检索结果-内蒙古大学图书馆

上海第二医科大学学报 2003年第1期23卷 82-85页

作者：顾鸣敏陆振虞王铸钢上海第二医科大学医学遗传学教研室上海200025

人类基因组计划旨在破译人类全部遗传信息,发现所有人类基因.该计划工程巨大,可以与美国曾进行的"曼哈顿"计划和"阿波罗"计划相媲美.经过美国、英国、法国、德国、日本、中国等国家近12年的努力,该计划即将完成.本... 详细信息

人类基因组计划旨在破译人类全部遗传信息,发现所有人类基因.该计划工程巨大,可以与美国曾进行的"曼哈顿"计划和"阿波罗"计划相媲美.经过美国、英国、法国、德国、日本、中国等国家近12年的努力,该计划即将完成.本文主要综述人类基因组计划的概况,疾病基因组、功能基因组及比较基因组研究的进展,基因组生物信息学的重要性以及人类基因组研究的未来.

关键词：人类基因组计划人类基因组序列图疾病基因组功能基因组比较基因组学人类基因组作图

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BMP2真核表达载体的构建

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哈尔滨医科大学学报 2007年第6期41卷 524-526页

作者：付春江毕郑钢黄昀曲延隆哈尔滨医科大学第一临床医学院骨外科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学医学遗传学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的为研究骨缺损的基因治疗提供实验基础,构建人骨形态发生蛋白2真核表达载体。方法采用双酶切方法克隆载体将骨形态发生蛋白2基因与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建pcDNA3.1-BMP2表达基因载体。结果通过测序分析证实,成功构建BMP2真核... 详细信息

目的为研究骨缺损的基因治疗提供实验基础,构建人骨形态发生蛋白2真核表达载体。方法采用双酶切方法克隆载体将骨形态发生蛋白2基因与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建pcDNA3.1-BMP2表达基因载体。结果通过测序分析证实,成功构建BMP2真核表达载体。结论成功构建BMP2表达载体。

关键词：骨形态发生蛋白-2 基因基因载体

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在非洲爪蟾胚胎原位杂交中卵黄膜酶的去除和载玻片制备的操作改进

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国外医学（遗传学分册） 1998年第1期21卷 45-46页

作者：陈宇哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

在非洲爪蟾胚胎原位杂交中卵黄膜酶的去除和载玻片制备的操作改进为了简化和提高用在非洲爪蟾属的载玻片原位杂交技术，已做了一些改进。特别是：从预孵化的胚胎中去除卵黄膜的方法，已由酶浴代替了原来的机械去除方法。其它为改善产量... 详细信息

在非洲爪蟾胚胎原位杂交中卵黄膜酶的去除和载玻片制备的操作改进为了简化和提高用在非洲爪蟾属的载玻片原位杂交技术，已做了一些改进。特别是：从预孵化的胚胎中去除卵黄膜的方法，已由酶浴代替了原来的机械去除方法。其它为改善产量，减少染色背景的方法包括：高温灭活...

关键词：非洲爪蟾胚胎原位杂交卵黄膜酶去除载玻片

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自然选择与自然选择标记的检测

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国际遗传学杂志 2007年第5期30卷 359-361+386页

作者：孙冬琳傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

在人类的进化过程中,自然选择起到了至关重要的作用,选择作用在人类的基因组中留下了标记使我们能够更好地认识人类历史,更多地了解基因多样性及其与疾病、药物反应的关系。

关键词：自然选择正性选择平衡选择

来源：评论

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人卵巢癌细胞及小鼠MTX抗性细胞中DMs大小的测定

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国际遗传学杂志 2006年第4期29卷 241-245页

作者：张钰邓新宇白静李璞傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

目的测定肿瘤细胞及耐药性细胞中双微体(double minutes,DMs)的大小。方法应用PFGE(Pulsed field gradient gel electrophoresis)与Southern印迹杂交技术,对人卵巢癌细胞UACC-1598及氨甲蝶呤(Methotrexate,MTX)抗性的小鼠胚胎成纤维细胞中DMs的大小进行检测。结果发现UACC- 1598细胞中存在2．8Mb、2．1Mb及1．4Mb的DMs群体,提示多拷贝的扩增基因及其邻近的染色体区域经染色体断裂、易位及重排形成较大的DMs。同时,用浓度逐渐增高的MTX对小鼠胚胎成纤维细胞进行体外诱导,分离出富含DMs的不同MTX抗性程度的细胞群体。在MTX抗性细胞中检测到2．5Mb及1．4Mb的DMs群体,MTX100细胞中以1．4Mb的DMs群体为主,而MTX500细胞中以2．5Mb的DMs群体为主。结论MTX细胞中产生的扩增子结构在演化过程中趋向于寡聚化或多聚化形成较大片段的DMs。

关键词：基因扩增双微体 PFGE Southern印迹

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不同转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973的比较蛋白质组学研究

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国际遗传学杂志 2007年第4期30卷 249-253页

作者：王帅郭昌龙原伟光王哲白静傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

目的寻找高低转移能力肺癌细胞中潜在的蛋白标记以更好的解释肺腺癌转移机制。方法用双向电泳的方法对高低转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973进行了比较蛋白质组学分析。选取差异较大的候选差异表达蛋白进行基质辅助激光解析/电离... 详细信息

