检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2023年第8期18卷 922-926页

作者：李丹韩萌都建安然安徽医科大学基础医学院生物化学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032

目的制备抗弓形虫钙依赖蛋白激酶(TgCDPK3)多克隆抗体,为进一步探究TgCDPK3在弓形虫中的作用奠定基础。方法将酶切鉴定正确的原核重组表达载体pET28a-TgCDPK3转化BL21,使用IPTG诱导表达重组TgCDPK3蛋白,利用His-Ni Beads亲和层析法纯化... 详细信息

目的制备抗弓形虫钙依赖蛋白激酶(TgCDPK3)多克隆抗体,为进一步探究TgCDPK3在弓形虫中的作用奠定基础。方法将酶切鉴定正确的原核重组表达载体pET28a-TgCDPK3转化BL21,使用IPTG诱导表达重组TgCDPK3蛋白,利用His-Ni Beads亲和层析法纯化重组pET-28a-TgCDPK3蛋白。取纯化蛋白用弗氏佐剂乳化后通过皮下多点注射免疫新西兰大白兔,一周后加强免疫,共2次。末次免疫后1周取血,分离血清,通过ELISA测定抗体效价,Western blot检测抗血清与内源天然TgCDPK3蛋白以及重组表达蛋白TgCDPK3的反应性。同时以该抗血清为一抗采用免疫荧光法进行TgCDPK3蛋白的定位。结果pET-28a-TgCDPK3转化BL21后表达相对分子质量为59×103的His-TgCDPK3蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,制备的抗血清抗体效价为1∶64000。Western blot检测该抗血清能识别来源于弓形虫ME-49株的TgCDPK3蛋白及外源重组TgCDPK3蛋白。免疫荧光检测显示TgCDPK3定位于弓形虫速殖子膜表面。结论成功制备TgCDPK3多克隆抗体,该抗体效价高且特异性强,可用于相关基础实验,为进一步探究TgCDPK3在弓形虫中的作用奠定了基础。

关键词：弓形虫 TgCDPK3 多克隆抗体免疫荧光

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负载泼尼松龙牛奶外泌体治疗杜兴肌肉萎缩症的研究

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天津医科大学学报 2024年第3期30卷 218-223页

作者：钟丽宋军栗瑞斌韩刚尹海芳天津医科大学基础医学院细胞生物学系天津300070 天津医科大学医学技术学院临床生物化学教研室天津300203

目的:探究牛奶外泌体(mEXO)减少泼尼松龙(PSL)治疗杜兴肌肉萎缩症(DMD)的药物不良反应的效果。方法:将超速离心法收集的mEXO与PSL共孵育得到生物纳米药物(mEXO_(PSL));通过高效液相色谱(HPLC)检测药物装载效率;对DMD模型mdx小鼠给予口... 详细信息

目的:探究牛奶外泌体(mEXO)减少泼尼松龙(PSL)治疗杜兴肌肉萎缩症(DMD)的药物不良反应的效果。方法:将超速离心法收集的mEXO与PSL共孵育得到生物纳米药物(mEXO_(PSL));通过高效液相色谱(HPLC)检测药物装载效率;对DMD模型mdx小鼠给予口服治疗;监测mdx小鼠体重和体长变化,评估mEXO减轻PSL引起的生长抑制不良反应的效果,利用苏木素-伊红(HE)染色和micro-CT分析骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(***)和骨小梁间隙(***)等骨密度相关指标,评估mEXO减轻PSL引起的骨质疏松不良反应的效果;利用HE染色和CD68免疫组织化学染色检测肌肉病理情况及炎症浸润情况,评估mEXO_(PSL)的治疗效果。结果:通过共孵育可实现54.6%PSL在mEXO的负载;mdx小鼠经治疗后,与PSL组相比,mEXO_(PSL)组mdx小鼠体重(P<0.01)及体长(P<0.01)显著增加;与PSL组相比,mEXO_(PSL)组mdx小鼠的BV/TV(P<0.01)、Tb.N(P<0.01)和***(P<0.05)显著增加,***(P<0.05)显著减少;与生理盐水组相比,PSL组和mEXO_(PSL)组肌肉病理以及炎症浸润均显著改善。结论:mEXO_(PSL)显著减少了mdx小鼠的生长抑制及骨质疏松药物不良反应,对PSL进行了药物改良。

