检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2006年第5期28卷 572-576,580页

作者：孙东波冯力时洪艳刘胜旺陈洪岩佟有恩李伟杰王明马思奇陈建飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司黑龙江哈尔滨150001

本研究以纯化的原核表达猪传染性胃肠炎病毒N蛋白为诊断抗原,建立了猪传染性胃肠炎病毒抗体检测的间接ELISA诊断方法,将其命名为rnTGE-ELISA。该抗原不与其他常见10种猪病的阳性血清发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于1... 详细信息

本研究以纯化的原核表达猪传染性胃肠炎病毒N蛋白为诊断抗原,建立了猪传染性胃肠炎病毒抗体检测的间接ELISA诊断方法,将其命名为rnTGE-ELISA。该抗原不与其他常见10种猪病的阳性血清发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于15%;对仔猪免疫后不同时间的血清检测结果表明rnTGE-ELISA与纯化病毒ELISA符合率达95.0%;rnTGE-ELISA相对于VN试验的敏感性为96.3%、特异性为92.2%;现地试验中,rnTGE-ELISA与SvanovaTGEV/PRCVantibodydiagnosisKit的符合率达87.0%,通过中和试验复核结果表明,rnTGE-ELISA的假阳性低于SvanovaTGEV/PRCVantibodydiagnosisKit。本试验建立的rnTGE-ELISA诊断方法具有良好的敏感性和特异性,为免疫猪群抗体监测和TGE流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。

关键词： TGEV 重组N蛋白间接ELISA 诊断

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猪传染性胃肠炎病毒n基因的原核表达及重组蛋白的免疫活性分析

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病毒学报 2006年第2期22卷 147-149页

作者：孙东波冯力刘杰时洪艳佟有恩刘胜旺童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

A pair of primers containing BamHI and XhoI sites was designed to amplify n gene of 1149bp from the positive pMD18-TN plasmid of transmissible gastroenteritis virus n gene by *** product was subcloned into multiple cloning sites of pET-30a containing 6 His·*** plasmid pET-30a of n gene named pET30a-N was transfected into *** BL21 and the bacteria was induced with IPTG at 37℃.It was demonstrated by SDS-PAGE that recombinant N protein expressed in *** BL21 was soluble protein and its molecular weight was about *** result of Western blot test showed that immunoactivity of the recombinant N protein was the same to that of the natural N protein.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 n基因原核表达免疫活性分析

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感染性犊牛腹泻病原学的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2015年第12期 73-76页

作者：智海东高艳刘长明付朝阳中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司哈尔滨150069

犊牛腹泻是危害养牛业最为严重的疾病之一，给养牛业造成了重大的经济损失。传染性和非传染性因子均可引起犊牛腹泻，但以传染性病原体引起的居多。引起犊牛腹泻的病原体主要有病毒、细菌和寄生虫。虽然近些年来在犊牛腹泻的防控中取得... 详细信息

犊牛腹泻是危害养牛业最为严重的疾病之一，给养牛业造成了重大的经济损失。传染性和非传染性因子均可引起犊牛腹泻，但以传染性病原体引起的居多。引起犊牛腹泻的病原体主要有病毒、细菌和寄生虫。虽然近些年来在犊牛腹泻的防控中取得很大进展，但存在的问题依然很多，目前犊牛腹泻的复杂性又使专家将研究重点转向病原学研究。本文对引起犊牛腹泻的主要病毒、细菌和原虫的一些特点和致病性方面的近期研究进展进行综述，以期为犊牛腹泻防控提供借鉴。

关键词：犊牛腹泻病原学感染性非传染性经济损失养牛业病原体寄生虫

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禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原的研制及应用

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 718-722页

作者：智海东解生亮杨志王云峰张宇辉王牟平孙建宏陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司黑龙江哈尔滨150001

研制了禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原,检测了该抗原的效价和特异性,并用该抗原对人工感染鸡沉淀抗体的变化以及现地血清样本进行了检测。结果显示,该抗原不与其他主要禽类病原体阳性血清反应,可与1∶8稀释的禽腺病毒Ⅰ型阳性血清反应。对3月... 详细信息

