检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2006年第45期86卷 3173-3176页

作者：范鹰张一娜张艳桥滕宗艳李志伟武小薇李呼伦哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科 150086 哈尔滨医科大学附属第三医院内八科哈尔滨医科大学基础医学院神经生物教研室

目的观察蛋白激酶Cδ亚型(PKCδ)磷酸化激活在6羟基多巴胺(6-OHDA)引起的多巴胺能神经细胞死亡过程中所起作用,探讨帕金森病中神经元缺失的分子发病机制。方法体外培养多巴胺能神经细胞系SH-SY5Y细胞,观察预先加入的PKC抑制剂和激活剂对... 详细信息

目的观察蛋白激酶Cδ亚型(PKCδ)磷酸化激活在6羟基多巴胺(6-OHDA)引起的多巴胺能神经细胞死亡过程中所起作用,探讨帕金森病中神经元缺失的分子发病机制。方法体外培养多巴胺能神经细胞系SH-SY5Y细胞,观察预先加入的PKC抑制剂和激活剂对6-OHDA毒性作用的影响,噻唑蓝比色法观察细胞生存率,Western免疫印迹法观察磷酸化PKCδ的表达。结果PKCδ抑制剂rottlerin2μmol/L可抑制PKCδ磷酸化激活,减轻6-OHDA引起的细胞死亡约57%±6%(P<0.01)。总PKC抑制剂双吲哚亚酰胺(BisindolylmaleimideⅠ)和钙依赖性PKC抑制剂G6976不影响6-OHDA的毒性作用和PKCδ激活,而PKCδ激活剂100nmol/L佛波酯,增加磷酸化PKCδ水平,加重6-OHDA的损害,使细胞生存率下降至单用6-OHDA时生存率的66%±9%(P<0.01)。结论磷酸化激活的PKCδ是6-OHDA发挥毒性作用的关键一环,抑制PKCδ可减轻6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞死亡,说明PKCδ在帕金森病患者神经元缺失中可能起作用。

关键词：帕金森病羟多巴胺蛋白激酶C SH—SY5Y细胞

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神经干细胞的研究进展

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中华神经外科杂志 2006年第10期22卷 583-584页

作者：金连弘哈尔滨医科大学基础医学院组织胚胎学教研室 150001

干细胞（stem cell，SC）是上世纪生物医学领域的重大发现，干细胞的概念是Evans在20世纪80年代提出，是指有多种分化潜能和自我更新能力的细胞。按分化潜能的大小，干细胞可分为三种类型：全能干细胞（胚胎干细胞）、单能干细胞、多能... 详细信息

干细胞（stem cell，SC）是上世纪生物医学领域的重大发现，干细胞的概念是Evans在20世纪80年代提出，是指有多种分化潜能和自我更新能力的细胞。按分化潜能的大小，干细胞可分为三种类型：全能干细胞（胚胎干细胞）、单能干细胞、多能干细胞。神经干细胞即为多能干细胞，指可生成神经组织或起源于神经系统，具有自我更新能力并具有演化为不同成熟细胞潜能的细胞，90年代Roybholds等怛。从成年鼠脑纹状体中首次分离出神经干细胞（neural stem cell，NSC）。随着对神经干细胞的深入研究，突破了以往一直认为成年哺乳动物神经元不能再生的观念，而且通过基因修饰还可用于神经系统的基因治疗，表达外源性的神经递质、神经营养因子及代谢性酶，为许多难治性神经系统疾病开辟了一条全新的治疗途径。

关键词：神经干细胞神经系统疾病自我更新能力多能干细胞生物医学领域分化潜能成年哺乳动物神经营养因子

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人肺癌细胞中去甲长春新碱和泰索帝药物敏感性基因的比较分析

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中华肿瘤杂志 2006年第4期28卷 253-256页

作者：蔡莉李建华辛彦牛林琳臧家兰隋广杰哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内科 150040 中国医科大学基础医学院病理教研室中国医科大学第一附属医院肿瘤研究所第四研究室

目的筛选人肺癌细胞株中与去甲长春新碱(NVB)、泰索帝(Doc)药物敏感性相关的基因。方法采用MTT比色分析法,测定4株小细胞肺癌(SCLC)细胞株和6株非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株对NVB、Doc的药物敏感性;应用cDNA macroarray技术检测10株肺癌... 详细信息

