检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2018年第6期53卷 938-942页

作者：孙涛程茂胜袁晓玲张晓燕黄升海安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

目的探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用。方法采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒(RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增... 详细信息

目的探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用。方法采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒(RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增殖和阻断作用)及不同给药浓度下对RSV的抑制作用。测定细胞的半数中毒浓度(TC_(50))、药物半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI)。结果细胞的TC_(50)为25 mg/ml;直接灭活和抑制增殖均对RSV有明显作用(P<0.01);采用直接灭活方式时,其IC50为7.43 mg/ml,TI为3.36;采用抑制病毒增殖时,其IC50为4.42mg/ml,TI为5.66。CCK-8法结果显示,在阻断以及抑制吸附两种给药方式下,病毒抑制率与病毒对照组之间差异无统计学意义。结论 999感冒灵颗粒在直接灭活以及抑制病毒增殖两种给药方式下对RSV有一定的抑制作用。

关键词：呼吸道合胞病毒细胞病变法 CCK-8法感冒灵颗粒抗病毒作用

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诺如病毒病毒样颗粒的表达及其与Caco-2细胞的结合活性研究

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中国病原生物学杂志 2013年第10期8卷 865-868页

作者：杨柏财黑凯文邱依然李咏梅天津医科大学基础医学院微生物学教研室天津300072

目的在杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞中表达诺如病毒（NorovirUSes，NoV）的衣壳蛋白VPl，并芎令证其与Caco-2细胞的结合活性。方法利用杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞进行诺如病毒VPl蛋白表达，用蔗糖密度梯瞍超速离心方法... 详细信息

目的在杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞中表达诺如病毒（NorovirUSes，NoV）的衣壳蛋白VPl，并芎令证其与Caco-2细胞的结合活性。方法利用杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞进行诺如病毒VPl蛋白表达，用蔗糖密度梯瞍超速离心方法纯化，采用Westernblot鉴定表达产物，采用流式细胞术检测NoV病毒样颗粒（Virus-likeparticles，VLPs）与Caco-2细胞的结合活性。结果重组质粒转染细胞表达产物经蔗糖密度梯度超速离心后进行SDS~PAGE，在分子质量单位55~70ku之间有3条蛋白带，与预期重组蛋白NoV—VI-Ps大小相符；Westernblot分析各蛋白组分均能被兔抗NoV多抗血清识别；流式细胞仪分析届示，加入重组蛋白NoV—VI—Ps后荧光信号较阴性对照组显著增强，表明表达的重组蛋自NoV—***能够与Caco-2结合，且3个组分的结合能力不同（P〈i0·05），以组分5与Caco-2细胞结合的能力最强（P〈O．05）。结论***表达成功，并证明NoV-VI—Ps具有与Caco2细胞结合活性，为N。V疫苗的开发和防治药物的研制奠定了基础。

关键词：诺如病毒杆状病毒表达系统病毒样颗粒 Caco-2细胞

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呼吸道合胞病毒空斑形成实验的条件优化

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安徽医科大学学报 2016年第4期51卷 595-598页

作者：于莉吴璇汪旻旻黄升海安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

采用空斑形成实验方法测定呼吸道合胞病毒（RSV）的滴度,加入覆盖层倒置培养27、30、34、40h后经固定染色、剔除覆盖层后,可见清晰透明空斑,边缘清晰、形态均为圆形或类圆形,空斑直径分别为1、1.5、3、5mm左右。加入覆盖层后培养病毒的... 详细信息

采用空斑形成实验方法测定呼吸道合胞病毒（RSV）的滴度,加入覆盖层倒置培养27、30、34、40h后经固定染色、剔除覆盖层后,可见清晰透明空斑,边缘清晰、形态均为圆形或类圆形,空斑直径分别为1、1.5、3、5mm左右。加入覆盖层后培养病毒的时间可以影响RSV最终所形成的空斑大小,并且随着时间的延长空斑逐渐增大,在30～34h所形成的空斑大小最佳,易于计数。病毒的稀释度也会影响空斑最终形成的数量,且随着稀释度的增加,空斑数量逐渐减少。

关键词：呼吸道合胞病毒空斑形成实验甲醛-结晶紫

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幽门螺杆菌vacA毒性片段与hpaA融合基因的原核表达

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世界华人消化杂志 2004年第5期12卷 1096-1099页

作者：刘淼杨致邦林珊珊吴利先重庆医科大学基础医学院微生物学教研室重庆市400016

目的:构建幽门螺杆菌vacA毒性片段(v)与hpaA融合基因的原核表达载体,并诱导表达,为制备具有治疗与预防作用的疫苗奠定基础. 方法:通过设计带有编码IL-3N端12个氨基酸引物,用PCR技术从pQE30-V质粒扩增出有接头的v基因,克隆至质粒pTrc99A-... 详细信息

