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中国生物制品学杂志 2008年第11期21卷 929-932页

作者：史立军王菁华徐克达曹振远孙博王广友王丹丹孔庆飞李呼伦哈尔滨医科大学附属第一医院哈尔滨150001 哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨医科大学神经生物省重点实验室哈尔滨150081 黑龙江省双鸭山煤炭总医院消化内科双鸭山155100

目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠肝纤维化细胞(CFSCs)凋亡的影响。方法常规培养BMSCs、CFSCs和大鼠肝细胞系BRL,并双层共培养CFSCs与BMSCs。用ELISA方法检测BMSCs培养上清中NGF、HGF和TGF-β1的浓度;RT-PCR检测与BMSCs共培养的CFSC... 详细信息

目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠肝纤维化细胞(CFSCs)凋亡的影响。方法常规培养BMSCs、CFSCs和大鼠肝细胞系BRL,并双层共培养CFSCs与BMSCs。用ELISA方法检测BMSCs培养上清中NGF、HGF和TGF-β1的浓度;RT-PCR检测与BMSCs共培养的CFSCs及BRL的p75表达;TUNEL法检测BMSCs分泌的细胞因子封闭后对CFSCs凋亡的影响。结果BMSCs可分泌NGF、HGF、TGF-β1等细胞因子,且随着培养时间的延长,其分泌量逐渐增多;BRL不表达p75,CFSCs表达p75,且与BMSCs共培养后,其表达量增高;分别用p75的阻断剂TAT-Pep5、HGF的中和抗体和JNK的阻滞剂sp600125作用后,BMSCs诱导CFSCs凋亡的比例均明显降低;封闭TGF-β1后,BMSCs诱导CFSCs凋亡的比例增高。结论BMSCs能够通过分泌NGF和HGF促进CFSCs的凋亡,这种凋亡诱导作用依赖于JNK的活性,并且在封闭TGF-β1后增强。

关键词：骨髓基质干细胞肝纤维化细胞细胞因子凋亡大鼠

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癫痫患者脑组织海马神经元的形态变化和神经元特异性烯醇化酶表达

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中国地方病学杂志 2008年第6期27卷 641-643页

作者：谷佳睿李小光谷佳傲林志国靳占峰刘玉芳张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室 150081 第一临床医学院神经外科基础医学院病理学和法医学教研室

目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和... 详细信息

目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和正常无精神与神经疾病的尸检者（20例）。HE染色，光镜下观察脑组织中海马区齿状回颗粒细胞层神经元形态学改变；免疫组织化学方法检测NSE表达，比较两组NSE阳性表达率。结果癫痫患者脑组织海马颗粒细胞层中均可见核固缩的神经元，约占全部神经元的15．80％，还可见到肿胀的神经元：NSE阳性表达的神经元呈棕黄色，在出现核固缩的神经元中，发生NSE阳性表达占28．66％；癫痫病人脑组织海马NSE阳性表达率为（7．9±5．6）％。对照组脑组织海马神经元形态正常，细胞核大而圆，位于胞体中央。核仁明显，NSE阳性表达率为（39．0±17．4）％。与对照组相比，癫痫患者含棕黄色颗粒的神经元数目减少，两组NSE阳性表达率比较，差异有统计学意义（t=-5．13，P〈0．01）。结论癫痫患者脑组织中海马神经元形态改变和NSE表达异常．可能是癫痫患者发病的主要因素之一。

关键词：癫痫海马神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学

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NOD小鼠自发糖尿病过程中CD4+T细胞亚群分布的实验研究

NOD小鼠自发糖尿病过程中CD4+T细胞亚群分布的实验研究

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第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议

作者：赵崴徐晋赵文然赵裕光张淑娟沃晓嫚杨爱英金连弘李呼伦哈尔滨医科大学细胞生物学教研室哈尔滨医科大学组织胚胎学教研室哈尔滨医科大学神经生物学教研室

本文旨在探讨NOD(non-obese diabetic,NOD)小鼠自发糖尿病过程中CD4+T细胞亚群分布的变化情况。实验通过流式细胞仪(FACS)对不同血糖浓度NOD小鼠胰腺淋巴细胞进行Th1、Th2、Th17和Treg细胞数量的检测;分离不同血糖浓度NOD小鼠血清进行I... 详细信息

