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第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议

作者：傅振坤陈双李殿俊哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室

诱导受体3 (DCR3)位于人20号染色体,又称肿瘤坏死因子受体超家族分子6β,DCR3可以结合FasL、LIGHT及TL1A调节免疫应答.在肿瘤组织中可以观察到DCR3的高表达,提示DCR3可能对于肿瘤的早期诊断及预后判断发挥作用.本研究探讨了乳腺癌患者... 详细信息

诱导受体3 (DCR3)位于人20号染色体,又称肿瘤坏死因子受体超家族分子6β,DCR3可以结合FasL、LIGHT及TL1A调节免疫应答.在肿瘤组织中可以观察到DCR3的高表达,提示DCR3可能对于肿瘤的早期诊断及预后判断发挥作用.本研究探讨了乳腺癌患者及正常对照者的DCR3基因多态性与乳腺癌的发病风险的关系.本研究涉及DCR3基因的rs3208008、rs41309931、rs2297441、rs909341及rs1291207共5个SNPs位点,结果发现rs41309931、rs909341及rs1291207的基因型及等位基因频率具有统计学意义(P＜0.05).在单体型研究中,共发现3个频率大于5％的单体型,其中AGGTA及ATGTA在乳腺癌患者中频率低.本研究的结果发现,DCR3基因多态性与中国女性散发性乳腺癌的发病风险具有相关性.

关键词： DCR3 乳腺癌基因多态性

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表皮生长因子诱导人脐静脉内皮细胞迁移过程中波形蛋白及基质金属蛋白酶2的表达变化

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解剖学报 2013年第6期44卷 789-794页

作者：卢诗军杨慧科马文平李晓冬张雅芳哈尔滨医科大学基础医学院解剖学教研室哈尔滨150081 黑龙江护理高等专科学校解剖学教研室哈尔滨150086 沈阳市第二中医院神经外科沈阳110101

目的观察人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移过程中表皮生长因子(EGF)对波形蛋白(vimentin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响,分析波形蛋白与EGF促HUVECs迁移能力的关系。方法 EGF处理HUVECs细胞10h后,采用细胞划痕实验检测HUVECs细胞的... 详细信息

目的观察人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移过程中表皮生长因子(EGF)对波形蛋白(vimentin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响,分析波形蛋白与EGF促HUVECs迁移能力的关系。方法 EGF处理HUVECs细胞10h后,采用细胞划痕实验检测HUVECs细胞的迁移水平,荧光显微镜下观察细胞的形态变化情况;免疫荧光染色观察划痕诱导HUVECs迁移时波形蛋白的表达变化;Western blotting和RT-PCR法分析MMP-2及波形蛋白表达。结果 EGF刺激后HUVECs的迁移能力上升1.8倍,迁移细胞的形态发生改变,由铺路石样变为长梭形,同时波形蛋白和MMP-2的表达上调(P<0.05)。结论 EGF促进HUVECs的迁移过程中可明显上调波形蛋白和MMP-2的表达,波形蛋白与HUVECs的迁移相关。

关键词：表皮生长因子细胞迁移波形蛋白基质金属蛋白酶2 免疫印迹法

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第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议

作者：夏福灿裴春颖田琳璐姜鹏字程海荣傅嫣然徐红薇哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室

免疫相关GTP酶家族成员IRGM/IRGM1在巨噬细胞相关的抗感染免疫应答中发挥重要作用,但其在非感染免疫过程中的作用仍不清楚.我们的前期研究证实在小鼠动脉粥样硬化斑块中浸润的巨噬细胞内IRGM1高表达,提示IRGM1可能通过调节巨噬细胞对氧... 详细信息

