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神经药理学报 2015年第2期5卷 9-16页

作者：张玉瑶姜国华班涛黑龙江中医药大学基础医学院解剖与组胚学教研室哈尔滨医科大学药学院药理学教研室

胍丁胺是精氨酸脱羧基生成的内源性代谢产物,在自然界中广泛存在于植物、细菌及哺乳类动物的多种组织中。研究表明胍丁胺有着重要的生物学特性,如增强吗啡镇痛,降低吗啡耐受及躯体依赖,故具有良好的新药开发前景。准确而快速地测定生物... 详细信息

胍丁胺是精氨酸脱羧基生成的内源性代谢产物,在自然界中广泛存在于植物、细菌及哺乳类动物的多种组织中。研究表明胍丁胺有着重要的生物学特性,如增强吗啡镇痛,降低吗啡耐受及躯体依赖,故具有良好的新药开发前景。准确而快速地测定生物体内的胍丁胺对于研究其生物学功能具有十分重要的意义。目前,已有多种测量方法用于胍丁胺的定量测定,如色谱法、质谱法、电泳法、免疫法。该文对胍丁胺含量测定方法的研究进展、适用范围及其优缺点作一综述,旨在为后期对胍丁胺的深入研究提供方法学的参考。

关键词：胍丁胺高效液相色谱法气相色谱/质谱联用毛细管电泳法酶联免疫吸附实验

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金丝桃素介导的声动力诱导THP-1巨噬细胞凋亡和自噬的机制研究

金丝桃素介导的声动力诱导THP-1巨噬细胞凋亡和自噬的机制研究

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：李雪松郑龙彬寇佳媛田野杨力明哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科黑龙江哈尔滨150001

目的:探讨金丝桃素结合低频超声(HY-SDT)对THP-1巨噬细胞产生的作用及机制研究.方法:激光共聚焦检测细胞内HY定位、活性氧(ROS)产生、线粒体通透性转换孔(mPTP)开放和LC3表达.荧光显微镜观察线粒体膜电位(MMP).Hoechst-PI染色、透射电...

目的:探讨金丝桃素结合低频超声(HY-SDT)对THP-1巨噬细胞产生的作用及机制研究.方法:激光共聚焦检测细胞内HY定位、活性氧(ROS)产生、线粒体通透性转换孔(mPTP)开放和LC3表达.荧光显微镜观察线粒体膜电位(MMP).Hoechst-PI染色、透射电镜和流式细胞术观察自噬与凋亡.Western blot(WB)检测Bax 与cytochrome C 转位以及凋亡与自噬相关蛋白的表达.结果:HY在THP-1巨噬细胞的细胞核和线粒体等细胞器均有分布.HY-SDT后2 h细胞内自噬增加;6 h细胞存活率下降,凋亡率、ROS和MDA 升高,MMP 降低,自噬抑制剂3MA 导致凋亡率进一步升高.WB 显示SDT后早期LC3-Ⅱ和Beclin 1表达增多,随后Bax和cytochrome C 发生转位,Bcl-2 下调,线粒体-caspase 凋亡相关蛋白表达增多.NAC 可明显抑制ROS 增加、MMP 下降、mPTP 开放和凋亡自噬相关蛋白的变化.结论:HY-SDT 通过产生ROS 早期增加自噬,随后促凋亡因子Bax 从胞浆转位锚定在线粒体上,增加Bax/Bcl-2 比值,诱导mPTP 开放,释放cytochrome C,从而诱导凋亡.

关键词：

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上转化纳米颗粒介导的光动力治疗对THP-1巨噬细胞凋亡机制研究

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1829-1829页

作者：朱兴仲昭宇姜月晴田野杨力明哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科

目的:探讨上转化纳米颗粒包覆的二氢卟吩(UCNPs-Ce6)介导的光动力治疗对THP-1巨噬细胞凋亡机制。方法:通过DCFH-DA检测光动力治疗后细胞内活性氧(ROS)的变化,通过钙黄绿素探针检测光动力治疗之后线粒体通透性转换孔(MPTP)开放。通过免... 详细信息

目的:探讨上转化纳米颗粒包覆的二氢卟吩(UCNPs-Ce6)介导的光动力治疗对THP-1巨噬细胞凋亡机制。方法:通过DCFH-DA检测光动力治疗后细胞内活性氧(ROS)的变化,通过钙黄绿素探针检测光动力治疗之后线粒体通透性转换孔(MPTP)开放。通过免疫荧光与Western blotting检测光动力治疗后Bax蛋白与细胞色素C蛋白在胞浆和线粒体的表达。结

