检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学遗传学杂志 2007年第3期24卷 266-270页

作者：富伟能郭艳黄带发尚超孙开来中国医科大学医学遗传学教研室沈阳110001

目的探索S100A8相互作用蛋白在喉癌发生、发展中的可能机制。方法应用抗S100A8抗体通过免疫沉淀的方法从喉癌细胞系Hep-2中分离与S100A8相互作用的蛋白质。用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪分析目的蛋白条带。根据这些目的蛋白条... 详细信息

目的探索S100A8相互作用蛋白在喉癌发生、发展中的可能机制。方法应用抗S100A8抗体通过免疫沉淀的方法从喉癌细胞系Hep-2中分离与S100A8相互作用的蛋白质。用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪分析目的蛋白条带。根据这些目的蛋白条带的肽指纹谱,用Mascot软件预测其相应的蛋白质。用P-Match软件预测这些蛋白质的NF-kappa B结合位点。用免疫共沉淀方法证实其中一个蛋白质与S100A8相互结合的能力。结果获得了4种与S100A8相互作用的新的蛋白质,它们分别是假想蛋白质LOC80154（hypothetical protein LOC80154）、MHCclass Ⅰ HLA-B、T-box1异构体C相似蛋白质（similar to T-box1 isoformC）和肌纤维膜相关蛋白1（sarcolemmal associated protein 1）。这4种蛋白质均具有NF-kappa B的结合位点,其中MHCclass Ⅰ HLA-B是NF-kappa B通路中的一个成员,我们首次证实该蛋白质具有结合S100A8的能力。结论本研究获得的S100A8新的伴侣可能是NF-kappa B通路的成员。MHCclass Ⅰ HLA-B与S100A8的结合提示S100A8可能作为新成员与包括HLA-B在内的其他蛋白质在NF-kappa B通路中发挥作用。这些发现为进一步研究S100A8在喉癌发生中的分子机制提供了新线索。

关键词：喉癌 S100A8相互作用蛋白 NF-kappa B通路人类白细胞抗原B

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CASP9基因在非小细胞肺癌中的表达及其多态性研究

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中华医学遗传学杂志 2007年第1期24卷 59-62页

作者：娄毅方长清李建华中国医科大学医学遗传学教研室沈阳110001 中国医科大学病理教研室沈阳110001

目的探讨caspase9（CASP9）基因在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）中的表达及其单核苷酸多态（single nucleotide polymorphism，SNP）位点在非小细胞肺癌患者和正常人中的分布情况。方法应用逆转录-PCR方法检测... 详细信息

目的探讨caspase9（CASP9）基因在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）中的表达及其单核苷酸多态（single nucleotide polymorphism，SNP）位点在非小细胞肺癌患者和正常人中的分布情况。方法应用逆转录-PCR方法检测了81例NSCLC患者及对应癌旁正常组织中CASP9的表达情况；应用限制性片段长度多态性技术结合测序法，分析81例NSCLC患者及100名正常人CASP9基因2个SNP位点基因型；应用列联表法统计分析患者组和对照组各SNP位点基因型及等位基因频率。结果 44．4％（36／81）的NSCLC组织CASP9基因表达明显下调，与癌旁正常组织相比差异有统计学意义（P〈0．05）。位于CASP9基因第1外显子的SNP位点rs1052571的基因型频率和等位基因频率在两组人群中的分布差异无统计学意义；位于CASP9基因第5外显子的SNP位点rs1052576的基因型频率和等位基因频率在两组人群中的分布差异有统计学意义；患者组G等位基因频率明显高于对照组（P〈0．05）；AG基因型频率在有淋巴结转移的患者中明显高于无淋巴结转移的患者（P〈0．05）。结论 CASP9基因在NSCLC中低表达，rs1052576多态位点G等位基因和肺癌的发生相关。AG基因型和淋巴结转移有关。

关键词：非小细胞肺癌 caspase 9基因单核苷酸多态

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应用DHPLC技术检测非缺失型DMD致病基因的新突变

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中华儿科杂志 2007年第6期45卷 413-416页

作者：陈亚男周鑫金春莲徐岩林长坤曹丽华李宁张学罗阳中国医科大学医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 中国医科大学医学遗传学教研室

目的建立检测 Duchenne 型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)致病基因 dystrophin 突变的快速、敏感的微小突变筛查系统。方法选择经多重 PCR 检测未发现dystrophin 基因大尺度缺失的 DMD 患儿20例,年龄在2～10岁,以其基因... 详细信息