免疫相关GTP酶家族成员IRGM/IRGM1在巨噬细胞相关的抗感染免疫应答中发挥重要作用,但其在非感染免疫过程中的作用仍不清楚.我们的前期研究证实在小鼠动脉粥样硬化斑块中浸润的巨噬细胞内IRGM1高表达,提示IRGM1可能通过调节巨噬细胞对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)的吞噬和代谢进而参与动脉粥样硬化的发生发展.目的:研究IRGM/IRGMl在动脉粥样硬化发病过程中巨噬细胞来源泡沫细胞形成中的作用.方法:1)利用高脂饲料饲养ApoE-/-小鼠,诱导小鼠动脉粥样硬化模型并通过western blot和免疫荧光染色检测IRGM1在斑块内表达及细胞定位,通过免疫组化染色检测IRGM在人动脉粥样硬化斑块内的表达;2)收集/诱导原代巨噬细胞(小鼠腹腔巨噬细胞,小鼠骨髓诱导巨噬细胞,人外周血单核细胞诱导的巨噬细胞),利用PMA刺激活化人THP1细胞;体外利用oxLDL诱导巨噬细胞源性泡沫细胞的形成,通过western blot和免疫荧光染色检测1RG M/I RGM1的表达,通过real-time PCR检测miR196的表达;3)收集健康人的外周血单核细胞并用hGM-CSF诱导其分化为巨噬细胞,然后oxLDL处理24小时,再用miR196 mimic处理12小时后收集蛋白,通过western blot检测IRGM的表达;4)体外利用Dil-oxLDL处理来自Irgm1+/+小鼠和Irgm1-/-小鼠的原代巨噬细胞及经过IRGM siRNA处理的人原代巨噬细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测泡沫细胞的形成;5)通过抗体介导的受体交联内化实验和聚合型F-actin的Phalloidin特染实验,应用免疫荧光染色和流式细胞术检测巨噬细胞表面CD36受体的内化能力及细胞内F-actin的聚合能力;6)利用高脂饲料喂养ApoE基因缺失背景下的Irgm1 +/+小鼠和Irgm1+,-小鼠16周,对小鼠进行心脏灌注和胸腹主动脉取材,然后对动脉粥样硬化斑块进行油红染色和斑块面积定量分析.

关键词：免疫相关GTP酶1(IRGM/IRGM1) oxLDL 巨噬细胞泡沫细胞

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正交实验法优选蓝莓提取工艺

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中国医药 2013年第S1期8卷 73-74页

作者：解岩黄伟王鹏王晓艳 163319 哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室

目的研究影响蓝莓提取的各种因素,确定最佳提取的工艺条件.方法以乙醇浸膏收率、抗感染效果为指标,采用正交实验,考察乙醇提取次数、加醇量、醇浓度、提取时间四个因素的影响.结果在考察因素中,对乙醇浸膏收率、抗感染效果影响程度... 详细信息

目的研究影响蓝莓提取的各种因素,确定最佳提取的工艺条件.方法以乙醇浸膏收率、抗感染效果为指标,采用正交实验,考察乙醇提取次数、加醇量、醇浓度、提取时间四个因素的影响.结果在考察因素中,对乙醇浸膏收率、抗感染效果影响程度均为醇浓度C＞提取次数A＞提取时间D＞加醇量B.结论综合考虑两方面因素,其中以抗感染效果为主要指标,最后确定蓝莓的最佳提取工艺为A1B3C2D2,即用75％乙醇10倍量,每次4h,提取2次.

关键词：蓝莓正交实验法提取工艺

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全人源抗人TRAIL-R1单克隆抗体诱导肿瘤细胞凋亡的研究

全人源抗人TRAIL-R1单克隆抗体诱导肿瘤细胞凋亡的研究

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第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议

作者：杨复娇刘晔芦凤亮宗卫娇梁媛高翔金艾顺 150081 哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室

目的探讨本研究组制备的全人源抗人TRAIL-R1单克隆抗体TRAILR1-422 (TR1-422)诱导肿瘤细胞凋亡的作用.方法利用竞争ELISA法鉴定TR1-422与TRAIL-R1结合特异性;流式细胞分析检测与Jurkat细胞表面TRAIL-R1的结合能力;细胞计数法计算TR1-... 详细信息

目的探讨本研究组制备的全人源抗人TRAIL-R1单克隆抗体TRAILR1-422 (TR1-422)诱导肿瘤细胞凋亡的作用.方法利用竞争ELISA法鉴定TR1-422与TRAIL-R1结合特异性;流式细胞分析检测与Jurkat细胞表面TRAIL-R1的结合能力;细胞计数法计算TR1-422在不同时间点对Jurkat细胞生存和细胞增殖的影响;镜下观察TR1-422对肿瘤细胞的作用;Annexin V/PI双染色评价TR 1-422诱导Jurkat细胞凋亡的作用.结果 TR1-422与Jurkat细胞表面TRAIL-R1高度特异结合;与无相关IgG抗体组比较表达率变化72.3％. 1 μg/ml TR1-422与10μg/ml抗人IgG交联作用于Jurkat细胞在不同时间点(24h和48h)的生存率分别为72.57％,64.08％,对照组分别为96.14％,95.69％(t=2.534,P＜0.05;t=3.147,P＜0.05);镜下观察,1μg/ml TR 1-422与10μg/ml抗体交联作用72h后,Jurkat细胞出现大量死亡;1μg/ml TR1-422与10μg/ml抗体交联作用24h,Annexin V阳性率达30％,而1μg/ml TR1-422单独作用为12.8％(t=2.355,P＜0.05);各组未检测到PI阳性细胞.结论本研究证实我组制备的抗TRAIL-R1全人源单抗与抗体交联作用可促进肿瘤细胞凋亡,提高抗肿瘤治疗效果.

