检索结果-内蒙古大学图书馆

动物营养学报 2025年第1期37卷 115-125页

作者：钟新皇张振斌蔡青和王梦芝扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 上海欧耐施生物技术有限公司上海201613 省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆农垦科学院畜牧兽医研究所石河子832000

肽是由氨基酸组合连接的活性物质,不仅具有营养性作用,而且具备特定的生物活性功能。肽对机体的活性作用表现在促进养分吸收和代谢、抗炎、抗氧化、免疫调节和维护肠道健康等方面。在动物生产中,肽能够促进动物生长、提高生产力、维持健... 详细信息

肽是由氨基酸组合连接的活性物质,不仅具有营养性作用,而且具备特定的生物活性功能。肽对机体的活性作用表现在促进养分吸收和代谢、抗炎、抗氧化、免疫调节和维护肠道健康等方面。在动物生产中,肽能够促进动物生长、提高生产力、维持健康,具有广阔的应用前景,因此成为21世纪的研究热点。本文聚焦于肽和反刍动物,旨在综述各种肽类物质尤其是活性小肽的作用及其在反刍动物生产中的应用研究进展,以期为反刍动物生产中肽的应用提供参考。

关键词：肽反刍动物应用研究进展

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鹌鹑实验动物化简史及相关研究进展

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中国家禽 2023年第5期45卷 85-91页

作者：李昌文于海波都成王野陈洪岩夏长友中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家禽类实验动物资源库兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江哈尔滨150069

鹌鹑是一种重要的生产和实验用家禽,可按照实验动物标准进行实验动物化。文章总结了鹌鹑实验动物化简史及当前与实验动物领域密切相关的研究进展,包括分类学地位和驯化、常用的品种品系及资源、无菌鹌鹑培育、近交系鹌鹑培育、实验室饲... 详细信息

鹌鹑是一种重要的生产和实验用家禽,可按照实验动物标准进行实验动物化。文章总结了鹌鹑实验动物化简史及当前与实验动物领域密切相关的研究进展,包括分类学地位和驯化、常用的品种品系及资源、无菌鹌鹑培育、近交系鹌鹑培育、实验室饲养健康管理和资源保存,并对实验鹌鹑的应用前景进行了展望。

关键词：鹌鹑实验动物资源

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猪源和犬源ELF4蛋白的亚细胞定位比较研究

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畜牧与兽医 2024年第3期56卷 45-53页

作者：高翠翠喻娇唐青海侯鑫军刘婷全飞杨刘建行赵婷芳赵铖朱钰英危艳武衡阳师范学院生命科学学院/南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室湖南衡阳421008 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

本研究旨在对比分析猪E74样因子4(sELF4)和犬E74样因子4(cELF4)的亚细胞定位,为深入开展二者功能研究提供依据。利用PCR截短扩增sELF4和cELF4,分别克隆至真核表达载体pEGFP-C1中,构建17个sELF4重组真核表达载体和13个cELF4重组真核表达... 详细信息

本研究旨在对比分析猪E74样因子4(sELF4)和犬E74样因子4(cELF4)的亚细胞定位,为深入开展二者功能研究提供依据。利用PCR截短扩增sELF4和cELF4,分别克隆至真核表达载体pEGFP-C1中,构建17个sELF4重组真核表达载体和13个cELF4重组真核表达质粒,转染HeLa细胞、Hoechst33342染色,荧光倒置显微镜观察亚细胞定位,运用生物信息学软件分析其编码氨基酸序列特征。结果表明,sELF4和cELF4蛋白全长均定位在细胞核中,sELF4 196~291 aa(586~873 bp)之间有可能存在两个细胞质核定位信号肽,cELF4的核定位信号肽分布在203~291 aa(607~873 bp),cELF4 292~663 aa(874~1 992 bp)、sELF4 292~662 aa(874~1 989 bp)在细胞中发生聚集现象。cELF4与sELF4氨基酸序列在第169~303位氨基酸之间均高度保守,其他区段均存在不同程度的差异。综上,sELF4蛋白全长和cELF4蛋白全长均定位在细胞核中,截短表达的羧基端功能区有聚集现象,二者的核定位信号肽分布有一定差异。

关键词：猪ELF4蛋白犬ELF4蛋白真核表达亚细胞定位

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三峡水库浮游植物群落结构特征及其水环境评价

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武汉大学学报（理学版） 2024年第1期70卷 75-86页

作者：田楚铭齐青松张弛刘妍何婷夏春香张羽珩米武娟毕永红哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨150025 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室湖北武汉430072