关键词：牛奶外泌体泼尼松龙杜兴肌肉萎缩症

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TMEM240慢病毒载体构建及在人神经母细胞瘤细胞中的表达

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国际免疫学杂志 2022年第2期45卷 119-123页

作者：徐昊孙瑾张冲王菁华哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室哈尔滨150081

目的构建跨膜蛋白(transmembrane protein,TMEM)240慢病毒载体,并在人神经母细胞瘤细胞中表达。方法提取人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的RNA,逆转录成cDNA并作为模板,聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)扩增TMEM240的CDS序列,与pLVX-EGFP-N1载体连接,转化、验菌送公司测序,pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒与慢病毒包装质粒共转染293Ta细胞,收取上清,感染SH-SY5Y,嘌呤霉素筛选,获得表达TMEM240的SH-SY5Y细胞,将感染pLVX-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞作为对照组,感染pLVX-TMEM240-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞为实验组。通过共聚焦显微镜、实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,Real-time PCR)和Western blot检测细胞中TMEM240表达。结果测序结果显示pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒构建成功;共聚焦显微镜下,表达TMEM240的细胞内出现点状绿色荧光;Real-time PCR及Western blot结果表明细胞内TMEM240表达。结论成功构建TMEM240慢病毒载体,慢病毒在基因和蛋白水平均引起TMEM240表达升高。

关键词：跨膜蛋白240 慢病毒载体人神经母细胞瘤细胞

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地方院校医学生创新能力培养模式探索与实践

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基础医学教育 2025年第3期27卷 274-278页

作者：高媛宋利石芸尹希赵烨王升袁芳史海水河北医科大学基础医学院神经生物学教研室河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河北医科大学第四医院功能科河北医科大学护理学院河北省生命早期健康促进重点实验室

强化医学生创新能力培养是卓越医师培养的必然要求，也是健康中国战略实施的关键，已成为我国高等医学教育改革的重要内容。教研团队在建构主义理论指导下，秉承学生中心、成效导向、全面发展的理念，经过近20年的探索，探索构建了“一... 详细信息

强化医学生创新能力培养是卓越医师培养的必然要求，也是健康中国战略实施的关键，已成为我国高等医学教育改革的重要内容。教研团队在建构主义理论指导下，秉承学生中心、成效导向、全面发展的理念，经过近20年的探索，探索构建了“一心双核、三重四维”医学生创新能力培养模式。该培养模式聚焦以学生发展为中心，坚持以科研能力和横向技能培养为核心，注重全面发展培养、全科研流程培养、全方位育人培养，以创新课程建设为依托，以教师创新育人能力提升为抓手，以创新项目实施为载体，以创新竞赛活动为驱动的四位一体的创新育人路径，实现了师资、课程、项目、资源、竞赛等创新育人关键要素的有效整合，弥补了长期以来学生创新能力培养主要依靠零散的课外科研活动、缺乏系统科研思维训练和科研全流程实践等的局限性，为地方医学院校更高效率提升创新育人成效、促进学生全面发展提供了借鉴与参考。

关键词：地方医学院校教学改革创新能力学生中心培养模式

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失神经骨骼肌中自噬介导肌萎缩的研究进展

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神经损伤与功能重建 2022年第5期17卷 275-276,288页

作者：张冲孙瑾王菁华哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室哈尔滨150081

骨骼肌是人体最有活力并且最有可塑性的组织之一,它占人体总体重的40%,并且包含人体所有蛋白质的50%~75%。在骨骼肌运动过程中,每条肌纤维的收缩都受运动神经元的一个分支支配。骨骼肌失神经后,在结构、形态和超微结构等方面都会产生巨... 详细信息

