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外源性IFN-β对OL细胞和OL/BDV细胞中内源性Ⅰ型IFN的诱导作用

国际免疫学杂志 2019年第1期42卷 1-6页

作者：翟爱霞颜冬梅王海萍崔乐乐卜桐考文萍张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所、黑龙江省感染与免疫重点实验室、黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室、黑龙江省普通高校感染与免疫科技创新团队哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第四医院 150001

目的探讨外源性干扰素(interferon,IFN)-β对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte,OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中内源性Ⅰ型IFN表达和干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)7细胞定位的影响。方法外源性IFN-β处理OL细胞和OL/BDV细胞0、0.5、2、4、8、24 h,根据细胞是否加入外源性IFN-β,分为外源性IFN-β未刺激组和刺激组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测Ⅰ型IFN mRNA表达。OL细胞和OL/BDV细胞分别转染IRF7-EGFP质粒,外源性IFN-β刺激4 h,观察IRF7细胞定位情况。结果外源性IFN-β刺激OL细胞,在2、4、24 h,IFN-αmRNA表达显著增加(P值分别为0.008,0.0001,0.004);在0.5、4、8、24 h,IFN-βmRNA表达显著增加(P值分别为0.0004,0.0002,0.011,0.012),两者均在4 h增加最为显著。外源性IFN-β刺激OL/BDV细胞4 h和24 h,IFN-αmRNA表达显著增加(P值分别为0.0004,0.022),IFN-βmRNA表达仅在刺激4增加(P=0.002)。外源性IFN-β刺激OL细胞和OL/BDV细胞4 h,IRF7绿色荧光蛋白均转移至细胞核内。结论外源性IFN-β可诱导OL细胞和OL/BDV细胞中内源性I型IFN表达,参与解除BDV对I型IFN应答的抑制过程,并促进IRF7的活化入核。

关键词：外源性干扰素-β 人类少突胶质细胞博尔纳病病毒持续感染的人类少突胶质细胞内源性I型干扰素

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HIV-1广谱中和者病毒包膜中和敏感表位及诱导中和抗体能力研究

HIV-1广谱中和者病毒包膜中和敏感表位及诱导中和抗体能力研究

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：李妍曹子茜许颖出王甲业李迪庄敏凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室

研究目的:探讨HIV-1广谱中和者病毒包膜表位特征及其诱导中和抗体的能力。研究方法:通过测定大量我国HIV-1感染者血浆对不同亚型HIV-1毒株的中和能力,分析广谱中和者病毒包膜的一些表位特征;进一步研究广谱中和者HIV-1包膜的抗原性及针... 详细信息

研究目的:探讨HIV-1广谱中和者病毒包膜表位特征及其诱导中和抗体的能力。研究方法:通过测定大量我国HIV-1感染者血浆对不同亚型HIV-1毒株的中和能力,分析广谱中和者病毒包膜的一些表位特征;进一步研究广谱中和者HIV-1包膜的抗原性及针对广谱中和抗体表位的暴露情况;通过突变分析确定中和表型与表位序列差异性的关联,进而确定影响中和敏感性的病毒包膜关键位点;最终通过用包膜糖蛋白三聚体免疫家兔,探讨中和敏感和中和抵抗包膜诱导特异性体液免疫的能力。结果:自HIV-1 CRF7BC亚型广谱中和者分离的病毒包膜中,不但有已知的V1V2可变区广谱中和抗体表位（PG9/16及CD4bd）等,还有一些未经报道的新表位,存在于包膜V4区以及恒定区（C区）;在同一感染者体内分离获得的病毒包膜表现出不同的中和敏感性;发现了广谱中和者包膜中有多个氨基酸单个位点影响包膜对已知广谱中和抗体（VRC01、HJ16、447-52D或4E10等）的中和敏感性;中和敏感和中和抵抗包膜均能诱导出高滴度的特异性结合抗体,但诱导中和抗体能力不同。结论:HIV-1 CRF7BC病毒包膜中一些关键氨基酸位点影响包膜对中和抗体的中和敏感性。中和敏感和中和抵抗包膜诱导中和抗体能力不同。

关键词： HIV-1 包膜蛋白中和抗体

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Gelsolin的生物学功能与其在疾病诊断及治疗中的作用

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国际免疫学杂志 2016年第4期39卷 364-367页