关键词：光动力治疗后巨噬细胞凋亡 THP-1 介导纳米颗粒

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新人工阳离子多肽AIK抗肿瘤活性的初步研究

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中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第6期21卷 617-623页

作者：范芳芳徐晖孙慧莹刘佳玮张海员李亦兰宁雪莲白静傅松滨周春水哈尔滨医科大学基础医学院医学遗传学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:研究新发现的人工阳离子多肽AIK在体内外对肿瘤细胞的抑制作用和杀伤机制。方法:MTS方法检测AIK对急性早幼粒白血病细胞HL-60的抑制作用,确定AIK最佳作用浓度及作用时间,并以此条件测定其对10株人肿瘤细胞(95C、95D、HL-60、He La... 详细信息

目的:研究新发现的人工阳离子多肽AIK在体内外对肿瘤细胞的抑制作用和杀伤机制。方法:MTS方法检测AIK对急性早幼粒白血病细胞HL-60的抑制作用,确定AIK最佳作用浓度及作用时间,并以此条件测定其对10株人肿瘤细胞(95C、95D、HL-60、He La、B95-8、HO-8910PM、HO-8910、SMMC-7721、U2OS和A549细胞)及人正常肝细胞HL-7702的抑制效应。流式细胞术检测AIK对宫颈癌He La细胞凋亡的影响,并经DAPI染色后荧光显微镜下观察细胞的形态学变化。制备小鼠荷肝癌H22细胞皮下移植瘤模型,将36只模型小鼠随机分为PBS阴性对照组、AIK低剂量组[8 mg/(kg·d)]、高剂量组[15 mg/(kg·d)]以及MTX阳性对照组[1 mg/(kg·d)],给予连续10 d瘤旁注射治疗,记录小鼠体质量并观察其活动状态;用药结束后,脊椎脱臼法处死小鼠,比较肿瘤质量及体积。结果:AIK对10种肿瘤细胞均有不同程度的杀伤活性,600μg/ml AIK作用24 h后对肺巨细胞癌95C、白血病HL-60和宫颈癌Hela细胞生长的抑制分别达(90.33±0.75)%、(89.06±1.28)%和(76.09±3.68)%。AIK处理组He La凋亡细胞[(4.88±0.57)%vs(0.51±0.19)%,P<0.05]及坏死细胞比例[(2.96±0.50)%vs(1.87±0.27)%,P<0.05]均显著高于对照组,400μg/ml AIK处理组50%以上的H22细胞出现胞膜破碎、细胞裂解等坏死表型。AIK高剂量组、低剂量组和MTX阳性对照组的移植瘤体积和质量均显著低于PBS阴性对照组(P<0.01)。4组小鼠体质量在治疗期间没有显著差异,但MTX组小鼠体质量在治疗第5天开始出现下降,其余3组在药物处理期间呈上升趋势。结论:AIK能够抑制多种肿瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡和坏死;显著抑制肝癌H22细胞小鼠皮下移植瘤的生长,无明显不良反应。

关键词：阳离子多肽 AIK 肿瘤细胞凋亡细胞坏死

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肠道菌群与自身免疫性疾病研究进展

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中国微生态学杂志 2015年第10期27卷 1233-1237页

作者：李苗孙迪付冰冰孙晓鹏佳木斯大学附属第一医院风湿免疫科黑龙江佳木斯154000 哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室黑龙江哈尔滨150006

自身免疫性疾病是以机体自身反应性T细胞和B细胞过度活化,大量自身抗体产生为特点,并引起多器官多系统广泛损伤的慢性系统性多关节炎症性疾病。研究证实,特定的肠道菌群可通过特定的分子模式诱导产生多种炎性细胞及炎性因子从而调节肠... 详细信息

自身免疫性疾病是以机体自身反应性T细胞和B细胞过度活化,大量自身抗体产生为特点,并引起多器官多系统广泛损伤的慢性系统性多关节炎症性疾病。研究证实,特定的肠道菌群可通过特定的分子模式诱导产生多种炎性细胞及炎性因子从而调节肠黏膜屏障的完整性,影响黏膜免疫功能,引起免疫性炎症。深入了解两者之间的关系,对进一步研究自身免疫性疾病的病因及发病机制,优化治疗策略等具有重要的临床应用价值。本文主要对肠道菌群与类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、脊柱关节炎等自身免疫性疾病的关系做一简要综述。

