检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2020年第2期54卷 121-124页

作者：郑天虎刘兴汉赵玲王立新哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的采用镍离子亲和层析从含有PTYB21-His-p30质粒的菌株中提取抗肿瘤多肽30肽,即Peptide30,检测Peptide30对肿瘤细胞和实体瘤的抗肿瘤活性。方法培养PTYB21菌株,IPTG诱导表达,经超声离心等方法后,取其上清(含30肽融合蛋白),DTT裂解目... 详细信息

目的采用镍离子亲和层析从含有PTYB21-His-p30质粒的菌株中提取抗肿瘤多肽30肽,即Peptide30,检测Peptide30对肿瘤细胞和实体瘤的抗肿瘤活性。方法培养PTYB21菌株,IPTG诱导表达,经超声离心等方法后,取其上清(含30肽融合蛋白),DTT裂解目的蛋白后,经镍柱层析分离Peptide30肽后G25凝胶过滤层析除盐,然后检测Peptide30肽浓度和纯度,经细胞克隆形成实验和动物实验检测Peptide30的抗肿瘤活性。结果经镍柱亲和层析纯化的Peptide30浓度为:451μg/mL,纯度为:95.5%;细胞克隆形成实验结果表明Peptide30肽能够显著降低U251胶质瘤细胞和HGC27胃癌细胞的存活率,动物实验结果显示:Peptide30的抑瘤率达到63.49%,高于41肽抑瘤率。结论加入His标签的PTYB21-30肽质粒转入大肠埃希菌Rosetta(DE3) pLysSS后,经诱导表达及镍柱亲和层析纯化后能够得到高纯度的抗肿瘤多肽Peptide30,该Peptide30具有较好的体外、体内抗肿瘤活性。

关键词：抗肿瘤多肽蛋白质纯化镍离子亲和层析抗肿瘤活性

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北方汉族人群醛固酮合成酶基因多态性与高血压的关系

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 329-335页

作者：牛文全王建炳李素洁周文郁赵景波邱长春中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室哈尔滨150086 黑龙江省电力医院体检科哈尔滨150081

目的探讨北方汉族人群醛固酮合成酶基因(CYP11B2)启动子区C-344T和第三外显子K173R多态性位点与原发性高血压的关系。方法在哈尔滨报社人群中分别选取182例原发性高血压患者和189例正常对照者进行病例-对照研究,采用多聚酶链式反应/限... 详细信息

目的探讨北方汉族人群醛固酮合成酶基因(CYP11B2)启动子区C-344T和第三外显子K173R多态性位点与原发性高血压的关系。方法在哈尔滨报社人群中分别选取182例原发性高血压患者和189例正常对照者进行病例-对照研究,采用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序技术检测C-344T和K173R的基因型。结果各位点基因型分布在男性和女性组中均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。C-344T位点的基因型和等位基因频率以及K173R的等位基因频率在整个群体和按性别分组后亚群体的分布在高血压组和对照组间差异均没有显著性(P≥0.05)。而K173R位点的基因型频率在整个群体中具有边缘统计学意义(P=0.0500),且在女性组中更为明显(P=0.0038),并以显性方式遗传,这种遗传方式在对混杂因素进行校正后更加明显。同时K173R与女性的收缩压显著相关。结论在北方汉族人群中,CYP11B2 K173R多态性位点与女性高血压的易感相关联。

关键词：原发性高血压醛固酮合成酶基因基因多态性

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BMI1对脑部神经发生的影响及其在脑部神经系统疾病中的作用

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生命的化学 2020年第8期40卷 1314-1321页

作者：孙长慧惠洋宁心高旭哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨市宁心口腔诊所哈尔滨150080

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(blymphoma momlv insertion region 1,BMI1)是位于人类染色体10p12.2的一段基因序列,它是多梳组蛋白复合物1(polycomb repressive complex 1,PRC1)的重要组成成分之一。含有BMI1蛋白的复合物PRC... 详细信息

