检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第1期31卷 18-22页

作者：都建安然程里陈滢沈继龙安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学药学院合肥230032 安徽医科大学省部级基因研究重点实验室病原生物学教研室合肥230032

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自... 详细信息

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自激活作用,利用酵母双杂交系统从人胚胎脑cDNA文库中筛选与ROP18相互作用的宿主蛋白。结果构建了诱饵载体pGBKT7-ROP18,ROP18具有自激活功能。用ROP18^(25-25lan)为诱饵,筛选获得一系列与ROP18相互作用的宿主蛋白:DNA损伤特异性结合蛋白1(DDB1)、torsin A相互作用蛋白1(TOR1AIP1)、整联蛋白β1(integrinβ1)、溶质运载蛋白3(SLC3A2)、酪氨酸硫化转移酶2(TPST2)、Derl样域家族成员2(DERL2)和OCIA结构域蛋白1(OCIAD1)。结论通过酵母双杂交技术筛选出与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的多种宿主蛋白。

关键词：弓形虫 ROP18^25-251aa 酵母双杂交相互作用宿主蛋白

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mTORC2调节细胞骨架的信号通路

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中国细胞生物学学报 2012年第10期34卷 1030-1035页

作者：陈银涛于秉治武迪迪中国医科大学临床医学院沈阳110001 中国医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室沈阳110001

近几年来,关于哺乳动物雷帕霉素靶(mammalian target of rapamycin,mTOR)在各种哺乳动物细胞中调节肌动蛋白微丝极化及肌球蛋白微丝网形成的研究一直在不断地取得新的进展。尽管到目前为止,包括mTORC2上游和下游在内的相关的调控路径还... 详细信息

近几年来,关于哺乳动物雷帕霉素靶(mammalian target of rapamycin,mTOR)在各种哺乳动物细胞中调节肌动蛋白微丝极化及肌球蛋白微丝网形成的研究一直在不断地取得新的进展。尽管到目前为止,包括mTORC2上游和下游在内的相关的调控路径还未明确,但是因为mTORC的生物学多样性,使其成为了当今生物学研究的焦点之一。基于长久以来特别是近五年对mTORC2的研究,在涉及细胞运动迁移、增殖分化、蛋白质合成、凋亡及自噬等生物学功能的研究中,一些重要的下游相关调控分子和蛋白相继被发现,比如P-Rex1/2、Rho家族GTPases、PKC、cAMP、p27Kip1等。该综述着重总结了mTORC2实现这些生物学功能所可能通过的四条路径。当然,仍然需要大量的实验数据和研究证据进一步地证实和完善这些已经发现的可能存在的路径。

关键词： mTORC2 细胞骨架微丝肌动蛋白信号通路

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pCAGGs-miR-483重组质粒构建及miR-483转基因小鼠模型的建立

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中国生物化学与分子生物学报 2010年第5期26卷 478-483页

作者：马宁王曦迪乔瑜李福源杨宝峰吕延杰单宏丽郑晓飞高旭哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨150086 北京放射与辐射医学研究所北京100850

miR-483是近年发现的一种编码于胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因第2内含子的microRNA.研究表明,高脂饮食诱导的肥胖动物的心脏、肝脏及肝、肾肿瘤组织中miR-483表达异常,但其生物学功能尚待研究.建立稳定表达m... 详细信息

miR-483是近年发现的一种编码于胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因第2内含子的microRNA.研究表明,高脂饮食诱导的肥胖动物的心脏、肝脏及肝、肾肿瘤组织中miR-483表达异常,但其生物学功能尚待研究.建立稳定表达miR-483并能够传代的miR-483转基因小鼠是研究其功能的重要环节.利用特异miR-483克隆引物,以小鼠基因组为模版,经PCR获得pre-miR-483片段,通过重组构建pCAGG-miR-483重组质粒.该质粒可在真核细胞中稳定表达成熟miR-483.再利用原核显微注射法建立miR-483过表达转基因小鼠.利用实时PCR检测各组织miR-483含量.结果显示,miR-483转基因小鼠心肌、骨骼肌、肝脏等组织可过表达成熟miR-483.此外,miR-483转基因过表达小鼠较野生型小鼠体重降低,提示miR-483可能在发育、代谢等方面具有调节作用.miR-483转基因小鼠模型的建立为microRNA功能研究提供了在体研究的平台.