目的寻找高低转移能力肺癌细胞中潜在的蛋白标记以更好的解释肺腺癌转移机制。方法用双向电泳的方法对高低转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973进行了比较蛋白质组学分析。选取差异较大的候选差异表达蛋白进行基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF- MS)分析并鉴定。结果双向电泳胶图分析结果说明两细胞系的蛋白表达差异具有统计学意义。MALDI-TOF-MS鉴定证实这3个蛋白分别为Stathmin 1蛋白、磷酸甘油酸变位酶1(PGAM 1)和热休克蛋白27(HSP27)。结论在高转移细胞系Anip973中,HSP表达显著升高,Stathmin 1和HSP27表达显著下降,这3种蛋白与肿瘤的发生和恶性程度密切相关。

关键词：肺腺癌蛋白质组学 2-DE

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大尺度PCR:不依赖大小的产物合成

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国外医学（遗传学分册） 1998年第1期21卷 46-47页

作者：陈宇哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

大尺度ＰＣＲ：不依赖大小的产物合成大尺度ＰＣＲ已被用来制做原肌球蛋白４（ＴＭＰ４）的一个探针。已经发现至少３个ＴＭＰ４假基因的存在并不抑制长达４．５ｋｂ基因产物的合成。原肌球蛋白是肌细胞（骨骼肌、心肌和平滑肌）及非肌... 详细信息

大尺度ＰＣＲ：不依赖大小的产物合成大尺度ＰＣＲ已被用来制做原肌球蛋白４（ＴＭＰ４）的一个探针。已经发现至少３个ＴＭＰ４假基因的存在并不抑制长达４．５ｋｂ基因产物的合成。原肌球蛋白是肌细胞（骨骼肌、心肌和平滑肌）及非肌细胞中一族高度相关联的杆类蛋白。经...

关键词：大尺度PCR 原肌球蛋白4 产物合成

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重组P16蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其功能研究

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国际遗传学杂志 2007年第2期30卷 88-91+162页

作者：江晖白静史忠诚傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

目的在原核细胞中表达P16蛋白并纯化,研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响。方法构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16。IPTG诱导大肠杆菌BL21菌株表达P16融合蛋白,通过亲和层析柱纯化目的蛋白,经Western-blot鉴定后,将P16... 详细信息

目的在原核细胞中表达P16蛋白并纯化,研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响。方法构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16。IPTG诱导大肠杆菌BL21菌株表达P16融合蛋白,通过亲和层析柱纯化目的蛋白,经Western-blot鉴定后,将P16蛋白转导入人肺腺癌细胞系A549中,利用免疫细胞化学方法对蛋白进行细胞内定位,同时绘制细胞生长曲线,并用流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果所构建P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16,可在大肠杆菌中稳定表达,通过纯化获得P16融合蛋白。利用lipofectamine TM2000转染试剂可将P16蛋白转入A549细胞中,生长曲线与流式细胞术结果显示P16蛋白可抑制肿瘤细胞增殖。结论原核细胞表达的P16蛋白经纯化,转导进入A549细胞,可影响其生长周期,抑制A549细胞的增殖。

关键词： P16 融合蛋白细胞周期

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聚合酶链反应与分子杂交检测异常色觉基因的比较研究

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中华眼科杂志 1993年第6期29卷 356-358页

作者：张清炯毛文书广州中山医科大学中山眼科中心 510060 广州中山医科大学医学遗传学教研室 510060

根据色觉基因异常的特点，我们设计了一对２０个核苷酸长的引物以控制扩增红与绿色觉基因的第５个外显子。利用红与绿色觉基因第５个外显子酶切位点的差异对扩增ＤＮＡ片段进行酶解后电泳观察，以确定红或绿色觉基因异常的情况。并用色... 详细信息

根据色觉基因异常的特点，我们设计了一对２０个核苷酸长的引物以控制扩增红与绿色觉基因的第５个外显子。利用红与绿色觉基因第５个外显子酶切位点的差异对扩增ＤＮＡ片段进行酶解后电泳观察，以确定红或绿色觉基因异常的情况。并用色觉基因第４个内含子作为探针，以分子杂交法检测红与绿色觉基因第５个外显子相关片段的异常情况，两种方法结果一致。聚合酶链反应是一种简便、可靠、实用的异常色觉基因检出方法。

关键词：色盲基因分子杂交聚合酶链反应

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NUP98-PMX1转基因小鼠发生髓系白血病样表型

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中华血液学杂志 2004年第5期25卷 262-265页

作者：王阳顾鸣敏谭轶陆顺元王龙孔辉孙岳平陆振虞陈赛娟王振义王铸钢 200025 上海第二医科大学医学遗传学教研室医学与分子遗传学实验室上海第二医科大学附属瑞金医院、上海血液学研究所上海南方模式生物研究中心

目的在整体动物水平研究NUP98-PMX1融合蛋白的致白血病作用.方法采用分子克隆技术构建含有NUP98-PMX1的转基因质粒,显微注射法建立转NUP98-PMX1基因的小鼠,以PCR、RT-PCR方法检测融合基因的表达;用流式细胞仪检测骨髓细胞表型.结果转染N... 详细信息

目的在整体动物水平研究NUP98-PMX1融合蛋白的致白血病作用.方法采用分子克隆技术构建含有NUP98-PMX1的转基因质粒,显微注射法建立转NUP98-PMX1基因的小鼠,以PCR、RT-PCR方法检测融合基因的表达;用流式细胞仪检测骨髓细胞表型.结果转染NUP98-PMX1融合基因的NIH3T3细胞生长加快,软琼脂上可形成集落,并使裸鼠致瘤.出现病态的8只NUP98-PMX1转基因小鼠中有4只发生粒细胞白血病样表型,其中3只表现为人类慢性髓系白血病样表型.结论 NUP98-PMX1融合基因具有致瘤性,其表达在髓系白血病的发生中起着极为重要的作用.

关键词：基因,NUP98-PMX1 小鼠,转基因白血病,髓样

来源：评论

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