目的筛选人肺癌细胞株中与去甲长春新碱(NVB)、泰索帝(Doc)药物敏感性相关的基因。方法采用MTT比色分析法,测定4株小细胞肺癌(SCLC)细胞株和6株非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株对NVB、Doc的药物敏感性;应用cDNA macroarray技术检测10株肺癌细胞株中1291个药物敏感性关联基因的表达状态,聚类分析二者间的相关性。结果(1)NVB对10株肺癌细胞株的作用效果明显优于Doc。(2)10株肺癌细胞株中,与Doc呈正相关的药物敏感性关联基因多于NVB,而与NVB呈负相关的多于Doc;而在6株NSCLC中,与Doc和NVB呈正相关、负相关一致的基因较多。(3)10株肺癌细胞株中,有51个基因与Doc、NVB药物敏感性相关联,占全部候选基因的3.95%(51/1291)。与NVB药物敏感性呈显著相关的基因27个,其中负相关24个,正相关3个;与Doc药物敏感性关联的基因24个,其中负相关13个,正相关11个。6株NSCLC株中,有67个基因与药物敏感性相关,占全部实验基因的5.19%(67/1291)。与NVB药物敏感性呈显著相关的基因29个,其中负相关25个,正相关4个;与Doc药物敏感性关联的基因38个,其中负相关34个,正相关4个。(4)Rab1、Rab3、Rho B、Rho C、Rac1、Rac2、Gho GDIβ、CD44、Integrinα5、Integrinα6、Integrinβ5、Vinculin等细胞骨架关联基因在SCLC、NSCLC中的表达存在差异。结论SCLC和NSCLC细胞株中,NVB、Doc药物敏感性相关联基因表达存在明显差异。

关键词：人肺癌细胞去甲长春新碱泰索帝药物敏感性基因

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大鼠胚胎期心脏Na^+通道基因SCN5A的表达

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哈尔滨医科大学学报 2006年第4期40卷 286-289页

作者：金剑峰董钦李凤兰陈诗慧马宁李晖哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究大鼠胚胎发育过程中,编码心肌组织电压门控Na+通道α亚单位SCN5A基因mRNA的表达和蛋白定位。方法大鼠胚胎期分7个时间点(E12.5-P1),提取心脏总RNA,RT-PCR和免疫组化方法分别检测SCN5A基因mRNA表达和蛋白定位。结果大鼠胚胎发育... 详细信息

目的研究大鼠胚胎发育过程中,编码心肌组织电压门控Na+通道α亚单位SCN5A基因mRNA的表达和蛋白定位。方法大鼠胚胎期分7个时间点(E12.5-P1),提取心脏总RNA,RT-PCR和免疫组化方法分别检测SCN5A基因mRNA表达和蛋白定位。结果大鼠胚胎发育期SCN5A基因mRNA表达呈动态模式,E12.5d(0.425±0.012)表达最少,E13.5d(0.532±0.012)和E14.5d(0.665±0.119)相对增加,E15.5d达到高峰(1.08±0.01),E17.5d(0.870±0.035)与E19.5d(0.855±0.057)相比略有降低,无显著性差别,提示胚胎发育后期表达量趋于平衡。出生后一天(P1)表达量(0.751±0.041)较胚胎期表达显著降低。除E17.5d与E19.5d比较无统计学意义外(P>0.05),其余组间比较均有统计学意义(P<0.001)。免疫组化结果显示,SCN5A蛋白表达高峰及在左、右心室肌及室间隔中表达持续时间各不相同,胚胎早期SCN5A蛋白在不同心腔表达相对均匀,后期在心外膜和心室左、右束支位置表达增强。结论SCN5A基因与大鼠胚胎心脏传导系统发生及其功能相关,Na+电流是形成胚胎发育中期心肌动作电位的主要成分。

关键词：心肌胚胎 SCN5A 基因表达

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内皮抑素在大肠杆菌中表达、纯化及复性的研究

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哈尔滨医科大学学报 2006年第5期40卷 375-378页

