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氢气抑制白细胞介素22(IL-22)反应缓解胶原蛋白诱导关节炎(CIA)小鼠症状

细胞与分子免疫学杂志 2022年第5期38卷 400-405页

作者：田艳康行杨昊张淑婷王雨樊卫平山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室山西太原030001

目的探讨氢气(H2)对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的治疗作用及相关机制。方法18只DBA/1小鼠随机分为正常对照组、CIA组和H2治疗组,每组6只。CIA组和H_(2)治疗组小鼠采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导CIA模型,H2治疗组小鼠在第15~60天进行H_(2)吸入治疗... 详细信息

目的探讨氢气(H2)对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的治疗作用及相关机制。方法18只DBA/1小鼠随机分为正常对照组、CIA组和H2治疗组,每组6只。CIA组和H_(2)治疗组小鼠采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导CIA模型,H2治疗组小鼠在第15~60天进行H_(2)吸入治疗(300 mL/L,3 h/d)。比较各组小鼠关节炎症状评分;HE染色进行关节病理评分;流式细胞术、免疫组织化学染色检测脾和关节中白细胞介素22(IL-22)阳性细胞变化;ELISA检测血清及关节软骨中IL-22水平;Western blot法检测关节软骨中磷酸化的信号转导子和转录激活子3(p-STAT3)和磷酸化的核因子κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果与正常对照组相比,CIA组关节炎症状评分和病理评分显著升高、脾细胞和关节软骨中IL-22+细胞比例升高、血清和关节软骨中IL-22含量增加,关节软骨中p-STAT3和p-NF-κB蛋白表达增高,H_(2)治疗后均显著降低。结论H2可能通过抑制STAT3/NF-κB通路抑制IL-22炎症反应,缓解CIA小鼠症状。

关键词：氢气(H2) 胶原蛋白诱导关节炎(CIA) 白细胞介素22(IL-22) 信号转导子与转录激活子3(STAT3) 核因子kB(NF-kB)

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pCAGGs-miR-483重组质粒构建及miR-483转基因小鼠模型的建立

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中国生物化学与分子生物学报 2010年第5期26卷 478-483页

作者：马宁王曦迪乔瑜李福源杨宝峰吕延杰单宏丽郑晓飞高旭哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨150086 北京放射与辐射医学研究所北京100850

miR-483是近年发现的一种编码于胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因第2内含子的microRNA.研究表明,高脂饮食诱导的肥胖动物的心脏、肝脏及肝、肾肿瘤组织中miR-483表达异常,但其生物学功能尚待研究.建立稳定表达m... 详细信息

miR-483是近年发现的一种编码于胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因第2内含子的microRNA.研究表明,高脂饮食诱导的肥胖动物的心脏、肝脏及肝、肾肿瘤组织中miR-483表达异常,但其生物学功能尚待研究.建立稳定表达miR-483并能够传代的miR-483转基因小鼠是研究其功能的重要环节.利用特异miR-483克隆引物,以小鼠基因组为模版,经PCR获得pre-miR-483片段,通过重组构建pCAGG-miR-483重组质粒.该质粒可在真核细胞中稳定表达成熟miR-483.再利用原核显微注射法建立miR-483过表达转基因小鼠.利用实时PCR检测各组织miR-483含量.结果显示,miR-483转基因小鼠心肌、骨骼肌、肝脏等组织可过表达成熟miR-483.此外,miR-483转基因过表达小鼠较野生型小鼠体重降低,提示miR-483可能在发育、代谢等方面具有调节作用.miR-483转基因小鼠模型的建立为microRNA功能研究提供了在体研究的平台.

