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- 62 篇 生物学
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主题

77 篇 猪圆环病毒2型
68 篇 单克隆抗体
41 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 猪瘟病毒
37 篇 原核表达
34 篇 序列分析
30 篇 猪流行性腹泻病毒
30 篇 抗原表位
27 篇 分离鉴定
26 篇 抗菌活性
25 篇 重组蛋白
24 篇 新城疫病毒
23 篇 鉴定
21 篇 传染性法氏囊病病...
21 篇 猪细小病毒
18 篇 遗传变异
18 篇 猪圆环病毒
16 篇 免疫原性
15 篇 分离
14 篇 抗体检测

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
156 篇 东北农业大学
115 篇 中国农业科学院哈...
112 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
38 篇 中国农业科学院哈...
30 篇 黑龙江八一农垦大...
29 篇 中国农业科学院哈...
24 篇 新疆农业大学
24 篇 中国农业科学院上...
19 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 东北林业大学
17 篇 中国农业科学院哈...
15 篇 内蒙古农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 中国农业科学院
10 篇 哈尔滨师范大学
9 篇 中国农业科学院哈...
8 篇 华南农业大学

作者

167 篇 刘长明
142 篇 危艳武
115 篇 王笑梅
112 篇 高玉龙
109 篇 黄立平
98 篇 高宏雷
92 篇 刘胜旺
85 篇 祁小乐
79 篇 童光志
77 篇 冯力
74 篇 吴洪丽
71 篇 陈建飞
70 篇 崔尚金
69 篇 郭龙军
65 篇 时洪艳
61 篇 韩宗玺
59 篇 仇华吉
58 篇 秦立廷
58 篇 王云峰
52 篇 刘建波

语言

839 篇 中文

检索条件"机构=哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室"

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高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：范培虎危艳武郭龙军吴洪丽黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用,澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头,随机分6组,PCV2/HP-PRRSV顺序共感染组、HP-PRRSV/PCV2顺... 详细信息

为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用,澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头,随机分6组,PCV2/HP-PRRSV顺序共感染组、HP-PRRSV/PCV2顺序共感染组、HP-PRRSV+PCV2同时共感染组、HP-PRRSV感染组、PCV2感染组、未接种对照组。感染后每天测量体温、观察临床症状,每周称量体重、采血。用流式细胞仪检测血液中的CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、γδT、NK细胞及粒细胞和单核细胞变化;免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测这两种病毒抗体变化;用ELISA法检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-2、GM-CSF细胞因子变化;用荧光定量PCR法检测血清和组织中病毒载量。对各组试验猪进行组织病理学观察。试验结果表明,HP-PRRSV/PCV2顺序共感染组临床症状最严重,死亡率达60%;组织和血清中病毒载量显著高于其它组,抗体滴度明显低于其它组;淋巴细胞亚群及细胞因子(尤以TNF-α)变化也最为明显。临床猪群中HP-PRRSV和PCV2普遍存在共感染,猪群感染HP-PRRSV后再感染PCV2,可明显提高猪群发病率和死亡率。本研究对临床HP-PRRSV和PCV2的综合防制提供科学依据。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型共感染协同致病性

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表达O型口蹄疫VP1中和表位的重组猪圆环病毒2型毒株的构建及其生物学特性鉴定

表达O型口蹄疫VP1中和表位的重组猪圆环病毒2型毒株的构建及其生...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：张飞雁唐青海黄立平危艳武吴洪丽郭龙军付玉洁刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

为构建以猪圆环病毒2型(PCV2)为载体表达O型口蹄疫病毒(FMDV)中和表位的重组病毒,本研究将FMDV-VP1蛋白中和抗原表位区(第141-160位氨基酸)插入到PCV2-ORF2编码的Cap蛋白C-末端,利用感染性克隆技术拯救出一株表达FMDV-VPl的中和抗原表位... 详细信息

为构建以猪圆环病毒2型(PCV2)为载体表达O型口蹄疫病毒(FMDV)中和表位的重组病毒,本研究将FMDV-VP1蛋白中和抗原表位区(第141-160位氨基酸)插入到PCV2-ORF2编码的Cap蛋白C-末端,利用感染性克隆技术拯救出一株表达FMDV-VPl的中和抗原表位PCV2重组毒株,命名为recPCV2-CL-VP1。采用免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、捕获ELISA和免疫电镜鉴定该重组病毒。结果表明,在病毒感染细胞中检出PCV2特异性抗原及VP1表位抗原;重组病毒的形态学特征与亲本病毒相似,可采用PCR和ELISA法相鉴别;拯救毒株的繁殖能力较亲本毒差,经细胞连续传10代,体外培养增殖性能稳定。本研究成功地构建了一株表达FMDV-VP1中和抗原表位的PCV2重组病毒,为进一步研制基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型口蹄疫病毒 VP1蛋白中和表位重组病毒