作者：何晶晶金德均刘兴汉王超李继宏哈尔滨医科大学第二临床医学院耳鼻咽喉头颈外科哈尔滨医科大学基础医学院生物化学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨重组人内皮抑素(recombinant human endostatin,rhES)表达、纯化及复性的最佳生产方案。方法活化rhES工程菌,诱导表达,提取并洗涤包涵体,然后变性、复性、浓缩。通过鸡胚尿囊膜实验(chorioallantoicmembrane,CAM)检测rhES活性... 详细信息

目的探讨重组人内皮抑素(recombinant human endostatin,rhES)表达、纯化及复性的最佳生产方案。方法活化rhES工程菌,诱导表达,提取并洗涤包涵体,然后变性、复性、浓缩。通过鸡胚尿囊膜实验(chorioallantoicmembrane,CAM)检测rhES活性。结果rhES产品纯度超过95%。CAM中rhES显著抑制新血管生长。结论本实验方法可以提取到高活性、高纯度的可溶性rhES,为大规模生产rhES奠定了基础。

关键词：内皮抑素大肠杆菌表达纯化复性

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基质金属蛋白酶MMP-26能有效促进人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3浸润能力

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生物化学与生物物理进展 2006年第6期33卷 524-530页

作者：吴晓秋李玉侠付雅媛李殿俊 SANG Qing-Xiang 王雁玲哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室 Department of Chemistry and Biochemistry and Institute of Molecular Biophysics Florida State UniversityTallahasseeFL 32306USA

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少... 详细信息

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少.利用国际常用的人滋养层细胞模型——人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)作为体外实验模型,探讨MMP-26在人滋养层细胞浸润调节中的作用.将含有MMP-26全长cDNA的pCR3.1质粒转染到JEG-3细胞中,获得过量表达MMP-26基因的稳定细胞系JEG-3/MMP-26;细胞浸润分析表明JEG/MMP-26细胞的浸润能力较母本细胞明显增强;RT-PCR和明胶酶谱分析显示JEG-3/MMP-26细胞中MMP-9的表达和分泌水平提高;双荧光免疫细胞化学进一步显示MMP-26和MMP-9蛋白在细胞中有共定位现象.上述结果表明MMP-26能有效促进人滋养层细胞浸润,其作用可能是通过与其他MMP分子(如MMP-9)的协调来实现的.

关键词：基质金属蛋白酶 JEG-3细胞细胞浸润人滋养层细胞

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胎鼠脊髓神经干细胞分离方法的比较

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现代生物医学进展 2006年第2期6卷 29-31页

作者：马红梅郭筠秋张洪艳汪美琪哈尔滨医科大学大庆校区基础部组胚教研室大庆163319 哈尔滨医科大学基础医学院组胚教研室

目的:比较机械法和胰酶消化法对胎鼠脊髓源神经干细胞增殖分化的影响。方法:分别用机械法和胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞,应用台盼蓝检测细胞成活率,用无血清培养技术培养神经干细胞,应用MTT法检测细胞分裂增殖能力,采用... 详细信息

目的:比较机械法和胰酶消化法对胎鼠脊髓源神经干细胞增殖分化的影响。方法:分别用机械法和胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞,应用台盼蓝检测细胞成活率,用无血清培养技术培养神经干细胞,应用MTT法检测细胞分裂增殖能力,采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化细胞。结果:机械法获得的细胞数量多于胰酶消化法。细胞经过培养其增殖能力机械法略强于胰酶消化法,但无统计学意义。培养形成的细胞球Nestin阳性,诱导分化后可见NSE和GFAP阳性细胞。结论:运用机械法比胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞方法简单,容易操作,经过培养细胞增殖能力较强。并可提供健康的细胞来源。

关键词：神经干细胞脊髓分离培养机械法胰酶消化法

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抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定

抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定

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2006第六届中国药学会学术年会

作者：武正华唐晓波王志刚纪宏宇于磊刘慧文朱大岭哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学附属二院药学部哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学基础医学院组胚教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室

目的:制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(human carboxylesterases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法:以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb... 详细信息