目的:构建幽门螺杆菌vacA毒性片段(v)与hpaA融合基因的原核表达载体,并诱导表达,为制备具有治疗与预防作用的疫苗奠定基础. 方法:通过设计带有编码IL-3N端12个氨基酸引物,用PCR技术从pQE30-V质粒扩增出有接头的v基因,克隆至质粒pTrc99A-HpaA中与hpaA融合.将融合基因插入原核表达载体pQE30,再将pQE30-V-HpaA转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果, Western blotting鉴定其抗原性. 结果:融合蛋白的相对分子量约为65 000,能与幽门螺杆菌感染的人阳性血清发生抗原抗体反应. 结论:重组表达质粒pQE30-V-HpaA表达成功,为进一步研究其免疫学活性及制备疫苗提供了材料.

关键词：幽门螺杆菌 vacA毒性 hpaA融合基因原核表达氨基酸

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普乐可复防治大鼠抗肾小球基底膜肾炎的实验研究

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中国病理生理杂志 2003年第12期19卷 1631-1634,I001页

作者：汤仁仙王迎伟黄瑞高丰光刘晓梅徐州医学院微生物学与免疫学教研室江苏徐州221002 南京医科大学微生物学与免疫学教研室江苏南京210007 苏州大学基础医学院微生物学教研室江苏苏州215007

目的 :观察普乐可复 (FK5 0 6 )防治大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法 :复制大鼠抗GBM肾炎模型。实验分 3组 :肾炎 +FK5 0 6组、肾炎对照组及正常对照组。大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后 6h内皮下注射FK5 0 6注射液 (0 5m... 详细信息

目的 :观察普乐可复 (FK5 0 6 )防治大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法 :复制大鼠抗GBM肾炎模型。实验分 3组 :肾炎 +FK5 0 6组、肾炎对照组及正常对照组。大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后 6h内皮下注射FK5 0 6注射液 (0 5mg·kg-1·d-1) ,至第 2 1d。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第 4d、第 14d和第2 1d ,检测大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平 ,观察肾组织病理学改变 ,以及检测T淋巴细胞转化功能。结果 :肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第 4d即出现异常蛋白尿 ,血清肌酐和尿素氮亦持续上升 ;肾小球内可见细胞数增加和新月体形成 ,肾小管内大量蛋白管型 ,GBM呈不规则增厚 ,足突大片融合 ;T淋巴细胞转化功能异常。而肾炎 +FK5 0 6组大鼠上述病变均明显较轻。结论 :FK5 0 6能够明显改善大鼠抗GBM肾炎的肾功能。

关键词：普乐可复抗肾小球基底膜肾炎大鼠

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卡介苗荚膜阿拉伯甘露聚糖的提纯鉴定及其免疫调节功能的初步研究

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中国微生态学杂志 2022年第5期34卷 540-543页

作者：邓国英刘欣杨淑凤大连医科大学基础医学院微生物学教研室辽宁大连116044

目的确定卡介苗(BCG)中荚膜中糖成分阿拉伯甘露聚糖(AM)的功能。方法本研究从我国目前普遍使用的BCG中,利用氯仿甲醇抽提方法分离纯化荚膜AM,经AM单克隆抗体鉴定后,腹腔注射BCG致敏小鼠,体内外评价AM的免疫调节功能。结果AM能在小鼠体... 详细信息

目的确定卡介苗(BCG)中荚膜中糖成分阿拉伯甘露聚糖(AM)的功能。方法本研究从我国目前普遍使用的BCG中,利用氯仿甲醇抽提方法分离纯化荚膜AM,经AM单克隆抗体鉴定后,腹腔注射BCG致敏小鼠,体内外评价AM的免疫调节功能。结果AM能在小鼠体内增强BCG诱导的迟发型超敏反应(P<0.01),体外免疫指标检测发现AM提高小鼠脾细胞Th1类细胞因子IFN-γ和TNF-α的表达水平(P<0.05)。结论BCG的荚膜AM是潜在的保护性抗原,并为优化BCG提供理论依据。

关键词：荚膜多糖阿拉伯甘露聚糖卡介苗

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乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠炎性细胞因子及肠道菌群的影响

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医学动物防制 2023年第3期39卷 282-287,293页

作者：迟茜文解文利姚梦玮李玉迁魏洪贵州医科大学基础医学院感染与免疫学实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室

目的探究不同剂量乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠的虫荷量、炎症调节作用及肠道菌群组成的影响。方法取感染旋毛虫的小鼠(300条/只)随机分为模型组、乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组、低剂量组,未感染旋毛虫小鼠作为空白对照组;高、中、低剂... 详细信息