本文旨在探讨NOD(non-obese diabetic,NOD)小鼠自发糖尿病过程中CD4+T细胞亚群分布的变化情况。实验通过流式细胞仪(FACS)对不同血糖浓度NOD小鼠胰腺淋巴细胞进行Th1、Th2、Th17和Treg细胞数量的检测;分离不同血糖浓度NOD小鼠血清进行IFN-γ,IL-4和

关键词： NOD Th17 Treg cell

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NGF对局灶性脑缺血再灌注后大鼠皮质IL-1β表达的调控作用

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解剖学杂志 2008年第6期31卷 751-754页

作者：曲鹏张正洪曲晶孙长斌方秀斌大连大学医学院解剖学教研室大连116622 郧阳医学院解剖学教学研室十堰442000 辽宁医学院附属第一医院眼科锦州121000 中国医科大学神经生物学教研室沈阳110001

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响。方法:线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学显色、免疫印迹分析方法,结合图像分析技术检测大鼠缺血侧顶叶皮质IL-1... 详细信息

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响。方法:线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学显色、免疫印迹分析方法,结合图像分析技术检测大鼠缺血侧顶叶皮质IL-1β蛋白表达变化。结果:假手术组大鼠顶叶皮质IL-1β没有表达,缺血再灌注组顶叶皮质IL-1β蛋白在各时间点明显表达,IL-1β蛋白阳性产物的光密度值高于假手术组;NGF组IL-1β蛋白阳性产物的光密度值低于缺血再灌注组。结论:脑缺血再灌注损伤后诱导IL-1β蛋白表达,NGF明显降低缺血再灌注大鼠顶叶皮质IL-1β蛋白表达,这可能是NGF发挥神经保护作用的分子机制之一。

关键词：神经生长因子局灶性脑缺血再灌注顶叶皮质白细胞介素-1β

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喉癌中MicroRNA-24(miR-24)转录后下调炎症因子S100A8的表达并促进Hep2细胞侵袭

喉癌中MicroRNA-24(miR-24)转录后下调炎症因子S100A8的表达并促...

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中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会

作者：郭艳刘佳尚超孙开来富伟能中国医科大学医学遗传学教研室中国医科大学神经生物学教研室

炎症因子 S100A8具有抑制凋亡、促进肿瘤细胞侵袭和转移的重要功能,可能通过 P65/S100A8/BCL-2/Caspase-9(-3)途径参与喉鳞癌的发生与发展。目前,尚未有 miRNAs 通过靶向结合 S100A8基因3'-UTR 而调控该基因的表达及 miRNAs 参与喉... 详细信息

炎症因子 S100A8具有抑制凋亡、促进肿瘤细胞侵袭和转移的重要功能,可能通过 P65/S100A8/BCL-2/Caspase-9(-3)途径参与喉鳞癌的发生与发展。目前,尚未有 miRNAs 通过靶向结合 S100A8基因3'-UTR 而调控该基因的表达及 miRNAs 参与喉鳞癌侵袭的相关报道。我们应用生物信息学技术对 S100A8基因3'-UTR 进行预测;通过 RT—PCR、Western Blotting 对肝癌、喉癌等7个细胞系中 S100A8基因在 RNA 和蛋白水平上的表达进行检测;应用终点 PCR、实时荧光定量 PCR 技术对7个细胞系和10例喉鳞癌组织中 miR-24的表达进行检测:分别构建野生型和突变型 S100A8—3'-UTR 荧光报告素酶载体并同 pre-miR-24一起共转染于喉癌 Hep2 细胞系中,应用 Western Blotting 结合荧光素酶活性分析以检测 miR-24对 S100A8基因的靶向性调控,通过体外侵袭实验分析 miR-24对喉癌 Hep2细胞系侵袭能力的影响。结果表明, 在 S100A8基因3'-UTR 329 nt 预测到 miR-24特异性结合位点,且 miR-24在大鼠和人类当中同源性高达95%;7个细胞系中 miR-24均有表达且其表达与 S100A8基因在蛋白水平上的表达呈负相关:10例喉鳞癌组织中 miR-24的表达较癌旁正常组织中明显下调:共转染 pre-miR-24及野生型 S100A8-3'-UTR 荧光报告素酶载体能够明显抑制喉癌 Hep2细胞系的荧光素酶活性及体外侵袭能力、下调 S100A8基因的表达,而共转染 pre-miR-24及突变型 S100A8-3'-UTR 荧光报告素酶载体对喉癌 Hep2细胞系的影响不明显。由此可见,喉癌 miR-24 靶向结合于 S100A8基因3'-UTR 329 nt 位点并转录后下调 S100A8基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的侵袭。喉癌中 S100A8基因及 miR-24的深入研究,不仅有利于人们对炎症介导的肿瘤的认识,而且对以 microRNAs 为靶点的新药开发提供科学依据。