为探究三峡水库浮游植物群落结构特征及水环境质量状况,于2021—2022年在三峡水库干支流设置56个采样点进行了季度调查。共鉴定出浮游植物78种,隶属于8门66属,群落类型为绿藻-硅藻-蓝藻型,2021年优势种12种,2022年优势种6种。浮游植物... 详细信息

为探究三峡水库浮游植物群落结构特征及水环境质量状况,于2021—2022年在三峡水库干支流设置56个采样点进行了季度调查。共鉴定出浮游植物78种,隶属于8门66属,群落类型为绿藻-硅藻-蓝藻型,2021年优势种12种,2022年优势种6种。浮游植物细胞密度具有时空异质性,2021年由大到小次序为:秋季、春季、夏季、冬季;2022年由大到小次序为:夏季、春季、秋季、冬季,空间变化上均表现为支流大于干流的变化趋势。Pearson相关性分析表明,浮游植物生物量与WT、TN、SPC呈极显著正相关性(P<0.001),与NH_(4)^(+)-N、NO_(3)^(-)-N、DO呈极显著正相关性(P<0.01),与CODMn、pH呈显著正相关性(P<0.05)。变差分解分析(VPA)表明,2021年营养盐对浮游植物群落结构影响较大,而2022年则是水体理化性质影响较大。单项理化参数评价、综合营养状态指数评价以及浮游植物α多样性指数评价结果显示,2021—2022年三峡水库水体呈中-轻富营养状态,水体为中污染型水体。

关键词：三峡水库浮游植物群落结构环境因子水环境评价

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基于人ANP32A蛋白的C型流感病毒聚合酶纯化及PB2蛋白单克隆抗体的高效制备

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生物工程学报 2022年第8期38卷 3041-3048页

作者：屈玉杏郭兴韩佳岐张振宇王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室马传染病与慢病毒病创新团队黑龙江哈尔滨150069

C型流感病毒是感染人的重要呼吸道病原,也可感染猪、狗等动物。聚合酶是C型流感病毒复制的核心,是研究病毒复制机制的重要靶标。然而目前没有商品化针对C型流感病毒聚合酶的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb),一定程度制约了相关研... 详细信息

C型流感病毒是感染人的重要呼吸道病原,也可感染猪、狗等动物。聚合酶是C型流感病毒复制的核心,是研究病毒复制机制的重要靶标。然而目前没有商品化针对C型流感病毒聚合酶的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb),一定程度制约了相关研究的开展。为了制备C型流感病毒碱性聚合酶2(polymerase basic protein 2,PB2)的MAb,本研究依据人酸性核磷酸蛋白32A(human acidic nuclear phosphoprotein 32 family member A,huANP32A)与流感病毒RNA依赖性RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)相互作用的特性,利用免疫共沉淀技术在真核表达系统中通过融合Flag标签的huANP32A(huANP32A-Flag)纯化并富集C型流感病毒RdRp(PB1、PB2、P3),并以之作为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用间接ELISA与Western blotting方法筛选出6株(7B11-5、8A4-5、13D9-6、8D4-1、8D4-3、9F9-4)能稳定分泌识别PB2 MAb的阳性杂交瘤细胞株。经鉴定7B11-5、8A4-5、8D4-1和8D4-3抗体亚型为IgG1型,13D9-6抗体亚型为IgG2a型,9F9-4抗体亚型为IgG3,轻链均为κ链。进一步选取1株效价高的杂交瘤细胞8D4-1来制备腹水,测定收集的小鼠腹水抗体效价为1︰64000。Western blotting结果显示,制备的MAb能够与C型流感病毒PB2发生特异性免疫反应;激光共聚焦试验结果表明,该MAb可准确检测C型流感病毒PB2的亚细胞定位。本研究通过huANP32A蛋白高效富集了C型流感病毒的RdRp,并以该复合物为抗原制备的PB2 MAb具有较好的特异性,为C型流感病毒聚合酶检测、结构分析及机制研究奠定了基础。

关键词： C型流感病毒 PB2 huANP32A 单克隆抗体

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伪狂犬病毒gB蛋白纯化及单克隆抗体的制备

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中国动物传染病学报 2023年

作者：焦爽李长尧张朝霞翁长江熊涛长江大学生命科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/基础免疫创新团队黑龙江省兽医免疫重点实验室

本研究利用昆虫杆状病毒表达系统对伪狂犬病毒（PRV）gB基因中富含抗原表位区段进行融合表达及纯化，并将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠以制备单克隆抗体（mAb）。小鼠经三次免疫后，利用iELISA检测其血清中抗gB蛋白的抗体效价，并将抗... 详细信息

