检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2006年第45期86卷 3173-3176页

作者：范鹰张一娜张艳桥滕宗艳李志伟武小薇李呼伦哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科 150086 哈尔滨医科大学附属第三医院内八科哈尔滨医科大学基础医学院神经生物教研室

目的观察蛋白激酶Cδ亚型(PKCδ)磷酸化激活在6羟基多巴胺(6-OHDA)引起的多巴胺能神经细胞死亡过程中所起作用,探讨帕金森病中神经元缺失的分子发病机制。方法体外培养多巴胺能神经细胞系SH-SY5Y细胞,观察预先加入的PKC抑制剂和激活剂对... 详细信息

目的观察蛋白激酶Cδ亚型(PKCδ)磷酸化激活在6羟基多巴胺(6-OHDA)引起的多巴胺能神经细胞死亡过程中所起作用,探讨帕金森病中神经元缺失的分子发病机制。方法体外培养多巴胺能神经细胞系SH-SY5Y细胞,观察预先加入的PKC抑制剂和激活剂对6-OHDA毒性作用的影响,噻唑蓝比色法观察细胞生存率,Western免疫印迹法观察磷酸化PKCδ的表达。结果PKCδ抑制剂rottlerin2μmol/L可抑制PKCδ磷酸化激活,减轻6-OHDA引起的细胞死亡约57%±6%(P<0.01)。总PKC抑制剂双吲哚亚酰胺(BisindolylmaleimideⅠ)和钙依赖性PKC抑制剂G6976不影响6-OHDA的毒性作用和PKCδ激活,而PKCδ激活剂100nmol/L佛波酯,增加磷酸化PKCδ水平,加重6-OHDA的损害,使细胞生存率下降至单用6-OHDA时生存率的66%±9%(P<0.01)。结论磷酸化激活的PKCδ是6-OHDA发挥毒性作用的关键一环,抑制PKCδ可减轻6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞死亡,说明PKCδ在帕金森病患者神经元缺失中可能起作用。

关键词：帕金森病羟多巴胺蛋白激酶C SH—SY5Y细胞

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氮氟共掺杂荧光碳点的制备及其在核黄素检测中的应用

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分析测试学报 2020年第6期39卷 762-768页

作者：张丽婷高杉马榕李宁波乔洁山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室山西太原030001 山西医科大学基础医学院化学教研室山西太原030001

以柠檬酸、L-赖氨酸和氟化钠为原料,利用水热法制备了具有明亮蓝色荧光的氮氟共掺杂碳点(NFCDs),通过透射电子显微镜(TEM)、傅立叶变换红外光谱(FT-IR)、紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱对合成的NFCDs进行表征,并基于核黄素与NFCD... 详细信息

以柠檬酸、L-赖氨酸和氟化钠为原料,利用水热法制备了具有明亮蓝色荧光的氮氟共掺杂碳点(NFCDs),通过透射电子显微镜(TEM)、傅立叶变换红外光谱(FT-IR)、紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱对合成的NFCDs进行表征,并基于核黄素与NFCDs之间的荧光共振能量转移构建了NFCDs荧光探针用于核黄素的检测。在优化实验条件下,该方法对核黄素的线性范围为3.0~66.5μmol/L,检出限为0.26μmol/L,将其用于牛奶和奶粉中核黄素的测定,回收率为96.7%~103%。经MTT法测定NFCDs对HeLa细胞为低毒性,并成功用于细胞中核黄素的检测。

关键词：氮氟共掺杂碳点(NFCDs) 荧光探针荧光共振能量转移核黄素

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纤维蛋白凝胶与几丁质对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响

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解剖学报 2009年第6期40卷 909-913页

作者：李冬梅金连弘张宝东杨水友李继承浙江大学医学院基础医学院杭州310058 哈尔滨医科大学组织学胚胎学教研室哈尔滨150086

目的比较纤维蛋白凝胶与几丁质对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的影响,探讨三维支架与软骨组织工程种子细胞BMSCs分化的关系。方法BMSCs与几丁质、纤维蛋白凝胶形成复合物,分别体外培养及植入大鼠关节软骨缺损部位。体外培养14... 详细信息

