检索结果-内蒙古大学图书馆

中国应用生理学杂志 2008年第2期24卷 144-146,232页

作者：刘鑫于洪伟王凤丹王建醒王淑娟于晓光哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:构建酵母双杂交系统"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4... 详细信息

目的:构建酵母双杂交系统"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4 Two-Hybrid System 3中的自激活和毒性作用。结果:本实验成功构建了"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。结论:构建的诱饵质粒pGBKT7-TACE可应用在酵母双杂交系统中,为筛选小鼠cDNA文库中与TACE相互作用的蛋白奠定实验基础。

关键词： TNF-α转化酶酵母双杂交系统自激活作用

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人参皂苷Rh2对小鼠移植瘤生长及对细胞间连接黏附分子表达的影响

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中国中药杂志 2008年第18期33卷 2116-2119页

作者：王强吴美清赵玲辉杨慧科吕晓红内蒙古林业总医院普外科内蒙古牙克石022150 哈尔滨医科大学基础医学院解剖教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:观察人参皂苷Rh2对小鼠移植瘤生长及其对细胞间连接黏附分子(JAM)在癌组织表达的影响,探讨其抗肿瘤作用。方法:昆明种小鼠40只,前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水0.2 mL,成瘤后随机分为2组,实验组给予人参皂苷Rh2(20 ***-1)灌服,2 mL/... 详细信息

目的:观察人参皂苷Rh2对小鼠移植瘤生长及其对细胞间连接黏附分子(JAM)在癌组织表达的影响,探讨其抗肿瘤作用。方法:昆明种小鼠40只,前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水0.2 mL,成瘤后随机分为2组,实验组给予人参皂苷Rh2(20 ***-1)灌服,2 mL/只;对照组给予等量生理盐水,6周后取材。用免疫组化法观察JAM-1,JAM-2在癌细胞、淋巴管及血管的表达。结果:对照组JAM-1阳性表达的肿瘤细胞吸光度(A)549.90,实验组340.55,P<0.05;JAM-2阳性表达弱。对照组JAM-1和JAM-2阳性表达的血管数密度分别为2.33和1.34,实验组分别为1.09和0.9。对照组JAM-1和JAM-2阳性表达的淋巴管数密度分别为2.23和1.88,实验组分别为0.99和0.79;两组间的差异均为P<0.05。结论:人参皂苷Rh2通过下调JAM在肿瘤细胞的表达,抑制肿瘤组织血管及淋巴管的生成,进而抑制肿瘤生长。

关键词：人参皂苷Rh2 移植瘤细胞间连接黏附分子

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天然脱细胞神经支架复合骨髓间充质细胞修复坐骨神经缺损

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中国医科大学学报 2008年第2期37卷 177-180页

作者：何红云邓仪昊佟晓杰贾桦张旭中国医科大学基础医学院解剖学教研室沈阳110001 四川大学华西基础医学与法医学院人体解剖学教研室成都610041

目的观察脱细胞神经支架复合骨髓间充质细胞、构建组织工程化人工神经,修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法贴壁法体外分离、纯化、增殖骨髓间充质细胞,取第5代细胞与脱细胞异体神经复合培养,构建移植物。SD大鼠18只,随机分为实验组,支架... 详细信息

目的观察脱细胞神经支架复合骨髓间充质细胞、构建组织工程化人工神经,修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法贴壁法体外分离、纯化、增殖骨髓间充质细胞,取第5代细胞与脱细胞异体神经复合培养,构建移植物。SD大鼠18只,随机分为实验组,支架组,对照组。术后12周,采用坐骨神经功能指数测定、腓肠肌湿质量恢复率检测及组织学等方法评价神经缺损的修复效果。结果坐骨神经功能指数及腓肠肌湿质量恢复率的检测显示实验组优于支架组(P<0.05);组织学检查,实验组修复神经S-100蛋白表达明显强于支架组,足底皮肤单位面积内触觉小体明显多于支架组,实验组缝合神经有效神经截面积、纤维数目、纤维密度、纤维直径、髓鞘厚度均优于支架组(P<0.05),其坐骨神经缺损修复效果接近对照组。结论脱细胞神经支架复合骨髓间充质细胞可有效修复坐骨神经缺损,经脱细胞神经支架溶液诱导的骨髓间充质细胞在体内具有施万细胞的功能。

