检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2020年第1期15卷 107-110,114页

作者：那睿思李颜超陈硕李玉军哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所黑龙江哈尔滨150086

天然免疫是宿主细胞在生物进化过程中形成的抵御外来侵袭的第一道防线。病毒感染后通过信号转导机制引发机体免疫反应,线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)作为天然免疫信号通路的重要接头蛋白,可以接收上游Toll样受体(TLR)和维甲酸诱导基因I(RI... 详细信息

天然免疫是宿主细胞在生物进化过程中形成的抵御外来侵袭的第一道防线。病毒感染后通过信号转导机制引发机体免疫反应,线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)作为天然免疫信号通路的重要接头蛋白,可以接收上游Toll样受体(TLR)和维甲酸诱导基因I(RIG-I)受体(RLRs)等识别RNA病毒并传递信号,活化下游NF-κB和IRF3/7相关信号通路,从而激活干扰素表达,介导天然免疫相关信号通路。RNA病毒在长期进化过程中针对MAVS也形成了一系列免疫逃逸策略。本综述介绍了MAVS的发现及结构,并对MAVS抗RNA病毒的作用及病毒对MAVS的负调控进行综述,旨在为相关研究提供帮助。

关键词：线粒体抗病毒信号蛋白 RNA病毒维甲酸诱导基因I 综述

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高通量测序技术在阴道感染性疾病的病原鉴定及诊断中的应用

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中国微生态学杂志 2021年第10期33卷 1220-1223页

作者：孙艺歌陈小贝张文莉张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学卫生检验中心

阴道感染性疾病是育龄妇女最常见的妇科疾病,其主要的类型有细菌性阴道病和外阴阴道假丝酵母菌病。目前的临床诊断主要包括病原体的显微镜观察以及病原体代谢物的检测等,但因其诊断阳性率低、敏感性低等限制,导致抗感染药物选择困难、... 详细信息

阴道感染性疾病是育龄妇女最常见的妇科疾病,其主要的类型有细菌性阴道病和外阴阴道假丝酵母菌病。目前的临床诊断主要包括病原体的显微镜观察以及病原体代谢物的检测等,但因其诊断阳性率低、敏感性低等限制,导致抗感染药物选择困难、治愈率低、复发率高等。本综述在比较阴道感染性疾病,特别是细菌性阴道病以及外阴阴道假丝酵母菌病临床常见诊断方法的基础上,介绍了高通量测序技术在细菌性阴道病和外阴阴道假丝酵母菌病的病原体鉴定及诊断中的应用,以期为阴道感染性疾病的诊断、治疗及愈后提供实验依据。

关键词：细菌性阴道病外阴阴道假丝酵母菌病高通量测序技术诊断

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游离DNA检测技术及其在疾病诊疗中的应用和研究进展

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中华检验医学杂志 2024年第2期47卷 197-204页

作者：陆昕怡孟庆泰黄萍段雅干陈智远徐鹏张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

游离DNA(cfDNA)是存在于人体细胞外液中的DNA片段,在生理或病理条件下(如妊娠、肿瘤等),cfDNA的含量变化和分子特征等使其成为疾病诊疗的生物标志物之一。随着cfDNA富集技术以及测序、质谱等检测技术的发展,cfDNA的检测已形成完整的检... 详细信息

游离DNA(cfDNA)是存在于人体细胞外液中的DNA片段,在生理或病理条件下(如妊娠、肿瘤等),cfDNA的含量变化和分子特征等使其成为疾病诊疗的生物标志物之一。随着cfDNA富集技术以及测序、质谱等检测技术的发展,cfDNA的检测已形成完整的检验流程。基于cfDNA检测的液体活检技术在临床肿瘤诊疗、产前检查中已得到广泛应用,并且在自身免疫病诊疗中展现出较大的潜力。本综述描述了cfDNA检测技术的发展和液体活检在临床方面的应用,以及cfDNA在疾病诊断和治疗中的研究进展。