骨骼肌是人体最有活力并且最有可塑性的组织之一,它占人体总体重的40%,并且包含人体所有蛋白质的50%~75%。在骨骼肌运动过程中,每条肌纤维的收缩都受运动神经元的一个分支支配。骨骼肌失神经后,在结构、形态和超微结构等方面都会产生巨大的变化。自噬是细胞自杀的一种保守的形式,是失神经骨骼肌中卫星细胞耗竭的潜在机制。TGF-β1是TGF-β家族成员之一,并且通过自噬途径介导骨骼肌的萎缩效应。

关键词：失神经骨骼肌肌萎缩自噬

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柚皮素促进Nrf2/Ⅱ相解毒酶活性并降低血管炎症反应

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中国药理学通报 2021年第7期37卷 1002-1007页

作者：董豆豆张芸何慧雷霆雯欧海龙贵州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025

目的柚皮素对核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)/Ⅱ相解毒酶活性的作用及其对血管炎症反应影响的研究。方法Western blot、免疫荧光、逆转录-qPCR检测蛋白的表达。Ⅱ相酶活性检测通过相关试剂盒进行。利用免疫共沉淀技术分析Nrf2与Kelch样... 详细信息

目的柚皮素对核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)/Ⅱ相解毒酶活性的作用及其对血管炎症反应影响的研究。方法Western blot、免疫荧光、逆转录-qPCR检测蛋白的表达。Ⅱ相酶活性检测通过相关试剂盒进行。利用免疫共沉淀技术分析Nrf2与Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap-1)的相互作用。结果柚皮素促进RAW264.7细胞中Nrf2与Keap-1的解离和核内的聚集,并提高Ⅱ相解毒酶的表达,包括NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO-1)、谷胱苷肽S-转移酶(GST)和谷胺酸半胱氨酸连接酶(GCL)。同时,柚皮素抑制细胞炎症因子的产生;而Nrf2抑制剂ML385使NQO-1、GST和GCL表达降低、炎症因子的含量提高。另外,检测还发现柚皮素同样通过Nrf2的作用,提高动脉粥样硬化模型小鼠肝脏NQO-1、GST和GCL的表达以及酶的活性,降低主动脉血管的炎症反应。结论柚皮素激活Nrf2,促进相关的Ⅱ相解毒酶活性,从而抑制血管炎症。

关键词：柚皮素 Ⅱ相解毒酶 Nrf2 血管炎症 NAD(P)H醌氧化还原酶动脉粥样硬化

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骨骼肌减少症中免疫衰老阻碍肌肉再生的研究进展

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国际免疫学杂志 2022年第1期45卷 74-77页

作者：田思嘉张冲王菁华哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室哈尔滨150081

骨骼肌减少症是老年人常见的肌肉疾病,主要表现为肌肉力量和质量的下降。肌肉再生能力下降是骨骼肌减少症的发病机制之一。免疫系统在肌肉再生过程中发挥了重要作用,促进了肌肉中卫星细胞的增殖和分化,肌肉也可以通过分泌肌肉因子的方... 详细信息

骨骼肌减少症是老年人常见的肌肉疾病,主要表现为肌肉力量和质量的下降。肌肉再生能力下降是骨骼肌减少症的发病机制之一。免疫系统在肌肉再生过程中发挥了重要作用,促进了肌肉中卫星细胞的增殖和分化,肌肉也可以通过分泌肌肉因子的方式调节免疫细胞的功能。随着年龄的增长,免疫衰老导致的慢性低级别炎症破坏了免疫细胞和肌肉的相互作用,导致肌肉再生能力下降、肌纤维萎缩,最终导致了骨骼肌减少症的出现。文章概述了免疫衰老诱导骨骼肌减少症的机制和过程。

关键词：骨骼肌减少症免疫衰老肌肉再生

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p62体募集自噬相关蛋白WIPI2的机制研究

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新疆医科大学学报 2024年第5期47卷 668-674页

作者：张金佩冯学召刘梦薇何心瞳徐梦波阿来依·买提卡比力麦尔哈巴·达毛拉衡锐米娜新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学重点实验室乌鲁木齐830017 中山大学肿瘤防治中心广东510060 新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830054