目的比较纤维蛋白凝胶与几丁质对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的影响,探讨三维支架与软骨组织工程种子细胞BMSCs分化的关系。方法BMSCs与几丁质、纤维蛋白凝胶形成复合物,分别体外培养及植入大鼠关节软骨缺损部位。体外培养14d后,进行HE染色、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色;体内培养2周、4周、6周后,对移植物进行形态学观察,表达软骨特异蛋白分析及BMSCs体内示踪。统计学分析BMSCs向软骨分化情况。结果体外培养部分,BMSCs-纤维蛋白凝胶组和BMSCs-几丁质组的Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性率与对照组无显著差异;体内移植部分,BMSCs-纤维蛋白凝胶组的甲苯胺蓝染色与Ⅱ型胶原免疫组织化学染色积分吸光度(IA)变化率与对照组有显著差异,其他组别软骨分化与对照组无显著差异。结论在体外纤维蛋白凝胶或几丁质诱导BMSCs向软骨细胞分化的作用很弱,在体内BMSCs-纤维蛋白凝胶可促进BMSCs分化成类软骨细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞软骨细胞纤维蛋白凝胶几丁质免疫组织化学大鼠

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神经干细胞的研究进展

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中华神经外科杂志 2006年第10期22卷 583-584页

作者：金连弘哈尔滨医科大学基础医学院组织胚胎学教研室 150001

干细胞（stem cell，SC）是上世纪生物医学领域的重大发现，干细胞的概念是Evans在20世纪80年代提出，是指有多种分化潜能和自我更新能力的细胞。按分化潜能的大小，干细胞可分为三种类型：全能干细胞（胚胎干细胞）、单能干细胞、多能... 详细信息

干细胞（stem cell，SC）是上世纪生物医学领域的重大发现，干细胞的概念是Evans在20世纪80年代提出，是指有多种分化潜能和自我更新能力的细胞。按分化潜能的大小，干细胞可分为三种类型：全能干细胞（胚胎干细胞）、单能干细胞、多能干细胞。神经干细胞即为多能干细胞，指可生成神经组织或起源于神经系统，具有自我更新能力并具有演化为不同成熟细胞潜能的细胞，90年代Roybholds等怛。从成年鼠脑纹状体中首次分离出神经干细胞（neural stem cell，NSC）。随着对神经干细胞的深入研究，突破了以往一直认为成年哺乳动物神经元不能再生的观念，而且通过基因修饰还可用于神经系统的基因治疗，表达外源性的神经递质、神经营养因子及代谢性酶，为许多难治性神经系统疾病开辟了一条全新的治疗途径。

关键词：神经干细胞神经系统疾病自我更新能力多能干细胞生物医学领域分化潜能成年哺乳动物神经营养因子

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基于分子信标策略的CRISPR/Cas12a荧光传感器用于循环肿瘤DNA的放大检测

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分析化学 2023年第2期51卷 184-193页

作者：张函笑代晓春周亚楠吕旭珍弓韬赵旭华于保锋山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

构建了一种以分子信标（Molecular beacon, MB）为信号探针的CRISPR/Cas12a生物传感器，用于循环肿瘤DNA(Circular tumor DNA, ctDNA)的快速放大检测。MB具有良好的稳定性，其颈部末端分别标记有荧光素（FAM）和四甲基罗丹明（TAMRA）... 详细信息