研制了禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原,检测了该抗原的效价和特异性,并用该抗原对人工感染鸡沉淀抗体的变化以及现地血清样本进行了检测。结果显示,该抗原不与其他主要禽类病原体阳性血清反应,可与1∶8稀释的禽腺病毒Ⅰ型阳性血清反应。对3月龄SPF鸡进行人工感染后,第7 d可检测到沉淀抗体,血清中的沉淀抗体可持续3个月以上。抗原在-20℃条件下可保存2年。经对现地38个鸡场进行检测,其中阳性场14个,阳性率为36.84%,表明我国的禽腺病毒感染率很高。结果证实,研制的禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原敏感、特异,可用于禽腺病毒感染的血清学检测。

关键词：禽腺病毒琼脂扩散抗原沉淀抗体感染率

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标记疫苗与鉴别诊断检验技术的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2012年第7期 29-32页

作者：智海东张宇辉王云峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司哈尔滨150069

随着分子生物学等相关学科的迅速发展,已开发出一系列更加安全有效的基因工程疫苗,这些疫苗具有将疫苗免疫动物与天然毒株感染动物区分开的潜力,由此产生了对研发高效标记疫苗与鉴别诊断检验技术的需求,文章对标记疫苗与相应的鉴别诊断... 详细信息

随着分子生物学等相关学科的迅速发展,已开发出一系列更加安全有效的基因工程疫苗,这些疫苗具有将疫苗免疫动物与天然毒株感染动物区分开的潜力,由此产生了对研发高效标记疫苗与鉴别诊断检验技术的需求,文章对标记疫苗与相应的鉴别诊断检验技术的研发现状进行了分析与综述,以期为标记疫苗及相应鉴别诊断检验技术的研究与推广应用提供参考。

关键词：基因工程疫苗标记疫苗鉴别诊断血清学检验技术核酸检验技术

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病原性犊牛腹泻的实验室诊断与防控

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黑龙江畜牧兽医 2016年第7期 179-183页

作者：智海东高艳刘长明付朝阳中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司哈尔滨150069

犊牛腹泻是危害养牛业最为严重的疾病之一，给养牛业造成了重大的经济损失。传染性和非传染性因子均可引起犊牛腹泻，但以传染性病原体引起的居多。引起犊牛腹泻的病原体主要有病毒、细菌和寄生虫。由于受多方面因素的影响，犊牛腹泻的... 详细信息

犊牛腹泻是危害养牛业最为严重的疾病之一，给养牛业造成了重大的经济损失。传染性和非传染性因子均可引起犊牛腹泻，但以传染性病原体引起的居多。引起犊牛腹泻的病原体主要有病毒、细菌和寄生虫。由于受多方面因素的影响，犊牛腹泻的发病情况复杂多样。

关键词：犊牛腹泻实验室诊断病原性防控非传染性经济损失发病情况养牛业

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一株鹌鹑源禽流感病毒A/quail/Jilin/7/2015(H9N2)的遗传进化分析和致病性研究

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中国预防兽医学报 2017年第12期39卷 957-962页

作者：刘慧敏蒋烈戈王时李雪孙项南唐雷刘景利哈尔滨维科生物技术开发公司黑龙江哈尔滨150069 新疆兵团第九师畜牧科学研究所新疆额敏834601

为探究从死亡鹌鹑肺脏分离鉴定出的1株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)A/quail/Jilin/7/2015(简称QA/JL/7/15)在流感病毒生态分布中的进化关系,本研究对QA/JL/7/15株进行了全基因序列测定,并结合Gen Bank中登录的代表性H9N2亚型流感病毒的基因... 详细信息

为探究从死亡鹌鹑肺脏分离鉴定出的1株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)A/quail/Jilin/7/2015(简称QA/JL/7/15)在流感病毒生态分布中的进化关系,本研究对QA/JL/7/15株进行了全基因序列测定,并结合Gen Bank中登录的代表性H9N2亚型流感病毒的基因组序列及其它参考株序列进行了遗传进化分析。结果显示,QA/JL/7/15为一株重组病毒,血凝素基因(HA)来自A/chicken/Jiangsu/1/00类病毒株;神经氨酸酶(NA)来自A/chicken/Guangxi/KMIII/1999类病毒株;PB2基因来自A/duck/Shantou/163/2004类病毒株;PB1、PA、NP和NS基因来自A/chicken/Shanghai/F/98类病毒株;M基因来自A/Quail/Hong Kong/G1/97类病毒株。HA基因与近年中国湖北分离株A/chicken/Hubei/R386/2012(H9)的核苷酸序列同源性最高(98.5%),HA裂解位点推导氨基酸序列为"-RSSR-",为典型低致病性AIV的特征序列,动物实验也显示该病毒株对鸡和小鼠呈现低致病性。本研究首次证实H9N2重组病毒株在我国鹌鹑中出现,为AI防控提供了实验依据。

