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工业卫生与职业病 2024年第2期50卷 141-145页

作者：杨士宽李丽娜张童高影张丹吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究硫酸镍(NiSO_(4))对人支气管上皮细胞(Beas-2B)的毒作用及损伤机制,并探讨Wnt/β-catenin通路在损伤中的作用。方法选择不同浓度硫酸镍(0、50、100、200μmol/L)处理Beas-2B细胞24 h,CCK-8法检测硫酸镍的细胞毒性;使用丙二醛... 详细信息

目的研究硫酸镍(NiSO_(4))对人支气管上皮细胞(Beas-2B)的毒作用及损伤机制,并探讨Wnt/β-catenin通路在损伤中的作用。方法选择不同浓度硫酸镍(0、50、100、200μmol/L)处理Beas-2B细胞24 h,CCK-8法检测硫酸镍的细胞毒性;使用丙二醛和总铁离子检测试剂盒检测细胞内丙二醛、总铁离子含量;使用免疫印迹法(Western blot)检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白Wnt3a、β-catenin和铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、胱氨酸/谷氨酸反转运蛋白(xCT)以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)表达水平;通路抑制剂XAV-939处理Beas-2B细胞后100μmol/L硫酸镍染毒24 h,检测GPX4、xCT表达水平。结果 Beas-2B细胞存活率随着硫酸镍浓度的升高而降低(F=12.530,P<0.05);丙二醛和总铁离子含量下降,Wnt3a、β-catenin表达逐渐增加(F=9.209、3.936、7.639、23.350,P<0.05), GPX4、xCT表达增加,Bax表达逐渐增加和Bcl-2表达逐渐降低(F=6.903、17.76、52.930、14.460,P<0.05);与100μmol/L染毒组比较,XAV-939处理组Beas-2B细胞中Wnt3a、β-catenin、GPX4和xCT表达均降低(t=8.055、8.049、9.659、11.700,P<0.05)。结论体外实验硫酸镍可诱导Beas-2B细胞凋亡的同时可能通过激活Wnt/β-catenin通路抑制细胞铁死亡。

关键词：硫酸镍 Wnt/β-catenin通路铁死亡凋亡

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高尔基体磷蛋白3在镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞炎性损伤中的作用

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中国工业医学杂志 2023年第2期36卷 105-110页

作者：张丹高影句立言张童陈阳阳姚文学杨士宽李丽娜吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨高尔基体磷蛋白3(golgiosomal phosphoprotein 3,GOLPH3)调控JAK2/STAT3信号通路在镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞(Beas-2B)炎性损伤中的作用。方法采用不同浓度镍精炼烟尘(0.00、12.50、25.00、50.00μg/ml)处理Beas-2B细胞24 h,使用CCK8法检测细胞存活率;采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)法检测GOLPH3及JAK2/STAT3信号通路蛋白JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和炎性效应蛋白NLRP3、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。使用siRNA转染沉默GOLPH3,采用WB法检测GOLPH3、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平;使用JAK2/STAT3通路抑制剂AG490抑制该信号通路,采用WB法检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平。结果随着镍精炼烟尘染毒浓度增加,Beas-2B细胞存活率显著降低(P<0.05);GOLPH3、p-JAK2、p-STAT3、NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平呈逐渐升高趋势(P<0.05);与si-对照组相比,si-GOLPH3组Beas-2B细胞中GOLPH3、p-JAK2、p-STAT3和NLRP3、IL-18、TNF-α表达均降低(P<0.05);与二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组相比较,AG490组Beas-2B细胞中p-JAK2、p-STAT3和NLRP3、IL-18、TNF-α表达均降低(P<0.05)。结论镍精炼烟尘可通过激活GOLPH3调控JAK2/STAT3信号通路,诱导Beas-2B细胞发生炎性损伤。

关键词：镍精炼烟尘炎症 JAK2/STAT3 细胞毒性

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镍精炼烟尘激活Wnt/β-catenin通路诱导人支气管上皮细胞Warburg效应的研究

