检索结果-内蒙古大学图书馆

国际移植与血液净化杂志 2003年第4期 194-194页

RNAi(RNA interference)即RNA干涉,是最初在线虫Caenorhbditis elegans中发现的在双链RNA(dsRNA)的介导下特异性降解相应序列的mRNA的现象,属于转录后基因沉默(PTGS)机制,广泛存在于从真菌到植物,从果蝇等无脊椎动物到鼠等哺乳动物的多... 详细信息

RNAi(RNA interference)即RNA干涉,是最初在线虫Caenorhbditis elegans中发现的在双链RNA(dsRNA)的介导下特异性降解相应序列的mRNA的现象,属于转录后基因沉默(PTGS)机制,广泛存在于从真菌到植物,从果蝇等无脊椎动物到鼠等哺乳动物的多种生物中.RNAi是自然存在的生物抵抗病毒入侵、抑制转座子活动的一种防御性机制,对于生物体的基因调控和生长发育可能也有着重要的作用.由于其存在的广泛性以及抑制基因表达的特异性和高效性,RNAi已经在短短的几年时间里成为功能基因组研究中的有力工具.

关键词： RNAi PTGS 基因沉默 dsRNA siRNA

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一个在肺腺癌细胞系中差异表达cDNA片段的定位及表达分析

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Acta Genetica Sinica 2002年第6期29卷 476-480页

作者：樊红李钰冯会臣吕冰洁傅松滨张贵寅李璞哈尔滨医科大学遗传教研室哈尔滨150086

为了研究和克隆肺癌转移相关候选基因 ,探讨肺癌发生及转移的分子基础 ,应用细胞培养、cDNA克隆、North ern印记杂交和生物信息学技术分析了在细胞来源相同 ,但转移能力不同的肺腺癌细胞系AGZY83 a和Anip973中差异表达片段OPB7 1在人不... 详细信息

为了研究和克隆肺癌转移相关候选基因 ,探讨肺癌发生及转移的分子基础 ,应用细胞培养、cDNA克隆、North ern印记杂交和生物信息学技术分析了在细胞来源相同 ,但转移能力不同的肺腺癌细胞系AGZY83 a和Anip973中差异表达片段OPB7 1在人不同组织中和不同人肺癌细胞系中的表达情况 ,并应用RH定位技术对该片段进行了基因定位。表明OPB7 1与已知基因同源性差 ,该基因在正常人多种组织中有表达 ,心肌和骨骼肌中高表达 ,转录本均为 3 0kb左右。在不同人肺癌细胞系中存在该基因的表达差异 ,高转移潜能、低分化及高浸润的细胞系中呈高表达趋势 ,且表达的片段大小略有差别。提示OPB7 1是一个具有广泛表达谱的基因。

关键词：肺腺癌细胞系差异表达cDNA片段肿瘤转移基因表达 Northern印记表达基因定位

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胚胎植入前非整倍体筛查

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国际移植与血液净化杂志 2003年第6期 330-330页

染色体非整倍体改变在体外受精胚胎中十分多见,是导致人类辅助生殖失败的常见原因.胚胎细胞染色体的非整倍体筛查,已成为胚胎植入前遗传学诊断的主要内容.体外受精后胚胎活检,进行荧光原位杂交,避免非整倍体胚胎移入母体宫腔,能起到显... 详细信息

染色体非整倍体改变在体外受精胚胎中十分多见,是导致人类辅助生殖失败的常见原因.胚胎细胞染色体的非整倍体筛查,已成为胚胎植入前遗传学诊断的主要内容.体外受精后胚胎活检,进行荧光原位杂交,避免非整倍体胚胎移入母体宫腔,能起到显著提高着床率和改善受孕率的效果.