关键词：脱细胞神经支架骨髓间充质细胞坐骨神经组织工程

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CMV、AdV、HBV抗原在IgAN肾组织的表达及相关性研究

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哈尔滨医科大学学报 2008年第2期42卷 150-152,156页

作者：朱骥伟张英博张磊哈尔滨医科大学法医学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学第一临床医学院骨外科黑龙江哈尔滨150001

目的研究HCMV、AdV、HBV抗原在IgAN肾组织中的表达及与IgAN发生发展的关系。方法采用免疫组织化学技术对96例IgAN肾活检组织、80例非IgAN肾小球肾炎肾活检组织和20例血清HBV抗原阳性的IgAN肾活检组织分别进行了HCMV、AdV、HBsAg抗原的... 详细信息

目的研究HCMV、AdV、HBV抗原在IgAN肾组织中的表达及与IgAN发生发展的关系。方法采用免疫组织化学技术对96例IgAN肾活检组织、80例非IgAN肾小球肾炎肾活检组织和20例血清HBV抗原阳性的IgAN肾活检组织分别进行了HCMV、AdV、HBsAg抗原的检测。结果①HCMV,AdV抗原在IgAN肾组织中的表达明显高于其它类型的原发性肾小球肾炎;②HCMV抗原随IgAN肾小球损伤加重而表达增强(线性趋势检验,P<0.001);③HBsAg在血清HBV阳性的IgAN肾组织中表达率为75%。结论HCMV,AdV的感染与IgAN的发生可能有相关性。HCMV感染在IgAN的发生发展中起重要作用。HBsAg在血清HBV阳性IgAN组织中的表达率明显增高,且与间质的损伤呈正相关,证实了HBV感染参与IgAN的进展。

关键词： IgA肾病人巨细胞病毒腺病毒乙型肝炎表面抗原

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部分去背根猫Sema3A及其受体NP-1在脊髓和背根节的表达

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四川大学学报（医学版） 2008年第1期39卷 48-51页

作者：丁艳章为黄倩彭谨赵秀军徐爱丽周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 河北医科大学组织胚胎学教研室滨州医学院生理学教研室

目的研究部分去背根对神经生长抑制因子Sema3A在脊髓及其受体NP-1在备用背根节内表达的影响。方法建立猫的单侧备用背根模型,分别在术后7d、14d取L3、L5、L6脊髓节段及手术侧L6背根节进行免疫组织化学ABC法染色,同时设置正常对照组。脊... 详细信息

目的研究部分去背根对神经生长抑制因子Sema3A在脊髓及其受体NP-1在备用背根节内表达的影响。方法建立猫的单侧备用背根模型,分别在术后7d、14d取L3、L5、L6脊髓节段及手术侧L6背根节进行免疫组织化学ABC法染色,同时设置正常对照组。脊髓背角内检测Sema3A免疫阳性产物的平均光密度值(OD值),背根节内计数NP-1阳性中小神经元数。结果在L3脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.25±0.14)、14d(0.27±0.09)较正常对照组(0.37±0.87)减弱(P<0.05);在L5脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.26±0.11)较正常组减弱(P<0.05),术后14d(0.33±0.09)时有所恢复;L6脊髓节段各组Sema3A的表达无明显变化。背根节内,术后7dNP-1阳性中小神经元数(30.85±10.26)较正常组(45.06±12.47)减少(P<0.05),14d时阳性中小神经元数(40.73±12.25)较7d时有所增加(P<0.05)。结论脊髓部分去背根后,Sema3A及其受体NP-1表达的时空变化可能与脊髓损伤后可塑性有关。

