检索结果-内蒙古大学图书馆

中国老年学杂志 2008年第18期28卷 1790-1792页

作者：林平邹海峰于靖边淑玲刘紫君于晓光哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(CGRP)的衍生物(CGRP-VY),并初步鉴定其生物学活性。方法以pETC-GRP重组质粒为模板,用PCR方法扩增编码CGRP-VY的基因片段,将该基因片段定向克隆到pET-32 a(+)载体上,构建pETC-GRP-VY重组质粒,... 详细信息

目的利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(CGRP)的衍生物(CGRP-VY),并初步鉴定其生物学活性。方法以pETC-GRP重组质粒为模板,用PCR方法扩增编码CGRP-VY的基因片段,将该基因片段定向克隆到pET-32 a(+)载体上,构建pETC-GRP-VY重组质粒,转化E-.coli JM109菌株,经扩增提取重组质粒,酶切和测序鉴定;将鉴定正确的重组质粒pETC-GRP-VY转化*** BL21 trxB(DE3)pLysS菌株,经IPTG诱导后,收集并裂解菌体,SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达;通过粗提物扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验,初步鉴定CGRP-VY扩张血管的活性,并与重组CGRP进行活性比较。结果获得了含有CGRP成熟肽编码基因序列(111 bp)及缬氨酸和亮氨酸的密码子序列(6 bp)的重组质粒pETC-GRP-VY,符合预期结果;经诱导后在***中表达出21.2kD的融合蛋白,初步证明其粗提物具有扩张血管的功能。结论成功获得具有生物学活性的融合蛋白CGRP衍生物(CGRP-VY),为进一步进行其降血压功能研究奠定了实验基础。

关键词： CGRP CGRP-VY 克隆表达

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研究生分子生物学实验的教学设计与实践

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广西医科大学学报 2008年第S1期25卷 197-198页

作者：贺菽嘉吴耀生周素芳曾麒燕蓝秀万林文珍广西医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室南宁530021

21世纪是生物学迅速发展的时代,分子生物学已成为生命科学的领头羊,其理论与基本技术迅速渗透到基础医学和临床医学的许多领域,并且得到越来越广泛的发展应用,呈现出巨大的生命力。分子生物学是一门实践性很强的学科,理论知识抽象,内容... 详细信息

21世纪是生物学迅速发展的时代,分子生物学已成为生命科学的领头羊,其理论与基本技术迅速渗透到基础医学和临床医学的许多领域,并且得到越来越广泛的发展应用,呈现出巨大的生命力。分子生物学是一门实践性很强的学科,理论知识抽象,内容多,有一定的深度,学生较难理解,因此实验课的教学在整个分子生物学课程中显得尤为重要[1]。众所周知,研究生是我国科研力量的后备人才,培养其良好的综合素质、创新思维和实际科学研究的能力是研究生教学工作的重点。随着我校研究生招收人数的不断扩大,选修分子生物学实验课的学生呈逐年增加的趋势。回顾过去的研究生实验课教学的情况,存在着一些不足,主要表现在:①实验的仪器设备缺乏,学生不能人人动手。②实验内容陈旧老化,先进的分子生物学技术几乎不能引进到实验课中。③实验流程安排不紧凑,不合理。④实验课中以传统的灌输式教学为主,教师示教的内容太多。上述问题严重束缚了研究生的动手能力和综合分析问题的能力。为此,结合几年来的教学实践,我们拟从下面几个方面对研究生分子生物学实验进行改革尝试。1教学内容的改革和实验课程的实施结合我室的现有条件和研究生课题研究的需要,开设30个学时以重组DNA技术为主线,紧紧围绕分、切...

关键词：分子生物学实验研究生分子生物学技术实验课重组质粒

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P38MAPKc、aspase-8在Fas-放线菌素D诱导Bel-7402细胞凋亡中的作用

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哈尔滨医科大学学报 2008年第3期42卷 216-220页

作者：王玉孙黎光王璐中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨医科大学国际遗传学杂志编辑部黑龙江哈尔滨150081

目的确定P38MAPKc、aspase-8的关系,以探讨Fas-actinomycin D(Fas-AD)诱导Bel-7402细胞凋亡的信号转导机制。方法通过流式细胞仪检测Fas-AD、SB203580(P38MAPK特异性抑制剂)及Ac-IEFD-cho(caspase-8特异性抑制剂)对Bel-7402细胞凋亡的影响;通过Western-blot法检测Fas-AD、SB203580及Ac-IEFD-cho对培养的Bel-7402细胞的P38MAPK、caspase-8的激活及其表达的影响。结果Fas-AD能明显诱导Bel-7402细胞凋亡,SB203580和Ac-IEFD-cho能明显抑制Fas-AD诱导的细胞凋亡。Fas-AD能诱导P38MAPK、caspase-8激活并表达,而SB203580和Ac-IEFD-cho能分别抑制它们的激活及表达。结论在Bel-7402细胞凋亡中,P38MAPK与caspase-8参与Fas-AD凋亡途径,并且相互调节。