关键词：胚胎植入前遗传学诊断非整倍体荧光原位杂交

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中国6个人群中Y染色体15个双等位基因标记变异频率分布及单体群分析

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Acta Genetica Sinica 2002年第4期29卷 283-289页

作者：于敏张咏莉陈峰薛雅丽于旸马琳琳黄小义刘岸史榕茜吕芙蕖黄承滨张贵寅李璞傅松滨哈尔滨医科大学生物教研室与医学遗传学研究室哈尔滨150086

以 6个群体 (5个民族 ) 342名男性为研究对象 ,采用等位基因特异性PCR技术对Y染色体上 15个双等位基因标记进行基因分型 ,得到 15个标记的变异频率分布并界定了 6个群体的单体群。结果显示 ,两个汉族人群中M9G的频率相当高 (96 2 0 %和... 详细信息

以 6个群体 (5个民族 ) 342名男性为研究对象 ,采用等位基因特异性PCR技术对Y染色体上 15个双等位基因标记进行基因分型 ,得到 15个标记的变异频率分布并界定了 6个群体的单体群。结果显示 ,两个汉族人群中M9G的频率相当高 (96 2 0 %和 96 4 3% ) ,为一特征性标志 ;四川汉族以高M95T(82 14 % )为显著特点 ;回族以M4 5A(18 5 7% )的高频率有别于其他 5个群体 (0 % )。进一步对单体群分析表明 ,4个少数民族群体享有共同的基本单体群 ,并根据群体间的共有单体群比较推测出 4个少数民族间的相对遗传距离。

关键词：中国基因标记变异频率分布 Y染色体双等位基因单体群

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利用体外定点诱变技术构建人突变型α-L-艾杜糖醛酸酶基因

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中山医科大学学报 2002年第2期23卷 105-107页

作者：于洪枫曾瑞萍葛春喜林群娣中山医科大学医学遗传教研室广东广州510089

【目的】构建突变型α L 艾杜糖醛酸酶基因 (IDUA)cDNA ,为体外表达、鉴定突变的性质提供物质基础。【方法】以野生型pcDNA3 IDUA为基础质粒 ,采用双引物法体外定点诱变技术 ,引入突变E40 4X。【结果】突变区域经PCR SSCP和测序证实诱... 详细信息

【目的】构建突变型α L 艾杜糖醛酸酶基因 (IDUA)cDNA ,为体外表达、鉴定突变的性质提供物质基础。【方法】以野生型pcDNA3 IDUA为基础质粒 ,采用双引物法体外定点诱变技术 ,引入突变E40 4X。【结果】突变区域经PCR SSCP和测序证实诱导突变成功。【结论】本研究成功构建了突变型IDUAcDNA ,可用于下游的体外表达 ;此定点突变技术具有简便、诱变效率高等优点 ,是体外构建突变型基因的一种有效方法。

关键词：定点诱变 α-L-艾杜糖醛酸酶基因 IDUA 体外表达基因突变

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RAB5A对人肺腺癌细胞系侵袭转移作用的研究

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中国肺癌杂志 2002年第5期5卷 326-329页

作者：王春梅李钰高凌寒刘芳莉傅松滨李璞哈尔滨医科大学遗传学教研室医学遗传学专业硕士研究生150086

目的　探讨RAB5A基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用。方法　采用体外重建基底膜侵袭实验和癌细胞粘附能力、癌细胞趋化性运动能力、癌细胞分泌明胶酶的能力及活性的测定 ,分析RAB5A正义真核表达载体转染后的AGZY83 a和反义RNA转... 详细信息

