检索结果-内蒙古大学图书馆

全国氨基酸、活性肽研究开发与综合应用新技术、新设备交流研讨会

目的：利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(cgrp)的衍生物(cgrp vy),并初步鉴定其生物学活性。方法：以pet cgrp重组质粒为模板,用pcr方法扩增编码cgrp vy的基因片段,将该基因片段定向克隆到pet 32a(+)载体上,构建pet cgrp vy重组质... 详细信息

目的：利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(cgrp)的衍生物(cgrp vy),并初步鉴定其生物学活性。方法：以pet cgrp重组质粒为模板,用pcr方法扩增编码cgrp vy的基因片段,将该基因片段定向克隆到pet 32a(+)载体上,构建pet cgrp vy重组质粒,转化*** jm 109菌株,经扩增提取重组质粒,酶切和测序鉴定;将鉴定正确的重组质粒pet cgrp vy转化*** b12 1trxb(de3)plyss菌株,经iptg诱导后,收集并裂解菌体,sds page电泳检测蛋白的表达;通过粗提物扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验,初步鉴定cgrp vy扩张血管的活性,并与重组cgrp进行活性比较.结果：获得了含有cgrp成熟肽编码基因序列(111bp)及缬氨酸和亮氨酸的密码子序列(6 bp)的重组质粒pet cgrp vy,符合预期结果;经诱导后在***中表达出21.2kd的融合蛋白,初步证明其粗提物具有扩张血管的功能.结论：成功获得具有生物学活性的融合蛋白cgrp衍生物(cgrp vy),为进一步进行其降血压功能研究莫定了实验基础.

关键词：降钙素基因相关肽衍生物克隆表达生物活性降血压功能

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课堂启发式教学中充分发挥教师主导作用

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中国校外教育 2010年第4期 59-59页

作者：刘建宇许峰哈尔滨医科大学附属第二医院外科哈尔滨医科大学基础医学学院计算机教研室

课堂教学方法主要包括注入式教学法和启发式教学法。启发式教学法是提高课堂教学质量的关键。课堂上充分发挥教师的主导作用,调动学生学习的主动性,是启发式教学的核心,是提高课堂教学质量的最佳途径。

关键词：课堂教学启发式教学法主导作用

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政府与科学发展间的关系:巴斯德及巴斯德研究所的历史启示

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医学与社会 2009年第12期22卷 37-38页

作者：杨威李志平哈尔滨医科大学基础医学院医史学教研室哈尔滨150081

巴斯德是法国化学家和微生物学家,是微生物学和免疫学奠基人之一。巴斯德研究所是一个世界顶级的公益性私人科研机构。通过回顾巴斯德及巴斯德研究所的历史,对"政府与科学发展之间的关系"进行了系统阐述。

关键词：巴斯德研究所历史启示

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允许性高碳酸血症对大鼠脑缺血再灌注时脑水肿的影响

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中华麻醉学杂志 2009年第1期29卷 47-49页

作者：周强曹博李文志崔晓光李恩有王国年戚思华哈尔滨医科大学附属第二医院麻醉科 150086 哈尔滨医科大学基础医学学院组织学与胚胎学教研室 150086 哈尔滨医科大学附属第一医院麻醉科 150086 哈尔滨医科大学附属第三医院麻醉科 150086 哈尔滨医科大学附属第四医院麻醉科 150086

目的探讨允许性高碳酸血症对大鼠脑缺血再灌注时脑水肿的影响。方法健康雄性Wistar大鼠40只，随机分为5组（n=8）：假手术组（SH组）、脑缺血再灌注组（IR组）、PaCO2 60～80mmHg组（P1组）、PaCO2 81～100mmHg组（P2组）和PaCO2 101～1... 详细信息

目的探讨允许性高碳酸血症对大鼠脑缺血再灌注时脑水肿的影响。方法健康雄性Wistar大鼠40只，随机分为5组（n=8）：假手术组（SH组）、脑缺血再灌注组（IR组）、PaCO2 60～80mmHg组（P1组）、PaCO2 81～100mmHg组（P2组）和PaCO2 101～120mmHg组（B组）。采用双侧颈总动脉夹闭并发低血压法建立脑缺血再灌注损伤模型。P1组、P2组和P3组于再灌注同时吸入CO2 2h，使PaCO2分别维持在各组相应PaCO2允许范围内。再灌注24h时处死大鼠，测定脑水含量和海马水通道蛋白（AQP）-4表达。结果与SH组比较，其余4组脑水含量及AQP-4表达升高（P〈0．01）；与IR组、P1组和P2组比较，P3组脑水含量及AQP-4表达升高（P〈0．01）；与IR组比较，P1组和P2组AQP-4表达下调（P〈0．05）。结论允许性高碳酸血症PaCO2 101～120mmHg可加重大鼠脑缺血再灌注时脑水肿的程度，可能与其上调AQP-4表达有关；而PaCO2 60—100mmHg时不加重脑水肿的程度。