构建了一种以分子信标（Molecular beacon, MB）为信号探针的CRISPR/Cas12a生物传感器，用于循环肿瘤DNA(Circular tumor DNA, ctDNA)的快速放大检测。MB具有良好的稳定性，其颈部末端分别标记有荧光素（FAM）和四甲基罗丹明（TAMRA）两种荧光基团。ctDNA不存在时，CRISPR/Cas12a体系无活性，无法切割MB，因此MB两端的荧光基团由于形成发夹结构的颈部相互靠近而发生荧光共振能量转移（Fluorescence resonance energy transfer, FRET），显示出TAMRA的荧光。当ctDNA存在时，ctDNA特异性识别Cas12a/crRNA二元复合物并激活Cas12a的反式切割活性。由于单链DNA是Cas12a最敏感的底物，因此MB的环部单链首先被切割，继而引起颈部双链的解离而导致两种荧光团彼此远离，无法发生FRET，最终显示出FAM的荧光信号。对MB环部的碱基数目、MB浓度以及crRNA与Cas12a的浓度比例等实验条件进行了优化。在最优条件下，1.7～500 pmol/L范围内，ctDNA浓度与传感器在518 nm处的荧光强度呈线性关系，检出限为0.6 pmol/L(3σ)。将此传感器用于血清样品中ctDNA的检测，回收率在93%～110%之间。

关键词： CRISPR 生物传感器荧光共振能量转移循环肿瘤DNA

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酶化学发光法测定何首乌中四羟基二苯乙烯葡萄糖甙的含量

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同济医科大学学报 1995年第4期24卷 289-291页

作者：李光道孙雅量过健俐武汉同济医科大学基础医学院化学教研室

报道一种新的何首乌中二苯乙烯甙含量的测定方法──酶化学发光法。该方法对二苯乙烯甙的检测限量为２．５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ标准偏差小于２％，标准回收率在９６％～１０４％之间，线性范围为５．０×１０－７～１．０×... 详细信息

报道一种新的何首乌中二苯乙烯甙含量的测定方法──酶化学发光法。该方法对二苯乙烯甙的检测限量为２．５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ标准偏差小于２％，标准回收率在９６％～１０４％之间，线性范围为５．０×１０－７～１．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。测定结果与紫外分光光度法基本一致。本法灵敏度较高，稳定性好，可用于中草药何首乌中二苯乙烯甙含量的测定。

关键词：何首乌二苯乙烯甙中药化学成分酶化学发光法

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黄酒中微量铜、锌的电位溶出法测定

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华中师范大学学报（自然科学版） 1998年第4期32卷 458-460页

作者：田秋霖张瑞田卫群李习俊湖北医科大学基础医学院化学教研室

在ＮＨ３－ＮＨ４Ｃｌ（ｐＨ９．２及ｐＨ５．６）底液中，采用玻碳电极镀汞膜作工作电极，经阴极电解富集后，铜（Ⅱ）在－０．４８Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ），锌（Ⅱ）在－１．０８Ｖ左右呈现良好的氧化溶出峰．峰高对浓度的线性范围：铜为... 详细信息

在ＮＨ３－ＮＨ４Ｃｌ（ｐＨ９．２及ｐＨ５．６）底液中，采用玻碳电极镀汞膜作工作电极，经阴极电解富集后，铜（Ⅱ）在－０．４８Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ），锌（Ⅱ）在－１．０８Ｖ左右呈现良好的氧化溶出峰．峰高对浓度的线性范围：铜为０．１～２．５μｇ／２０ｍＬ，锌为０．２～４．６μｇ／２０ｍＬ．用该方法直接测定了黄酒中的微量铜和锌．

关键词：电位溶出法黄酒铜锌测定

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金属离子对蛇毒蛋白生物活性及结构效应的影响

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高等学校化学学报 2009年第9期30卷 1773-1778页

作者：刘淑清郭春梅徐跃飞孙明忠辛毅唐建武大连医科大学生物化学与分子生物学教研室大连116044 大连医科大学基础医学院生物技术系大连医科大学病理学教研室大连116044

从旅顺产白眉蝮蛇(Gloydius blomhoffii brevicaudus,GBB)蛇毒中纯化得到了3种电泳和质谱纯蛋白活性组分,其酶解肽段采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI-MS/MS)进行序列测定,与其它同源性蛇毒蛋白氨基酸序列比对发现,3种蛋白为... 详细信息