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(blymphoma momlv insertion region 1,BMI1)是位于人类染色体10p12.2的一段基因序列,它是多梳组蛋白复合物1(polycomb repressive complex 1,PRC1)的重要组成成分之一。含有BMI1蛋白的复合物PRC1可以通过染色质重塑维持许多基因的转录抑制状态,对脑部各区域的神经发生产生影响。此外,BMI1蛋白作为神经系统中的重要转录因子之一,其基因表达水平的改变,对脑部神经系统疾病的进程有显著的影响。本综述旨在阐述BMI1基因对脑部侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)、嗅球区、小脑区、皮层区以及视网膜区神经干细胞的自我更新、增殖和分化能力的影响,并且系统性地剖析了其对阿尔茨海默症和胶质母细胞瘤的影响机制。

关键词： BMI1 脑部神经发生阿尔茨海默症胶质母细胞瘤

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衣霉素抑制细胞周期蛋白D1表达而强化TRAIL诱发凋亡的实验研究

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中国医科大学学报 2010年第7期39卷 521-524页

作者：解继胜张海燕都镇先邓娓娓王华芹右江民族医学院组织胚胎学教研室广西百色533000 中国医科大学附属第一医院老年病干诊科中国医科大学附属第一医院内分泌科沈阳110001 中国医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室沈阳110001

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合衣霉素促甲状腺未分化癌细胞株凋亡的作用机制。方法通过单用TRAIL(TRAIL组)、衣霉素(衣霉素组)、联合用药组(TRAIL+衣霉素组)对多种甲状腺未分化癌细胞株进行作用,并以正常甲状腺上皮... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合衣霉素促甲状腺未分化癌细胞株凋亡的作用机制。方法通过单用TRAIL(TRAIL组)、衣霉素(衣霉素组)、联合用药组(TRAIL+衣霉素组)对多种甲状腺未分化癌细胞株进行作用,并以正常甲状腺上皮细胞株HTori-3作对照,利用流式细胞仪分析各组细胞周期变化及各组细胞凋亡状态;采用蛋白印迹杂交法检测衣霉素处理前后各组细胞细胞周期蛋白D1蛋白表达水平;利用微小RNA干扰技术及质粒转染技术探讨细胞周期蛋白D1对依霉素增敏TRAIL效应的影响。结果 TRAIL与衣霉素单用对甲状腺癌细胞均无明显杀伤作用,最高细胞凋亡率分别为10.68%、10.14%;联合用药组细胞凋亡率最大达54.77%,与TRAIL组和衣霉素组相比,具有统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,衣霉素组和联合用药组细胞周期蛋白D1水平明显降低。微小RNA干扰可以特异性下调细胞周期蛋白D1进而增加ARO细胞对TRAIL的敏感性;而细胞周期蛋白D1过表达ARO细胞中细胞凋亡率降低22.7%。结论在体外单用TRAIL对甲状腺癌细胞增殖无明显抑制作用,衣霉素明显增加肿瘤细胞对TRAIL敏感性,其增敏机制至少部分与下调细胞周期蛋白D1水平有关。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体衣霉素甲状腺肿瘤细胞周期蛋白D1

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PEP06肽的成胶性及其解决方法的初步研究

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医学分子生物学杂志 2020年第2期17卷 135-141页

作者：陈奕冰郭帅利董兴丽刘兴汉王志国张丽秋哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院实验教学中心哈尔滨市150081

目的开发一种避免PEP06肽形成凝胶从而消除药物凝胶有害作用的优化方法。方法选用不同溶剂研究溶剂对PEP06肽溶解性的影响;将PEP06肽放入装有氨水和浓盐酸容器内,研究pH对pEP06肽成胶性的影响;改变溶液的浓度,研究浓度对PETO6肽成胶性... 详细信息