关键词：内含子microRNA 转基因小鼠宿主基因

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雌性大鼠交配实验模型的建立

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中国男科学杂志 2014年第6期28卷 6-9页

作者：张盼盼王丽阿地力江·伊明刘凤霞迪丽达尔·库德热提新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室乌鲁木齐 830011 新疆医科大学中医学院中西医临床2012-2班新疆医科大学基础医学院微生物学教研室

目的：建立最佳雌性大鼠交配实验模型。方法正常雌性SD大鼠30只，随机分为自然组、黄体酮组和去势＋药物组，每组10只。自然组大鼠不给于任何处理；黄体酮组于交配前4h仅注射黄体酮500μg/只；去势＋药物组统一行双侧卵巢切除术，于交... 详细信息

目的：建立最佳雌性大鼠交配实验模型。方法正常雌性SD大鼠30只，随机分为自然组、黄体酮组和去势＋药物组，每组10只。自然组大鼠不给于任何处理；黄体酮组于交配前4h仅注射黄体酮500μg/只；去势＋药物组统一行双侧卵巢切除术，于交配实验前48h和4h分别皮下注射苯甲酸雌二醇20μg/只和黄体酮500μg/只。各组于交配前进行阴道涂片，并正常雄鼠进行交配实验，检测其交配成功率。结果自然组1只大鼠发情，交配成功率10%；黄体酮组2只大鼠发情，交配成功率20%；去势＋药物组阴道涂片显示全部处于发情期，交配成功率为100%。结论雄鼠的性行为与雌鼠是否发情密切相关，在性行为学检测中，经雌孕激素处理的去势雌鼠为最佳交配实验模型。

关键词：卵巢切除术大鼠交配模型

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柯萨奇-腺病毒受体基因的原核表达和多克隆抗体制备

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上海第二医科大学学报 2004年第9期24卷 726-730页

作者：吴赟陈洪黄孝天陈宏新刘晶星上海第二医科大学基础医学院微生物教研室上海200025

目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新... 详细信息

目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新西兰兔,ELISA检测抗血清滴度。结果重组质粒转化的大肠杆菌M15经IPTG诱导表达及亲和纯化后得到滴度较高的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot显示其分子量约为26 kd,具有特异的抗原性,主要以包涵体形式存在于菌体中。纯化的融合蛋白免疫新西兰兔后产生的抗体,经ELISA检测抗体滴度>1:32 000。结论CAR胞外段基因的克隆表达和多克隆抗体的制备,为进一步研究该受体在以腺病毒载体为基础的基因治疗中的作用及柯萨奇病毒的致病机制奠定了基础。

关键词：胞外段腺病毒受体多克隆抗体滴度基因重组质粒新西兰兔克隆表达诱导表达纯化

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H6N1亚型禽流感病毒跨种属传播研究进展

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中国人兽共患病学报 2017年第3期33卷 236-240页

作者：孙增辉朱银川王熹婧蒙远雁张增峰广西医科大学微生物学教研室南宁530021 广西医科大学基础医学院南宁530021

禽流感病毒H6N1亚型广泛存在于水禽和陆禽,是最常分离到的甲型流感病毒亚型,遗传分析表明该病毒可能是高致病禽流感病毒H5N1的前体。随着病毒基因的持续进化,H6N1可跨种间屏障传播至哺乳动物,其对于哺乳动物小鼠、猪和雪貂已经具有较强... 详细信息

禽流感病毒H6N1亚型广泛存在于水禽和陆禽,是最常分离到的甲型流感病毒亚型,遗传分析表明该病毒可能是高致病禽流感病毒H5N1的前体。随着病毒基因的持续进化,H6N1可跨种间屏障传播至哺乳动物,其对于哺乳动物小鼠、猪和雪貂已经具有较强感染能力。血清流行病学调查结果显示少数人H6禽流感病毒抗体阳性,2013年5月,我国台湾出现全球首例人类感染H6N1亚型流感病毒。因此,H6N1病毒宿主范围不断扩大,在这些宿主内可发生病毒基因突变、基因重配,进而演变为具有感染人类潜能的新变异株的可能。本文从病原学、流行病学、病毒感染哺乳动物和人类等方面对H6N1亚型禽流感病毒的研究进展进行综述,以期为H6N1禽流感病毒的防控提供参考。

关键词：甲型流感病毒 H6N1亚型流行病学调查感染哺乳动物人

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人乳头瘤病毒11型L1基因原核表达系统的构建及鉴定

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中国地方病学杂志 2004年第2期23卷 163-165页