本研究利用昆虫杆状病毒表达系统对伪狂犬病毒（PRV）gB基因中富含抗原表位区段进行融合表达及纯化，并将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠以制备单克隆抗体（mAb）。小鼠经三次免疫后，利用iELISA检测其血清中抗gB蛋白的抗体效价，并将抗体效价达到2×104以上的小鼠进行细胞融合。随后通过iELISA和IFA实验对阳性杂交瘤细胞进行筛选。经3-4次亚克隆筛选后，得到了一株可以稳定分泌gB mAb的杂交瘤细胞株293。同时，对其进行亚类鉴定发现该株细胞分泌的抗体类型为IgM型。本研究为建立新型ELISA检测试剂盒、新型疫苗的开发以及后续中和抗体的研究提供了良好的生物材料。

关键词：伪狂犬病毒 gB基因昆虫杆状病毒单克隆抗体

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病毒感染引起的炎症反应:宿主对抗病毒的“双刃剑”

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微生物学报 2022年第5期62卷 1571-1586页

作者：葛海亮李素于少雄李淑红李连峰周萍萍杨玉莹仇华吉长江大学动物科学学院湖北荆州434023 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

先天性免疫系统作为宿主抵抗外来病原入侵的第一道防线,也是最迅速的防御系统。宿主先天性免疫系统中的模式识别受体识别入侵信号并激活炎症信号通路,诱导产生大量促炎性细胞因子,引起炎症反应。病毒感染是激活炎症反应的条件之一,诱导... 详细信息

先天性免疫系统作为宿主抵抗外来病原入侵的第一道防线,也是最迅速的防御系统。宿主先天性免疫系统中的模式识别受体识别入侵信号并激活炎症信号通路,诱导产生大量促炎性细胞因子,引起炎症反应。病毒感染是激活炎症反应的条件之一,诱导机体产生强烈的免疫应答,强大的炎症反应调控网络在宿主抗病毒过程中发挥关键作用,以维持机体的平衡。本文综述了病毒感染引起的炎症反应,重点介绍了宿主对炎症反应的调控网络,以及DNA和RNA病毒对炎症反应的调节机制,为病毒感染引起的免疫性疾病的治疗提供参考。

关键词：炎症反应病毒感染免疫调节机制病理损伤

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增强型猫ω干扰素的筛选及抗病毒活性分析

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中国预防兽医学报 2022年第2期44卷 195-201,213页

作者：李茵潘玉迪田进曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为获得增强型猫ω干扰素(FeIFN-ω),本研究通过分子对接方法预测和参考相关位点研究,设计3组定点突变引物。以pJET-FeIFN-ω为模板分别扩增FeIFN-ω基因及其3个突变基因(FeIFN-ω-R35L、FeIFN-ω-A156R、FeIFN-ω-T188R),并连接慢病毒载... 详细信息

为获得增强型猫ω干扰素(FeIFN-ω),本研究通过分子对接方法预测和参考相关位点研究,设计3组定点突变引物。以pJET-FeIFN-ω为模板分别扩增FeIFN-ω基因及其3个突变基因(FeIFN-ω-R35L、FeIFN-ω-A156R、FeIFN-ω-T188R),并连接慢病毒载体pLVX-IRSE,构建重组质粒pLVX-FeIFN-ω、pLVX-FeIFN-ω-R35L、pLVX-FeIFN-ω-A156R、p LVX-FeIFN-ω-T188R。4个重组质粒分别与包装质粒psPAX2和膜蛋白质粒pMD2.G共转染293T细胞包装慢病毒,48 h后收获细胞上清即为慢病毒。分别将4个慢病毒转导293悬浮细胞(293s),扩大培养后收获细胞上清,经镍离子亲和层析柱纯化蛋白,并经SDS-PAGE检测、BCA法测蛋白浓度。结果显示,rFeIFN-ω、rFeIFN-ω-R35L、rFeIFN-ω-A156R、rFeIFN-ω-T188R在293s细胞中得到高效表达,且蛋白纯化效果好;经BCA法测浓度,4种重组蛋白浓度均约为200μg/mL,即获得了重组干扰素rFeIFN-ω、rFeIFN-ω-R35L、rFeIFN-ω-A156R、rFeIFN-ω-T188R。4种重组干扰素分别经猫肾细胞(CRFK)孵育18 h后接种猫杯状病毒(FCV)或猫疱疹病毒(FHV)12 h,经相对荧光定量PCR法检测干扰素抗FCV和FHV活性;4种重组干扰素分别经CRFK细胞孵育12 h,经相对荧光定量PCR法检测干扰素刺激基因ISG15、Viperin、IFITM1的转录水平,结果显示:实验组与空白对照组差异极显著(P<0.01),实验组中rFeIFN-ω-R35L、rFeIFN-ω-A156R与rFeIFN-ω均差异不显著(P>0.05)或表现为活性降低,rFeIFN-ω-T188R与rFeIFN-ω、rFeIFN-ω-R35L、rFeIFN-ω-A156R差异均显著(P<0.05)表现为活性增强,并且r FeIFN-ω-T188R抗病毒活性及诱导ISGs的转录水平均比rFeIFN-ω高1倍左右。选择r FeIFN-ω和rFeIFN-ω-T188R分别与His纯化树脂结合,加入等量表达干扰素受体(IFNAR1/R2)的重组质粒转染293T细胞的裂解液,4℃结合过夜,经western blot鉴定干扰素与IFNAR1/R2结合亲和力分析,结果显示,rFeIFN-ω-T188R与IFNAR1的结合能力比r FeIFN-ω高1倍左右,且两者与IFNAR2的结合能力差异不显著。本研究成功筛选到增强型rFeIFN-ω-T188R,为研究高效FeIFN-ω药物奠定了基础。