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中国工业医学杂志 2022年第5期35卷 393-397页

作者：高影张童张丹陈阳阳姚文学杨世宽李丽娜吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨Wnt/β-catenin通路在镍精炼烟尘诱导人支气管上皮(Beas-2B)细胞产生Warburg效应过程中的作用。方法采用不同浓度镍精炼烟尘(0、12.5、25.0、50.0μg/ml)处理Beas-2B细胞24 h,通过CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性,使用乳酸... 详细信息

目的探讨Wnt/β-catenin通路在镍精炼烟尘诱导人支气管上皮(Beas-2B)细胞产生Warburg效应过程中的作用。方法采用不同浓度镍精炼烟尘(0、12.5、25.0、50.0μg/ml)处理Beas-2B细胞24 h,通过CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性,使用乳酸试剂盒检测乳酸分泌量,使用免疫印迹法(Western blot)检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和Warburg效应相关蛋白丙酮酸脱氢酶激酶1(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)、单羧酸乳酸转运体1(monocarborxylat transporter 1,MCT1)和乳酸脱氢酶激酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的表达水平。采用通路抑制剂XAV-939处理Beas-2B后以25.0μg/ml镍精炼烟尘染毒24 h,检测Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平。结果与对照组相比,镍精炼烟尘染毒组Beas-2B细胞的相对存活率明显降低,乳酸生成量随着镍精炼烟尘暴露浓度增加而升高(P<0.05),β-catenin及Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平均见增高且呈剂量依赖关系;Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV-939可以抑制Warburg效应相关蛋白的表达(P<0.05)。结论镍精炼烟尘可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路诱导Beas-2B细胞产生Warburg效应,从而将正常的线粒体氧化磷酸化转变为有氧糖酵解的能量代谢方式,并可能诱导癌症的发生。

关键词：镍精炼烟尘 Wnt/β-catenin通路 Warburg效应

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二甲双胍对镍精炼烟尘诱导Beas-2B细胞炎性损伤的干预作用

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工业卫生与职业病 2022年第2期48卷 92-96页

作者：陈阳阳张童王玥王声远张丹高影吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江150081

目的研究镍精炼烟尘对人正常肺上皮(Beas-2B)细胞的毒作用及炎性损伤,并探讨二甲双胍是否对其具有保护作用。方法 CCK-8法检测Beas-2B细胞活力;Western blot法检测不同浓度镍精炼烟尘(0.00、 6.25、 12.50和25.00μg/ml)和二甲双胍干预... 详细信息

目的研究镍精炼烟尘对人正常肺上皮(Beas-2B)细胞的毒作用及炎性损伤,并探讨二甲双胍是否对其具有保护作用。方法 CCK-8法检测Beas-2B细胞活力;Western blot法检测不同浓度镍精炼烟尘(0.00、 6.25、 12.50和25.00μg/ml)和二甲双胍干预后Beas-2B细胞炎症相关蛋白NLRP3、IL-1β和TNF-α表达水平。结果 Beas-2B细胞存活率随着镍精炼烟尘浓度的增加而降低(F=156.7,P<0.05)。与对照组相比,不同浓度镍精炼烟尘处理细胞后炎症相关蛋白NLRP3、 IL-1β和TNF-α表达水平显著升高,且随着镍精炼烟尘浓度升高,表达水平呈一定的剂量反应关系(F=206.9、158.9、294.0,P<0.05)。不同浓度二甲双胍均可提高镍精炼烟尘暴露后细胞的相对活力,5 mmol/L二甲双胍的保护作用最为显著(F=163.7,P<0.05)。与对照组相比,25.00μg/ml镍精炼烟尘染毒组NLRP3、 IL-1β和TNF-α蛋白表达水平显著升高。与25.00μg/ml镍精炼烟尘染毒组相比,二甲双胍预处理显著降低NLRP3、 IL-1β和TNF-α蛋白表达水平(F=81.03、45.79、299.7,P<0.05)。结论二甲双胍对镍精炼烟尘诱导的Beas-2B细胞炎性损伤起到一定保护作用。