关键词： Sema3A NP-1 部分去背根猫

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猪戊型肝炎病毒重组蛋白ORF2-V1单克隆抗体的制备及抗原表位差异分析

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中国生物工程杂志 2008年第11期28卷 14-19页

作者：李丹丹杨春亮西北农林科技大学动物医学院预防兽医学系免疫学教研室杨凌712100 哈尔滨医科大学基础医学学院哈尔滨150081

用纯化的猪戊型肝炎病毒DQ株重组蛋白ORF2-V1免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次克隆和间接ELISA筛选,获得了αC11,αC12,γH1,γF8,BC4和CH86株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定,单... 详细信息

用纯化的猪戊型肝炎病毒DQ株重组蛋白ORF2-V1免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次克隆和间接ELISA筛选,获得了αC11,αC12,γH1,γF8,BC4和CH86株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定,单抗效价为:细胞培养上清1∶1.60×103～1∶3.20×103,腹水为1∶1.28×106～1∶2.56×106;经ELISA法测定,6株单克隆抗体均与重组蛋白ORF2-V1反应,而不与ORF2其它部分片段的蛋白反应;将试验中制备的MAbs分别用HEVswDQ株感染的A549细胞涂片进行IFA检测,同时分别用猪的阳性、阴性血清和SP2/0细胞上清做对照,制备的6株MAbs对感染细胞均呈现阳性反应,说明其可以与天然的病毒发生反应,并且与阳性多克隆血清比较,以单克隆抗体为一抗,IFA反应表现出良好的特异性。单抗的亚类鉴定结果表明,所有MAbs均为IgG1型,而且所有单克隆抗体的轻链均为κ链。单克隆抗体抗原识别位点分析结果表明,6株单抗分别针对4个不同抗原位点,McAb-γH1,BC4,CH8识别的位点各不相同,其中McAb-γH1,BC4识别的位点有部分重叠,McAb-αC11,αC12,γF8识别同一位点,位于γH1,BC4识别位点的重叠区内。

关键词：猪戊型肝炎病毒 ORF2-V1蛋白单克隆抗体识别位点

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降钙素基因相关肽衍生物克隆表达与活性鉴定

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中国老年学杂志 2008年第18期28卷 1790-1792页

作者：林平邹海峰于靖边淑玲刘紫君于晓光哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(CGRP)的衍生物(CGRP-VY),并初步鉴定其生物学活性。方法以pETC-GRP重组质粒为模板,用PCR方法扩增编码CGRP-VY的基因片段,将该基因片段定向克隆到pET-32 a(+)载体上,构建pETC-GRP-VY重组质粒,... 详细信息

目的利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(CGRP)的衍生物(CGRP-VY),并初步鉴定其生物学活性。方法以pETC-GRP重组质粒为模板,用PCR方法扩增编码CGRP-VY的基因片段,将该基因片段定向克隆到pET-32 a(+)载体上,构建pETC-GRP-VY重组质粒,转化E-.coli JM109菌株,经扩增提取重组质粒,酶切和测序鉴定;将鉴定正确的重组质粒pETC-GRP-VY转化*** BL21 trxB(DE3)pLysS菌株,经IPTG诱导后,收集并裂解菌体,SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达;通过粗提物扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验,初步鉴定CGRP-VY扩张血管的活性,并与重组CGRP进行活性比较。结果获得了含有CGRP成熟肽编码基因序列(111 bp)及缬氨酸和亮氨酸的密码子序列(6 bp)的重组质粒pETC-GRP-VY,符合预期结果;经诱导后在***中表达出21.2kD的融合蛋白,初步证明其粗提物具有扩张血管的功能。结论成功获得具有生物学活性的融合蛋白CGRP衍生物(CGRP-VY),为进一步进行其降血压功能研究奠定了实验基础。

关键词： CGRP CGRP-VY 克隆表达

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猪骨髓间充质干细胞的分离培养及核移植后重构胚胎发育能力的研究

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分子细胞生物学报 2008年第4期41卷 275-282页