作者：孙迪李辉考文萍张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081 哈尔滨医科大学基础医学院

凝溶胶蛋白（Gelsolin）是一种激动蛋白结合蛋白,目前被认为在细胞运动、细胞吞噬中有重要的作用.近年,研究表明在许多疾病中血清Gelsolin水平下降,且其与疾病的严重程度、并发症的发生率和并发症的严重程度有关,能够预测并发症的发生... 详细信息

凝溶胶蛋白（Gelsolin）是一种激动蛋白结合蛋白,目前被认为在细胞运动、细胞吞噬中有重要的作用.近年,研究表明在许多疾病中血清Gelsolin水平下降,且其与疾病的严重程度、并发症的发生率和并发症的严重程度有关,能够预测并发症的发生和严重程度.Gelsolin还被发现有降糖和抗炎的作用,可以对疾病治疗起到一定作用.因而有必要对Gelsolin的生物学功能与其在疾病诊断及治疗中的作用进行研究.

关键词：凝溶胶蛋白诊断治疗

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含齐多夫定或替诺福韦的两组治疗方案的早期疗效评价

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国际免疫学杂志 2018年第2期41卷 154-157页

作者：王丽解洪明金春英高文霞杨丽云赵威凌虹哈尔滨市传染病院 150030 哈尔滨医科大学医学微生物学教研室、伍连德研究所、黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081

目的评估HIV感染者/艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）病人接受一线抗反转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）早期（治疗4周）的疗效。方法2014年9月至2017年9月在哈尔滨市传染病院接受一线ART治疗和随访的HI... 详细信息

目的评估HIV感染者/艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）病人接受一线抗反转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）早期（治疗4周）的疗效。方法2014年9月至2017年9月在哈尔滨市传染病院接受一线ART治疗和随访的HIV/AIDS病人325例，药物组合分别为含齐多夫定（Zidovudine，AZT）或替诺福韦（Tenofovir，TDF）加拉米夫定（lamivudine，3TC）及依菲韦伦（Efavirenz，EFV）两组。用药前、用药后4周，分别测定CD4＋T淋巴细胞数和病毒载量（viral load，VL），评价治疗效果。结果共纳入325例HIV/AIDS病人，AZT组合116人，TDF组合209人，两组在性别、年龄、感染途径占比上差异无统计学意义。AZT和TDF组合在抗病毒治疗4周的病毒抑制率分别为80%和70%，差异有统计学意义（P＝0.049）。将两组病人的基线VL进行分区间对比研究发现，在低基线VL时（HIV-RNA〈105），AZT组合的病毒抑制率（88%）低于TDF组合（94%）但差异无统计学意义（P〉0.05）。基线病毒在高基线VL时（HIV-RNA≥105），AZT组合的病毒抑制率（74%）明显高于TDF组合（57%），差异有统计学意义（P＝0.03）。结论含AZT的治疗方案比TDF治疗方案在短期治疗（4周）具有较高的病毒抑制率，即AZT具有更快速的病毒学应答特性，对指导临床用药合理治疗HIV感染及AIDS有一定意义。

关键词：人类免疫缺陷病毒艾滋病高效抗反转录病毒治疗齐多夫定替诺福韦

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哈尔滨地区男男性行为人群HIV-1感染未治疗者耐药基因变异分析

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国际免疫学杂志 2019年第3期42卷 241-245页

作者：魏相辉张雪莹杨阳王欣欣赵一霖王丽凌虹庄敏哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室 150081 黑龙江省医院感染内科 150036

目的了解2016年至2017年哈尔滨地区男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)流行的人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)的亚型分布及原发耐药流行特点。方法收集哈尔滨市传染病院和哈尔滨医科大学... 详细信息

目的了解2016年至2017年哈尔滨地区男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)流行的人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)的亚型分布及原发耐药流行特点。方法收集哈尔滨市传染病院和哈尔滨医科大学附属第四医院60的新诊断的MSM途径HIV-1感染者未经抗逆转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的外周血样本,提取血浆中RNA,逆转录PCR和巢式PCR扩增HIV-1的gag、pol、int片段并纯化和测序。应用Mega 6.0软件构建系统进化树并分析病毒亚型。利用美国斯坦福大学HIV耐药检测系统分析耐药突变的种类和频率。结果成功获得50条gag基因序列、56条pol基因序列和44条int基因序列。亚型分析结果显示:CRF01_AE、CRF07_BC、B亚型和独特重组型(unique recombinant form,URF)分别占比为59.7%(34/57)、26.3%(15/57)、3.5%(2/57)和10.5%(6/57)。本研究共发现7份(12.5%)样本存在耐药突变,其中针对非核苷类逆转录抑制剂的耐药位点V179D/E/T频率最高为8.75%(5/56),此外还发现蛋白酶抑制剂耐药位点Q58E(1/56)和M46I(1/56)突变。未发现针对核苷类逆转录酶抑制剂和整合酶抑制剂的耐药突变位点。结论哈尔滨地区部分新诊断的MSM途径HIV-1感染者中以CRF01_AE亚型比例最多,其次为CRF07_BC和CRF01_AE与其他亚型重组株,耐药株所占比例较高,未发现整合酶抑制剂耐药突变。