关键词：镍精炼烟尘炎性损伤二甲双胍 Beas-2B细胞实验研究

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苯胺的健康效应研究进展

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中华预防医学杂志 2020年第2期54卷 213-218页

作者：冯越陈丽丽张童吴永会宋莉王玥哈尔滨医科大学公共卫生学院 150086 哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室 150086 黑龙江省劳动卫生职业病研究院职业中毒科哈尔滨150010

苯胺是人们日常生活及化工工业中重要的化工原料之一,可经完整皮肤,呼吸道及消化道进入人体,对人体多个系统均能造成损害,包括对血液、肝脏和脾脏的毒性或致癌性。本文阐述了苯胺对人体的健康的直接影响及苯胺通过环境的污染对人体健康... 详细信息

苯胺是人们日常生活及化工工业中重要的化工原料之一,可经完整皮肤,呼吸道及消化道进入人体,对人体多个系统均能造成损害,包括对血液、肝脏和脾脏的毒性或致癌性。本文阐述了苯胺对人体的健康的直接影响及苯胺通过环境的污染对人体健康产生的间接危害,并对苯胺导致健康危害将来研究的方向进行了展望。

关键词：苯胺化合物危害物质研究进展

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高尔基体磷蛋白3在镍精炼烟尘致 Beas-2B细胞损伤中的作用

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中国工业医学杂志 2021年第2期34卷 132-134页

作者：辛野王声远王玥王芮辛芮张童吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江哈尔滨150081

为探讨镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞(Beas-2B)损伤过程中高尔基体磷蛋白3(golgiosomal phosphoproteinⅢ,GOLPH3)表达的变化,采用0、6.25、12.50、25.00μg/ml的镍精炼烟尘混悬液处理Beas-2B细胞24 h,以免疫印迹法检测GOLPH3、缺氧诱... 详细信息

为探讨镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞(Beas-2B)损伤过程中高尔基体磷蛋白3(golgiosomal phosphoproteinⅢ,GOLPH3)表达的变化,采用0、6.25、12.50、25.00μg/ml的镍精炼烟尘混悬液处理Beas-2B细胞24 h,以免疫印迹法检测GOLPH3、缺氧诱导因子(HIF-1α)、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、磷酸化蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)的蛋白表达水平。结果表明,随着染毒浓度的增大,GOLPH3、HIF-1α、PI3K、p-AKT表达量随之增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。提示GOLPH3表达增加可能在镍精炼烟尘致Beas-2B细胞损伤中具有一定的作用。

关键词：镍精炼烟尘高尔基体磷蛋白3(GOLPH3) 细胞毒性

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纳米镍致人支气管上皮细胞衰老机制的研究

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工业卫生与职业病 2025年第2期51卷 114-119页

作者：吕俊杰齐鸿清徐志威于瀚浓孙倩倩伍睿泽吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江150081

目的通过体外实验研究纳米镍造成人支气管上皮细胞(Beas-2B细胞)衰老的机制,并对腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine 5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK)、默信息调节因子1,(Sirtiun1,SIRTl)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)调控作用进行探讨。方法用不同浓度纳米镍(0、20、40、80μmol/L)染人支气管上皮细胞24 h,通过CCK-8法检测细胞存活率来印证纳米镍的细胞毒作用;使用流式细胞术观察细胞周期变化;使用免疫印迹法(Western blot)检测AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路蛋白AMPK、p-AMPK、SIRT1、NF-κB和细胞衰老相关多重肿瘤抑制基因(multiple tumor suppressor l,MTS1,P16)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(cyclin dependent kinase inhibitor1A,P21)的表达情况;通路瞬时转染技术处理Beas-2B细胞后80μmol/L纳米镍处理24 h,检测通路相关蛋白及效应蛋白表达水平变化。结果Beas-2B细胞存活率随着纳米镍浓度的升高而降低;静止期/DNA合成前期(G0/G1)期细胞比例增加,早期衰老细胞增多;AMPK、SIRT1表达逐渐降低,NF-κB表达逐渐升高,P16、P21表达增加;转染组过表达AMPK组与80μmol/L处理组比较,过表达组Beas-2B细胞中AMPK、SIRT1表达升高,NF-κB表达降低,P16、P21表达降低。结论AMPK/SIRT1/NF-κB通路在体外实验纳米镍诱导Beas-2B细胞发生衰老发挥调控作用。