关键词： TRAIL TRAIL-R1 单抗细胞凋亡

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体外诱导外周血B淋巴细胞分化浆细胞方法的建立及评价

体外诱导外周血B淋巴细胞分化浆细胞方法的建立及评价

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第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议

作者：梁嫒芦凤亮宗卫娇刘晔高翔金艾顺 150081 哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室

目的建立体外活化外周血单个核细胞(PBMCs)中B淋巴细胞扩增和分化浆细胞的方法,为高亲和力治疗性人源单克隆抗体的研发提供研究基础.方法从3名接种过流感疫苗健康志愿者(＞10个月)的末梢血中分离PBMCs,加入TLR9激动剂CpG DNA 2006和... 详细信息

目的建立体外活化外周血单个核细胞(PBMCs)中B淋巴细胞扩增和分化浆细胞的方法,为高亲和力治疗性人源单克隆抗体的研发提供研究基础.方法从3名接种过流感疫苗健康志愿者(＞10个月)的末梢血中分离PBMCs,加入TLR9激动剂CpG DNA 2006和细胞因子等培养;流式细胞分析、酶联免疫吸附试验(ELISA)、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)、细胞计数法评价B淋巴细胞体外活化效果.结果与对照组相比,刺激组中CD19阳性细胞和CD138阳性细胞的比率明显增高(t=2.625,P＜0.05;t=3.571,P＜0.05),培养上清中总IgG和抗原特异性IgG含量增加,且分泌IgG和抗原特异性IgG的浆细胞数量明显增加(t=2.942,P＜0.05;t=3.196,P＜0.05),刺激组比未刺激组细胞生存率提高(t=2.182,P＜0.05).通过体外活化方法,只需约10 ml外周血即可检测到足量的抗原特异性抗体分泌细胞.结论本试验所建立的体外活化方法能够有效地诱导外周血B淋巴细胞扩增和分化浆细胞.

关键词： B淋巴细胞浆细胞体外活化外周血单个核细胞

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小鼠胚胎第一次细胞命运决定的分子调控机制

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生命科学 2013年第7期25卷 730-734页

作者：吴稀白光宇孙瑞珍李彤雷蕾哈尔滨医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室

着床前小鼠的发育过程中,随着囊胚的形成,胚胎建立了两个不同的细胞系:滋养外胚层(TE)和内细胞团(ICM),且发生两次重要的命运选择。主要回顾了两个经典发育模式,即内外模式(inside-outsidemodel)和极性模式(polarity model),总结了TE和... 详细信息

着床前小鼠的发育过程中,随着囊胚的形成,胚胎建立了两个不同的细胞系:滋养外胚层(TE)和内细胞团(ICM),且发生两次重要的命运选择。主要回顾了两个经典发育模式,即内外模式(inside-outsidemodel)和极性模式(polarity model),总结了TE和ICM第一次谱系分离过程中起关键作用的分子调控机制,并探讨了存在于卵裂球间的分子差异,对细胞极性、细胞命运和分子调节之间存在的复杂联系也进行了讨论。

关键词：滋养外胚层内细胞团 Cdx2 Oct4 Hippo

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阿托伐他汀预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用机制研究

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中国急救医学 2013年第9期33卷 844-846页

作者：高凤敏安锦丹李雪峰徐晶郭继芳姜锋王坤牡丹江医学院附属红旗医院心内科黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院基础医学院病理教研室黑龙江牡丹江157011 哈尔滨医科大学附属第三医院黑龙江哈尔滨158001

目的阿托伐他汀具有多重心肌保护作用,但其机制尚不明确,本文应用大鼠心肌缺血-再灌注损伤（MIRI）模型研究短期阿托伐他汀预处理的心肌保护作用,并对其与血浆内皮素（ET）、血栓素A2（TXA2）、前列环素（PGI2）的关系进行初步探讨.方... 详细信息