关键词：基因检测测序癌症产前检查自身免疫病

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人核糖核酸酶A超家族抗微生物活性及其作用机制

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第4期39卷 507-515页

作者：黄萍孟庆泰张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1~RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家... 详细信息

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1~RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家族成员在多种免疫细胞例如嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞中表达,并可被分泌以发挥多种多样的生物学功能,包括抗微生物活性、促进宿主防御、参与血管生成及精子成熟等。其中,人核糖核酸酶A超家族部分成员,可通过水解病毒RNA、抑制病毒复制、破坏细菌细胞壁、促进微生物凝集、损伤寄生虫细胞膜和线粒体膜等直接作用,以及通过宿主天然免疫细胞介导的间接作用,发挥抗微生物及寄生虫活性,参与宿主防御。本文对人核糖核酸酶A的抗微生物(包括病毒、细菌、真菌)和抗寄生虫活性及其作用机制进行综述,并对人核糖核酸酶A作为抗微生物活性物质和天然免疫分子,用于治疗严重和耐药微生物感染的前景进行展望。

关键词：人类核糖核酸酶A 抗微生物活性宿主防御先天免疫微生物感染

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人类风湿关节炎滑膜中ABC转运蛋白基因差异表达的生物信息学分析

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国际遗传学杂志 2022年第4期45卷 265-274页

作者：郑婷丹刘倩楠张涵旭潘越吴昊付英梅宋武琦哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所

目的本研究通过对来自GEO数据库的数据和实验室测序数据进行生物信息学分析, 分析ATP结合盒(ATP-binding cassette, ABC)转运蛋白基因在类风湿关节炎中的表达情况, 分析ABC转运蛋白在类风湿关节炎中的作用机制。方法采用R语言软件对人... 详细信息

目的本研究通过对来自GEO数据库的数据和实验室测序数据进行生物信息学分析, 分析ATP结合盒(ATP-binding cassette, ABC)转运蛋白基因在类风湿关节炎中的表达情况, 分析ABC转运蛋白在类风湿关节炎中的作用机制。方法采用R语言软件对人类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)、骨关节炎(osteoarthritis, OA)滑膜组织以及正常(normal, N)滑膜组织, 体外实验中的人类滑膜成纤维细胞中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α, TNF-α)实验组和对照组的多基因差异表达谱数据集进行综合分析。将ABC转运蛋白的差异基因与其他差异基因相关联, 以获得相关性更大的差异基因。使用KEGG对具有更高相关性的差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)进行通路富集。利用Cytospace软件的STRING在线数据库, 通过蛋白质相互作用(PPI)网络分析鉴定枢纽(Hub)基因。结果 ABC转运蛋白基因差异表达:RA组与N组相比, ABCC4和ABCG1的表达显著增加, 而ABCA8的表达显著降低(P<0.001);RA组与OA组相比, ABCC4的表达显著增加, ABCA8的表达显著降低(P<0.001);与对照组相比, TNF-α组ABCA5的表达显著增加。与上述ABC家族具有高度相关性的差异表达基因的KEGG通路和蛋白质相互作用(PPI)网络分析进一步发现, 大多数已确定的通路参与炎症、增殖、细胞存活和血管生成的调节。结论本研究发现了在类风湿关节炎中潜在的一组ABC家族差异基因, 这将为RA的早期诊断提供潜在的生物标志物, 并将有助于研究ABC转运蛋白在RA中的作用机制以及分子靶向治疗。

关键词：类风湿关节炎 ABC转运蛋白 GEO数据库生物标志物生物信息学

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应用CRISPR/Cas9靶向细胞内整合的HPV E6、 E7基因治疗宫颈癌

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国际遗传学杂志 2020年第2期43卷 69-75页

作者：陈思佳穆宇松张林月钟照华哈尔滨医科大学微生物学教研室及伍连德研究所　150081

目的:通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的 E6、 E7致癌基因，探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法:以SiHa细胞系为研究对象，设计靶向其内整合的HPV16 E6和 E7基因的... 详细信息