目的开发一种避免PEP06肽形成凝胶从而消除药物凝胶有害作用的优化方法。方法选用不同溶剂研究溶剂对PEP06肽溶解性的影响;将PEP06肽放入装有氨水和浓盐酸容器内,研究pH对pEP06肽成胶性的影响;改变溶液的浓度,研究浓度对PETO6肽成胶性的影响;通过阳离子交换层析去除PEP06肽中的促成胶物质,解决PEP06的成胶问题。结果溶剂的种类影响PEP06肽的溶解性,在偏碱性的PBS缓冲液(pH=6.45)中药物的溶解性较差,在酸性的2%醋酸(pH=3.01)中溶解较好,溶剂对PEP06肽溶解性的影响可能与pH有关。溶液浓度与成胶性正相关,随着溶液浓度的增加,溶液逐渐地变得黏稠,直至形成凝胶。阳离子交换层析后的PEP06肽不再形成凝胶,推测影响PEP06肽成胶性的因素除了PEP06肽自身结构和上述因素外,溶液中可能还有一种能促进PEP06肽形成凝胶的物质,该物质能通过阳离子交换层析去除。结论确定了溶剂、浓度和pH对PEP06肽成胶性的影响;建立了通过阳离子交换层析解决PEP06肽的黏稠和成胶问题的方法,使得高浓度PEP06肽溶液能够通过微孔滤膜过滤,为大规模生产提供了技术支撑。

关键词： PEP06肽蛋白的成胶性阳离子交换层析

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医学院校《生物化学》与《医学分子生物学》课程体系建设的研究与实践

医学院校《生物化学》与《医学分子生物学》课程体系建设的研究与...

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全国高等医学教育学会基础医学教育分会、中华医学会医学教育分会基础医学教育研究会第六次学术大会

作者：马永平宋方洲易发平重庆医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室重庆400016

本问介绍了课题组在"保持原有课时不变、保持原有课程不变"的前提下,对原有的《生物化学》和《医学分子生物学》2门课程进行教学内容和结构进行改革的经验,通过改革,使该2门基础课课程的教学内容"既各具特色,又互相衔接&... 详细信息

本问介绍了课题组在"保持原有课时不变、保持原有课程不变"的前提下,对原有的《生物化学》和《医学分子生物学》2门课程进行教学内容和结构进行改革的经验,通过改革,使该2门基础课课程的教学内容"既各具特色,又互相衔接",达到了不增加课时、不增加难度,却能够增加教学内容和广度的目的.

关键词：生物化学医学分子生物学课程改革高等医学教育

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分子生物学PBL教学法实施及体会

分子生物学PBL教学法实施及体会

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首届全国生物化学与分子生物学教学研讨会

作者：王磊李晖哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室

为探索传统教学与PBL教学相结合的教学模式在生物化学与分子生物学教学中的可行性，本文介绍了本学期分子生物学课程进行了PBL教学尝试，收到了较好的效果的经验体会。

关键词：分子生物学问题教学法教学改革终身教育

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降钙素基因相关肽衍生物克隆表达与活性鉴定

降钙素基因相关肽衍生物克隆表达与活性鉴定

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全国氨基酸、活性肽研究开发与综合应用新技术、新设备交流研讨会

目的：利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(cgrp)的衍生物(cgrp vy),并初步鉴定其生物学活性。方法：以pet cgrp重组质粒为模板,用pcr方法扩增编码cgrp vy的基因片段,将该基因片段定向克隆到pet 32a(+)载体上,构建pet cgrp vy重组质... 详细信息

目的：利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(cgrp)的衍生物(cgrp vy),并初步鉴定其生物学活性。方法：以pet cgrp重组质粒为模板,用pcr方法扩增编码cgrp vy的基因片段,将该基因片段定向克隆到pet 32a(+)载体上,构建pet cgrp vy重组质粒,转化*** jm 109菌株,经扩增提取重组质粒,酶切和测序鉴定;将鉴定正确的重组质粒pet cgrp vy转化*** b12 1trxb(de3)plyss菌株,经iptg诱导后,收集并裂解菌体,sds page电泳检测蛋白的表达;通过粗提物扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验,初步鉴定cgrp vy扩张血管的活性,并与重组cgrp进行活性比较.结果：获得了含有cgrp成熟肽编码基因序列(111bp)及缬氨酸和亮氨酸的密码子序列(6 bp)的重组质粒pet cgrp vy,符合预期结果;经诱导后在***中表达出21.2kd的融合蛋白,初步证明其粗提物具有扩张血管的功能.结论：成功获得具有生物学活性的融合蛋白cgrp衍生物(cgrp vy),为进一步进行其降血压功能研究莫定了实验基础.

