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Uhrf1在心肌缺血再灌注损伤中调节mTOR的H3K9me2抑制自噬的作用

解剖学杂志 2021年第S1期44卷 162-162页

作者：李翰耕秦存兰谈佳岩刘慧雯哈尔滨医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室哈尔滨150081

表观遗传疗法为心肌缺血性疾病的临床治疗提供了个性化的方案和新的治疗方向。本研究探讨表观遗传因子Uhrf1在体内、外对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用机制,以及调控mTOR的H3K9me2继而影响自噬的独特分子机制。小鼠心脏左前降支... 详细信息

表观遗传疗法为心肌缺血性疾病的临床治疗提供了个性化的方案和新的治疗方向。本研究探讨表观遗传因子Uhrf1在体内、外对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用机制,以及调控mTOR的H3K9me2继而影响自噬的独特分子机制。小鼠心脏左前降支结扎再释放的方法建立体内MIRI模型;以H2O2处理的小鼠心肌细胞为体外MIRI模型。qRT-PCR、Western blotting和免疫荧光分析表明,Uhrf1显著降低心肌细胞的凋亡,Bax和caspase-3表达水平均下降,Bcl-2表达水平增加。

关键词：免疫荧光分析心肌缺血再灌注损伤保护作用机制左前降支治疗方向表观遗传自噬小鼠心肌细胞

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DNMT1表达与乳腺癌临床预后相关性研究

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黑龙江八一农垦大学学报 2019年第4期31卷 71-76,82页

作者：梁松鹤杨昕光高春艳袁丽杰张萍王麟哈尔滨医科大学(大庆)医学检验与技术学院临检教研室大庆163319 哈尔滨医科大学(大庆)医学检验与技术学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨医科大学(大庆)基础医学院病理教研室

为分析原发性乳腺癌中DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1, DNMT1)表达水平与临床预后的相关性。收集97例临床资料完整的乳腺癌手术切除标本,采用免疫组化SP法检测DNMT1、ERα、PR、HER-2、P53、ki-67在乳腺癌中的表达,将DNMT1表... 详细信息

为分析原发性乳腺癌中DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1, DNMT1)表达水平与临床预后的相关性。收集97例临床资料完整的乳腺癌手术切除标本,采用免疫组化SP法检测DNMT1、ERα、PR、HER-2、P53、ki-67在乳腺癌中的表达,将DNMT1表达水平与临床病理参数及随访生存状况进行相关性分析。结果发现:原发性乳腺癌组织中,DNMT1表达水平与Ki-67呈正相关,与其他临床病理参数未见相关性;低临床分期组、无淋巴结转移组、ER阳性组、DNMT1低表达组的5年总生存率和无病生存率均显著高于相应对照组,Ki-67低表达组仅5年总生存率高于相应对照组,HER-2阴性组仅5年无病生存率高于相应对照组;Cox风险比例模型分析显示:只有临床分期和DNMT1表达水平是影响总生存期(Overall survival, OS)和无病生存期(Disease free survival, DFS)的独立风险因素。表明原发性乳腺癌中DNMT1表达水平与肿瘤细胞恶性表型及患者生存时间有关,可能成为判断乳腺癌预后的一个重要指标。

关键词：乳腺癌 DNA甲基转移酶1 预后免疫组化

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软骨寡聚基质蛋白在SD大鼠肺动脉平滑肌表型转化中的作用

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解剖科学进展 2019年第3期25卷 296-299,303页

作者：胡兵冯晓茜陈红霞王亮倪秀芹于航哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室

目的探讨软骨寡聚基质蛋白(COMP)对肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)表型转化的影响。方法利用常氧和缺氧条件培养的SD大鼠(21%O2或10%O2饲养21d)与PASMCs(21%O2或3%O2培养48h),采用免疫组织化学染色、Western blot和q-PCR方法检测大鼠肺组织和... 详细信息

目的探讨软骨寡聚基质蛋白(COMP)对肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)表型转化的影响。方法利用常氧和缺氧条件培养的SD大鼠(21%O2或10%O2饲养21d)与PASMCs(21%O2或3%O2培养48h),采用免疫组织化学染色、Western blot和q-PCR方法检测大鼠肺组织和PASMCs COMP表达;qPCR法检测特异性siRNA敲低COMP条件下,SM22α-、SMα-actin-和calponin mRNA水平的表达;Western blot法检测缺氧、siRNA-COMP或腺病毒过表达COMP后,SM22α、SMα-actin、calponin、osteopontin和proliferating cell nuclear antigen(PCNA)蛋白的表达。结果缺氧条件下,大鼠肺组织和PASMCs中COMP表达水平降低;COMP缺失引起PASMCs收缩表型蛋白SM22α和calponin的表达减少,osteopontin和PCNA表达增加;过表达COMP可以逆转缺氧引起的肺动脉平滑肌细胞SM22α和calponin表达的减少。结论 COMP有助于维持缺氧条件下肺动脉平滑肌处于收缩表型。