关键词：禽流感病毒鹌鹑 H9N2亚型

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猪流行性腹泻病毒CH/S株N蛋白基因的遗传变异及其原核表达

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中国预防兽医学报 2007年第11期29卷 856-860,895页

作者：陈建飞冯力时洪艳孙东波白兴华佟有恩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司黑龙江哈尔滨150001

应用RT-PCR和nested-PCR方法扩增得到含猪流行性腹泻病毒CH/S株N蛋白基因的目的片段,并将其进行了克隆、序列测定及分析。CH/S株N蛋白基因含有一个长1326bp的ORF,编码由441个氨基酸残基组成的多肽,未发现碱基的插入和缺失。CH/S与CV777... 详细信息

应用RT-PCR和nested-PCR方法扩增得到含猪流行性腹泻病毒CH/S株N蛋白基因的目的片段,并将其进行了克隆、序列测定及分析。CH/S株N蛋白基因含有一个长1326bp的ORF,编码由441个氨基酸残基组成的多肽,未发现碱基的插入和缺失。CH/S与CV777、Chinju99、JS-2004-2和LJB/03N蛋白基因ORF的序列同源性分别为97.1%、96.8%、96.7%和96.5%;推导的氨基酸序列的同源性分别为97.7%、97.1%、97.1%和96.8%。以阳性质粒为模板,用分别含有BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点的上、下游引物扩增得到ORF,其PCR产物经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到pET-30a载体,构建的重组质粒命名为pET-30a-PN;将pET-30a-PN转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在IPTG诱导下进行表达;SDS-PAGE结果表明表达出与预期大小相符的约54.4Ku的重组蛋白,重组蛋白以包涵体形式存在;薄层扫描结果表明表达产物占菌体总蛋白的30.5%;Western blot分析表明表达的重组蛋白能与抗PEDV高免血清反应,说明该重组蛋白具有免疫学活性。

关键词：猪流行性腹泻病毒 N蛋白基因序列同源性重组蛋白免疫学活性

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我国禽用基因工程疫苗研发现状及策略

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中国家禽 2010年第22期32卷 4-7页

作者：智海东王云峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司黑龙江哈尔滨150001

近些年来,我国在禽用基因工程疫苗研究上取得了很大的进展,一些禽用基因工程疫苗已经商品化,并对我国养禽业作出了巨大贡献。本文对通过注册的禽用基因工程疫苗进行简介,并对基因工程疫苗研发现状进行总结,提出相应策略。

关键词：家禽基因工程疫苗研发

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疫苗佐剂的研究现状和发展趋势

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中国预防兽医学报 2013年第1期35卷 81-86页

作者：李娜周伟芳刘慧敏李赞仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨维科生物技术开发公司黑龙江哈尔滨150001 上海奉贤动物卫生监督所上海201400

疫苗佐剂是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质。佐剂能够诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应，提高机体保护能力，同时又能减少免疫物质的用量，降低疫苗的生产成本。长期以来，传统疫... 详细信息

疫苗佐剂是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质。佐剂能够诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应，提高机体保护能力，同时又能减少免疫物质的用量，降低疫苗的生产成本。长期以来，传统疫苗（多为菌体或其裂解物）由于其免疫原性强，佐剂的研究和使用只局限于较小的范围，如毒素和类毒素。从巴斯德至今近百年来已开发了许多菌苗和疫苗，但传统的菌疫苗一般多为全细菌或全病毒制成，其中含有大量非免疫原性物质，这些物质除具有毒副作用外也具有佐剂作用。

关键词：疫苗佐剂发展趋势免疫物质非特异性免疫原性免疫应答辅助作用免疫反应

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