检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2020年第7期15卷 761-767页

作者：花璇王涛毕言伟陶裕凯孔德龙汤仁仙吴建伟江苏省免疫与代谢重点实验室江苏徐州221004 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州贵阳550025

目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(M... 详细信息

目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC)以及不同环境中Mt6-21DLeu对Ca抑菌活性的变化;通过时间-杀菌曲线反映Mt6-21DLeu对Ca的杀菌动力学;通过结晶紫染色测定Mt6-21DLeu对Ca不同阶段生物被膜的清除作用;采用多功能酶标仪检测荧光探针DPH的相对荧光密度;荧光显微镜观察Mt6-21DLeu的细胞膜通透性;采用流式细胞仪检测Mt6-21DLeu影响Ca活性氧ROS生成的影响。结果与MAF-1A相比,Mt6-21DLeu抑制Ca生长的效果提高近5倍,其MIC和MFC分别为0.128 mg/ml和0.256 mg/ml。在盐离子环境中,Mt6-21DLeu活性几乎不受影响,胰酶环境对Mt6-21DLeu有所抑制但远小于对MAF-1A活性的干扰。时间-杀菌曲线结果显示在MIC和2 MIC浓度下,Mt6-21DLeu于9 h后逐渐抑制Ca的生长;4 MIC浓度时Mt6-21DLeu的杀菌能力增强。Mt6-21DLeu在4、24、48 h时均能部分清除Ca已形成的生物被膜,清除效果与Mt6-21DLeu的浓度有关;4 MIC浓度的Mt6-21DLeu能显著增加Ca细胞膜的流动性(P<0.01)及通透性,进而引起Ca菌体内ROS的积累。结论衍生肽Mt6-21DLeu能高效、持久、稳定地抑杀Ca,其抗菌作用可能通过增强细胞膜通透性、促进胞内ROS积累的多靶点模式实现。因此,可将Mt6-21DLeu作为治疗Ca感染的候选药物分子。

关键词：家蝇抗菌肽衍生肽白色念珠菌抑菌活性活性氧

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行病学特征的研究进展

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大连医科大学学报 2013年第2期35卷 183-187页

作者：王斌史友权司怡然钟民涛黄敏大连医科大学基础医学院临床医学专业辽宁大连116044 大连医科大学基础医学院微生物学教研室辽宁大连116044

近些年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染越来越严重,且呈现逐年升高的趋势,成为医院感染流行的主要病原菌,MRSA因其多药耐药、易暴发流行、治疗困难和病死率高等特点已成为临床治疗的难题。本文就近年来MRSA流行病学特征的调查,分... 详细信息

近些年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染越来越严重,且呈现逐年升高的趋势,成为医院感染流行的主要病原菌,MRSA因其多药耐药、易暴发流行、治疗困难和病死率高等特点已成为临床治疗的难题。本文就近年来MRSA流行病学特征的调查,分别对其分类、分布及其感染诱因和耐药特征加以总结和综述,为临床的治疗和预防提供对策。

关键词： MRSA 耐药性流行病学特征医院感染

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登革病毒2型非结构蛋白NS2B的原核表达、纯化及其抗体的制备

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免疫学杂志 2008年第2期24卷 135-138页

作者：刘丽梅陈宗涛田衍平陈炜江雯徐小峰高娜安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的原核表达登革病毒(Dengue Virus,DV)NS2B蛋白并纯化,制备NS2B的小鼠多克隆抗体。方法RT-PCR扩增DV2全长的NS2B基因序列,构建表达带有6×His标签的NS2B的原核表达载体,进行表达与纯化,免疫Balb/c小鼠,制备NS2B多克隆抗体。采用EL... 详细信息

目的原核表达登革病毒(Dengue Virus,DV)NS2B蛋白并纯化,制备NS2B的小鼠多克隆抗体。方法RT-PCR扩增DV2全长的NS2B基因序列,构建表达带有6×His标签的NS2B的原核表达载体,进行表达与纯化,免疫Balb/c小鼠,制备NS2B多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,Western-blot及免疫荧光染色检测其特异性。结果成功构建原核表达载体pQE-31/NS2B,进一步获得相对分子质量为16000的纯化蛋白及多克隆抗体,ELISA显示抗体效价达1∶25600。Western-blot和免疫荧光染色显示多克隆抗体与NS2B蛋白特异性结合。结论本研究获得了纯化的DV2NS2B蛋白,成功地制备了NS2B多克隆抗体,为进一步研究NS2B的作用机制奠定了基础。