关键词：男男性行为者人类免疫缺陷病毒病毒亚型耐药突变

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乙型肝炎病毒新型治疗方式的研究进展

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国际免疫学杂志 2021年第3期44卷 318-324页

作者：于鑫刘兆基考文萍翟爱霞哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连徳研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江省普通高校感染与免疫科技创新团队哈尔滨150081

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染可以导致严重的肝脏疾病,是肝纤维化、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病死率高的主要原因。尽管已经拥有有效的疫苗,但三联乙肝疫苗的全球覆盖率为84%,未达100%,现有感染人数与新增人... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染可以导致严重的肝脏疾病,是肝纤维化、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病死率高的主要原因。尽管已经拥有有效的疫苗,但三联乙肝疫苗的全球覆盖率为84%,未达100%,现有感染人数与新增人数仍然很多。目前主要的抗HBV药物为核苷/核苷酸类似物(nucleotide analogues,NAs)以及干扰素(interferon,IFN)。但二者对病毒持续存在的根本因素——共价、闭合、环状DNA分子(covalently closed circular DNA,cccDNA)无效,故现有的抗病毒药物并不能彻底治愈HBV感染。HBV的新型治疗方法可以通过靶向cccDNA而使其失效,为治愈慢性HBV感染带来了希望。文章对当前新型治疗方法中研究较多的RNA干扰、基因编辑和表观遗传修饰方法在治疗HBV感染中的作用和新发展进行概述。

关键词：乙型肝炎病毒环状DNA分子 RNA干扰基因编辑表观遗传

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肺炎克雷伯菌临床分离株的庆大霉素耐药性和细菌铁载体的作用

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中国微生态学杂志 2017年第1期29卷 26-29页

作者：董春萍张文莉陈小贝付英梅赵吉子孙锐张凤民哈尔滨医科大学微生物教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学公共卫生学院黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院黑龙江哈尔滨150081

目的研究临床分离的肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素庆大霉素的耐药性与其产铁载体的关系。方法采用K-B纸片法和肉汤稀释法确定70株临床分离的肺炎克雷伯菌对庆大霉素的药物敏感性;CAS琼脂实验检测肺炎克雷伯菌是否产铁载体;紫外可见分... 详细信息

目的研究临床分离的肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素庆大霉素的耐药性与其产铁载体的关系。方法采用K-B纸片法和肉汤稀释法确定70株临床分离的肺炎克雷伯菌对庆大霉素的药物敏感性;CAS琼脂实验检测肺炎克雷伯菌是否产铁载体;紫外可见分光光度法确定细菌产铁载体的量,根据中位数法将70株临床分离菌分为铁载体高产组(35株)和低产组(35株);应用SPSS统计学软件分析抗生素耐药性与其产铁载体是否相关。结果药物敏感性试验检测出菌株对庆大霉素的耐药率为50.00%(35/70);铁载体检测实验确定70株肺炎克雷伯菌均产生铁载体,肺炎克雷伯菌对庆大霉素的耐药性与铁载体产量呈正相关关系(r=0.3154,P<0.05),对庆大霉素耐药菌株铁载体产量明显高于敏感菌株(t=3.1650,P<0.05),且铁载体高产组耐药率及lgMIC值明显高于低产组(x^2=9.6570,t=3.1360,P<0.05)。结论 70株临床分离的肺炎克雷伯菌均产生铁载体,铁载体可能参与肺炎克雷伯菌对庆大霉素的耐药,干扰庆大霉素的抑菌或杀菌过程。

关键词：肺炎克雷伯菌耐药性铁载体

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CVB对OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN信号转导途径的影响

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微生物学杂志 2019年第4期39卷 46-51页

作者：翟爱霞颜冬梅王海萍卜桐崔乐乐考文萍张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连徳研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江省普通高校感染与免疫科技创新团队黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第四医院黑龙江哈尔滨150001