关键词：猫ω干扰素真核表达生物活性

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2020-2021年中国部分活禽市场中classⅠ类新城疫病毒的分子特征遗传演化和耐热性分析

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中国兽医科学 2023年第4期53卷 491-498页

作者：张春玮孙军峰张智颖陈林娜刘添仪韩宗玺刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽呼吸道传染病创新团队黑龙江哈尔滨150069

对2020—2021年期间分离自10个省(自治区)活禽市场不同宿主与部分环境中的新城疫病毒(NDV)进行鉴定,获得了31株classⅠ类NDV。F基因分子特征分析显示,classⅠ类NDV F基因中起始密码子存在突变,导致产生不同长度的编码序列。氨基酸序列... 详细信息

对2020—2021年期间分离自10个省(自治区)活禽市场不同宿主与部分环境中的新城疫病毒(NDV)进行鉴定,获得了31株classⅠ类NDV。F基因分子特征分析显示,classⅠ类NDV F基因中起始密码子存在突变,导致产生不同长度的编码序列。氨基酸序列分析结果显示,大部分毒株的F蛋白具有典型的弱毒株裂解位点基序,但个别毒株的裂解位点存在特征性的突变。F蛋白中融合肽、N-连接的糖基化位点、中和表位以及七肽重复区域在这31个毒株之间高度保守,而信号肽区域中存在众多的氨基酸替换。HN蛋白中仅N-连接的糖基化位点在31个毒株之间保守,中和表位和七肽重复区域均存在氨基酸替换。此外,首次发现了HN编码区长度为1728 nt的突变毒株。遗传进化分析显示,与其他国家和地区的毒株不同,我国的classⅠ类NDV形成了独特的进化分支,即基因亚型1.1.2。耐热性测定结果显示,classⅠ类NDV分离株表现出不同程度的耐热特性。本研究结果为我国classⅠ类NDV的遗传变异和生物学特性研究奠定了基础。

关键词：新城疫病毒分子特征遗传进化热稳定性

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云芝葡聚糖对非洲猪瘟病毒的体外抑制作用

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中国兽医学报 2022年第11期42卷 2133-2138,2144页

作者：刘欣媛孙元李素李连峰仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

研究云芝葡聚糖抑制非洲猪瘟病毒(ASFV)感染效果并初步探索其作用机制。利用CCK-8试剂检测云芝葡聚糖对原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的毒性并计算半数细胞毒性浓度(CC50);ASFV感染细胞,检测不同质量浓度云芝葡聚糖抗ASFV感染的剂量依赖效应... 详细信息

研究云芝葡聚糖抑制非洲猪瘟病毒(ASFV)感染效果并初步探索其作用机制。利用CCK-8试剂检测云芝葡聚糖对原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的毒性并计算半数细胞毒性浓度(CC50);ASFV感染细胞,检测不同质量浓度云芝葡聚糖抗ASFV感染的剂量依赖效应,并计算半数抑制浓度(IC_(50));将25 mg/L的云芝葡聚糖与病毒悬液孵育处理,稀释后加入PAM,评价云芝葡聚糖体外直接杀灭ASFV的效果;同时在ASFV复制周期的不同时间点利用云芝葡聚糖处理细胞,确定其抗ASFV效果最显著的效应阶段;通过qPCR检测抗病毒相关细胞因子转录水平来初探其抗病毒机制。云芝葡聚糖的毒性较弱(CC50为270.1000 mg/L),具有一定的抗病毒效果(IC_(50)为0.9575 mg/L),其不能直接杀灭病毒;在ASFV感染前6~12 h使用云芝葡聚糖处理细胞,其抑制病毒复制的效果最为显著,且PAM的IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α等细胞因子的mRNA水平显著升高。

关键词：云芝葡聚糖非洲猪瘟病毒抗病毒药物细胞因子

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