关键词：内含子microRNA 转基因小鼠宿主基因

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62例冠心病病人抗心磷脂抗体的研究

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白求恩医科大学学报 2000年第1期26卷 53-54页

作者：裴瑾曲成刚曲立科杨翰仪长春白求恩医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室130021

目的 :为了研究冠心病的病因、发病机理 ,提供临床诊断依据。方法 :采用酶联免疫吸附法( ELISA) ,对临床上 62例冠心病病人及 40例正常人进行了抗心磷脂抗体 ( ACA)的 Ig G、Ig M和Ig A的血清学检测。结果 :冠心病病人组的血清 Ig G- AC... 详细信息

目的 :为了研究冠心病的病因、发病机理 ,提供临床诊断依据。方法 :采用酶联免疫吸附法( ELISA) ,对临床上 62例冠心病病人及 40例正常人进行了抗心磷脂抗体 ( ACA)的 Ig G、Ig M和Ig A的血清学检测。结果 :冠心病病人组的血清 Ig G- ACA和 Ig M- ACA显著高于正常对照组的Ig G- ACA和 Ig M- ACA水平。结论

关键词：冠心病抗心磷脂抗体 ELISA

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新生IUGR大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白表达的变化

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基础医学与临床 2013年第10期33卷 1275-1279页

作者：王宏娟徐世明李中秋王蓓盛树力陈瑞首都医科大学燕京医学院生化与分子生物学教研室北京101300 首都医科大学宣武医院中心实验室北京100053 首都医科大学基础医学院生化与分子生物学系北京100069

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白及突触后致密区蛋白(PSD95)表达的变化,探讨神经变性病可能的发育起源机制。方法应用热量限制法建立IUGR大鼠模型,通过RT-PCR和Western blot方法检测新生IUGR仔鼠脑内胰岛素受... 详细信息

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白及突触后致密区蛋白(PSD95)表达的变化,探讨神经变性病可能的发育起源机制。方法应用热量限制法建立IUGR大鼠模型,通过RT-PCR和Western blot方法检测新生IUGR仔鼠脑内胰岛素受体(InsR)、磷酸化InsR,胰岛素受体底物-1(IRS-1)及PSD95的表达水平。采用SPSS11.5软件进行统计分析。结果与对照组相比,IUGR新生仔鼠体质量和脑质量均显著降低(P<0.01),但脑质量/体质量比值却明显增加(P<0.01);脑内InsR在mRNA水平表达减少(P<0.05);在蛋白质水平InsRα和β亚基表达减少(P<0.05,P<0.01);InsRβ的磷酸化水平降低(P<0.05);IRS-1表达减少(P<0.05);PSD95表达减少(P<0.01)。结论新生IUGR大鼠脑内存在胰岛素信号通路障碍并发生了神经元可塑性的变化,这些变化可能增加成年后对神经变性病的易感性。

关键词：宫内发育迟缓胰岛素抵抗胰岛素受体神经变性

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限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠

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中国生物化学与分子生物学报 2016年第4期32卷 404-409页

作者：高旭马宁王大勇张赫张艳芬徐亚贺军徐书会霍亚丽杜智敏哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二临床医学院实验诊断教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所哈尔滨150081

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶... 详细信息

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。

关键词： CRISPR/Cas9 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3亚型遗传改变小鼠纯合子

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大鼠胚胎期心脏Na^+通道基因SCN5A的表达

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哈尔滨医科大学学报 2006年第4期40卷 286-289页