目的　探讨RAB5A基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用。方法　采用体外重建基底膜侵袭实验和癌细胞粘附能力、癌细胞趋化性运动能力、癌细胞分泌明胶酶的能力及活性的测定 ,分析RAB5A正义真核表达载体转染后的AGZY83 a和反义RNA转染后的Anip973细胞的侵袭、转移能力的改变。结果　RAB5A正义表达载体PcDNA3.1 RAB5A转染的AGZY83 a重建基底膜侵袭能力明显增强 ,统计学意义显著 (P <0 .0 0 0 5 ) ,细胞趋化性运动能力显著增高 (P <0 .0 0 0 5 ) ,对基底膜成分的粘附能力增大 (P <0 .0 5 ) ,以及明胶酶分泌及活性增强等一系列趋向Anip973的变化。PcDNA3 AntiRAB5A反义RNA表达载体对Anip973重建基底膜侵袭力明显下降 (P <0 .0 0 2 5 ) ,趋化性运动能力显著降低 (P <0 .0 0 5 ) ,对基底膜成分粘附能力降低 (P <0 .0 5 ) ,以及明胶酶分泌减少等一系列趋向AGZY83 a的变化。结论　RAB5A在肺腺癌侵袭转移表型形成中发挥重要的作用。

关键词： 1RAB5A 人肺腺癌细胞系肿瘤转移反义RNA

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新生儿基因CYP2E15′端RsaⅠ和PON2311位点多态性与早产的关系

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Acta Genetica Sinica 2002年第10期29卷 847-853页

作者：梁红业吴白燕陈大方杨帆胡海燕陈栎徐希平北京大学医学部生物遗传教研室北京100083 安徽医科大学生物医学研究所安庆分所安庆246000

探讨新生儿基因细胞色素P4 5 0 2E1(CYP2E1) 5′端RsaⅠ多态性和对氧磷酶 2 (二乙基对硝基苯磷酸酯酶 2 )基因 311位点 (PON2 311)多态性对早产的影响。采用横断面调查方法 ,使用统一的调查表 ,由安庆市各县医院对入院分娩孕妇及其单胎... 详细信息

探讨新生儿基因细胞色素P4 5 0 2E1(CYP2E1) 5′端RsaⅠ多态性和对氧磷酶 2 (二乙基对硝基苯磷酸酯酶 2 )基因 311位点 (PON2 311)多态性对早产的影响。采用横断面调查方法 ,使用统一的调查表 ,由安庆市各县医院对入院分娩孕妇及其单胎、活产、早产和对照新生儿进行调查 ,共得到有效样本 194个母亲 -新生儿对。单因素分析结果显示 :CYP2E1野生纯合子基因型 (cut/cut)与突变纯合子基因型 (uncut/uncut) /杂合子基因型 (cut/uncut)比较 ,对早产的影响不具有统计学意义。而PON2Ser311Ser纯合子基因型与Cys311Cys纯合子基因型 /Cys311Ser杂合子基因型比较 ,对早产的影响具有显著的统计学意义。进一步分析CYP2E15′端RsaⅠ位点多态性和PON2 311位点多态性是否存在交互作用 ,结果显示 :CYP2E1野生纯合子基因型和PON2Ser311Ser纯合子基因型这一组合与参照组比较 ,对早产的影响具有显著的统计学意义。基因CYP2E15′端RsaⅠ位点多态性与新生儿早产不相关 ,但基因PON2 311位点多态性与新生儿早产相关 ,且CYP2E15′端RsaⅠ位点多态性和PON2 311位点多态性之间对早产的影响存在交互作用。

关键词：新生儿 CYP2E1 5'端Rsa I PON2311 P450 2E1基因对氧磷酶2基因多态性早产基因型

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人乳头瘤病毒16型晚期蛋白在昆虫细胞中的表达

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中国公共卫生 2002年第6期18卷 697-698页

作者：魏兰兰韩立群谷鸿喜凌秋哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150086 中国预防医学科学院遗传与免疫室哈尔滨医科大学动物学部

目的　构建HPV1 6型晚期蛋白重组杆状病毒 ,并使其在昆虫细胞中获得高效表达。方法　首先用线性化的杆状病毒DNA与重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重组 ,获得 2株重组杆状病毒。结果　经鉴定该重组病毒中有目的DNA存在... 详细信息

目的　构建HPV1 6型晚期蛋白重组杆状病毒 ,并使其在昆虫细胞中获得高效表达。方法　首先用线性化的杆状病毒DNA与重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重组 ,获得 2株重组杆状病毒。结果　经鉴定该重组病毒中有目的DNA存在且可表达晚期蛋白 ;电镜观察发现重组杆状病毒感染的sf9细胞核内有乳头瘤病毒VLPs。结论　HPV1 6型晚期蛋白在昆虫细胞中的成功表达为HPV1