关键词：软骨寡聚基质蛋白肺动脉平滑肌表型转化 SD大鼠

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实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠体内免疫细胞变化的动态检测

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国际免疫学杂志 2019年第2期42卷 136-141页

作者：孙博刘江恒刘宇汪丹丹李呼伦王广友哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室 150081

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体内CD4^+和CD8^+T细胞动态变化.方法 C57BL/6小鼠用MOG35-55多肽和完全弗式佐剂皮下两点免疫,并设立对照组,在EAE小鼠免疫后的不同时间点检测淋... 详细信息

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体内CD4^+和CD8^+T细胞动态变化.方法 C57BL/6小鼠用MOG35-55多肽和完全弗式佐剂皮下两点免疫,并设立对照组,在EAE小鼠免疫后的不同时间点检测淋巴结中活化的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例变化,检测脊髓内浸润的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞.结果成功建立EAE动物模型,在免疫后第11天开始发病,病理学检测发现脊髓内有大量淋巴细胞浸润和脱髓鞘的现象,免疫荧光染色发现在发病高峰期脊髓内开始出现CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的浸润,而外周免疫器官淋巴结里,活化的CD4^+T细胞比例明显增多(P<0.05).结论 EAE中虽然外周活化的CD4^+T细胞比例升高,但CD4^+T细胞和CD8^+T细胞都会浸润到脊髓中.

关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4^+T细胞 CD8^+T细胞单核细胞

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褪黑素通过上调Beclin1-Atg信号通路激活自噬抵抗H2O2引起的海马神经过氧化损伤

褪黑素通过上调Beclin1-Atg信号通路激活自噬抵抗H2O2引起的海马...

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：高强郭晓成王娇曹扬吕春梅朱辉哈尔滨医科大学基础医学院生理教研室

海马衰老严重损害老年人的认知能力和生活质量。H2O2引起的氧化损伤是导致海马衰老的重要原因之一。褪黑素具有神经保护能力,然而其保护海马神经免受H2O2损伤的机制尚不明确。自噬对于海马神经的过氧化损伤的影响也需要更多的研究。因此... 详细信息

海马衰老严重损害老年人的认知能力和生活质量。H2O2引起的氧化损伤是导致海马衰老的重要原因之一。褪黑素具有神经保护能力,然而其保护海马神经免受H2O2损伤的机制尚不明确。自噬对于海马神经的过氧化损伤的影响也需要更多的研究。因此,我们想研究褪黑素是否通过调节自噬抵抗H2O2对海马神经的损伤,并探明其中调节自噬的相关信号通路。

关键词：海马神经氧化损伤信号通路 Beclin1-Atg H2O2

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肌动蛋白对授乳所致下丘脑星形胶质细胞可塑性变化中GFAP与其他功能蛋白间相互作用的影响

肌动蛋白对授乳所致下丘脑星形胶质细胞可塑性变化中GFAP与其他功...

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：于佳未李彤李冬洋刘晓宇王潇然贾淑伟王羽峰哈尔滨医科大学基础医学院生理教研室

目的:胶质纤维酸性蛋白(GFAP)主要表达于星形胶质细胞,是一种中间丝蛋白,而囊泡相关膜蛋白(VAMP)也广泛表达于星形胶质细胞并且参与多种神经系统疾病的病理过程。因而,阐明GFAP对VAMP的功能作用及其调控机制,不仅具有重要的理论价值,而... 详细信息