作者：金剑峰董钦李凤兰陈诗慧马宁李晖哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究大鼠胚胎发育过程中,编码心肌组织电压门控Na+通道α亚单位SCN5A基因mRNA的表达和蛋白定位。方法大鼠胚胎期分7个时间点(E12.5-P1),提取心脏总RNA,RT-PCR和免疫组化方法分别检测SCN5A基因mRNA表达和蛋白定位。结果大鼠胚胎发育... 详细信息

目的研究大鼠胚胎发育过程中,编码心肌组织电压门控Na+通道α亚单位SCN5A基因mRNA的表达和蛋白定位。方法大鼠胚胎期分7个时间点(E12.5-P1),提取心脏总RNA,RT-PCR和免疫组化方法分别检测SCN5A基因mRNA表达和蛋白定位。结果大鼠胚胎发育期SCN5A基因mRNA表达呈动态模式,E12.5d(0.425±0.012)表达最少,E13.5d(0.532±0.012)和E14.5d(0.665±0.119)相对增加,E15.5d达到高峰(1.08±0.01),E17.5d(0.870±0.035)与E19.5d(0.855±0.057)相比略有降低,无显著性差别,提示胚胎发育后期表达量趋于平衡。出生后一天(P1)表达量(0.751±0.041)较胚胎期表达显著降低。除E17.5d与E19.5d比较无统计学意义外(P>0.05),其余组间比较均有统计学意义(P<0.001)。免疫组化结果显示,SCN5A蛋白表达高峰及在左、右心室肌及室间隔中表达持续时间各不相同,胚胎早期SCN5A蛋白在不同心腔表达相对均匀,后期在心外膜和心室左、右束支位置表达增强。结论SCN5A基因与大鼠胚胎心脏传导系统发生及其功能相关,Na+电流是形成胚胎发育中期心肌动作电位的主要成分。

关键词：心肌胚胎 SCN5A 基因表达

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核酸检测技术进展及其在SARS-CoV-2核酸检测中的应用

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生物化学与生物物理进展 2021年第11期48卷 1290-1300页

作者：孟德豪张艳芬孙玉淼高旭马宁哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院检验科哈尔滨150000 黑龙江省基础医学研究所哈尔滨150086 哈尔滨医科大学北方转化医学研究合作中心哈尔滨150081 教育部中国遗传资源保护与疾病防控重点实验室哈尔滨150081 黑龙江省遗传改变模式动物重点实验室哈尔滨150081

2020年初至今,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情仍在全球多个国家流行,给全球公共卫生安全造成了严重威胁.中国在应对COVID-19的实践中,最先完成病毒核酸测序并共享序列信息,最早有效控制疫情蔓延、恢复生产,并在病毒作用人体机制研究、... 详细信息

2020年初至今,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情仍在全球多个国家流行,给全球公共卫生安全造成了严重威胁.中国在应对COVID-19的实践中,最先完成病毒核酸测序并共享序列信息,最早有效控制疫情蔓延、恢复生产,并在病毒作用人体机制研究、疫苗研发、中和性抗体发现等环节均处于世界前沿.其中,针对病毒核酸的检测工作——试剂盒研发、检测配套设备研制、10合1混检策略及相关政策制订,有效提高了疫情防控效率、保障了百姓健康.本文就严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测多种方法的原理、优劣势及其配套设备等进行综述.

关键词：新型冠状病毒核酸检测 CRISPR

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人端粒酶逆转录酶在肿瘤免疫治疗中的应用

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上海第二医科大学学报 2004年第3期24卷 225-227页

作者：仇全李颖钱关祥上海第二医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室上海200025

寻找有效的抗原表位是近期肿瘤免疫治疗的热点,人端粒酶逆转录酶(hTERT)的免疫学特性使其成为肿瘤免疫治疗中一个吸引人的目标。从人和鼠系统获得的数据证实,细胞毒淋巴细胞(CTL)能识别hTERT特异的肽并杀死多种组织类型hTERT表达的肿瘤... 详细信息