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猪细小病毒体外培养适应毒株(HJ)的培育及动物感染试验

猪细小病毒体外培养适应毒株(HJ)的培育及动物感染试验

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：李胜斌危艳武唐青海吴洪丽刘建波郭龙军王一平刘丹刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

从初产母猪流产胎儿的肠系膜淋巴结中分离到一株猪细小病毒(PPV),采用无污染的猪睾丸传代细胞系(ST)对该毒株传代,培育成一株细胞适应毒株,命名为PPV-HJ毒株。该毒株经ST细胞连续传50代,于第25代起毒价显著提升,第40代毒价维持稳定(107.... 详细信息

从初产母猪流产胎儿的肠系膜淋巴结中分离到一株猪细小病毒(PPV),采用无污染的猪睾丸传代细胞系(ST)对该毒株传代,培育成一株细胞适应毒株,命名为PPV-HJ毒株。该毒株经ST细胞连续传50代,于第25代起毒价显著提升,第40代毒价维持稳定(107.2 TCID50/mL)。采用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验(IPMA)检测表明,该病毒感染细胞后病毒抗原主要分布在细胞核中,病毒感染的阳性细胞染成棕红色。免疫电镜观察到PPV粒子与抗体结合形成的免疫复合物,呈实心小颗粒样粒子,直径约21 nm。经病毒基因克隆测序证实,该毒株的NS1基因序列与GenBank中PPV-ZJ毒株同源性最高,达98.41%。用该毒株第50代培养物(1×107.2 TCID50/mL)接种35日龄仔猪,临床未表现明显症状,迫杀后未观察到明显病理学变化,PCR法在猪的肺脏、扁桃体、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结、小肠中检测到病毒核酸,表明该毒株对靶动物具有一定的感染性,但毒力随传代而明显减弱趋势。本研究成功地培育出一株体外细胞培养适应毒株,其繁殖性能稳定,为今后开展PPV与猪圆环病毒2型(PCV2)混合感染的协同致病性研究,以及联合疫苗的创制奠定了基础。

关键词：猪细小病毒病毒分离鉴定毒株培育

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猪输血传播病毒流行病学与遗传变异的研究进展

猪输血传播病毒流行病学与遗传变异的研究进展

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：刘建波刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

摘要猪输血传播病毒(PTTV)是最近发现的一种新病毒,属于指环病毒科,ι指环病毒属成员。该病毒在世界范围内广泛存在,在患有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群中PTTV的流行率明显高于健康猪群,怀疑该病毒与猪圆环病毒2型(PCV2)起协... 详细信息

摘要猪输血传播病毒(PTTV)是最近发现的一种新病毒,属于指环病毒科,ι指环病毒属成员。该病毒在世界范围内广泛存在,在患有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群中PTTV的流行率明显高于健康猪群,怀疑该病毒与猪圆环病毒2型(PCV2)起协同致病作用。由于目前该病毒体外分离尚未获得成功,对其致病性和血清学诊断方法的研究延后。本文就PTTV的发现、病原学及培养特性、流行状况、传播方式,以及诊断方法和遗传变异情况等研究进展进行简要综述,以期为今后对PTTV的研究提供依据。

关键词：猪输血传播病毒流行病学遗传变异

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腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2的系统评价

腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2的系统评价

引用

2012第四届中国兽药大会

作者：孙元田大勇孟其麟赵碧波王春花李素仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，哈尔滨 150001

猪瘟是一种非常重要的猪传染病，对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实，构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV—SFV—E2在猪体... 详细信息