关键词：高碳酸血再灌注损伤脑脑水肿

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出生前后慢性铝暴露对年轻大鼠海马神经颗粒素的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2009年第3期18卷 226-228页

作者：南娟杜艳霞银杰赵永张占雀刘鹏邢伟蔡葵蔡原时利德中国医科大学基础医学院生理学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院毒理学教研室沈阳110001 哈尔滨医科大学人文社会科学学院法学教研室山西省芮城县人民医院

目的研究出生前后不同浓度慢性铝暴露对年轻大鼠海马神经颗粒素（Ng）的影响，进一步探讨铝损害学习与记忆的突触机制。方法对照组、0．2％-Al组和0．4％-Al组大鼠各15只从孕期始分别自由饮用蒸馏水、Al^3＋浓度为15mmol·L^-1和30m... 详细信息

目的研究出生前后不同浓度慢性铝暴露对年轻大鼠海马神经颗粒素（Ng）的影响，进一步探讨铝损害学习与记忆的突触机制。方法对照组、0．2％-Al组和0．4％-Al组大鼠各15只从孕期始分别自由饮用蒸馏水、Al^3＋浓度为15mmol·L^-1和30mmol·L^-1的A1Cl3水溶液制备出生前后慢性铝暴露模型；分别取学习和记忆的行为学测试后各组模型鼠9只，采用Western blot法检测海马细胞内Ng含量；组间资料统计用单因素方差分析，多重比较用LSD-t检验。结果对照组大鼠海马№目标条带的平均密度值为（96．99±6．52）；0．2％-Al暴露组为（83．59±7．17）；0．4％-Al暴露组为（62．44±14．26）。与对照组相比，0．2％-Al组海马Ng的表达明显降低（P=0．034），0．4％-Al组海马Ng表达显著性降低（P〈0．01），且铝暴露组间亦差异有显著性（P=0．002）。结论出生前后慢性铝暴露使№含量降低是其导致学习与记忆功能下降的突触机制之一。

关键词：铝暴露神经颗粒素出生前后

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贝氏方法在检测CJKV码的垃圾邮件中的应用

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网络安全技术与应用 2009年第7期 74-77页

作者：王卉欢何影卜宪庚张春山哈尔滨医科大学基础医学学院计算机教研室黑龙江150081

随着互联网系统带给我们不可估量的经济和社会效益的同时,垃圾邮件也成为全球性的难题,各种语言的垃圾邮件借助网络在全球范围内畅通无阻。本文研究针对垃圾邮件多种语言的特征,利用贝氏理论的多种方法,根据CJKV码的垃圾邮件的特点,提... 详细信息

随着互联网系统带给我们不可估量的经济和社会效益的同时,垃圾邮件也成为全球性的难题,各种语言的垃圾邮件借助网络在全球范围内畅通无阻。本文研究针对垃圾邮件多种语言的特征,利用贝氏理论的多种方法,根据CJKV码的垃圾邮件的特点,提出检测CJKV码垃圾邮件的最适合的贝氏方法。贝氏方法一直被认为是最有效的垃圾邮件的检测方法,大部分研究仅针对于英文垃圾邮件,针对中文、日文等带有汉字的CJKV码垃圾邮件的研究非常少。现在,经常被应用的贝氏方法主要有三种,它们是naive方法,Paul Graham方法,Gary Robinson方法。哪一种方法是对CJKV码的邮件进行检测的最适合的贝氏方法?这个问题还没有被探讨过。本研究通过对实际的CJKV码的垃圾邮件进行检测分析发现,Paul Graham方式取得了高检测率的同时,较其它方法显示了超低的误检测率,更适用于生成检测CJKV码垃圾邮件的过滤器。

关键词：贝氏方法 CJKV码垃圾邮件检测计算机网络网络安全电子邮件

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TNF-α转化酶酵母双杂交系统“诱饵”质粒的构建及鉴定

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中国应用生理学杂志 2008年第2期24卷 144-146,232页

作者：刘鑫于洪伟王凤丹王建醒王淑娟于晓光哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:构建酵母双杂交系统"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4... 详细信息

目的:构建酵母双杂交系统"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4 Two-Hybrid System 3中的自激活和毒性作用。结果:本实验成功构建了"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。结论:构建的诱饵质粒pGBKT7-TACE可应用在酵母双杂交系统中,为筛选小鼠cDNA文库中与TACE相互作用的蛋白奠定实验基础。

关键词： TNF-α转化酶酵母双杂交系统自激活作用

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降钙素基因相关肽衍生物克隆表达与活性鉴定

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中国老年学杂志 2008年第18期28卷 1790-1792页

作者：林平邹海峰于靖边淑玲刘紫君于晓光哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(CGRP)的衍生物(CGRP-VY),并初步鉴定其生物学活性。方法以pETC-GRP重组质粒为模板,用PCR方法扩增编码CGRP-VY的基因片段,将该基因片段定向克隆到pET-32 a(+)载体上,构建pETC-GRP-VY重组质粒,... 详细信息