作者：庄敏谷鸿喜孔卫兰李迪魏兰兰李金梁林道红哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086 第一临床医学院皮肤科

目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1原核表达系统pBAD(B)鄄HPV11L1,表达HPVL1蛋白,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础。方法PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒11型L1基因片段,克隆至pBluescript质粒,并测序。将其从克隆重组质... 详细信息

目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1原核表达系统pBAD(B)鄄HPV11L1,表达HPVL1蛋白,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础。方法PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒11型L1基因片段,克隆至pBluescript质粒,并测序。将其从克隆重组质粒中切下连入表达载体,建立pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达重组质粒,在大肠杆菌宿主菌Top10中,经阿拉伯糖诱导,表达融合蛋白L1,经SDS鄄PAGE电泳和Westernblot进行鉴定。结果3株HPV11L1经测序发现变异一致,每株均有2个核苷酸变异,但未影响氨基酸变化。经SDS鄄PAGE鉴定L1蛋白相对分子质量为59×103,与预期值相同,Westernblot证明表达蛋白能与单克隆抗体反应,成功构建了pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达系统。结论所构建的pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达系统能够高效表达HPV11L1蛋白。

关键词：人乳头瘤病毒11型 L1基因原核表达系统 HPV11 基因表达疫苗

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大鼠内脏及压力感受器神经元的性别差异

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中国药理学通报 2009年第5期25卷 636-641页

作者：乔国芬龚冬梅赵瑞波李柏岩付宜利哈尔滨工业大学生物医学工程研究中心黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨医科大学基础医学院病理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的观察大鼠有髓和无髓内脏/主动脉压力感受器(ABN)传入神经元电生理及神经解剖学的性别差异。方法制备分离神经元、迷走神经-神经节切片,荧光标记主动脉减压神经(ADN),鉴别ABN,全细胞电流钳记录神经元动作电位(AP),结合电子显微镜观察... 详细信息

目的观察大鼠有髓和无髓内脏/主动脉压力感受器(ABN)传入神经元电生理及神经解剖学的性别差异。方法制备分离神经元、迷走神经-神经节切片,荧光标记主动脉减压神经(ADN),鉴别ABN,全细胞电流钳记录神经元动作电位(AP),结合电子显微镜观察,分析ADN各型纤维存在、分布及电生理特性之间的性别差异。结果♂♀大鼠结状神经节存在A-和C-型神经元,AP相关参数♂♀间差异无显著性。除A-和C-型外,♀大鼠还观察到一种传导速度快、低阈值高兴奋性Ah-型髓鞘化ABN;电镜结果显示,ADN有髓纤维出现频率(~25%)与电生理结果一致。Ah-型诱发放电频率(20 Hz^40 Hz)低于A-型(40 Hz^150 Hz,P<0.01),但高于C-型。去卵巢♀大鼠,A-和C-型兴奋性变化不明显,但Ah-型放电频率降低(2~5 Hz,P<0.01),雌激素恢复去卵巢♀大鼠Ah-型放电频率到正常水平,且作用可被雌激素特异性受体阻断剂阻断。结论仅见于♀大鼠内脏和压力感受器传入通路的Ah-型有髓纤维,其数量与A-型相似,表现为低阈值高兴奋性,可能在维持♀动物较低动脉血压的生理过程中发挥重要作用。

关键词：传入纤维神经元动作电位主动脉减压神经性别差异

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喉癌颈淋巴结抗肿瘤免疫状态的研究

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中华耳鼻咽喉科杂志 2004年第4期39卷 223-226页

作者：张杰武徐晋赵雪松贾深汕哈尔滨医科大学附属肿瘤医院头颈外科 150040 哈尔滨医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学教研室

目的　通过对肿瘤引流淋巴结中增生性滤泡反应和树突状细胞 (dendriticcell,DC)浸润密度进行定量分析 ,探讨其在喉癌患者抗肿瘤免疫反应中的作用。方法　重新制备 4 7例行选择性颈淋巴结清扫术的喉癌患者的 15 7枚颈淋巴结石蜡切片 ,用... 详细信息

