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黑龙江医学 2013年第12期37卷 1158-1159页

作者：吕昕张伟华哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江哈尔滨150081 黑龙江护理高等专科学校黑龙江哈尔滨150086

目的研究外源性硫化氢(H2S)影响链脲佐菌素(STZ)诱导的I型糖尿病大鼠心肌纤维化的作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg/kg)的方法建立大鼠糖尿病模型,以血糖>16.7 mmol/L为造模成功的标准。将大鼠随机分为对照组和糖尿病组... 详细信息

目的研究外源性硫化氢(H2S)影响链脲佐菌素(STZ)诱导的I型糖尿病大鼠心肌纤维化的作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg/kg)的方法建立大鼠糖尿病模型,以血糖>16.7 mmol/L为造模成功的标准。将大鼠随机分为对照组和糖尿病组。通过超声心动仪检测大鼠心脏的收缩和舒张功能;HE、Masson和TUNEL染色观察大鼠心肌的变化。结果腹腔注射STZ可以成功复制大鼠糖尿病的动物模型;心肌结构破坏,纤维结构增多;出现心脏收缩和舒张功能障碍(FS)、射血分数(EF)下降、收缩末期容积(ESV)升高;二尖瓣E峰升高和舒张速率E'降低;凋亡率升高。与糖尿病组相比,给予外源性NaHS上述指标的变化均有显著改善。结论 H2S通过预防糖尿病心肌纤维化,从而起到心肌保护的作用。

关键词：糖尿病心肌纤维化硫化氢心肌保护

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Lon蛋白酶介导的氧敏感性线粒体CBS积累

Lon蛋白酶介导的氧敏感性线粒体CBS积累

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中国病理生理学会心血管专业委员会第十五届学术大会暨国际心脏研究会中国分会第十二届学术大会

作者：滕华健吴博赵克新杨广东吴凌云王睿湖首大学生理学系加拿大安大略省桑德贝市P7B 5E1 湖首大学生理学系加拿大安大略省桑德贝市P7B 5E1 哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江哈尔滨150081 湖首大学运动学院加拿大安大略省桑德贝市P7B 5E1 湖首大学健康科学系加拿大安大略省桑德贝市P7B 5E1 加拿大桑德贝地方研究所P7A 7T1

目的:胱硫醚β-合成酶(CBS)作为哺乳动物体内核编码蛋白,含有血红素辅基,是半胱氨酸代谢和硫化氢(H2S)生成的关键酶.线粒体中CBS蛋白水平与线粒体功能关系目前不清,本课题旨在研究线粒体中CBS/H2S水平与线粒体功能关系.方法:Western blo...

目的:胱硫醚β-合成酶(CBS)作为哺乳动物体内核编码蛋白,含有血红素辅基,是半胱氨酸代谢和硫化氢(H2S)生成的关键酶.线粒体中CBS蛋白水平与线粒体功能关系目前不清,本课题旨在研究线粒体中CBS/H2S水平与线粒体功能关系.方法:Western blotting检测常氧和缺氧状态下线粒体中CBS蛋白水平.基因过表达和基因沉默技术分析CBS蛋白稳定性调节机制.线粒体离体孵育技术检测CBS/H2S与Ca2+诱导的线粒体损伤关系.

关键词：

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The polyamine homeostasis disbalance in cardiovascular system and protection

The polyamine homeostasis disbalance in cardiovascular syste...

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第九届海峡两岸心血管科学研讨会暨首届台湾南部国际心脑血管科学研讨会

作者：徐长庆赵雅君林岩韩丽萍白淑芝李宏霞哈尔滨医科大学病理生理教研室

目的:揭示多胺（腐胺、精咪和精胺）稳态失衡在心血管系统疾病中的作用、机制及其保护。方法:用大鼠在体、离体心脏和心肌细胞复制相关疾病模型,采用分子生物学、激光共聚焦、流式细胞仪、高效液谱、膜片钳及电镜等手段开展相关研究。结... 详细信息