猪瘟是一种非常重要的猪传染病，对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实，构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV—SFV—E2在猪体上可诱导高水平的猪瘟特异性体液免疫应答和细胞免疫应答，免疫攻毒的保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗C株相当。为了进一步评价该嵌合载体病毒的免疫效果及作为理想猪瘟疫苗的可能性，我们又从对靶动物及非靶动物安全性、不同免疫次数、不同免疫剂量、抗腺病毒载体抗体干扰、猪瘟母源抗体干扰及与其它疫苗联合免疫方面，对该腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒rAdV—SFV—E2进行了综合性评价。研究结果显示，该嵌合载体病毒对靶动物猪及非靶动物家兔和小鼠高度安全，免疫后没有任何副反应和组织病理学变化。rAdV-SFV-E2以6.25×105TCID50免疫后能够完全抵抗猪瘟病毒强毒的攻击;当存在猪瘟母源抗体，且抗体阻断率在60％以上时，嵌合载体猪瘟疫苗rAdV—SFV—E2正常免疫后，抗体水平逐渐上升，并于二免后4 w达到峰值，随后趋于稳定，攻毒后所有免疫猪均获得了完全保护，而猪瘟母源抗体阻断率在60％左右的非免疫猪，3～4 w抗体水平降到了阴性临界值以下(抗体阻断率30％以下)，攻毒后所有猪均未得到保护，并于攻毒后10 d左右全部死亡：rAdV—SFV—E2一次免疫后，于攻毒前一直没有检测到猪瘟特异性抗体，但是攻毒后所有猪均没有出现猪瘟临床症状，攻毒后6 d抗体迅速上升到80%左右，对猪瘟病毒的攻击提供了完全的保护;rAdV—SFV—E2与伪狂犬病疫苗同时免疫后相互不影响各自的免疫应答，所有免疫猪均产生了高水平的猪瘟抗体和伪狂犬病抗体，并对猪瘟病毒的攻击提供了完全的保护;rAdV—SFV—E2免疫后不影响再次免疫和其它腺病毒的免疫;BVDV抗体不影响该嵌合载体病毒的增殖。本研究进一步证实了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗作为一种理想猪瘟疫苗的可能性，将会对猪瘟的防控起到重要的作用。

关键词：猪瘟嵌合载体病毒疫苗免疫免疫功能系统评价

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猪圆环病毒(PCV)2a/2b亚型毒株病毒灭活疫苗及其重组Cap蛋白亚单位疫苗的交互免疫试验

猪圆环病毒(PCV)2a/2b亚型毒株病毒灭活疫苗及其重组Cap蛋白亚单...

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：付玉洁郭龙军黄立平危艳武唐青海吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为评价猪圆环病毒(PcV)2a／2b两种基因型毒株及其重组cap蛋白(rCap)之间的交互免疫效果，本研究采用PCV2a-LG和PCv2b-YJ株制备了2种病毒灭活疫苗，及其重组杆状病毒表达的2种C印蛋白(PCv2a-rap和PCv2b-rap)亚单位疫苗。选用8周龄BALB／c... 详细信息

为评价猪圆环病毒(PcV)2a／2b两种基因型毒株及其重组cap蛋白(rCap)之间的交互免疫效果，本研究采用PCV2a-LG和PCv2b-YJ株制备了2种病毒灭活疫苗，及其重组杆状病毒表达的2种C印蛋白(PCv2a-rap和PCv2b-rap)亚单位疫苗。选用8周龄BALB／c鼠165只，随机分成11组，每组15只，用上述4种疫苗各免疫2组，以Pcv2a或Pcv2b毒株攻毒。攻毒后，所有鼠均未见肉眼可见的临床症状和病理变化。采用IPMA法检测抗体，4种疫苗于免疫第3周抗体转阳，第5周抗体效价达到1：200～1：800倍，其中Pcv2a-rCap免疫组抗体效价最高。2种灭活苗和Pcv2a-rCap免疫组攻击同型或异型毒株均可获得完全保护。以Pcv2a和Pcv2b各为指示毒对病毒抗血清和r(=印蛋白抗血清进行交叉中和试验，同型毒株与同型血清的中和抗体效价均高于异型毒株。病理观察显示，免疫鼠均未见明显病理变化，攻毒对照鼠肺脏出现一定程度的病理损伤。本研究表明，病毒灭活疫苗及其rap亚单位疫苗对PcV2a和PcV2b可提供交叉保护。

关键词：猪圆环病毒病毒灭活疫苗重组Cap蛋白交互免疫

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抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa)，引物两端设计了salI和Not ... 详细信息

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa)，引物两端设计了salI和Not I酶切位点，将PcR产物克隆到pGEx-6P-1载体，构建的重组质粒命名为pGEx-TTV1-ORF1-c1。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株后进行诱导表达，获得了含GST标签的PTTv1-rCap重组融合蛋白，经SDS-AGE电泳分析和western blOt鉴定，目的蛋白获得了高效表达，分子量约为64．0kDa，以包涵体形式存在。用纯化的重组蛋白免疫Balb／c小鼠，采用淋巴细胞杂交瘤技术获得了8株稳定分泌抗PTTv1rCap蛋白的杂交瘤细胞株，依次命名为1H4、1E9、1E11、4G12、5c5、788、8c2、8G2，MAb亚类鉴定均为IgG1，轻链为K型;MAb培养上清效价为400～3200倍，腹水为4．0×105～6．4×1 06倍;有7株单抗与PTTVl=Cap蛋白产生特异性反应，另1株MAb(1E11)呈阴性，可能针对构象表位。为验证8株单抗与真核表达的cap蛋白的免疫反应性，将全长与截短的PTTV1-0RF-基因片段克隆到pcDNA3-1/V5-His TOPO表达载体，转染293T细胞进行蛋白表达，采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测表明，这8株MAb均能够与表达的c印蛋白产生特异性反应。本研究表达的PTTV1-Cap蛋白及制备的MAb，为该病毒诊断方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础。