从旅顺产白眉蝮蛇(Gloydius blomhoffii brevicaudus,GBB)蛇毒中纯化得到了3种电泳和质谱纯蛋白活性组分,其酶解肽段采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI-MS/MS)进行序列测定,与其它同源性蛇毒蛋白氨基酸序列比对发现,3种蛋白为新的蛇毒磷脂酶A2、类凝血酶和金属蛋白酶,分别将其命名为GBB-bPLA2,GBB-TLE和GBB-MP.电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测得每个GBB-bPLA2和GBB-MP中含有一个Ca2+;每个GBB-TLE中含有2个Zn2+.Ca2+可分别使GBB-bPLA2和GBB-MP的荧光发射波长向短波方向移动2.0和1.6nm,使二者的荧光发射强度提高14.0%和11.0%;Ca2+的存在可显著提高二者的热稳定性,使GBB-bPLA2和GBB-MP的热变性温度分别提高1.5和2.0℃.Zn2+使GBB-TLE的荧光发射强度增高4.3%,但对GBB-TLE的酯酶水解活性、荧光发射波长和热变性温度无显著影响.金属离子的存在能够不同程度地影响蛇毒蛋白结构热稳定性,但对蛇毒蛋白生物活性的作用则不同.

关键词：蛇毒蛋白金属离子活性

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视神经蛋白突变在肌萎缩侧索硬化症中的研究进展

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解剖学报 2016年第3期47卷 429-432页

作者：刘惠申景岭哈尔滨医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室哈尔滨150081

视神经蛋白(OPTN)目前被认为是原发性开角型青光眼(POAG),肌萎缩侧索硬化症(ALS)等神经退行性疾病的病理学标记蛋白。OPTN参与不同的细胞功能,例如调控后高尔基体膜运输、分泌、胞内病原体自噬、抗病毒先天免疫反应、有丝分裂、核因子-... 详细信息

视神经蛋白(OPTN)目前被认为是原发性开角型青光眼(POAG),肌萎缩侧索硬化症(ALS)等神经退行性疾病的病理学标记蛋白。OPTN参与不同的细胞功能,例如调控后高尔基体膜运输、分泌、胞内病原体自噬、抗病毒先天免疫反应、有丝分裂、核因子-κB(NF-κB)通路、基因表达等。在OPTN突变的ALS临床病例中,受损的运动神经元呈现出胞质内OPTN泛素化聚集改变,蛋白质包涵体形成以及与ALS相关病理蛋白铜锌超氧化物歧化酶1(SOD1)、反式激活-反应性DNA结合蛋白-43(TDP43)、肉瘤熔合基因(FUS)的共定位。本文着重阐述OPTN突变在肌萎缩侧索硬化症中的研究进展,探讨其致病机制、病理改变以及治疗方法。

关键词：视神经蛋白神经退行性疾病肌萎缩侧所硬化症动物模型

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大鼠睾丸支持细胞发育的形态学研究

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解剖学报 1996年第3期27卷 333-336页

作者：刘慧雯陶树青金连弘李晓敏李学均哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室哈尔滨医科大学附属二院骨外科哈尔滨医科大学基础医学院

对７０例不同胎龄及生后不同发育阶段Ｗｉｓｔａｒ大鼠睾丸支持细胞的发育进行了光镜、电镜研究。结果：１．依形态学特点，将支持细胞的发育过程初步分为４期：分化前期（胚胎１１～１５ｄ）、分化期（胚胎１５ｄ～生后１至２周）、成... 详细信息

对７０例不同胎龄及生后不同发育阶段Ｗｉｓｔａｒ大鼠睾丸支持细胞的发育进行了光镜、电镜研究。结果：１．依形态学特点，将支持细胞的发育过程初步分为４期：分化前期（胚胎１１～１５ｄ）、分化期（胚胎１５ｄ～生后１至２周）、成熟前期（生后２周～青春期前）、成熟期（青春期后）。２．胚胎及新生时，在支持细胞间见到两侧胞膜紧密相贴及不典型的桥粒连接等；自生后４周，见到紧密连接。３．自胚胎１７ｄ至成熟以后，在支持细胞与其周围的生殖细胞间见到大量类似桥粒和类似中间连接等不典型的细胞连接。４．胚胎１９ｄ及新生期，睾丸索内除支持细胞及生殖细胞外，尚可见一种特殊的细胞。

关键词：支持细胞睾丸超微结构发育大鼠

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