关键词： Fas caspase-8 P38MAPK 凋亡

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人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导途径中pp60c-Src和pERK1/2表达的差异

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首都医科大学学报 2008年第5期29卷 589-592页

作者：孔璐张玉祥孙林马慧苹贺旭谢千池李宝红首都医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室

目的研究人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导系统,探寻不同类型胰腺癌信号转导通路的差异,为研究靶点药物提供基础。方法将1640培养的HPAC和BxPC-3经细胞计数相同后各分为4组,分别为对照组、TGF-α组、TGF-α+PP2组和TGF-α... 详细信息

目的研究人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导系统,探寻不同类型胰腺癌信号转导通路的差异,为研究靶点药物提供基础。方法将1640培养的HPAC和BxPC-3经细胞计数相同后各分为4组,分别为对照组、TGF-α组、TGF-α+PP2组和TGF-α+PD组。细胞贴壁并达70%融合后,换无血清培养48h。无血清处理作对照,用无血清培养基溶解终浓度为7nmol/L的TGF-α刺激TGF-α组2h,TGF-α+PP2组先加入终浓度为10μmol/L的PP2刺激细胞20min后加入7nmol/L的TGF-α刺激2h,TGF-α+PD组先加入30μmol/L的PD98059刺激细胞20min后加入终浓度为7nmol/L的TGF-α刺激2h。用蛋白印迹方法分析HPAC和BxPC-3的4组细胞pp60c-Src和pERK1/2的表达。结果HPAC细胞pp60c-Src的表达:对照组显著高于TGF-α组、TGF-α+PD组(P<0.05)和TGF-α+PP2组(P<0.01);HPAC细胞pERK1/2的表达:TGF-α组显著高于对照组和TGF-α+PD组(P<0.01),与TGF-α+PP2组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。BxPC-3细胞pp60c-Src的表达:TGF-α组显著高于对照组(P<0.05)和TGF-α+PP2组(P<0.01),与TGF-α+PD组相比较差异无统计学意义(P>0.05);BxPC-3细胞pERK1/2的表达:TGF-α组显著高于对照组、TGF-α+PD组和TGF-α+PP2组(P<0.01)。结论HPAC和BxPC-3细胞中Src/MAPK信号途径存在差异。推测在BxPC-3细胞株中c-Src是活化Ras/Raf/MAPK途径的关键信号分子,应进一步研究在HPAC细胞株中c-Src的作用。

关键词：人胰腺癌细胞系 HPAC BxPC-3 Src MAPK

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CT-OGP的融合表达及其对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用

CT-OGP的融合表达及其对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用

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东北三省生物化学与分子生物学学会2008年学术交流会

作者：李冀宏刘远莉张宇雯马洪星李丹刘兴汉哈尔滨医科大学基础医学学院生化与分子生物学教研室

目的为了整合降钙素(CT)的抑制破骨作用和成骨生长肽(OGP)的促成骨作用以提高疗效, 构建原核表达、纯化 CT-OGP 融合多肽体系,测定 CT-OGP 活性并研究其对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗

关键词：去卵巢骨质疏松大鼠 CT-OGP 治疗作用

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pcDNA3．1-OGP质粒转染BMSC及其转录对1型胶原转录的影响

pcDNA3．1-OGP质粒转染BMSC及其转录对1型胶原转录的影响

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东北三省生物化学与分子生物学学会2008年学术交流会

作者：李冀宏刘远莉安刚邓秋奎刘兴汉哈尔滨医科大学基础医学学院生化与分子生物学教研室

目的以 OG P基因转染兔 BMSC,观察其促成骨作用。方法构建 OGP 真核表达质粒,转染兔 BMSC,以 RT-PCR 方法检测转染序列的转录,并在血清培养和矿化液培养条件下用 RT-PCR 方法检

关键词：型胶原 OGP pcDNA3

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腺病毒载体介导的HBx表达对HepG2细胞中PPARγ定位的影响

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第三军医大学学报 2008年第18期30卷 1693-1696页

作者：黄佳祎毕杨左国伟冯涛重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部实验室重庆市市级重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室重庆400016

目的检测外源基因HBx转入HepG2细胞后对PPARγ表达定量及定位的影响。方法以HBx重组腺病毒感染HepG2细胞,分别用RT-PCR和总蛋白Western blot检测PPARγ表达量的改变,免疫细胞化学检测其定位改变,Western blot分别检测细胞质和细胞核中P... 详细信息