目的建立检测 Duchenne 型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)致病基因 dystrophin 突变的快速、敏感的微小突变筛查系统。方法选择经多重 PCR 检测未发现dystrophin 基因大尺度缺失的 DMD 患儿20例,年龄在2～10岁,以其基因组 DNA 为模板,通过 PCR反应,分别扩增 dystrophin 基因外显子及侧翼序列,采用变性高效液相色谱(DHPLC)技术进行突变筛查,对 DHPLC 峰形变异的外显子片段行 PCR 产物直接测序,确定突变的具体位点和类型。结果筛查了包括2个缺失热点区 dystrophin 基因的68个外显子和3′UTR 部分片段,分别在4例患儿中检测出该基因的4种致病突变:c.6808_6811delTTAA,c.4959_4960insA,c.8656C>T 和 c.8608C>T。前两例引起移码突变分别导致 ***2270MeffsX9和 ***1654LysfsX5,后两例为无义突变分别导致 p.R2886X 和 p.R2870X。其中 c.6808_6811delTTAA,c.4959_4960insA 和 c.8656C>T 为文献未曾报道的新突变。结论 DHPLC 可以作为有效地筛查 DMD 微小突变的检测方法。

关键词：肌营养不良,杜氏色谱法,高效液相突变

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亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性及其与疾病的关系

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国际遗传学杂志 2007年第1期30卷 39-44页

作者：毛仁芳范义辉白静傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)在叶酸和同型半胱氨酸代谢、DNA甲基化和DNA合成等方面起重要作用。MTHFR基因突变造成酶活性和耐热性降低,导致高半胱氨酸血症和DNA结构异常,从而影响多种疾病的发生... 详细信息

亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)在叶酸和同型半胱氨酸代谢、DNA甲基化和DNA合成等方面起重要作用。MTHFR基因突变造成酶活性和耐热性降低,导致高半胱氨酸血症和DNA结构异常,从而影响多种疾病的发生。现已发现MTHFR基因多态性与心脑血管疾病、出生缺陷和一些肿瘤等多种疾病存在相关性。

关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性疾病

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TSG101基因研究进展

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国际遗传学杂志 2007年第1期30卷 14-18+33页

作者：刘芳莉傅松滨李璞哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

TSG101基因是近年来发现的一个新的抑癌基因候选者,定位于11p15.1-p15.2,其产物TSG101蛋白具有多种重要功能,例如调控蛋白及囊泡运输,与细胞存活增殖有关等,其N端与泛素结合酶(UBC)有一定的同源性。近年来的研究表明,TSG101基因与多种... 详细信息

TSG101基因是近年来发现的一个新的抑癌基因候选者,定位于11p15.1-p15.2,其产物TSG101蛋白具有多种重要功能,例如调控蛋白及囊泡运输,与细胞存活增殖有关等,其N端与泛素结合酶(UBC)有一定的同源性。近年来的研究表明,TSG101基因与多种肿瘤密切相关,其转录本在某些肿瘤细胞中发生了异常剪接;TSG101也有可能作为一种显性负调节子参与泛素系统对细胞周期的调节。它还参与艾滋病毒的感染过程。现对该基因的最新研究进展作一综述。

关键词： TSG101基因泛素化肿瘤

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GATA4基因与单纯性先天性心脏病的相关性研究

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中国实用儿科杂志 2007年第8期22卷 587-590页

作者：徐小延邱广蓉宫立国辛娜孙开来中国医科大学医学遗传学教研室辽宁沈阳110001

目的探讨GATA4基因与单纯性先天性心脏病的相关性。方法2001年,收集沈阳军区总医院心脏外科62个单纯性先天性心脏病(CHD)家系,选择GATA4基因编码区内4个可引起氨基酸改变的cSNP,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分... 详细信息

目的探讨GATA4基因与单纯性先天性心脏病的相关性。方法2001年,收集沈阳军区总医院心脏外科62个单纯性先天性心脏病(CHD)家系,选择GATA4基因编码区内4个可引起氨基酸改变的cSNP,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分析该62个单纯性CHD核心家系206名成员的基因型;应用ETDT软件进行单位点关联分析;应用2LD软件进行配对连锁不平衡检验;应用TRANSMIT软件进行单体型分析。结果Q19E(rs1139240)位点未检测到多态。L39V(rs1139241)、P66A(rs1139244)和G377S(rs3729856)位点存在多态。单位点关联分析显示L39V位点χ2=6·178(P<0·05),P66A位点χ2=8·607(P<0·05),G377S位点χ2=9·842(P<0·05)。配对连锁不平衡检验显示L39V和P66A之间存在连锁不平衡(D’=0·999999)。单体型分析共观察到4种单体型,只有2种单体型的频率大于3%,但却占单体型总数的97·7%。这两种单体型的总体统计χ2=1·0345(P>0·05)。结论Q19E在本文人群中未检测到多态;L39V、P66A和G377S3个位点与单纯性CHD有明显的相关性(P<0·05)。