作者：王振坤田江天李秋明武美玲孔庆然郑重于学武雷蕾刘忠华东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 哈尔滨医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室哈尔滨150086 东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同。本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化,对猪骨髓间充质干细胞的增殖... 详细信息

不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同。本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化,对猪骨髓间充质干细胞的增殖及生长特性进行了观察分析,并以其作为供体细胞进行核移植,对此类型细胞进行重编程的潜力进行了评估。结果表明用密度梯度离心法分离猪骨髓间充质干细胞优于全骨髓贴壁法;猪骨髓间充质干细胞数目在培养第6天达到峰值,传代培养10h时,贴壁率达到78.50%;传代培养后第4天分裂指数最高,为24.00‰;以猪骨髓间充质干细胞(pMSCs)和猪胎儿成纤维细胞(PF)分别作为供核细胞构建核移植胚胎,其体外囊胚发育率分别为14.63%与15.07%(P>0.05),孤雌对照组囊胚发育率为30.91%(P<0.05);而三组囊胚细胞数分别为30.67±17.7、24.1±6.5和25.8±11.4(P>0.05)。实验表明,体外培养的猪骨髓间充质干细胞生长增殖旺盛,生物学性状稳定,并适合作为核移植供体细胞。

关键词：猪骨髓间充质干细胞生长特性核移植

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PBL教学法在七年制病理学教学中的实践

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2008年第1期10卷 9-11页

作者：靳占峰程志金晓明哈尔滨医科大学病理学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院

在七年制学生病理学教学中采用PBL教学法，以临床或科研问题为基础，以临床病例为主线，根据整体病理学教学的需要，组织编排教学内容并实施教学。通过PBL教学法，极大地提高了学生的学习兴趣、学习自觉性和创新思维能力，取得了较好的... 详细信息

在七年制学生病理学教学中采用PBL教学法，以临床或科研问题为基础，以临床病例为主线，根据整体病理学教学的需要，组织编排教学内容并实施教学。通过PBL教学法，极大地提高了学生的学习兴趣、学习自觉性和创新思维能力，取得了较好的教学效果。

关键词：病理学 PBL教学七年制教学实践

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抑制ATM表达致鼻咽癌细胞CNE1辐射增敏的细胞周期阻滞研究

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癌症 2008年第5期27卷 466-470页

作者：王宏梅陈龙华郑小康伍新尧夏云飞南方医科大学南方医院放疗科广东广州510515 中山大学基础医学院法医物证教研室广东广州510080 华南肿瘤学国家重点实验室

背景与目的:细胞周期调控是决定细胞辐射敏感性的决定性因素之一。共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutant,ATM)功能与细胞DNA损伤修复、细胞周期检查点调控密切相关。我们前期研究通过反义RNA抑制ATM基因表达可... 详细信息

背景与目的:细胞周期调控是决定细胞辐射敏感性的决定性因素之一。共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutant,ATM)功能与细胞DNA损伤修复、细胞周期检查点调控密切相关。我们前期研究通过反义RNA抑制ATM基因表达可增加鼻咽癌细胞系CNE1辐射敏感性,本研究拟探讨其辐射增敏的细胞周期阻滞调控机制。方法:ATM反义组细胞CNE1/pDOR-atm及对照组细胞CNE1/pDOR经2Gy、5GyX线照射后不同时间点(1h、4h、8h、24h、48h)收获,应用流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测各细胞周期百分比及凋亡率。结果:两组细胞X线照射后均未出现明显G1期阻滞和细胞凋亡,但分别在照射后1h、4h、8h出现明显S期阻滞,24h、48h出现明显G2期阻滞,其中反义组S期细胞百分率总均数水平低于对照组(P<0.05),而G2/M期细胞百分率总均数水平高于对照组(P<0.05)。结论:反义RNA抑制ATM表达致CNE1辐射增敏的细胞周期调控机制可能与减少S期细胞比例,增加G2/M期细胞比例有关,与G1期阻滞和细胞凋亡的调控无关。

关键词： ATM基因 CNEl细胞细胞周期调控鼻咽肿瘤

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