关键词：自身免疫性疾病肠道菌群黏膜免疫

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阿尔茨海默与阿尔茨海默病的发现

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中华医史杂志 2014年第5期44卷 288-290页

作者：张丽丽李志平哈尔滨医科大学基础医学院医史学教研室 150086

1864年，阿尔茨海默出生于德国。1887年，阿尔茨海默在维尔茨堡大学获得医学博士学位。1888年，阿尔茨海默来到法兰克福精神病院，并在此工作了14年。其间，阿尔茨海默与弗朗茨·尼氏合作出版了6卷本《大脑皮层的组织学与组织病理... 详细信息

1864年，阿尔茨海默出生于德国。1887年，阿尔茨海默在维尔茨堡大学获得医学博士学位。1888年，阿尔茨海默来到法兰克福精神病院，并在此工作了14年。其间，阿尔茨海默与弗朗茨·尼氏合作出版了6卷本《大脑皮层的组织学与组织病理学》。1903年，阿尔茨海默来到慕尼黑大学精神病系工作，并于1904年发表了博士后论文《进行性麻痹组织学研究的鉴别诊断》。1912年，阿尔茨海默应邀前往布雷斯劳大学任教。在前往布雷斯劳大学的途中，阿尔茨海默患病，于1915年逝世。1906年，阿尔茨海默利用显微镜研究患者奥古斯特的脑组织标本，发现大量老年斑和神经纤维缠结。同年11月，阿尔茨海默在图宾根举办的第37届德国西南精神病学年会上报告了奥古斯特的病历，但没有引起关注。1910年，克雷佩林在第8版《精神病学》中将奥古斯特所患疾病命名为“阿尔茨海默病”。阿尔茨海默因此为世人所知。

关键词：阿尔茨海默阿尔茨海默病神经科学精神病学

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hβ-arrestin2基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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现代肿瘤医学 2015年第9期23卷 1198-1200页

作者：刘彩红毛琪郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞病理生物学研究室细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院免疫教研室黑龙江大庆163319

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测... 详细信息

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测序公司检测正确后瞬时转染人胚肾细胞HEK293,Western blot检测融合蛋白表达。激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在HEK293细胞中的分布。结果:hβ-arrestin2编码序列被成功克隆至p EGFP-C1中,Western blot检测到融合蛋白表达,分子量约为77k Da,p EGFP-C1-β-arrestin2定位于HEK293细胞的细胞质中。结论:成功构建hβ-arrestin2基因真核表达载体,证实了融合蛋白定位在HEK293的细胞质中。

关键词： hβ-arrestin2基因蛋白质印记绿色荧光蛋白

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硒代半胱氨酸合成蛋白基因表达对过氧化氢介导的内皮细胞EVC-304损伤的影响

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中华地方病学杂志 2014年第4期33卷 383-387页

作者：赵汉东孙美娜李凤兰李晖哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150081

目的：观察硒代半胱氨酸合成蛋白（SEPSECS）基因表达对过氧化氢（H2O2）介导的氧化应激状态下内皮细胞EVC-304损伤的影响。方法体外培养人内皮细胞EVC-304，对细胞进行转染处理，分为对照组、SEPSECS低表达组、空载体转染组、SEPSECS... 详细信息

目的：观察硒代半胱氨酸合成蛋白（SEPSECS）基因表达对过氧化氢（H2O2）介导的氧化应激状态下内皮细胞EVC-304损伤的影响。方法体外培养人内皮细胞EVC-304，对细胞进行转染处理，分为对照组、SEPSECS低表达组、空载体转染组、SEPSECS高表达组，分别用0、200、400、600、800、1000μmol/L H2O2处理细胞6 h。转染后，用实时荧光定量PCR 法检测各组细胞SEPSECS基因表达，蛋白质免疫印迹试验（Western blot）检测各组细胞SEPSECS蛋白表达，流式细胞仪对各组细胞进行细胞周期检测。H2O2处理后，用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测各组细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果转染后对照组、SEPSECS 低表达组、空载体转染组、SEPSECS 高表达组 EVC-304细胞 SEPSECS mRNA 表达分别为1.03±0.24、0.43±0.11、0.98±0.27、1.61±0.13，SEPSECS 蛋白表达分别为1.00±0.26、0.51±0.10、1.12±0.38、1.51±0.20。其中SEPSECS低表达组SEPSECS mRNA、蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P均〈0.05）；SEPSECS高表达组SEPSECS mRNA、蛋白表达与空载体转染组比较，差异有统计学意义（P均〈0.05）。转染后，各组细胞周期未见明显改变（P 均〉0.05）。经H2O2处理的各组EVC-304细胞MDA含量均随H2O2浓度的升高而升高。其中H2O2为800、1000μmol/L时，SEPSECS低表达组MDA含量[（15.8±0.5）、（19.6±1.5）μmol/L]明显高于对照组[（12.4±0.1）、（17.1±0.5）μmol/L，P均〈0.05]，SEPSECS高表达组MDA含量[（10.8±0.4）、（14.2±1.1）μmol/L]明显低于空载体转染组[（12.7±0.7）、（16.2±1.1）μmol/L，P均〈0.05]。经H2O2处理的各组EVC-304细胞SOD含量均随 H2O2浓度升高而降低，且 H2O2为800、1000μmol/L 时，SEPSECS 低表达组SOD 含量[（7.7±0.4）、（2.4±0.3）μmol/L]明显低于对照组[（10.0±1.0）、（6.0±0.6）μmol/L，P均〈0.05]， SEPSECS高表达组SOD含量[（11.3±0.6）、（12.7±1.6）μmol/L]明显高于空载体转染组[（9.2±0.6）、（6.7±0.2）μmol/L，P均〈0.05]。结论 SEPSECS基因表达对H2O2介导的氧化应激状态下内皮细胞EVC-304具有保护作用，能够显著降低氧化应激所致的细胞损伤。