目的:揭示多胺（腐胺、精咪和精胺）稳态失衡在心血管系统疾病中的作用、机制及其保护。方法:用大鼠在体、离体心脏和心肌细胞复制相关疾病模型,采用分子生物学、激光共聚焦、流式细胞仪、高效液谱、膜片钳及电镜等手段开展相关研究。结果:（1）精胺是钙敏感受体（CaSR）的激动剂,其浓度增加可通过CaSR-G蛋白-PLC-IP3途径引起心肌细胞内钙([Ca]i)增加,引起细胞内钙超载和细胞凋亡。（2）急性心肌缺血可诱发多胺应激反应;心肌缺血-再灌注时多胺代谢关键酶ODC和SSAT表达增加、活性增强,多胺总代谢池减小,腐胺增多,精咪、精胺明显减少,该紊乱与L-arg/NO通路上调有关,是心肌缺血/再灌注损伤的机制之一。（3）低浓度外源性精胺对心肌缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制与抗氧化、清除自由基、减轻细胞内钙超载（抑制L-钙通道）及抑制细胞凋亡（抑制Fas死亡受体途径）有关。（4）异丙肾上腺素（IS0）所致的大鼠心肌肥厚,心肌多胺含量增加和ODC、SSAT表达增强,下调多胺代谢可抑制心肌肥厚,其机制与[Ca]i和NO/PKG-Ⅰ通路密切相关。（5）缺血预适应（IPC）可上调成年大鼠心肌多胺代谢（ODC表达增加,总多胺池增加）;内源性ODC/多胺系统参与IPC介导的心肌保护作用与PKC、Erk1/2及PI3K/Akt信号转导通路的激活、清除自由基、降低细胞内钙、抑制线粒体膜电位下降和通透转运孔（mPTP）开放有关。（6）老年大鼠心肌多胺代谢下调,导致对IPC和缺血后适应（PC）心肌保护作用的敏感性降低,运动和适当补充外源性精胺可恢复敏感性。（7）糖尿病心肌病大鼠CaSR表达降低,外源性精胺可预防或减轻心肌损伤。结论:多胺稳态对心血管系统非常重要,其失衡参与了心肌缺血再灌注损伤、心肌肥大、对IPC和PC敏感性降低的发生,有望成为心血管疾病防治的新靶点。

关键词：多胺代谢 IPC ODC 清除自由基细胞内钙 The polyamine homeostasis disbalance in cardiovascular system and protection 心肌保护作用

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精胺预处理对离体灌流大鼠心肌缺血/再灌注损伤及细胞凋亡的影响

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中国药理学通报 2012年第8期28卷 1135-1140页

作者：赵雅君王艳丽杜丽娟孙智睿张伟华王丽娜薛过王伟伟张昊张力哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨精胺预处理对离体灌流大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及其可能的抗凋亡作用。方法应用Langehdorff离体灌流大鼠心脏复制模拟心肌缺血/再灌注损伤模型。24只大鼠随机分为3组,每组8只:对照组(Con-trol)、缺血/再灌注组(IR)、精胺... 详细信息

目的探讨精胺预处理对离体灌流大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及其可能的抗凋亡作用。方法应用Langehdorff离体灌流大鼠心脏复制模拟心肌缺血/再灌注损伤模型。24只大鼠随机分为3组,每组8只:对照组(Con-trol)、缺血/再灌注组(IR)、精胺干预组(Spermine)。比色法测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及心肌丙二醛(MDA)含量;多导生理记录系统记录心脏功能;HE染色光镜下观察心肌形态学变化;三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死面积;透射电镜和TUNEL方法检测细胞凋亡;免疫组化检测心肌Fas与Bcl-2蛋白的表达。结果 (1)与对照组比,IR组冠脉LDH漏出明显增多、心肌组织中MDA水平增加、SOD活性降低(P<0.01);心功能明显下降(LVDP,HR,CF均低于对照组,P<0.05);光镜下可见心肌细胞呈凝固性或带状坏死。与Control组比,IR组心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率明显增加(P<0.01);心肌Fas蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调。透射电镜下心肌细胞核染色质浓缩、凝聚且边集,染色质在核膜周边聚集形成新月形,线粒体嵴排列紊乱。(2)与IR组比,Spermine组冠脉LDH漏出减少,心肌组织中MDA减少,SOD增加(P<0.01);心功能有明显改善(LVDP,HR,CF均明显高于IR组,P<0.05);光镜下心肌细胞结构清晰。Spermine组与IR组比心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率均明显降低(P<0.01);心肌Fas蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调;电镜下可见心肌肌节结构清晰,线粒体嵴完整、基质致密,未见核染色质凝聚。结论外源性精胺能明显减轻离体灌流大鼠心肌缺血/再灌注损伤,其机制可能与精胺抑制细胞凋亡有关。

关键词：精胺缺血/再灌注心脏坏死凋亡 Fas Bcl-2 大鼠

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HYDROXYL ACETYLATION CURCUMIN-MEDIATED PHOTODYNAMIC EFFECTS ON THP-1 CELL-DERIVED MACROPHAGES

HYDROXYL ACETYLATION CURCUMIN-MEDIATED PHOTODYNAMIC EFFECTS ...