关键词：猪输血传播病毒重组cap蛋白单克隆抗体抗性鉴定

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稳定表达猪瘟病毒Npro蛋白PK-1 5细胞系的建立

稳定表达猪瘟病毒Npro蛋白PK-1 5细胞系的建立

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：凌理军李素李永锋杨硕廖亚金孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为构建稳定表达猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白的PK-15细胞系，本研究采用PCR方法，以pOKl2／F1-9质粒为模板扩增Npro基因，并引入Flag标签序列，将其连到plRES2-EGFP载体，构建重组质粒pGFP-Npro;通过脂质体将***转染至PK-15细胞中，利用G418... 详细信息

为构建稳定表达猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白的PK-15细胞系，本研究采用PCR方法，以pOKl2／F1-9质粒为模板扩增Npro基因，并引入Flag标签序列，将其连到plRES2-EGFP载体，构建重组质粒pGFP-Npro;通过脂质体将***转染至PK-15细胞中，利用G418加压筛选、纯化得到稳定表达Npro蛋白的细胞系;连续传代30代后，进行RT—PCR、Western blot和激光共聚焦试验，结果表明获得了稳定表达CSFV Npro蛋白的PK—15细胞系。该细胞系可应用于免疫共沉淀与N印蛋白相互作用的宿主蛋白，为进一步研究CSFV N印的功能奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒细胞系蛋白表达基因定位

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：危艳武范培虎郭龙军吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况，本试验采用第5代、10代和125代PRRSV-HBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明，低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以“高热综合征... 详细信息

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况，本试验采用第5代、10代和125代PRRSV-HBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明，低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以“高热综合征”为特点的症候群，第5代毒株感染组死亡率达40％(2／5)，第10代感染组症状明显减轻且无死亡，第125代毒株感染组基本无临床症状。这3个代次的毒株感染组于第3 d检测病毒血症呈阳性，第7～14 d到达高峰，第125代于21 d消失，较第5和10代毒株提前1 w。病毒感染后抗原检测主要分布于脾脏、扁桃体、淋巴结等组织，第5和10代毒株感染组脏器出现严重的病理损伤，第125代毒株感染组仅见轻微病理损伤。对3个代次毒株的ORF5、ORF6和ORF7测序显示，仅在ORF5出现了3个氨基酸位点突变，第29位：第5、10代为缬氨酸一第125代为丙氨酸;第32位：第5、125代为丝氨酸，第10代为甘氨酸;第196位：第5、10代为谷氨酰胺→第125代为精氨酸。研究表明，低代次毒株能够完全复制出典型的“猪高热综合征”，而高代次毒株无明显临床症状，证明该毒株经细胞传代后毒力下降。鉴于高代次毒株感染动物仍能够引起毒血症和持续感染，表明其仍具一定毒力，作为疫苗种毒需要进一步毒力弱化。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株代次水平毒力分析

来源：评论

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应用定量RT-PCR检验猪瘟兔化弱毒疫苗

应用定量RT-PCR检验猪瘟兔化弱毒疫苗

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：韩文王楠张兴娟葛叶韩秋颖孙元李素仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

前期的研究表明猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR与兔体定型热试验之间存在正相关性，本研究利用荧光定量RT-PcR方法对278批次猪瘟兔化弱毒疫苗进行检测，分别检测其疫苗含量及牛病毒性腹泻病毒污染情况。结果表明，278批次猪瘟疫苗中有6... 详细信息

前期的研究表明猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR与兔体定型热试验之间存在正相关性，本研究利用荧光定量RT-PcR方法对278批次猪瘟兔化弱毒疫苗进行检测，分别检测其疫苗含量及牛病毒性腹泻病毒污染情况。结果表明，278批次猪瘟疫苗中有66批(24％)疫苗含量达不到规程标准，有42批(15％)疫苗存在牛病毒性腹泻病毒污染;从中抽取6份荧光定量检测疫苗含量较低的疫苗用兔体定型热试验进行验证，两种方法结果吻合。

关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗实时荧光定量RT-PCR 牛病毒性腹泻病毒疫苗质量

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