目的探讨自噬接头蛋白(Sequestosome 1,SQSTM1/p62)与磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositide 3-kinase,PI3K)复合物的结合蛋白WD重复结构域磷酸肌醇互作蛋白2(WD repeat domain phosphoinositide-interacting protein 2,WIPI2)在空间上定位的调控关系。方法使用CRISPR-Cas9技术敲除正常大鼠肾上皮细胞(Normal rat kidney,NRK)中的自噬相关基因2A(Autophagy-related gene,Atg2A)、自噬相关基因2B(Autophagy-related gene,Atg2B)和p62基因,建立Atg2A和Atg2B基因敲除的细胞系(Atg2AB double knockout,Atg2AB DKO)以及p62基因敲除细胞系(p62 knockout,p62 KO);透射电镜观察Atg2AB DKO细胞中p62体周围囊泡的定位;活细胞成像观察Atg2AB DKO细胞内p62体与自噬相关蛋白WIPI2的定位变化;光漂白实验观察相变蛋白p62与WIPI2的荧光漂白恢复;通过免疫荧光观察WT、p62 KO和Atg2AB DKO细胞中WIPI2与p62的定位关系;通过蛋白免疫印记检测WT和p62 KO细胞中WIPI2表达量的变化。结果建立了Atg2AB DKO和p62 KO细胞系;透射电镜显示Atg2AB DKO细胞中p62附近聚集了大量囊泡;在Atg2AB DKO中,通过活细胞成像观察到tdTomatop62与WIPI2-GFP高度共定位;荧光漂白实验观察到WIPI2具有流动性;通过免疫荧光观察到,与WT细胞相比,在Atg2AB DKO中WIPI2点的数量明显增多(P<0.0001);与WT细胞相比,p62 KO细胞中WIPI2点的数量和表达量无明显变化(P>0.05)。结论无膜细胞器p62能够与具有流动性的WIPI2阳性囊泡动态融合,促进自噬体的形成。

关键词：自噬体自噬接头蛋白 WD重复结构域磷酸肌醇互作蛋白2

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高校研究生《肿瘤分子生物学》课程思政改革必要性探讨

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教育进展 2024年第8期14卷 925-929页

作者：刘秋均张春燕甘淋西南医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室四川泸州

立足当前研究生课程思政改革的现状和不足之处,我们讨论了研究生专业课《肿瘤分子生物学》进行思政教育的必要性,并从科学工作机制的建立,授课教师思政育人能力培养和学生的思政教学认同感等方面探讨了在研究生专业课进行思政教学改革... 详细信息

立足当前研究生课程思政改革的现状和不足之处,我们讨论了研究生专业课《肿瘤分子生物学》进行思政教育的必要性,并从科学工作机制的建立,授课教师思政育人能力培养和学生的思政教学认同感等方面探讨了在研究生专业课进行思政教学改革的几点教育反思。Based on the current situation and shortcomings of ideological and political education reform in graduate courses, we discuss the necessity of conducting ideological and political education in the graduate professional course “Molecular Oncology”. We also explore several educational reflections on the reform of ideological and political education in graduate professional courses from the establishment of scientific working mechanisms, the cultivation of ideological and political education abilities of teachers, and the recognition of students in ideological and political education.

关键词：思政改革研究生肿瘤分子生物学必要性

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基于创新能力培养的生物化学与分子生物学实验教学改革

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基础医学教育 2024年第7期26卷 582-586页

作者：高媛张丹丹孔鹏宋利史海水姚敏石芸许丽辉河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室石家庄050017

为有效提升生物化学与分子生物学实验课的教学质量与效果,培塑学生的综合素质和创新能力,生物化学与分子生物学实验教学改革从优化实践教学内容,建立科学合理的实验考核办法,规范实践教学管理制度等方面进行研究,建立了一套全新科学的... 详细信息

为有效提升生物化学与分子生物学实验课的教学质量与效果,培塑学生的综合素质和创新能力,生物化学与分子生物学实验教学改革从优化实践教学内容,建立科学合理的实验考核办法,规范实践教学管理制度等方面进行研究,建立了一套全新科学的综合性实践教学体系,探索了一条既能培养学生掌握扎实的生物化学基本技能与实践能力,又能提升学生综合素质和创新能力的实践教学途径。

关键词：生物化学与分子生物学实验教学教学改革教学评价创新能力学习兴趣

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