关键词：单纯性先天性心脏病 GATA4基因单核苷酸多态单体型

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BMP2真核表达载体的构建

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哈尔滨医科大学学报 2007年第6期41卷 524-526页

作者：付春江毕郑钢黄昀曲延隆哈尔滨医科大学第一临床医学院骨外科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学医学遗传学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的为研究骨缺损的基因治疗提供实验基础,构建人骨形态发生蛋白2真核表达载体。方法采用双酶切方法克隆载体将骨形态发生蛋白2基因与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建pcDNA3.1-BMP2表达基因载体。结果通过测序分析证实,成功构建BMP2真核... 详细信息

目的为研究骨缺损的基因治疗提供实验基础,构建人骨形态发生蛋白2真核表达载体。方法采用双酶切方法克隆载体将骨形态发生蛋白2基因与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建pcDNA3.1-BMP2表达基因载体。结果通过测序分析证实,成功构建BMP2真核表达载体。结论成功构建BMP2表达载体。

关键词：骨形态发生蛋白-2 基因基因载体

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自然选择与自然选择标记的检测

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国际遗传学杂志 2007年第5期30卷 359-361+386页

作者：孙冬琳傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

在人类的进化过程中,自然选择起到了至关重要的作用,选择作用在人类的基因组中留下了标记使我们能够更好地认识人类历史,更多地了解基因多样性及其与疾病、药物反应的关系。

关键词：自然选择正性选择平衡选择

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不同转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973的比较蛋白质组学研究

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国际遗传学杂志 2007年第4期30卷 249-253页

作者：王帅郭昌龙原伟光王哲白静傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

目的寻找高低转移能力肺癌细胞中潜在的蛋白标记以更好的解释肺腺癌转移机制。方法用双向电泳的方法对高低转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973进行了比较蛋白质组学分析。选取差异较大的候选差异表达蛋白进行基质辅助激光解析/电离... 详细信息

目的寻找高低转移能力肺癌细胞中潜在的蛋白标记以更好的解释肺腺癌转移机制。方法用双向电泳的方法对高低转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973进行了比较蛋白质组学分析。选取差异较大的候选差异表达蛋白进行基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF- MS)分析并鉴定。结果双向电泳胶图分析结果说明两细胞系的蛋白表达差异具有统计学意义。MALDI-TOF-MS鉴定证实这3个蛋白分别为Stathmin 1蛋白、磷酸甘油酸变位酶1(PGAM 1)和热休克蛋白27(HSP27)。结论在高转移细胞系Anip973中,HSP表达显著升高,Stathmin 1和HSP27表达显著下降,这3种蛋白与肿瘤的发生和恶性程度密切相关。

关键词：肺腺癌蛋白质组学 2-DE

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重组P16蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其功能研究

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国际遗传学杂志 2007年第2期30卷 88-91+162页

作者：江晖白静史忠诚傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

目的在原核细胞中表达P16蛋白并纯化,研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响。方法构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16。IPTG诱导大肠杆菌BL21菌株表达P16融合蛋白,通过亲和层析柱纯化目的蛋白,经Western-blot鉴定后,将P16... 详细信息

目的在原核细胞中表达P16蛋白并纯化,研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响。方法构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16。IPTG诱导大肠杆菌BL21菌株表达P16融合蛋白,通过亲和层析柱纯化目的蛋白,经Western-blot鉴定后,将P16蛋白转导入人肺腺癌细胞系A549中,利用免疫细胞化学方法对蛋白进行细胞内定位,同时绘制细胞生长曲线,并用流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果所构建P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16,可在大肠杆菌中稳定表达,通过纯化获得P16融合蛋白。利用lipofectamine TM2000转染试剂可将P16蛋白转入A549细胞中,生长曲线与流式细胞术结果显示P16蛋白可抑制肿瘤细胞增殖。结论原核细胞表达的P16蛋白经纯化,转导进入A549细胞,可影响其生长周期,抑制A549细胞的增殖。

关键词： P16 融合蛋白细胞周期

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