关键词：喉鳞状细胞癌 S100A8 miR-24 转录后调控侵袭

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大鼠第三脑室视上区接触脑脊液神经元的电镜观察

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中国伤残医学 2008年第1期16卷 3-5页

作者：金润浩朴杰汪丹丹孙博王菁华王丹丹王广友延边大学医学部吉林延吉133000 哈尔滨市国营香坊木材综合加工厂职工医院哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨医科大学神经生物省高校重点实验室

目的:观察大鼠第三脑室视上区接触脑脊液神经元的形态,探讨其作用。方法:采用扫描电镜和透射电镜进行研究。结果:在全部材料中都观察到了接触脑脊液神经元的树突终末和轴突终末,在一些材料中观察到了接触脑脊液神经元的核周体。树突终... 详细信息

目的:观察大鼠第三脑室视上区接触脑脊液神经元的形态,探讨其作用。方法:采用扫描电镜和透射电镜进行研究。结果:在全部材料中都观察到了接触脑脊液神经元的树突终末和轴突终末,在一些材料中观察到了接触脑脊液神经元的核周体。树突终末及胞体表面有成簇的9×2+0型纤毛,轴突终末表面光滑无纤毛。结论:在大鼠第三脑室视上区证实有接触脑脊液神经元的存在。视上区除已证实的途径参与调节外,还存在接触脑脊液神经元途径参与神经-体液调节。

关键词：第三脑室视上区接触脑脊液神经元

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骨髓基质干细胞治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的效果及免疫调节机制

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神经损伤与功能重建 2008年第1期3卷 12-16页

作者：李呼伦张苏明王丹丹王广友孔庆飞穆莉莉孙博哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨150081 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科武汉430030

目的:探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法:分离纯化培养BMSCs,建立EAE动物模型,随机分为CFA组、BMSCs回输CFA组、MBP组及BMSCs回输MBP组。BMSCs回输CFA组和BMSCs回输MBP组于... 详细信息

目的:探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法:分离纯化培养BMSCs,建立EAE动物模型,随机分为CFA组、BMSCs回输CFA组、MBP组及BMSCs回输MBP组。BMSCs回输CFA组和BMSCs回输MBP组于免疫后第6天尾静脉回输BMSCs,发病高峰期取材,全部大鼠予临床评价,检测淋巴细胞和IL-17+细胞浸润及T淋巴细胞增殖情况。建立BMSCs与淋巴细胞的共培养体系,观察BMSCs在封闭IL-27后对T淋巴细胞中Th17的影响。用ELISA检测大鼠血清或细胞培养上清中相关细胞因子表达。结果:BMSCs回输MBP组与MBP组相比,发病率降低,发病时间延后,临床评分显著降低(P<0.05),炎性细胞浸润明显减轻(P<0.01),IL-17+T细胞表达显著减少(P<0.01),血清中IFN-γ、TNF-α、IL-17、IL-23表达水平降低(P<0.05),IL-4、TGF-β和IL-27表达水平升高(P<0.05)。IL-27中和的BMSCs与病理性T细胞共培养后,细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ和IL-23的分泌水平明显升高(P<0.05),IL-4的分泌水平降低(P<0.01),IL-17的分泌水平显著升高(P<0.01)。结论:BMSCs经静脉移植治疗可以降低EAE发病程度,其作用机制是通过降低T淋巴细胞的反应性,通过IL-27的信号传导通路抑制EAE的靶细胞Th17产生生物学效应的。