关键词：登革病毒 Nonstructural Protein 2B(NS2B) 原核表达载体纯化蛋白多克隆抗体

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Rasmussen脑炎患者脑组织的转录组学特征分析

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第三军医大学学报 2020年第14期42卷 1407-1413页

作者：罗乔荔王一松关宇光陈思畅范东瀛王培刚栾国明安静首都医科大学基础医学院病原生物学系微生物学教研室北京100069 首都医科大学三博脑科医院功能神经外科北京100093

目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4... 详细信息

目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4例脑组织的基因表达谱进行检测。结果聚类分析显示RE患者及对照脑组织差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)谱存在明显差异。共筛选出1285个DEGs,其中782个(60.9%)下调,503个(39.1%)上调。上调表达的DEGs主要富集于神经元信号转导相关的通路,可能与RE患者频繁的癫痫发作相关;下调表达的DEGs主要富集于细胞骨架、细胞周期及趋化作用相关的通路,可能与RE患者脑组织中神经元的丢失及再生以及部分病原体感染后的免疫应答相关。上调表达的关键基因为TAS2R40、HTR4、NAP1L2,下调表达的关键基因为CXXC1、SEPTIN8、CCR7。结论RE患者脑组织的转录组学具有明显特征,DEGs主要富集于神经元信号转导、细胞周期以及趋化作用相关的通路中。

关键词： Rasmussen脑炎癫痫 RNA-Seq 转录组学

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SARS冠状病毒M基因的克隆及其表达

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中国病毒学 2005年第1期20卷 1-4页

作者：晏辉钧赵卫方丹云周经姣龙北国张文炳郭辉玉江丽芳中山大学基础医学院微生物学教研室广东广州510080 南方医科大学热带卫生学系微生物学教研室广东广州510515

从SARS冠状病毒(GD322株)组织培养上清中提取 RNA,进行 RT PCR扩增其 M基因并克隆到巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB,电穿孔法将重组体整合入酵母菌 P. pastoris,经抗生素 Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定,取Mut+菌用甲醇诱导表达,SD... 详细信息

从SARS冠状病毒(GD322株)组织培养上清中提取 RNA,进行 RT PCR扩增其 M基因并克隆到巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB,电穿孔法将重组体整合入酵母菌 P. pastoris,经抗生素 Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定,取Mut+菌用甲醇诱导表达,SDS PAGE检测其表达产物。Mut+ 酵母转化菌经甲醇诱导可分泌表达约 65kDa和42 kDa的蛋白质,与SARS恢复期病人血清的免疫印迹证实它们为特异的重组M蛋白质,且获得的重组M蛋白质具有免疫反应性。

关键词： SARS冠状病毒 M基因克隆巴氏毕赤酵母表达

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开展PBL教学法,在分子病毒学教学中培养学生的学习能力

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2004年第1期6卷 4-5页

作者：凌虹张凤民钟照华谷鸿喜程志哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室

为了加强对七年制学生综合素质和学习能力的培养,我们在分子病毒学的教学过程中,采取了PBL(problem based learning)教学法[1],即以问题为中心的教学模式.这种方法不仅给学生提供了展示教学新理念的机会,同时也对指导教师提出了挑战.现... 详细信息

为了加强对七年制学生综合素质和学习能力的培养,我们在分子病毒学的教学过程中,采取了PBL(problem based learning)教学法[1],即以问题为中心的教学模式.这种方法不仅给学生提供了展示教学新理念的机会,同时也对指导教师提出了挑战.现把我们对七年制学生的分子病毒学课程进行PBL教学的尝试与体会介绍如下.