目的利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(CGRP)的衍生物(CGRP-VY),并初步鉴定其生物学活性。方法以pETC-GRP重组质粒为模板,用PCR方法扩增编码CGRP-VY的基因片段,将该基因片段定向克隆到pET-32 a(+)载体上,构建pETC-GRP-VY重组质粒,转化E-.coli JM109菌株,经扩增提取重组质粒,酶切和测序鉴定;将鉴定正确的重组质粒pETC-GRP-VY转化*** BL21 trxB(DE3)pLysS菌株,经IPTG诱导后,收集并裂解菌体,SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达;通过粗提物扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验,初步鉴定CGRP-VY扩张血管的活性,并与重组CGRP进行活性比较。结果获得了含有CGRP成熟肽编码基因序列(111 bp)及缬氨酸和亮氨酸的密码子序列(6 bp)的重组质粒pETC-GRP-VY,符合预期结果;经诱导后在***中表达出21.2kD的融合蛋白,初步证明其粗提物具有扩张血管的功能。结论成功获得具有生物学活性的融合蛋白CGRP衍生物(CGRP-VY),为进一步进行其降血压功能研究奠定了实验基础。

关键词： CGRP CGRP-VY 克隆表达

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猪骨髓间充质干细胞的分离培养及核移植后重构胚胎发育能力的研究

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分子细胞生物学报 2008年第4期41卷 275-282页

作者：王振坤田江天李秋明武美玲孔庆然郑重于学武雷蕾刘忠华东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 哈尔滨医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室哈尔滨150086 东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同。本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化,对猪骨髓间充质干细胞的增殖... 详细信息

不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同。本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化,对猪骨髓间充质干细胞的增殖及生长特性进行了观察分析,并以其作为供体细胞进行核移植,对此类型细胞进行重编程的潜力进行了评估。结果表明用密度梯度离心法分离猪骨髓间充质干细胞优于全骨髓贴壁法;猪骨髓间充质干细胞数目在培养第6天达到峰值,传代培养10h时,贴壁率达到78.50%;传代培养后第4天分裂指数最高,为24.00‰;以猪骨髓间充质干细胞(pMSCs)和猪胎儿成纤维细胞(PF)分别作为供核细胞构建核移植胚胎,其体外囊胚发育率分别为14.63%与15.07%(P>0.05),孤雌对照组囊胚发育率为30.91%(P<0.05);而三组囊胚细胞数分别为30.67±17.7、24.1±6.5和25.8±11.4(P>0.05)。实验表明,体外培养的猪骨髓间充质干细胞生长增殖旺盛,生物学性状稳定,并适合作为核移植供体细胞。

关键词：猪骨髓间充质干细胞生长特性核移植

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猪戊型肝炎病毒重组蛋白ORF2-V1单克隆抗体的制备及抗原表位差异分析

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中国生物工程杂志 2008年第11期28卷 14-19页

作者：李丹丹杨春亮西北农林科技大学动物医学院预防兽医学系免疫学教研室杨凌712100 哈尔滨医科大学基础医学学院哈尔滨150081

用纯化的猪戊型肝炎病毒DQ株重组蛋白ORF2-V1免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次克隆和间接ELISA筛选,获得了αC11,αC12,γH1,γF8,BC4和CH86株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定,单... 详细信息

用纯化的猪戊型肝炎病毒DQ株重组蛋白ORF2-V1免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次克隆和间接ELISA筛选,获得了αC11,αC12,γH1,γF8,BC4和CH86株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定,单抗效价为:细胞培养上清1∶1.60×103～1∶3.20×103,腹水为1∶1.28×106～1∶2.56×106;经ELISA法测定,6株单克隆抗体均与重组蛋白ORF2-V1反应,而不与ORF2其它部分片段的蛋白反应;将试验中制备的MAbs分别用HEVswDQ株感染的A549细胞涂片进行IFA检测,同时分别用猪的阳性、阴性血清和SP2/0细胞上清做对照,制备的6株MAbs对感染细胞均呈现阳性反应,说明其可以与天然的病毒发生反应,并且与阳性多克隆血清比较,以单克隆抗体为一抗,IFA反应表现出良好的特异性。单抗的亚类鉴定结果表明,所有MAbs均为IgG1型,而且所有单克隆抗体的轻链均为κ链。单克隆抗体抗原识别位点分析结果表明,6株单抗分别针对4个不同抗原位点,McAb-γH1,BC4,CH8识别的位点各不相同,其中McAb-γH1,BC4识别的位点有部分重叠,McAb-αC11,αC12,γF8识别同一位点,位于γH1,BC4识别位点的重叠区内。

关键词：猪戊型肝炎病毒 ORF2-V1蛋白单克隆抗体识别位点

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