关键词：降钙素基因相关肽衍生物克隆表达生物活性降血压功能

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重组凋亡素组合肽(B9)的纯化及抗U251胶质瘤活性的研究

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医学分子生物学杂志 2020年第3期17卷 207-213页

作者：郭帅利陈奕冰董兴丽刘兴汉张丽秋王志国哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院实验教学中心哈尔滨市150081

目的构建凋亡素组合肽(B 9)基因工程菌,建立重组凋亡素组合肽的纯化方法,在细胞水平上研究重组凋亡素组合肽抗U 251胶质瘤细胞活性。方法以PE T 28a质粒为表达载体构建凋亡素组合肽基因工程菌;经过等电点沉淀、PA A沉淀和阳离子交换层... 详细信息

目的构建凋亡素组合肽(B 9)基因工程菌,建立重组凋亡素组合肽的纯化方法,在细胞水平上研究重组凋亡素组合肽抗U 251胶质瘤细胞活性。方法以PE T 28a质粒为表达载体构建凋亡素组合肽基因工程菌;经过等电点沉淀、PA A沉淀和阳离子交换层析纯化重组凋亡素组合肽;获得的充足凋亡素组合肽处理U 251细胞,检测细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭。结果建立了以等电点沉淀、PA A沉淀和阳离子交换层析为核心技术的纯化重组凋亡素组合肽的方法,纯化的凋亡素组合肽纯度达到了电泳纯。重组的凋亡素组合肽能诱导U 251细胞凋亡,抑制U 251细胞的增殖、迁移和侵袭。结论建立了纯化重组凋亡素组合肽的实验方法,重组凋亡素组合肽在细胞水平上诱导U 251细胞凋亡,抑制U 251细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：凋亡素组合肽聚丙烯酸离子交换层析 251胶质瘤细胞

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人绒毛膜癌细胞JEG-3中SEPSECS、TRNAU1AP蛋白表达稳定性的分析

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现代生物医学进展 2013年第18期13卷 3407-3409页

作者：孙美娜赵汉东饶翀李凤兰李晖哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学临床医学院黑龙江哈尔滨150081

目的:通过测定人绒毛膜癌细胞JEG-3中SEPSECS、TRNAU1AP两蛋白的半衰期,分析JEG-3细胞内SEPSECS、TRNAU1-AP两蛋白表达的稳定性。方法:采用蛋白合成抑制剂放线菌酮作用于人绒毛膜癌细胞JEG-3,用MTT法确定放线菌酮对细胞的最适作用浓度,... 详细信息

目的:通过测定人绒毛膜癌细胞JEG-3中SEPSECS、TRNAU1AP两蛋白的半衰期,分析JEG-3细胞内SEPSECS、TRNAU1-AP两蛋白表达的稳定性。方法:采用蛋白合成抑制剂放线菌酮作用于人绒毛膜癌细胞JEG-3,用MTT法确定放线菌酮对细胞的最适作用浓度,之后用最适浓度的放线菌酮处理JEG-3,利用Western blot检测10个时间点SEPSECS、TRNAU1AP蛋白表达量,确定SEPSECS、TRNAU1AP蛋白半衰期。结果:CHX作用于细胞的最适浓度为0.1μg/mL,与对照组相比,SEPSECS蛋白表达量在4 h、8 h有显著性差异(P<0.01);而TRNAU1AP蛋白表达量在2 h、4 h有显著性差异(P<0.01)。结论:在JEG-3细胞中SEPSECS蛋白的半衰期可能为4 h～8 h,而TRNAU1AP蛋白的半衰期可能为2 h～4 h,前者半衰期明显大于后者,由此,可推测SEPSECS蛋白在JEG-3细胞中表达的稳定性要高于TRNAU1AP蛋白,同时也为进一步分析二者在其他肿瘤细胞的表达情况提供依据。

关键词： SEPSECS TRANU1AP CHX 蛋白半衰期

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