为了制备禽戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)衣壳蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的重组蛋白ORF2-1作为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了抗ORF2-1蛋白的杂交瘤细胞。同时利用该蛋白建立的间接ELISA方法对杂...
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为了制备禽戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)衣壳蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的重组蛋白ORF2-1作为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了抗ORF2-1蛋白的杂交瘤细胞。同时利用该蛋白建立的间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选,获得了6株稳定分泌抗ORF2-1抗体的杂交瘤细胞株,命名为7H12,3E8,1B5,1H5,3A1和6G8。同时为了鉴定6株MAb的抗原表位,以ORF2-1为模板,克隆、表达和纯化了8段不同长度部分重叠的ORF2蛋白为ORF2-2~ORF2-9,利用该8段蛋白和实验室合成的针对ORF2蛋白的8个多肽作为包被抗原,间接ELISA检测了6株MAb,结果发现7H12,1H5,3A1和6G8分别识别aa339~355,aa384~414,aa389~398和aa510~516 4个不同的抗原表位区;3E8和1B5可能识别相互重叠的两个抗原表位位于aa355~384之间。这些MAb的获得有助于对禽HEV的深入研究。
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