目的:制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(human carboxylesterases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法:以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb效价、Western blot鉴定抗体特异性、免疫组化染色法对抗体相应的抗原进行组织定位。用免疫沉淀及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF),搜索数据库鉴定mAb对应的抗原。结果:获得1株可持续、稳定分泌抗hCE-Ⅱ的mAb的杂交瘤细胞系。杂交瘤细胞分泌的mAbIg亚类(型)为IgG1(κ),腹水mAb的效价达1×10-7。Western blot分析显示,在Mr为62000处有1条清晰的条带。免疫组化染色显示,该mAb可与肝细胞的浆蛋白结合(hCE-Ⅱ存在于肝细胞浆内微粒体),而不与血管平滑肌细胞内蛋白结合。该mAb免疫沉淀物的Mr为62000,与hCE-Ⅱ的Mr相符。对免疫沉淀的蛋白质进行质谱鉴定证实,该mAb对应的抗原为hCE-Ⅱ。结论:制备出的鼠抗hCE-Ⅱ的mAb效价高、特异性良好,为进一步研究hCE-Ⅱ的功能及其在肝癌等癌症的诊断和治疗中的作用提供了工具。

关键词：人羧酸酯酶-Ⅱ 单克隆抗体基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

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阿尔茨海默病的免疫治疗

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国际免疫学杂志 2006年第1期29卷 5-7页

作者：马春王爱民朱长义（审校者）万杰医学院基础部解剖教研室淄博 255213 哈尔滨医科大学生化教研室 150086 万杰医学院基础部微免教研室

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最常见的痴呆性疾病,目前使用的药物治疗效果欠佳,免疫治疗为该病的治疗带来新的希望。主动免疫治疗虽在动物模型取得良好效果,但有少数AD病人诱发了脑膜脑炎。被动免疫治疗在动物模型和AD病人的效... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最常见的痴呆性疾病,目前使用的药物治疗效果欠佳,免疫治疗为该病的治疗带来新的希望。主动免疫治疗虽在动物模型取得良好效果,但有少数AD病人诱发了脑膜脑炎。被动免疫治疗在动物模型和AD病人的效果都是令人鼓舞的,但仍需继续观察是否有副作用,并面临抗体选择等诸多问题。现就以上几个方面的研究进展作一综述。

关键词： Alzheimer病免疫治疗

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石菖蒲及其有效成分α-细辛醚对癫痫幼鼠脑海马神经元凋亡的影响

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中草药 2006年第8期37卷 1196-1199页

作者：杨立彬李树蕾黄艳智王宇虹梁建民张淑琴吉林大学第一医院儿科吉林长春130021 吉林大学基础医学院组胚教研室吉林长春130021 长春市儿童医院吉林长春130051 哈尔滨医科大学附属第一临床医院神经科黑龙江哈尔滨150001

目的探讨石菖蒲及其有效成分α-细辛醚对戊四氮(PTZ)诱发的幼鼠癫痫发作所激发的海马区神经元凋亡的影响。方法利用光电镜技术观察癫痫幼鼠海马神经元的病理改变,TUNEL法检测凋亡细胞,免疫组织化学法检测Bax和Bcl-2的表达情况。结果致... 详细信息

目的探讨石菖蒲及其有效成分α-细辛醚对戊四氮(PTZ)诱发的幼鼠癫痫发作所激发的海马区神经元凋亡的影响。方法利用光电镜技术观察癫痫幼鼠海马神经元的病理改变,TUNEL法检测凋亡细胞,免疫组织化学法检测Bax和Bcl-2的表达情况。结果致痫对照组癫痫幼鼠海马CA1和CA3区大量神经元凋亡;药物治疗后凋亡细胞数明显减少(P<0.01);PTZ致痫各组幼鼠海马CA1和CA3区Bcl-2和Bax阳性细胞数量较正常对照组均有明显增加(P<0.01)。其中,苯巴比妥钠组、石菖蒲组、α-细辛醚组Bcl-2阳性细胞数量增加较致痫对照组显著(P<0.01);Bax阳性细胞数量各致痫组之间无显著性差异。正常对照组Bcl-2/Bax的值约为6.0;致痫对照组约为0.7;其余3组均约为1.0。结论石菖蒲和α-细辛醚可能通过增强Bcl-2表达,抑制幼鼠癫痫发作激发的海马神经元凋亡。

关键词：石菖蒲 α-细辛醚,癫痫苯巴比妥钠凋亡

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