目的阿托伐他汀具有多重心肌保护作用,但其机制尚不明确,本文应用大鼠心肌缺血-再灌注损伤（MIRI）模型研究短期阿托伐他汀预处理的心肌保护作用,并对其与血浆内皮素（ET）、血栓素A2（TXA2）、前列环素（PGI2）的关系进行初步探讨.方法将80只雄性SD大鼠随机等分为4组：假手术组（A组,生理盐水5 mL/d）、MIRI组（B组,生理盐水5 mL/d）、阿托伐他汀标准剂量预处理组[C组,阿托伐他汀20 mg/（kg·d）]和阿托伐他汀强化剂量预处理组[D组,阿托伐他汀40 mg/（kg·d）].灌胃3 d后,第4天制作大鼠在体MIRI模型,结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min后,用放射免疫分析法测定血浆ET、TXA2、PGI2含量.结果与A组比较,B组血浆ET和TXA2水平升高、PGI2水平及PGI2/TXA2比值降低（P〈0.05）;与B组比较,C组ET和TXA2水平降低、PGI2水平及PGI2/TXA2比值升高（P〈0.05）;与C组比较,D组ET和TXA2水平降低、PGI2水平及PGI2/TXA2比值升高更为明显（P〉0.05）.结论在大鼠MIRI中,阿托伐他汀预处理可促进PGI2生成,扩张血管,削弱内皮因子的收缩作用,降低ET含量,调节PGI2/TXA2平衡,改善微循环,从而发挥心肌保护作用.

关键词：心肌缺血-再灌注损伤（MIRI）阿托伐他汀内皮素血栓素A2 前列环素

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VEGF-D的表达与结肠癌淋巴管生成及淋巴结转移的相关性

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解剖科学进展 2013年第4期19卷 307-310页

作者：李晓冬王劲健李晓峰常英哈尔滨医科大学基础医学院人体解剖学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨血管内皮生长因子-D(Vascular endothelial growth factorD,VEGF-D)在结肠癌组织中的表达规律,及其与结肠癌淋巴管密度(LVD)、淋巴结转移之间的关系。方法采用免疫组化法对43例人结肠癌组织和14例结肠良性病变组织的VEGF-D表达... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子-D(Vascular endothelial growth factorD,VEGF-D)在结肠癌组织中的表达规律,及其与结肠癌淋巴管密度(LVD)、淋巴结转移之间的关系。方法采用免疫组化法对43例人结肠癌组织和14例结肠良性病变组织的VEGF-D表达进行分析,以LYVE-1标记淋巴管,测算淋巴管密度,统计分析结肠癌中的VEGF-D表达与结肠癌临床病理特征的关系。采用Western-blot法检测16例人结肠癌组织中淋巴结转移组和无淋巴结转移组的VEGF-D蛋白表达。结果免疫组化结果显示结肠癌组织中VEGF-D的阳性率明显高于结肠良性病变组织,并且与结肠癌组织的LVD成正相关。Western-blot结果显示结肠癌中淋巴结转移组的VEGF-D的表达量较无淋巴结转移组明显增加,VEGF-D表达与患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期显著相关,而与年龄和肿瘤大小无关。结论结肠癌组织中VEGF-D的高表达可能与结肠癌的淋巴管的新生及淋巴结转移有关。

关键词：血管内皮生长因子-D 淋巴管新生淋巴道转移人结肠癌

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固有免疫中信号转导和转录激活因子在脓毒症中的作用

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国际免疫学杂志 2013年第5期36卷 379-382页

作者：杨旭刘洪羽陈鹤哈尔滨医科大学基础医学院病理教研室 150081 齐齐哈尔市第一医院病理科 161006

固有免疫是生物体长期种系进化过程中形成的一系列防御机制.其可对侵入的病原体迅速产生应答,发挥非特异抗感染免疫作用.在固有免疫中,白细胞的募集和激活是很有必要的,可被各种化学介质调控,这其中就包括细胞因子.研究表明,信号转导和... 详细信息

固有免疫是生物体长期种系进化过程中形成的一系列防御机制.其可对侵入的病原体迅速产生应答,发挥非特异抗感染免疫作用.在固有免疫中,白细胞的募集和激活是很有必要的,可被各种化学介质调控,这其中就包括细胞因子.研究表明,信号转导和转录激活因子（STAT）蛋白在脓毒症期间大鼠的固有免疫中起着重要作用,并且不同的细胞因子活化的STAT不同.STAT1、STAT3、STAT4和STAT6可以分别介导IFN-γ、IL-10、IL-12和IL-13信号.细胞因子信号转导抑制因子（SOCS）是对细胞因子应答而迅速被诱导的蛋白质家族,可以通过JAK/STAT信号途径减弱细胞因子的信号传导,由此将为治疗脓毒血症提供了理论依据.

关键词：脓毒症细胞因子固有免疫信号转导抑制因子

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