目的探究不同剂量乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠的虫荷量、炎症调节作用及肠道菌群组成的影响。方法取感染旋毛虫的小鼠(300条/只)随机分为模型组、乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组、低剂量组,未感染旋毛虫小鼠作为空白对照组;高、中、低剂量组分别给予乳双歧杆菌灌胃,模型组和空白对照组每日给予等量磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)连续灌胃30 d;胃蛋白酶消化法检测各组第7 d肠道成虫数量及第30 d肌肉幼虫数量。ELISA法检测各组模型小鼠血清中白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)水平,采集各组小鼠肠道感染期粪便样本,采用16S rDNA高通量测序进行微生物组生物信息学分析,评估样本多样性和分类学特征。结果虫荷量结果显示,高剂量乳双歧杆菌显著降低旋毛虫感染小鼠第7 d肠道成虫及第30 d肌肉幼虫数量(P<0.05);炎性因子水平检测发现高剂量乳双歧杆菌使旋毛虫感染小鼠血清抑炎因子(IL-10)水平升高(P<0.05),促炎因子(TNF-α)水平降低(P<0.05)。肠道微生物组成结果显示,乳双歧杆菌干预使感染小鼠厚壁菌门与拟杆菌门比值上升,降低普雷沃菌属丰度,高剂量组中异杆菌属、颤螺菌属丰度增加,中剂量组中布劳特菌属增加。结论乳双歧杆菌能改善旋毛虫感染小鼠炎症表现,促进旋毛虫清除,提高感染小鼠肠道内有益菌丰度。

关键词：乳双歧杆菌旋毛虫肠道菌群虫荷量炎性因子

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EV71型病毒驯化与手足口病动物模型的研究进展

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免疫学杂志 2011年第3期27卷 259-262页

作者：窦建琳安静兰州大学基础医学院病原生物学研究所 73000 首都医科大学基础医学院微生物学教研室 10006

手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机... 详细信息

手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机制,而建立动物模型的关键是通过病毒驯化获得EV71的神经细胞适应毒株。本文简要综述EV71的病毒驯化及手足口病动物模型的最新进展,以期推动相关研究。

关键词：手足口病 EV71病毒病毒驯化动物模型

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人乳头瘤病毒11型L1基因原核表达系统的构建及鉴定

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中国地方病学杂志 2004年第2期23卷 163-165页

作者：庄敏谷鸿喜孔卫兰李迪魏兰兰李金梁林道红哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086 第一临床医学院皮肤科

目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1原核表达系统pBAD(B)鄄HPV11L1,表达HPVL1蛋白,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础。方法PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒11型L1基因片段,克隆至pBluescript质粒,并测序。将其从克隆重组质... 详细信息

目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1原核表达系统pBAD(B)鄄HPV11L1,表达HPVL1蛋白,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础。方法PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒11型L1基因片段,克隆至pBluescript质粒,并测序。将其从克隆重组质粒中切下连入表达载体,建立pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达重组质粒,在大肠杆菌宿主菌Top10中,经阿拉伯糖诱导,表达融合蛋白L1,经SDS鄄PAGE电泳和Westernblot进行鉴定。结果3株HPV11L1经测序发现变异一致,每株均有2个核苷酸变异,但未影响氨基酸变化。经SDS鄄PAGE鉴定L1蛋白相对分子质量为59×103,与预期值相同,Westernblot证明表达蛋白能与单克隆抗体反应,成功构建了pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达系统。结论所构建的pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达系统能够高效表达HPV11L1蛋白。

关键词：人乳头瘤病毒11型 L1基因原核表达系统 HPV11 基因表达疫苗

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类器官在人类病毒研究中的应用进展

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医学研究与战创伤救治 2023年第6期36卷 644-648页

作者：徐运娥敖弟书(综述) 宋鸿(审校) 遵义医科大学基础医学院微生物学教研室遵义563099

病毒是危害人类健康的重要病原体,由于缺乏能再现病毒自然感染过程的体外研究模型,这为深入研究病毒致病机制、宿主-病毒之间相互作用等带来了巨大挑战,严重阻碍了病毒致病机制的研究、抗病毒药物的筛选和疫苗的开发。类器官技术能在体... 详细信息

病毒是危害人类健康的重要病原体,由于缺乏能再现病毒自然感染过程的体外研究模型,这为深入研究病毒致病机制、宿主-病毒之间相互作用等带来了巨大挑战,严重阻碍了病毒致病机制的研究、抗病毒药物的筛选和疫苗的开发。类器官技术能在体外构建模拟体内组织结构和生理功能的实验模型,被认为是目前最具潜力的病毒感染研究模型。文章就类器官在病毒体外培养、宿主-病毒相互作用、病毒致病机制及抗病毒药物筛选等研究中的应用进展作一综述。

关键词：类器官病毒研究感染模型

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