关键词：教学中学习能力学生综合素质指导教师培养学生课程教学过程分子病毒学 PBL教学法七年制

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细胞型朊蛋白分子结构及其相关疾病的研究进展

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国际遗传学杂志 2017年第4期40卷 233-237页

作者：王鑫颜学勤商庆龙哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室

细胞型朊蛋白(cellular prion protein,PrP~c)是一种高度保守且广泛表达的糖磷脂酰基醇(glycosyl phosphatidyl inositol,GPI)锚定糖蛋白,定位于脂筏。在哺乳动物体内,PrP~c在中枢神经系统和网状内皮系统中大量存在,其它组织中有少量分... 详细信息

细胞型朊蛋白(cellular prion protein,PrP~c)是一种高度保守且广泛表达的糖磷脂酰基醇(glycosyl phosphatidyl inositol,GPI)锚定糖蛋白,定位于脂筏。在哺乳动物体内,PrP~c在中枢神经系统和网状内皮系统中大量存在,其它组织中有少量分布。目前研究表明,PrP~c分子结构具有重要的生理功能之外,还与神经系统疾病和肿瘤发生等相关。本文重点阐述了PrP~c的分子结构、组织分布及其相关疾病研究进展。

关键词： PrP~C 分子结构相关疾病

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铜绿假单胞菌生物被膜形成能力与基因型的相关性分析

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四川大学学报（医学版） 2006年第5期37卷 666-669页

作者：程曦杨维青石磊尹晓琳谢轶曾蔚李心晖苏建裕寇亚丽贾文祥四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 华南理工大学食品与生物工程学院河北医科大学基础医学院

目的探讨铜绿假单胞菌(PA)临床分离株的粘附性、生物被膜形成能力及其与基因型的相关性。方法采用改良的微量平板法对临床分离的48株PA生物被膜的形成进行定量分析;通过肠杆菌基因间重复一致序列-PCR(ERIC-PCR)技术绘制48株PA的指纹图谱... 详细信息

目的探讨铜绿假单胞菌(PA)临床分离株的粘附性、生物被膜形成能力及其与基因型的相关性。方法采用改良的微量平板法对临床分离的48株PA生物被膜的形成进行定量分析;通过肠杆菌基因间重复一致序列-PCR(ERIC-PCR)技术绘制48株PA的指纹图谱,应用计算机软件建立遗传相似性系数矩阵及聚类分析树状图。结果48株临床分离PA菌株生物被膜的形成能力不同。生物被膜形成能力不同的PA在基因型上表现出多态性,PA在17%遗传相似性系数上分为A、B、C、D、E五个基因型,生物被膜形成能力强的PA大都属于D型,其遗传相似性系数为42%。结论绝大多数临床分离的PA株具有较强的生物被膜形成能力;生物被膜形成能力不同的PA在基因型上表现出多态性;生物被膜形成能力较强的PA在基因型上表现出一定的相似性。

关键词：铜绿假单胞菌生物被膜基因指纹图谱基因型

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人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第9期29卷 940-944页

作者：孙宇辉张沿君刘明明唐丽萍张光虹魏兰兰谷鸿喜商庆龙哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医学院妇科黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇科黑龙江哈尔滨150086

目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法... 详细信息

目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。

关键词：人乳头瘤病毒16型 E2蛋白表达抗血清

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硝酸甘油抗B组柯萨奇病毒的作用特点和机制

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哈尔滨医科大学学报 2005年第5期39卷 399-401页

作者：李晓波曾明孙艳影史巧云钟照华田野谷鸿喜张凤民周昌伟哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 基础医学研究所黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学黑龙江哈尔滨150086

目的研究硝酸甘油(GTN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用特点和机制。方法比较先经GTN预处理及与GTN同时加入的两种处理方法相同滴度的病毒所引起的CPE抑制率的差异;分别测定并比较多次给予GTN及不同时间点给予GTN对CVB3感染的HeLa细胞... 详细信息

目的研究硝酸甘油(GTN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用特点和机制。方法比较先经GTN预处理及与GTN同时加入的两种处理方法相同滴度的病毒所引起的CPE抑制率的差异;分别测定并比较多次给予GTN及不同时间点给予GTN对CVB3感染的HeLa细胞组间的细胞病变效应抑制效果;测定GTN在HeLa细胞中不同时间点代谢产生的NO浓度,并做NO浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果的相关性分析。结果预加GTN组与同时加GTN组经等量病毒攻击所引起的CPE无显著性差异(P>0.05);多次给药的组间CPE抑制率无显著性差异(P>0.05),但不同时间点给药的组间CPE抑制率具有显著差异(P<0.05),NO浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果呈正相关(r=0.97,P<0.01)。结论GTN是通过其代谢产物NO来发挥抗CVB3作用的。

关键词：硝酸甘油柯萨奇病毒一氧化氮

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