目的检测外源基因HBx转入HepG2细胞后对PPARγ表达定量及定位的影响。方法以HBx重组腺病毒感染HepG2细胞,分别用RT-PCR和总蛋白Western blot检测PPARγ表达量的改变,免疫细胞化学检测其定位改变,Western blot分别检测细胞质和细胞核中PPARγ蛋白量的表达改变,MTT法检测HBx对曲格列酮抑制HepG2增殖效率的影响。结果外源基因HBx转入HepG2细胞后,RT-PCR、总蛋白Western blot显示PPARγ表达差异无统计学意义(P>0.05),免疫细胞化学及细胞质和细胞核中PPARγ蛋白检测提示PPARγ在细胞核内表达降低而在细胞质中出现积聚,曲格列酮对HepG2细胞增殖的抑制效率降低(P<0.05)。结论外源基因HBx对HepG2细胞中PPARγ的表达量无明显影响,但影响其向核内转移。HBx降低曲格列酮对HepG2细胞增殖的抑制效率。

关键词： HBx HepG2细胞 PPARγ 曲格列酮

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维药西帕依溃结安对大鼠溃疡性结肠炎的实验研究

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新疆医科大学学报 2008年第12期31卷 1651-1654页

作者：贺捷阿孜古力.克热木勾小玉苟萍库热西.玉努斯新疆医科大学基础医学院机能中心新疆医科大学基础医学院生物化学及分子生物学教研室新疆大学生命科学学院生化教研室新疆乌鲁木齐830000

目的:建立2,4-二硝基氯苯(DNCB)+乙酸大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,观察维药西帕依溃结安对溃疡性结肠炎的治疗作用。方法:采用"DNCB复合乙酸法"复制溃疡性结肠炎大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分为维药西帕依溃结安大、中、小... 详细信息

目的:建立2,4-二硝基氯苯(DNCB)+乙酸大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,观察维药西帕依溃结安对溃疡性结肠炎的治疗作用。方法:采用"DNCB复合乙酸法"复制溃疡性结肠炎大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分为维药西帕依溃结安大、中、小剂量组、生理盐水(NS)阴性对照组,给药治疗20d,同时设正常对照组,以各组实验大鼠处理前后整体状态、病理形态学为检测指标,对其疗效进行观察。结果:一般状态:正常组大鼠明显优于模型组大鼠,治疗组用药20d后,模型组大鼠的状态能明显改善。光镜观察:正常组结肠各层结构清晰,无炎性改变。模型组结肠粘膜炎症显著,重者有溃疡形成。治疗组组织粘膜损伤程度均有一定改善。在组织标本大体病理变化比较及组织病理学比较方面:治疗组与模型组有统计学差异(P<0.05);治疗组与生理盐水(NS)阴性对照组有统计学差异(P<0.05);治疗组大、中剂量间的疗效差异无统计学意义,而大、中剂量治疗组与小剂量治疗组间疗效差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维药西帕依溃结安对大鼠溃疡性结肠炎治疗有效。

关键词：溃疡性结肠炎西帕依溃结安实验研究

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氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

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齐齐哈尔医学院学报 2008年第22期29卷 2689-2691页

作者：钟德泰张琪邹宇牛英才徐文娣王军黑龙江省神经精神病防治院齐齐哈尔医学院中心实验室哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的观察氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用慢性不可预见性的温和刺激结合孤养建立抑郁症动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠... 详细信息

目的观察氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用慢性不可预见性的温和刺激结合孤养建立抑郁症动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠海马组织Bcl-2 2-ΔΔCt显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明模型组大鼠海马组织Bcl-2 mRNA表达下调。与模型组比较,氟西汀高剂量组和氟西汀低剂量组Bax 2-ΔΔCt显著降低,表明Bax mRNA表达下调;而氟西汀高剂量组和氟西汀低剂量组Bcl-2 2-ΔΔCt显著升高,表明Bcl-2 mRNA表达上调。结论慢性不可预见性温和刺激结合孤养可诱导大鼠脑组织Bcl-2表达下调,而氟西汀通过抑制海马组织Bax mRNA的表达和促进Bcl-2 mRNA表达,进而减少神经细胞凋亡的作用。

关键词：细胞凋亡抑郁症氟西汀实时荧光定量PCR

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加强实验室管理,提高实验课教学质量

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2007年第2期9卷 182-183页

作者：王淑娟于晓光哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

生物化学与分子生物学实验教学是培养学生实际操作能力和分析问题、解决问题能力的重要手段，是一门实践性很强的学科。为了提高学生实际操作能力，只有加大实验教学设备的投入，才能培养出一流的人才；同时必须加强实验室管理，才能提... 详细信息

生物化学与分子生物学实验教学是培养学生实际操作能力和分析问题、解决问题能力的重要手段，是一门实践性很强的学科。为了提高学生实际操作能力，只有加大实验教学设备的投入，才能培养出一流的人才；同时必须加强实验室管理，才能提高实验课教学质量。

关键词：实验室管理实验教学生物化学分子生物学

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