目的:胶质纤维酸性蛋白(GFAP)主要表达于星形胶质细胞,是一种中间丝蛋白,而囊泡相关膜蛋白(VAMP)也广泛表达于星形胶质细胞并且参与多种神经系统疾病的病理过程。因而,阐明GFAP对VAMP的功能作用及其调控机制,不仅具有重要的理论价值,而且对制定相关脑疾病的防治策略也具有重要参考价值。本项研究的目的在于探究授乳所致视上核下丘脑星形胶质细胞可塑性变化中肌动蛋白对GFAP与VAMP等功能蛋白相互作用的影响。方法:本研究利用授乳大鼠作为在体研究模型,人工脑脊液中孵育的雄性大鼠脑片作为离体模型,使用免疫组化、免疫印迹和共免疫沉淀等实验方法观察了GFAP、肌动蛋白以及VAMP的表达。结果:研究结果显示,在授乳过程中,吸吮刺激使星形胶质细胞突起中GFAP回缩及AQP4等膜功能蛋白表达减少,伴随胞体肌动蛋白和GFAP表达增多,以及GFAP分子与肌动蛋白的相互交联作用的明显增加。当射乳反射(MER)发生后星形胶质细胞突起扩张时,GFAP纤维及AQP4等在突起表达增多,GFAP分子与肌动蛋白的相互交联也明显减弱。当母子分离使催产素神经元兴奋性降低,射乳反射发生障碍时,星形胶质细胞突起中GFAP明显扩张,并伴随AQP4等膜功能蛋白表达的增多。此外,免疫印迹分析显示吸吮刺激不同阶段,VAMP与GFAP的表达量呈现同步变化;共免疫沉淀结果显示,GFAP与VAMP的相互交联作用在吸吮刺激时明显减弱,而在MER时增加。最后,我们以催产素处理离体孵育的脑片来模拟吸吮刺激,以催产素加钾离子来模拟MER时,GFAP与VAMP的表达与相互交联作用变化与在体结果相同,而给予肌动蛋白阻断剂细胞松弛素-D后则反转以上变化。结论:GFAP对膜功能蛋白的空间定位具有引导作用;肌动蛋白在GFAP对VAMP的等膜功能蛋白的引导作用中,发挥关键作用。

关键词：星形胶质细胞授乳肌动蛋白胶质纤维酸性蛋白囊泡相关膜蛋白

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下丘脑腹侧结节乳头体核组织胺能神经元与视上核催产素神经元之间神经环路的鉴定

下丘脑腹侧结节乳头体核组织胺能神经元与视上核催产素神经元之间...

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2019中国生理学会学术年会暨张锡钧基金第十五届全国青年优秀生理学学术论文交流会及第十三届全国青年生理学工作者学术会议

作者：李彤刘晓宇王潇然贾淑伟王羽峰哈尔滨医科大学基础医学院生理教研室

我们早期研究发现,下丘脑腹后内侧部的乳头体核在催产素神经元同步化爆发放电中具有关键性作用,其中腹侧结节乳头体核(VTM)的组织胺能神经元可能是同步化信号的来源。本项研究的目的在于鉴定组织胺能神经元与视上核中催产素神经元之间... 详细信息

我们早期研究发现,下丘脑腹后内侧部的乳头体核在催产素神经元同步化爆发放电中具有关键性作用,其中腹侧结节乳头体核(VTM)的组织胺能神经元可能是同步化信号的来源。本项研究的目的在于鉴定组织胺能神经元与视上核中催产素神经元之间是否存在神经环路联系,并参与同步化活动的调节。为此,我们使用光遗传和膜片钳记录等技术来研究大鼠VTM中组织胺合成酶-组氨酸脱羧酶阳性神经元与催产素神经元之间的结构和功能联系。我们将视上核的催产素神经元和VTM的组织胺能神经元标记后成像发现,视上核与VTM间有双向纤维联系。离体灌流组织胺使下丘脑水平切片中催产素神经元的放电率明显降低,洗脱组织胺后出现爆发放电;而灌流催产素后VTM中神经元的放电活动减少。我们在给VTM中的组织胺能神经元转入光敏通道ChR2后并用间断蓝色激光激活组织胺能神经元的活动时,视上核中催产素神经元放电形式明显改变。以上结果表明视上核的催产素神经元与VTM的组织胺能神经元可以构成一个相互抑制的神经环路,这一环路可能在授乳、分娩、摄食、睡眠觉醒等生理和病理过程中发挥重要的调节作用。

关键词：下丘脑催产素神经元同步化爆发放电腹侧结节乳头体核组织胺能神经元

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外源性H_2S恢复缺氧后适应对衰老H9C2细胞的保护作用及机制

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中国应用生理学杂志 2018年第4期34卷 289-293页

作者：孙伟铭张源洲温馨席雨鑫袁迪王跃虹魏璨徐长庆李鸿珠哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的:探讨外源性硫化氢(H_2S)恢复缺氧后适应对衰老H9C2细胞的保护作用及相关机制。方法:H9C2细胞(心肌细胞系)用30μmol/L过氧化氢(H_2O_2)处理2 h后再培养3 d,诱导生成衰老细胞。衰老H9C2细胞被随机分5组(n=8):正常组(Control)、缺氧... 详细信息