寻找有效的抗原表位是近期肿瘤免疫治疗的热点,人端粒酶逆转录酶(hTERT)的免疫学特性使其成为肿瘤免疫治疗中一个吸引人的目标。从人和鼠系统获得的数据证实,细胞毒淋巴细胞(CTL)能识别hTERT特异的肽并杀死多种组织类型hTERT表达的肿瘤细胞。由于hTERT在人肿瘤组织中的广泛表达,在极少正常组织的低水平表达,临床试验已开始检验将hTERT作为肿瘤免疫治疗目标的可行程度。近期树突状细胞(DC)转运系统及其相关技术的发展和成熟提供了一个快速有效筛选抗原肽的方法。

关键词：人端粒酶逆转录酶端粒酶树突状细胞细胞毒淋巴细胞肿瘤细胞免疫治疗

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周围神经侵犯与结直肠癌临床病理因素及预后的关系

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中华胃肠外科杂志 2017年第1期20卷 62-66页

作者：韩冬魏颖王曦迪王庚陈瑛罡哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150081 哈尔滨医科大学基础医学院人体解剖学教研室 150081 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科哈尔滨医科大学大肠癌研究所 150001

目的探讨周围神经侵犯（PNI）与结直肠癌临床病理因素及预后的关系。方法回顾性收集2011年1月至2012年6月期间于哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科行根治性手术治疗的372例结直肠癌患者的临床病理资料及术后标本。病理标本经... 详细信息

目的探讨周围神经侵犯（PNI）与结直肠癌临床病理因素及预后的关系。方法回顾性收集2011年1月至2012年6月期间于哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科行根治性手术治疗的372例结直肠癌患者的临床病理资料及术后标本。病理标本经苏木精-伊红染色后，将肿瘤细胞侵犯神经鞘任意一层或肿瘤细胞沿神经生长包绕超过神经周径1/3定为PNI阳性。采用χ2检验或Fisher确切概率法分析PNI与结直肠癌临床病理因素的关系；绘制Kaplan-Meier生存曲线并采用Log-rank检验对PNI阳性与阴性患者的3年生存率进行比较。结果全组372例结直肠癌患者共133例（35.8%）存在PNI阳性。其中PNI阳性患者中男性63例，女性70例；年龄〉 60岁者76例，≤60岁者57例；肿瘤位于回盲部6例，升结肠33例，横结肠7例，降结肠8例，乙状结肠22例，直肠57例；肿瘤直径〉 4 cm者83例，≤4 cm者50例；中高分化者48例，低分化者85例；肿瘤浸润深度T1期者2例，T2期者7例，T3期者93例，T4期者31例；淋巴结转移N0期者56例，N1期者41例，N2期者36例；肿瘤分期Ⅰ期者2例，Ⅱ期者40例，Ⅲ期者75例，Ⅳ期者16例。PNI阳性与肿瘤位置（χ2= 11.20，P= 0.048）、肿瘤大小（χ2= 21.80 ，P= 0.000）、分化程度（χ2= 60.90 ，P= 0.000）、浸润深度（χ2= 19.00 ，P= 0.000）、淋巴结转移（χ2= 19.70，P= 0.000）及肿瘤分期（χ2= 70.80，P= 0.000）有关，差异均有统计学意义，而与患者性别、年龄及脉管侵犯情况无关（均P 〉 0.05）。全组中位随访时间48 （8~ 62）月，PNI阳性患者的3年生存率为52.6%，明显低于PNI阴性患者的78.3%（P= 0.000）。进一步对Ⅱ期和Ⅲ期结直肠癌患者进行亚组分析显示，Ⅱ期和Ⅲ期PNI阳性患者的3年生存率分别为62.3％和43.5%，均明显低于Ⅱ期和Ⅲ期PNI阴性患者的91.7％和79.4%，差异均有统计学意义（均P= 0.000）。结论 PNI阳性可能提示结直肠癌患者的预后不良。Ⅱ期和Ⅲ期结直肠癌患者PNI状态的检测对判断预后有重要意义。

关键词：结直肠肿瘤周围神经侵犯预后

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