺炎相对增重率淋巴细胞增生主要病原分离鉴定巴马猪

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