探讨柯萨奇病毒(coxsackievirus, CVB)对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus, BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中I型干扰素(interferon, IFN)、microRNA-155(miR-155)表达以及干扰素调节因子(interferon regulatory factor, IRF)7细胞定位的影响。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞0、2、4、6、12和24 h,qPCR检测I型IFN mRNA和miR-155表达水平。OL细胞和OL/BDV细胞分别转染IRF7-EGFP质粒,CVB感染4 h,观察IRF7细胞定位情况。CVB感染OL细胞2、4、12和24 h,IFN-αmRNA和miR-155表达水平显著增加,IFN-βmRNA表达水平在4、12和24 h显著增加;CVB感染OL/BDV细胞IFN-α和IFN-βmRNA表达水平除0 h均显著增加,但miR-155表达仅在12和24 h显著增加。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞4 h,IRF7绿色荧光蛋白由细胞浆转移至细胞核内。综上所述,CVB可诱导OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN、miR-155的表达,促进IRF7入核,从而激活I型IFN信号转导途径。

关键词：柯萨奇病毒 OL细胞 OL/BDV细胞 I型IFN信号转导途径 microRNA-155

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全人单克隆抗核抗体的制备和鉴定

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国际免疫学杂志 2017年第1期40卷 11-15页

作者：吴静李洋韩秋媛于鑫考文萍宋武琦翟爱霞李玉军李爱梅张庆猛潘超张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省感染与免疫科技创新团队伍连德研究所150081 哈尔滨医科大学附属第三医院放疗科 150081 哈尔滨医科大学附属第二医院重症医学科 150086 大连大学附属中山医院医学检验部 116001

目的本研究旨在从系统性红斑狼疮（systemmiclupuserythematosus，SLE）患者外周血淋巴细胞中获得自身抗体，并从中鉴定筛选出抗核抗体。方法利用人B细胞杂交瘤技术制备SLE患者来源的全人单克隆自身抗体，采用酶联免疫吸附实验（enzyme-... 详细信息

目的本研究旨在从系统性红斑狼疮（systemmiclupuserythematosus，SLE）患者外周血淋巴细胞中获得自身抗体，并从中鉴定筛选出抗核抗体。方法利用人B细胞杂交瘤技术制备SLE患者来源的全人单克隆自身抗体，采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linkedimmunosorbenkassay，ELISA）方法测定阳性杂交瘤细胞上清抗体浓度，并以HEp-2细胞为底物，采用间接免疫荧光法鉴定筛选出抗核抗体。结果共获得48株稳定分泌IgG型全人单克隆自身抗体的杂交瘤细胞株，其中12种细胞上清抗体浓度大于1500ng／mL，占25％，通过免疫荧光鉴定从中筛选出3种抗核抗体，荧光核型分别为周边型、斑点型和核仁型。结论全人单克隆自身抗体的制备及抗核抗体的筛选鉴定，为开发新型单克隆抗体药物以及研究SLE的致病机制奠定了良好的实验基础。

关键词：系统性红斑狼疮自身抗体抗核抗体人B细胞杂交瘤技术

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单克隆抗体及其抗感染作用的研究进展

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微生物学杂志 2020年第2期40卷 87-92页

作者：崔乐乐卜桐刘兆基张涵旭史雨井雯雯李爱梅考文萍翟爱霞哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连徳研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江省普通高校感染与免疫科技创新团队黑龙江哈尔滨150081

骨髓瘤细胞和单个B细胞可融合形成杂交瘤细胞,这种细胞分离并克隆后可产生针对单一表位,且结构和功能相同的抗体,即单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)。单克隆抗体发展历程经历了四个阶段。其制备技术也在不断革新与发展。目前单克... 详细信息

骨髓瘤细胞和单个B细胞可融合形成杂交瘤细胞,这种细胞分离并克隆后可产生针对单一表位,且结构和功能相同的抗体,即单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)。单克隆抗体发展历程经历了四个阶段。其制备技术也在不断革新与发展。目前单克隆抗体技术发展日益成熟,在疾病治疗与诊断中发挥着关键的作用。单克隆抗体与天然抗体不同,具有效价高、特异性强、交叉反应少、可大量制备,靶向性高等特点。mAb可用于诊断及治疗感染性疾病、自身免疫病以及癌症等。对mAb的发展历程及mAb在抗感染性疾病中的应用进行简要阐述。

关键词：抗体单克隆抗体全人源单克隆抗体抗感染感染性疾病

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