目的:通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的 E6、 E7致癌基因，探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法:以SiHa细胞系为研究对象，设计靶向其内整合的HPV16 E6和 E7基因的小引导RNA(small guide RNA，sgRNA)，将其克隆入CRISPR/Cas9质粒，并应用其将 E6、 E7基因敲除，随后应用错位酶切法和克隆测序检测突变效果，并用细胞迁移与侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果:设计的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9质粒，经测序克隆正确。该质粒转染SiHa细胞后，可以引发靶点DNA的突变，致使 E6和 E7基因密码子改变，无法正确表达。 E6、 E7突变后SiHa细胞侵袭及增殖能力下降( t检验，pCas9组与psgE6-1-1-Cas9组相比， P＝0.0006; pCas9组与psgE7-1-2-Cas9组相比， P＝0.0007)，促进肿瘤抑制因子P53的表达恢复，细胞的恶性度降低。

关键词： CRISPR/Cas9 HPV E6 HPV E7 宫颈癌治疗

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CRISPR/Cas9基因编辑技术在致瘤病毒感染研究中的应用

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微生物与感染 2017年第2期12卷 107-112页

作者：王玉徐维祯钟照华哈尔滨医科大学微生物学教研室及伍连德研究所哈尔滨150081

成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9〕基因编辑技术的发现源于真细菌和古细菌中CRISPR/Cas系统介导的适应性免疫机制研究。该技术利用特异性向导RNA识别靶点基因,引导核酸内切酶Cas9对其切割,并通过同源重组或非同源末端连接完成对目的 DNA的编辑。某些病毒感染机体后,可将其基因组整合到宿主细胞基因组中或潜伏于组织中而无法被彻底清除,从而引起持续性感染。本文参考2013年以来CRISPR/Cas9基因组编辑技术的最新相关研究报道,重点综述其在人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)、人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)等致瘤病毒感染相关疾病研究中的应用,并概括其作用于这些病毒的有效靶点。

关键词：成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9 基因编辑病毒

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柯萨奇病毒B3型3D蛋白抗体的制备

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微生物与感染 2017年第3期12卷 172-178页

作者：王玉徐维祯穆宇松王天楹闫碧莹颜学勤赵文然钟照华哈尔滨医科大学微生物学教研室及伍连德研究所哈尔滨150081 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室哈尔滨150081

肠道病毒3D蛋白是其RNA聚合酶。柯萨奇病毒B3型(coxsackievirus B3,CVB3)主要感染心脏,其3D蛋白在心肌表达中的时序和分布尚不清楚。本研究将通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的CVB 3D片段插入pET28a(+)的表达框,获... 详细信息

肠道病毒3D蛋白是其RNA聚合酶。柯萨奇病毒B3型(coxsackievirus B3,CVB3)主要感染心脏,其3D蛋白在心肌表达中的时序和分布尚不清楚。本研究将通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的CVB 3D片段插入pET28a(+)的表达框,获得pET28a(+)-3D重组质粒。异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导pET28a(+)-3D表达3D-His蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后,切胶,获得3D-His蛋白。3D-His蛋白加佐剂免疫新西兰大白兔制备3D蛋白多克隆抗体,蛋白免疫印迹法检测抗体效价及特异性。结果显示,本研究获得了高效价且特异性好的抗CVB3 3D蛋白抗体,可用于CVB3 3D蛋白功能的后续研究。

关键词：柯萨奇病毒B3型 3D聚合酶抗体原核表达

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630nm LED照射促进TRPV1表达诱导成纤维样滑膜细胞凋亡

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激光生物学报 2022年第3期31卷 224-233页

作者：吴昊刘倩楠刘海亮张凤民宋武琦哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所哈尔滨150081

类风湿关节炎(RA)是一类以滑膜增生、滑膜关节损害、活动功能不全为主要特点的慢性全身性自我免疫炎症性病变。目前,对于RA的治疗包括药物治疗、外科手术治疗和物理疗法。物理疗法中光疗法由于其无侵袭力、无痛等优势,被用作辅助治疗手... 详细信息