关键词：纳米镍 AMPK/SIRT1/NF-κB通路衰老细胞周期

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镍精炼烟尘对Beas-2B细胞Warburg效应影响的实验研究

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中国工业医学杂志 2020年第2期33卷 148-150页

作者：王芮王声远王玥辛芮辛野张童吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江哈尔滨150081

将镍精炼烟尘配制成终浓度分别为000、2500、5000、10000μg/ml的混悬液,处理人支气管上皮(Beas-2B)细胞24 h。通过CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性;使用免疫印迹法(Western blot)检测Warburg效应相关蛋白HK2、PKM2和LDHA的蛋白表达水... 详细信息

将镍精炼烟尘配制成终浓度分别为000、2500、5000、10000μg/ml的混悬液,处理人支气管上皮(Beas-2B)细胞24 h。通过CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性;使用免疫印迹法(Western blot)检测Warburg效应相关蛋白HK2、PKM2和LDHA的蛋白表达水平。结果显示,不同浓度染毒组Beas-2B细胞的相对存活率分别为7020%、5401%、3428%,随着镍精炼烟尘浓度增高而降低,差异均具有统计学意义(P<005)。与对照组相比,各染毒组Warburg效应相关蛋白HK2、PKM2和LDHA表达水平均增高,且随染毒浓度的增加而增加,差异有统计学意义(P<005)。提示镍精炼烟尘可以诱导Beas-2B细胞的Warburg效应增强,改变细胞的能量代谢方式,最终可能诱发癌症。

关键词：镍精炼烟尘细胞毒性 Warburg效应

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苯胺生产企业职业危害因素分析

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中国工业医学杂志 2020年第6期33卷 541-543页

作者：邹之雄于静杨颖陈丽丽金硕王玥哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室黑龙江哈尔滨150081 黑龙江省劳动安全科学技术研究中心

采用职业卫生现场调查、职业病危害因素检测等方法对某苯胺生产企业进行职业病危害因素检测。结果显示,该企业可能存在的职业病危害因素有煤尘、矽尘、苯胺、一氧化氮、二氧化氮、硫化氢、氨、苯及噪声。除空压机巡检工接触噪声声级超... 详细信息

采用职业卫生现场调查、职业病危害因素检测等方法对某苯胺生产企业进行职业病危害因素检测。结果显示,该企业可能存在的职业病危害因素有煤尘、矽尘、苯胺、一氧化氮、二氧化氮、硫化氢、氨、苯及噪声。除空压机巡检工接触噪声声级超过国家卫生标准,其他工种接触职业病危害因素均符合国家卫生标准。该企业采取的各种职业病危害防护措施总体有效,职业病危害因素可以预防和控制。

关键词：苯胺噪声职业病危害

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镍精炼烟尘对NIH/3T3细胞凋亡及TNF-α、VEGF表达的影响

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中国工业医学杂志 2019年第4期32卷 305-306,337页

作者：李吉平夏冰秦汝男王玥吴永会哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室

以镍精炼烟尘染毒,测定细胞的增殖率和凋亡率,检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平。与对照组比较,各染毒剂量组细胞生长增殖率明显降低,细胞凋亡率、TNF-α、VEGF蛋白表达水平明显增加,差异有统计... 详细信息

以镍精炼烟尘染毒,测定细胞的增殖率和凋亡率,检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平。与对照组比较,各染毒剂量组细胞生长增殖率明显降低,细胞凋亡率、TNF-α、VEGF蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。提示镍精炼烟尘可以引发细胞炎症反应,并诱导细胞凋亡。

关键词：镍精炼烟尘细胞凋亡肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 血管内皮生长因子(VEGF)

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