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第九届海峡两岸心血管科学研讨会暨首届台湾南部国际心脑血管科学研讨会

作者：杨力明郑龙彬谢宇孙文杰田野哈尔滨医科大学病理生理学教研室

Photodynamic therapy(PDT) is a new treatment for atherosclerosis through photosensilizer-produced reactive oxygen *** are well known to contribute to atherosclerotic lesion and induction of macrophage apoptosis regionally would be expected to inhibit *** evaluated the effect of PDT on THP-1 cell line derived macrophages by hydroxyl acetylation *** of hydroxyl acetylation curcumin by macrophages was determined by laser scanning confocal microscope(LSCM).The effect of PDT on the survival rate of macrophages was determined by MTT viability *** was detected by TEM and JC-1 staining for mitochondrial membrane *** cultured with hydroxyl acetylation curcumin at 5μg/ml,LSCM revealed uptake by macrophages of hydroxyl acetylation curcumin with intracellular concentration increasing with incubation time reaching the peak value at 4 ***

关键词： THP PDT HYDROXYL ACETYLATION CURCUMIN-MEDIATED PHOTODYNAMIC EFFECTS ON THP-1 CELL-DERIVED MACROPHAGES

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SHP-2对人胃癌细胞克隆增殖的影响

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中国药理学通报 2012年第1期28卷 106-109页

作者：汪钊张丽景侯媛媛徐长庆田野张力哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究SHP-2对人胃癌细胞SGC-7901细胞克隆增殖的影响。方法采用重组腺病毒Ad-GFP(GFP)、Ad-GFP-SHP-2(WT)转染SGC-7901细胞;采用蛋白印迹技术(Western blot)检测SHP-2蛋白的表达;同时进行集落形成实验检测SGC-7901细胞克隆形成能力... 详细信息

目的研究SHP-2对人胃癌细胞SGC-7901细胞克隆增殖的影响。方法采用重组腺病毒Ad-GFP(GFP)、Ad-GFP-SHP-2(WT)转染SGC-7901细胞;采用蛋白印迹技术(Western blot)检测SHP-2蛋白的表达;同时进行集落形成实验检测SGC-7901细胞克隆形成能力。另外,观察SHP-2抑制剂NSC-87877作用后,对SGC-7901集落形成的影响。结果当胃癌细胞感染复数为150时,转染成功的细胞数占总细胞数的0.9。WT组SHP-2蛋白过表达。WT组的平板克隆数明显高于SGC-7901亲本细胞组(Control 1)和GFP组,P<0.05。SHP-2抑制剂组(NSC-87877)的平板克隆数及软琼脂克隆数分别明显低于SGC-7901亲本细胞组(Control2),P<0.05。结论 SHP-2对SGC-7901细胞克隆增殖有明显促进作用。

关键词： SHP-2 SGC-7901细胞细胞增殖 NSC-87877 平板克隆软琼脂克隆

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蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞增殖的影响

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中国病理生理杂志 2012年第2期28卷 244-248页

作者：张丽景金成艳王果元吴博李全凤徐长庆田野张力哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:探讨含有Src同源结构域2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology 2 domain-containing pro-tein tyrosine phosphatase 2,SHP-2)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激的心肌成纤维细胞(cardiac fi-broblasts,CFs)增殖的作用。方法:差速贴壁法体外培养心肌成纤维细胞,以波形蛋白(vimentin)鉴定CFs纯度;MTT法检测AngⅡ作用下心肌成纤维细胞增殖率,采用重组腺病毒过表达SHP-2和SHP-2抑制剂NSC-87877分别对AngⅡ作用下的细胞增殖的影响。结果:AngⅡ对CFs增殖的促进作用有剂量依赖性,其促进细胞增殖的最高浓度为10-7mol/L;在AngⅡ的刺激下,SHP-2可以促进心肌成纤维细胞增殖,并且突变体组比野生型组增殖更明显(P<0.01)。SHP-2抑制剂NSC-87877达到50μmol/L时可以明显抑制AngⅡ刺激下的CFs增殖。结论:AngⅡ的促CFs增殖作用是通过SHP-2调控的。

关键词：含有Src同源结构域2的蛋白酪氨酸磷酸酶2 心肌成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 细胞增殖

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磷酸化ERK1/2在6-OHDA致PC12细胞损伤中的作用

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中国老年学杂志 2012年第15期32卷 3244-3246页

作者：李静张一娜范鹰马兰姜礼红崔璨吴博哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学病理生理教研室

目的观察细胞外信号调节激酶(ERK1/2)在6-OHDA致PC12细胞损伤的帕金森(PD)细胞模型中所起的作用。方法 6-OHDA处理体外培养的PC12细胞株,建立PD细胞模型。MTT法检测6-OHDA对PC12细胞活力的影响,免疫印迹法研究p-ERK1/2蛋白表达随时间变... 详细信息