目的:探讨外源性硫化氢(H_2S)恢复缺氧后适应对衰老H9C2细胞的保护作用及相关机制。方法:H9C2细胞(心肌细胞系)用30μmol/L过氧化氢(H_2O_2)处理2 h后再培养3 d,诱导生成衰老细胞。衰老H9C2细胞被随机分5组(n=8):正常组(Control)、缺氧/复氧组(H/R)、H/R+NaHS组、缺氧后适应(PC)组、PC+NaHS组。缺氧/复氧(H/R)模型:衰老H9C2细胞用缺氧液(无血清、无糖培养基,p H=6.8)培养3 h,然后正常培养6h;缺氧后适应(PC)模型:方法同H/R模型,缺氧结束复氧前连续进行3次5 min间隔的复氧/再缺氧处理,随后复氧6 h。ELISA试剂盒分别检测大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)含量和caspase-3活性; CCK-8试剂盒检测细胞活力; DCFH-DA染色检测活性氧(ROS)水平; Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率; Real-time PCR检测相关基因m RNA水平。结果:30μmol/L H_2O_2可诱导H9C2细胞衰老但不会导致其凋亡;与Control组比较,H/R和PC均降低细胞活力,增加细胞凋亡率、ROS水平及caspase-3、caspase-9和Bcl-2 m RNA水平(P<0.01);且PC组与H/R组比较,上述指标变化无明显差异;在H/R和PC组加入NaHS,可显著提高细胞活力,降低细胞凋亡率和氧化应激; PC+NaHS对上述指标的作用明显强于H/R+NaHS。结论:外源性H_2S能够恢复PC对衰老H9C2细胞的保护作用,其机制与抑制氧化应激和细胞凋亡有关。

关键词：硫化氢缺氧/复氧缺氧后适应 H9C2细胞细胞凋亡

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坐骨神经预损伤对脊髓损伤后小鼠神经功能恢复的影响

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解剖科学进展 2019年第5期25卷 552-555页

作者：毛东升李怡萱许凤燕唐旭东 JAY PRAKASH PRASAD KUMAL 吴迪孙亮吴树亮哈尔滨医科大学基础医学院人体解剖学教研室

目的研究坐骨神经预损伤对脊髓损伤后小鼠神经功能恢复的影响。方法以C57BL/6小鼠为研究对象,分为假手术组(对照组,Control),脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)组和坐骨神经预损伤(sciatic nerve injury,SNI)组。假手术组仅移除小鼠T8-... 详细信息

目的研究坐骨神经预损伤对脊髓损伤后小鼠神经功能恢复的影响。方法以C57BL/6小鼠为研究对象,分为假手术组(对照组,Control),脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)组和坐骨神经预损伤(sciatic nerve injury,SNI)组。假手术组仅移除小鼠T8-T10椎骨上棘暴露胸髓,SCI组移除小鼠T8-T10椎骨上棘暴露胸髓给予外力打击造成标准损伤,SNI组小鼠手术切断右腿坐骨神经,在预损伤7d后进行脊髓损伤。在恢复期(即脊髓损伤14d后),通过电生理实验检测运动神经传导功能,通过组织病理学检验检测组织缺损恢复、髓鞘再生及小胶质细胞的募集活化。结果电生理实验表明SNI组小鼠运动传导功能恢复明显强于SCI组;HE染色结果说明SNI组脊髓组织缺损恢复情况明显强于SNI组;以MBP为指标的免疫荧光结果显示SNI组髓鞘含量明显多于SCI组,髓鞘再生能力明显增强;以IBA-1为指标的免疫荧光结果显示SNI组小胶质细胞明显增多,坐骨神经预损伤明显增强了小胶质细胞的募集活化作用。结论坐骨神经预损伤处理可促进小鼠脊髓损伤后组织形态恢复、小胶质募集活化作用、髓鞘再生作用和神经传导功能的恢复。

关键词：脊髓损伤坐骨神经预损伤髓鞘再生

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协作测试指引人体解剖学考试改革的实证研究

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基础医学教育 2019年第7期21卷 505-507页

作者：肖建兵杨树才李雪梅刘宝全李鑫磊哈尔滨医科大学基础医学院人体解剖学教研室

人体解剖学课程系统性、实践性较强,学生学习有一定难度。为了通过考试评价学生的综合素质和能力,激发学生学习兴趣,在考试中采用协作测试法。结果表明应用协作测试法后,学生成绩提高显著,并且有效提高学生自我效能感,具有较强的适用性... 详细信息

人体解剖学课程系统性、实践性较强,学生学习有一定难度。为了通过考试评价学生的综合素质和能力,激发学生学习兴趣,在考试中采用协作测试法。结果表明应用协作测试法后,学生成绩提高显著,并且有效提高学生自我效能感,具有较强的适用性,为其他考试改革提供了一定借鉴。

关键词：人体解剖学协作测试考试改革

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