类风湿关节炎(RA)是一类以滑膜增生、滑膜关节损害、活动功能不全为主要特点的慢性全身性自我免疫炎症性病变。目前,对于RA的治疗包括药物治疗、外科手术治疗和物理疗法。物理疗法中光疗法由于其无侵袭力、无痛等优势,被用作辅助治疗手段普遍应用于临床。为此,本研究通过630 nm LED红光探讨了光生物调节法通过促进成纤维样滑膜细胞凋亡,从而治愈类风湿性关节炎的机理。JC-1染色试验表明,630 nm LED光照后线粒体膜电位去极化增强,膜电位降低;使用CASP3活性检测试剂盒和CASP9活性检测试剂盒进行试验,证明630 nm LED可以促进MH7A细胞中CASP3和CASP9酶的活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)试验显示,630 nm LED可以促进瞬时受体电位香草素1(TRPV1)的表达;蛋白质免疫印迹试验(Western blot)证明,经过630 nm LED红光照射可以促进MH7A细胞TRPV1蛋白的表达;CCK-8试验表明,630 nm LED可以显著性抑制MH7A细胞活力,但不能降低TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞活性;TUNEL试验证实,630 nm LED照射诱导MH7A细胞凋亡,但不能诱导TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞凋亡。综上所述,630 nm LED红光在类风湿性关节炎中通过调控TRPV1促进TNF-α诱导的MH7A细胞凋亡,这对辅助缓解RA滑膜炎症有一定作用。

关键词：发光二极管类风湿关节炎细胞凋亡成纤维样滑膜细胞 TRPV1

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630 nm LED照射阻滞STAT1核转位抑制M1型巨噬细胞极化

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激光生物学报 2021年第6期30卷 541-547页

作者：潘越宋武琦张凤民刘海亮哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所哈尔滨150081

M1型巨噬细胞为经典活化型巨噬细胞,可分泌多种促炎因子和趋化因子促进炎症的发展。我们前期研究已经证明,630 nm发光二极管(LED)照射能抑制巨噬细胞释放炎症因子,然而,630 nm LED对巨噬细胞极化的调控作用及其分子机制尚不清楚。在本... 详细信息

M1型巨噬细胞为经典活化型巨噬细胞,可分泌多种促炎因子和趋化因子促进炎症的发展。我们前期研究已经证明,630 nm发光二极管(LED)照射能抑制巨噬细胞释放炎症因子,然而,630 nm LED对巨噬细胞极化的调控作用及其分子机制尚不清楚。在本研究中,我们评估了630 nm LED照射对单核细胞(THP-1)来源的M1型巨噬细胞极化的影响,探讨了其对M1型巨噬细胞极化的作用机制。体外培养THP-1细胞,用佛波酯(PMA)将其诱导成巨噬细胞。用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)处理巨噬细胞,使其极化成M1型巨噬细胞,极化的同时用波长为630 nm、功率密度为40.02 mW/cm^(2)的LED对其进行照射。采用噻唑蓝(MTT)法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法和乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒检测细胞活力,用实时定量PCR法检测M1型巨噬细胞相关因子mRNA的表达水平,采用免疫印迹和细胞免疫荧光检测M1型巨噬细胞中STAT1的核转位。结果显示,M1型巨噬细胞经630 nm LED照射后,其活性未受影响,但M1型巨噬细胞相关因子干扰素调节因子5(IRF5)、趋化因子配体9(CXCL9)、CXL10、CXCL11 mRNA的表达水平显著降低,并且阻滞转录因子STAT1向核内转移。综上所述,630 nm LED照射可通过阻滞STAT1核转位抑制M1型巨噬细胞极化,此研究可能对治疗巨噬细胞极化相关疾病提供新的思路。

关键词：发光二极管 M1型巨噬细胞极化单核细胞 STAT1 核转位

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