目的观察细胞外信号调节激酶(ERK1/2)在6-OHDA致PC12细胞损伤的帕金森(PD)细胞模型中所起的作用。方法 6-OHDA处理体外培养的PC12细胞株,建立PD细胞模型。MTT法检测6-OHDA对PC12细胞活力的影响,免疫印迹法研究p-ERK1/2蛋白表达随时间变化的趋势,并检测ERK1/2上游激酶抑制剂PD98059和U0126对6-OHDA诱导ERK1/2磷酸化及凋亡的影响。结果 PC12细胞随6-OHDA作用时间的增加,p-ERK1/2出现表达升高;PD98059和U0126明显抑制6-OHDA所致的ERK1/2磷酸化,明显减低了细胞损伤的程度。结论在6-OHDA介导的多巴胺神经元损伤中呈现ERK1/2磷酸化,抑制ERK1/2可以6-OHDA引起的PC12细胞损伤,该过程可能在调控PD多巴胺能细胞损伤中起重要作用。

关键词： PC12细胞 PD98059 U0126 帕金森病 ERK1/2

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FAP对体外内皮细胞增殖及其小管形成的影响

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哈尔滨医科大学学报 2012年第1期46卷 10-13,18页

作者：朱琳张宁代海丽邵洪江赵艳靳占峰哈尔滨医科大学病理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学法医学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在体外对内皮细胞的增殖和小管形成的影响。方法应用不同浓度FAP(0、300、600、1 200 pmol/L)处理人脐静脉内皮细胞***926,采用MTT检测内皮细胞增殖,划痕愈合实验分析细... 详细信息

目的探讨成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在体外对内皮细胞的增殖和小管形成的影响。方法应用不同浓度FAP(0、300、600、1 200 pmol/L)处理人脐静脉内皮细胞***926,采用MTT检测内皮细胞增殖,划痕愈合实验分析细胞迁移并使用三维胶模型研究内皮细胞的小管形成。结果与正常对照组相比,FAP可以诱导内皮细胞迁移和增殖(P<0.05),并促进内皮细胞小管形成(P<0.01),其中600 pmol/L浓度的FAP处理组作用较其他组明显增强(P<0.01)。结论 FAP在体外可促进人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。此发现为进一步研究FAP在血管生成中的机制提供了理论基础。

关键词：内皮细胞成纤维细胞激活蛋白 MTT 划痕实验小管形成

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心衰大鼠心肌β_3肾上腺素能受体和内皮型一氧化氮合酶的表达

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哈尔滨医科大学学报 2012年第2期46卷 99-103,F0004页

作者：冷晓宁贾静王蕾红董世云钟鑫徐长庆卢方浩张伟华哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的检测从心肌肥大到心力衰竭的发展过程中大鼠心脏β3肾上腺素能受体(β3-adrenergicreceptor,β3-AR)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达水平的变化,为临床治疗心力衰竭提供新思路。方法成年雄性Wis... 详细信息

目的检测从心肌肥大到心力衰竭的发展过程中大鼠心脏β3肾上腺素能受体(β3-adrenergicreceptor,β3-AR)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达水平的变化,为临床治疗心力衰竭提供新思路。方法成年雄性Wistar大鼠80只,随机分为正常对照组(n=10),模型组(n=70)。采用皮下注射盐酸异丙肾上腺素(170 ***-1.d-1×4d)制备大鼠心力衰竭模型。存活的模型组大鼠分为心肌肥大1周组(myocardial hypertrophy 1 week group,MH1w),心肌肥大2周组(myocar-dial hypertrophy 2 week group,MH2w),心肌肥大3周组(myocardial hypertrophy 3 week group,MH3w),心肌肥大4周组(myocardial hypertrophy 4 week group,MH4w)和心力衰竭组(heart failure group,HF)。第1、2、3、4、6周末分别应用超声心动图检测各组大鼠左心室功能,确定模型制备成功。取大鼠心脏组织,透射电子显微镜观察心肌超微结构变化。TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测心肌细胞凋亡情况。West-ern blot检测β3-AR和eNOS等相关蛋白的表达。结果与对照组比较,心力衰竭组大鼠射血分数(leftventricular ejection fraction,LVEF)明显降低(P<0.01);注射盐酸异丙肾上腺素1周后,左室后壁舒张期厚度(left ventricular posterior wall dimensions,LVPWd)明显增加,3周后LVPWd开始下降,4周后LVPWd接近正常水平;心肌细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05);β3-AR和eNOS表达逐渐增加(P<0.05)。结论大鼠心力衰竭发展过程中β3-AR和eNOS表达显著增加,这可能为临床治疗心肌肥大和心力衰竭提供新的药物作用靶点。

关键词：盐酸异丙肾上腺素心肌肥大心力衰竭 β3肾上腺素能受体内皮型一氧化氮合酶

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