关键词：硒代半胱氨酸合成蛋白过氧化氢细胞培养技术

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低硒对小鼠心肌钾离子通道基因mRNA表达的影响．

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中华地方病学杂志 2014年第1期33卷 46-48页

作者：孙美娜李凤兰赵汉东李晖哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150081

目的研究钾离子通道基因mRNA在低硒小鼠心肌组织中的表达。方法C57BL／6小鼠40只，雌雄各半，体质量18～22g，按体质量随机分为4组，每组10只小鼠（雌雄各半），其中低硒4周组、12周组、24周组分别采用低硒饲料（硒含量为0．004mg／kg... 详细信息

目的研究钾离子通道基因mRNA在低硒小鼠心肌组织中的表达。方法C57BL／6小鼠40只，雌雄各半，体质量18～22g，按体质量随机分为4组，每组10只小鼠（雌雄各半），其中低硒4周组、12周组、24周组分别采用低硒饲料（硒含量为0．004mg／kg）喂养4周、12周、24周，对照组则给予正常饲料（硒含量为0．256mg／kg）。将各组小鼠断颈处死，取小鼠心脏，Trizol法提取RNA，采用实时荧光定量PCR（reM—timePCR）方法检测钾离子通道基因（KCNA4、KCND2、KCND3、KCNEl、KCNE2、KCNJ2、KCNJl2、KCNQl）mRNA的表达。结果低硒4周组钾离子通道基因KCNA4、KCND2mRNA[（25．3±0．09）、（4．85±0．05）]表达高于对照组（1．00±0．00、1．00±0．00，P均〈0．05）；低硒24周组钾离子通道基因KCNJl2mRNA（22．7±0．10）表达高于对照组（P〈0．05）；KCND3、KCNEl、KCNE2、KCNJ2、KCNQlmRNA表达与对照组比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论低硒能够影响小鼠心肌钾离子通道基因的表达。

关键词：硒小鼠钾离子通道

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骨髓来源细胞治疗放射性唾液腺损伤的研究进展

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现代生物医学进展 2015年第19期15卷 3762-3765页

作者：袁瑶薇袁泽姜国华刘宏刘洋黑龙江中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨医科大学附属第一医院影像科黑龙江哈尔滨150001 黑龙江中医药大学基础医学院病理学教研室黑龙江哈尔滨150040

罹患头颈部肿瘤的患者在接受放射治疗时往往会发生放射性唾液腺损伤。射线的照射使患者唾液腺结构破坏、功能减退,患者的生活质量严重下降。对于放射性唾液腺损伤,临床上尚无有效的治疗方式。骨髓来源细胞(bone marrow-derived cells,BM... 详细信息

罹患头颈部肿瘤的患者在接受放射治疗时往往会发生放射性唾液腺损伤。射线的照射使患者唾液腺结构破坏、功能减退,患者的生活质量严重下降。对于放射性唾液腺损伤,临床上尚无有效的治疗方式。骨髓来源细胞(bone marrow-derived cells,BMDCs)最早用于治疗血液系统疾病。随着对BMDCs认识的逐渐深入,BMDCs的应用领域日益广泛。近些年来,一些动物实验的研究结果表明,利用BMDCs治疗放射性唾液腺损伤能够有效地保护腺体内各种实质细胞,促进腺组织再生,恢复唾液腺功能。本文主要对利用BMDCs治疗放射性唾液腺损伤的治疗方式、治疗效果及其主要的治疗机制进行综述,并对该领域今后的研究方向进行了展望。

关键词：骨髓来源细胞放射性损伤唾液腺

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