目的　通过对肿瘤引流淋巴结中增生性滤泡反应和树突状细胞 (dendriticcell,DC)浸润密度进行定量分析 ,探讨其在喉癌患者抗肿瘤免疫反应中的作用。方法　重新制备 4 7例行选择性颈淋巴结清扫术的喉癌患者的 15 7枚颈淋巴结石蜡切片 ,用抗S 10 0、CD4 5RO和CD2 0单克隆抗体免疫组化抗生物素生物素过氧化物酶复合物 (avidin biotinperoxidase,ABC)法显示DC和增生性滤泡的分布并检测其密度。根据增生性滤泡反应的特点进行分型研究。结果　增生型滤泡反应的程度与类型和DC浸润密度有明显的相关性。术后生存 5年以上的患者淋巴结中滤泡计数和DC浸润密度明显多于生存期少于 5年者 (P <0 0 0 1)。无淋巴结转移组患者淋巴结中的滤泡计数和DC浸润密度较有转移组亦有明显增加 (P <0 0 0 1)。具有T细胞增生型滤泡反应的患者比T细胞非增生型患者有较高的 5年生存率 (P <0 0 1)和较低的淋巴结转移率 (P <0 0 5 )。结论　颈淋巴结中增生性滤泡反应和树突状细胞的浸润反映了机体免疫系统的抗肿瘤潜能。树突状细胞的浸润密度和增生性滤泡反应的程度及分型反映了该患者的抗肿瘤免疫状态 ,可以共同作为预后判定的重要指标。

关键词：喉癌颈淋巴结转移免疫学预后树突状细胞增生性滤泡反应

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FZS中药合剂对细胞凋亡的保护作用研究

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哈尔滨医科大学学报 2009年第4期43卷 320-324页

作者：王建秀王德生段淑荣赵敬堃郭彩玲张凤民哈尔滨医科大学第一临床医学院神经内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨FZS中药合剂对Aβ25-35、Aβ42、Aβ42寡聚体诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法应用正常细胞进行对照研究,通过测定MTT、LDH和原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡。原子力显微镜观察PC12细胞表面突起的变化。结果MTT在FZS... 详细信息

目的探讨FZS中药合剂对Aβ25-35、Aβ42、Aβ42寡聚体诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法应用正常细胞进行对照研究,通过测定MTT、LDH和原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡。原子力显微镜观察PC12细胞表面突起的变化。结果MTT在FZS组明显增高(P<0.05);LDH、TUNEL凋亡率在FZS组表达明显降低(P<0.05);原子力显微镜观察Aβ致细胞表面突起缩短的现象在FZS组明显改善,差异有显著意义(P<0.05)。结论FZS可以通过降低Aβ的细胞凋亡作用而减少其细胞毒性,FZS中药合剂可能成为Alzheimer病的治疗手段之一。

关键词： β-淀粉样蛋白寡聚体凋亡中药合剂原子力显微镜

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类器官在人类病毒研究中的应用进展

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医学研究与战创伤救治 2023年第6期36卷 644-648页

作者：徐运娥敖弟书(综述) 宋鸿(审校) 遵义医科大学基础医学院微生物学教研室遵义563099

病毒是危害人类健康的重要病原体,由于缺乏能再现病毒自然感染过程的体外研究模型,这为深入研究病毒致病机制、宿主-病毒之间相互作用等带来了巨大挑战,严重阻碍了病毒致病机制的研究、抗病毒药物的筛选和疫苗的开发。类器官技术能在体... 详细信息

病毒是危害人类健康的重要病原体,由于缺乏能再现病毒自然感染过程的体外研究模型,这为深入研究病毒致病机制、宿主-病毒之间相互作用等带来了巨大挑战,严重阻碍了病毒致病机制的研究、抗病毒药物的筛选和疫苗的开发。类器官技术能在体外构建模拟体内组织结构和生理功能的实验模型,被认为是目前最具潜力的病毒感染研究模型。文章就类器官在病毒体外培养、宿主-病毒相互作用、病毒致病机制及抗病毒药物筛选等研究中的应用进展作一综述。

关键词：类器官病毒研究感染模型

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