关键词：人乳头瘤病毒16型病毒样颗粒重组杆状病毒基因表达人乳头瘤病毒感染昆明细胞

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喉癌中转谷氨酰胺酶3基因杂合性丢失和表达研究

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中华医学遗传学杂志 2002年第2期19卷 120-123页

作者：贺光赵震富伟能孙兴和徐振明孙开来中国医科大学医学遗传教研室沈阳110001 沈阳空军463医院耳鼻喉科

目的　探讨转谷氨酰胺酶 3(transglutaminase3,TGM3)基因在喉癌发生中的作用。方法　在 TGM3基因内部及附近选择微卫星标记进行杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)分析 ,于 DNA水平间接检测 72例喉癌患者中该基因的缺失 ;并进一... 详细信息

目的　探讨转谷氨酰胺酶 3(transglutaminase3,TGM3)基因在喉癌发生中的作用。方法　在 TGM3基因内部及附近选择微卫星标记进行杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)分析 ,于 DNA水平间接检测 72例喉癌患者中该基因的缺失 ;并进一步应用 Northern杂交检测 8例喉癌患者配对肿瘤及癌旁正常组织中 TGM3基因的表达差异。结果　 4个短串联重复序列 (shorttandem repeats,STR)位点均存在 L OH,其中 D2 0 S17、D2 0 S6 0 7、D2 0 S99和 D2 0 S841位点的 L OH频率分别为 2 5 .76 %、2 0 .0 0 %、38.10 %和 18.75 % ,至少 1个位点出现 L OH的病例占 6 1.11% ,杂合性丢失与临床分期、淋巴结转移和分化程度无显著相关性 ;Northern杂交结果显示 8例喉癌患者 TGM3基因在正常组织中的表达比肿瘤组织显著增强。结论　 TGM3基因在喉癌的发生中具有重要作用 ,具体机理有待进一步研究。

关键词：喉癌转谷氨酰胺酶3基因杂合性丢失基因表达

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应用反向斑点杂交技术进行脐血HLA-DRB基因分型方法的建立

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中国实验血液学杂志 2002年第2期10卷 148-152页

作者：黄以宁廖灿汤雪薇李焱谢杏梅曾瑞萍广州市妇婴医院广州市脐血库广州510180 中山医科大学医学遗传教研室广州510089

HLA分子的多态性对于移植有十分重要的意义。常用的HLA基因分型方法中SSOP基因分型方法有较高分辨率 ,但操作过程复杂 ,仅适于大样本的HLA分型。PCR SSP基因分型方法分辨率较低 ,但操作过程简单 ,适于临床要求。有必要建立一种简便、快... 详细信息

HLA分子的多态性对于移植有十分重要的意义。常用的HLA基因分型方法中SSOP基因分型方法有较高分辨率 ,但操作过程复杂 ,仅适于大样本的HLA分型。PCR SSP基因分型方法分辨率较低 ,但操作过程简单 ,适于临床要求。有必要建立一种简便、快速、价廉、高分辨率的基因分型方法。本研究取 6 3份已知HLA DRB型的脐血标本 ,经盐酸胍方法提取DNA用于反向斑点杂交 (RDB)基因分型 ,同时采用SSOP和PCR SSP方法进行比较。结果表明 ,所有样本用RDB方法基因分型均获得成功 ,可准确地分辨 6 0个HLA DRB等位基因 ,且结果与用SSOP和PCR SSP方法的结果完全一致。结论提示 ,RDB方法可准确地分辨HLA DRB等位基因 ,分辨率高 ,操作简单。

关键词：反向斑点杂交技术 HLA-DRB基因分型脐血特异性序列引物PCR 序列特异性寡核苷酸探针白细胞抗原

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