关键词： EAE 骨髓基质干细胞 IL-17 IL-27 免疫调节

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骨髓基质干细胞抑制大鼠肝纤维化细胞生长的实验研究

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国际免疫学杂志 2008年第6期31卷 405-407页

作者：王淑芳唐印华薄挽澜徐克达曹振远王菁华李呼伦史立军哈尔滨医科大学附属第一医院消化内科 150001 黑龙江省双鸭山煤炭总医院消化内科 155100 哈尔滨医科大学附属第一医院介入科 150001 哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨医科大学神经生物省重点实验室150081

目的探讨骨髓基质干细胞（BMSCs）对大鼠肝纤维化细胞（CFSCs）生长的抑制作用。方法采用不同培养时间BMSCs的培养上清培养大鼠正常肝细胞系（BRL）以及CFSCs，MTr法检测CFSCs的增殖情况；Transwell建立BMSCs与CFSCs的双层共培养体系，... 详细信息

目的探讨骨髓基质干细胞（BMSCs）对大鼠肝纤维化细胞（CFSCs）生长的抑制作用。方法采用不同培养时间BMSCs的培养上清培养大鼠正常肝细胞系（BRL）以及CFSCs，MTr法检测CFSCs的增殖情况；Transwell建立BMSCs与CFSCs的双层共培养体系，经TUNEL法检测与BMSCs按不同比例进行培养后的CFSCs凋亡情况。结果BMSCs培养上清作用于CFSCs后，其增殖能力明显低于对照组，有统计学意义（P〈0．05），并表现出剂量依赖性，而对BRL没有作用。CFSCs与BMSCs按不同比例共培养后，随着BMSCs比例的增加，CFSCs调亡率上升。结论BMSCs能够不可逆的抑制CFSCs生长而不影响正常的肝细胞，这种生长抑制是通过诱导CFSCs的凋亡发生的。

关键词：骨髓基质干细胞肝纤维化细胞生长抑制调亡

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α-突触核蛋白对大鼠原代培养神经元突起的促生长作用

α-突触核蛋白对大鼠原代培养神经元突起的促生长作用

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第十一届全国神经病学学术会议

作者：李昕王鹏李尧华何欣于顺首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室北华大学医学院基础医学部人体解剖学教研室首都医科大学宣武医院低氧医学研究

α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)是在神经系统中表达丰富的蛋白质,存在于神经元的突触前终末、轴突、胞体和细胞核中。α-Syn的突变和异常表达与帕金森病的发病机制密切相关,但该蛋白有何生理功能尚不十分清楚。体外研究提示,α-Sy... 详细信息

α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)是在神经系统中表达丰富的蛋白质,存在于神经元的突触前终末、轴突、胞体和细胞核中。α-Syn的突变和异常表达与帕金森病的发病机制密切相关,但该蛋白有何生理功能尚不十分清楚。体外研究提示,α-Syn可以促进γ-tubulin组装成微管。鉴于微管是神经元突起形成的重要细

关键词： α-突触核蛋白原代培养神经元促生长作用

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氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

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齐齐哈尔医学院学报 2008年第22期29卷 2689-2691页

作者：钟德泰张琪邹宇牛英才徐文娣王军黑龙江省神经精神病防治院齐齐哈尔医学院中心实验室哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的观察氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用慢性不可预见性的温和刺激结合孤养建立抑郁症动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠... 详细信息

目的观察氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用慢性不可预见性的温和刺激结合孤养建立抑郁症动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠海马组织Bcl-2 2-ΔΔCt显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明模型组大鼠海马组织Bcl-2 mRNA表达下调。与模型组比较,氟西汀高剂量组和氟西汀低剂量组Bax 2-ΔΔCt显著降低,表明Bax mRNA表达下调;而氟西汀高剂量组和氟西汀低剂量组Bcl-2 2-ΔΔCt显著升高,表明Bcl-2 mRNA表达上调。结论慢性不可预见性温和刺激结合孤养可诱导大鼠脑组织Bcl-2表达下调,而氟西汀通过抑制海马组织Bax mRNA的表达和促进Bcl-2 mRNA表达,进而减少神经细胞凋亡的作用。

关键词：细胞凋亡抑郁症氟西汀实时荧光定量PCR

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