检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：尹希史海水王杰超河北医科大学第四医院功能科石家庄050011 河北医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室石家庄050017 河北省老年病医院心内科石家庄050011

目的：探讨神经肽三叶因子3(trefoil factor 3 TFF3)对可卡因奖赏效应的影响及其可能的机制。方法：采用大鼠自发活动测试和条件性位置偏爱实验模型，评价TFF3系统给药对可卡因奖赏效应行为学的影响，采用高效液相色谱法测定伏隔核脑区... 详细信息

目的：探讨神经肽三叶因子3(trefoil factor 3 TFF3)对可卡因奖赏效应的影响及其可能的机制。方法：采用大鼠自发活动测试和条件性位置偏爱实验模型，评价TFF3系统给药对可卡因奖赏效应行为学的影响，采用高效液相色谱法测定伏隔核脑区神经递质含量。

关键词：神经肽三叶因子3 药物成瘾奖赏效应可卡因多巴胺

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酵母双杂交筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第1期31卷 18-22页

作者：都建安然程里陈滢沈继龙安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学药学院合肥230032 安徽医科大学省部级基因研究重点实验室病原生物学教研室合肥230032

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自... 详细信息

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自激活作用,利用酵母双杂交系统从人胚胎脑cDNA文库中筛选与ROP18相互作用的宿主蛋白。结果构建了诱饵载体pGBKT7-ROP18,ROP18具有自激活功能。用ROP18^(25-25lan)为诱饵,筛选获得一系列与ROP18相互作用的宿主蛋白:DNA损伤特异性结合蛋白1(DDB1)、torsin A相互作用蛋白1(TOR1AIP1)、整联蛋白β1(integrinβ1)、溶质运载蛋白3(SLC3A2)、酪氨酸硫化转移酶2(TPST2)、Derl样域家族成员2(DERL2)和OCIA结构域蛋白1(OCIAD1)。结论通过酵母双杂交技术筛选出与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的多种宿主蛋白。

关键词：弓形虫 ROP18^25-251aa 酵母双杂交相互作用宿主蛋白

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新生IUGR大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白表达的变化

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基础医学与临床 2013年第10期33卷 1275-1279页

作者：王宏娟徐世明李中秋王蓓盛树力陈瑞首都医科大学燕京医学院生化与分子生物学教研室北京101300 首都医科大学宣武医院中心实验室北京100053 首都医科大学基础医学院生化与分子生物学系北京100069

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白及突触后致密区蛋白(PSD95)表达的变化,探讨神经变性病可能的发育起源机制。方法应用热量限制法建立IUGR大鼠模型,通过RT-PCR和Western blot方法检测新生IUGR仔鼠脑内胰岛素受... 详细信息

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白及突触后致密区蛋白(PSD95)表达的变化,探讨神经变性病可能的发育起源机制。方法应用热量限制法建立IUGR大鼠模型,通过RT-PCR和Western blot方法检测新生IUGR仔鼠脑内胰岛素受体(InsR)、磷酸化InsR,胰岛素受体底物-1(IRS-1)及PSD95的表达水平。采用SPSS11.5软件进行统计分析。结果与对照组相比,IUGR新生仔鼠体质量和脑质量均显著降低(P<0.01),但脑质量/体质量比值却明显增加(P<0.01);脑内InsR在mRNA水平表达减少(P<0.05);在蛋白质水平InsRα和β亚基表达减少(P<0.05,P<0.01);InsRβ的磷酸化水平降低(P<0.05);IRS-1表达减少(P<0.05);PSD95表达减少(P<0.01)。结论新生IUGR大鼠脑内存在胰岛素信号通路障碍并发生了神经元可塑性的变化,这些变化可能增加成年后对神经变性病的易感性。

关键词：宫内发育迟缓胰岛素抵抗胰岛素受体神经变性

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上皮-间质转化在前列腺癌中的研究进展

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中华男科学杂志 2013年第4期19卷 360-364页

作者：刘莉王丽玲于晓光林锋哈尔滨医科大学药学院有机化学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

前列腺癌(PCa)是老年男性常见疾病,其发病率居西方国家男性恶性肿瘤第2位。近年来,我国的发病率呈上升趋势。肿瘤的转移是导致前列腺癌患者死亡的主要原因。在肿瘤的发生发展过程中,浸润区肿瘤细胞与其微环境相互作用,经历上皮-间质转化... 详细信息

前列腺癌(PCa)是老年男性常见疾病,其发病率居西方国家男性恶性肿瘤第2位。近年来,我国的发病率呈上升趋势。肿瘤的转移是导致前列腺癌患者死亡的主要原因。在肿瘤的发生发展过程中,浸润区肿瘤细胞与其微环境相互作用,经历上皮-间质转化(EMT),最终出现远处转移。因此研究EMT在前列腺癌发生发展中的作用,对前列腺癌治疗有重要意义。本文主要参考近3年相关的文献,以治疗靶点为方向,对促进前列腺癌EMT的因素,作一综述。

关键词：上皮-间质转化前列腺癌治疗靶点

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TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测

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中国医科大学学报 2013年第1期42卷 45-48页

作者：刘雪梅崔剑侯伟健李其久贲松彬辽宁大学生命科学院生化与分子生物学教研室沈阳110036 中国医科大学基础医学院组织工程教研室沈阳110001

目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的... 详细信息

目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。结果重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95%。结论成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性。

关键词：反式激活蛋白凋亡素分泌表达凋亡

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干扰素λ1在CHO细胞中的表达

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中华实验和临床病毒学杂志 2013年第3期27卷 190-192页

作者：袁武梅麻粉莲张骞郑文芝郑丽舒新疆医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室 830011 中国疾病预防控制中心卫生部医学病毒和病毒病重点实验室

目的构建干扰素λ1表达载体PCI-dhfr-λ1和连接增强子SP163的表达载体PCI-dhfr-SP163-λ1,并在CHO（dhfr-）细胞中表达.方法在合成的干扰素λ1基因中引入相应酶切位点,并通过融合PCR获得连接增强子SP163-λ1基因,测序正确后将该基因... 详细信息

目的构建干扰素λ1表达载体PCI-dhfr-λ1和连接增强子SP163的表达载体PCI-dhfr-SP163-λ1,并在CHO（dhfr-）细胞中表达.方法在合成的干扰素λ1基因中引入相应酶切位点,并通过融合PCR获得连接增强子SP163-λ1基因,测序正确后将该基因插入表达载体PCI-dhfr,构建重组表达载体PCI-dhfr-λ1和PCI-dhfr-SP163-λ1.将所构建的重组表达载体用脂质体法转入CHO（dhfr-）细胞,通过间接免疫荧光法和Western Blot鉴定了λ1蛋白的表达,应用细胞病变抑制法初步鉴定了λ1蛋白的抗病毒活性.结果成功构建了干扰素λ1真核表达载体PCI-dhff-λ1和PCI-dhfr-SP163-λ1.免疫荧光结果显示分别转染了两种表达载体的CHO（dhfr-）细胞均能表达干扰素λ1蛋白,SP163增强子明显增强了干扰素λ1蛋白的表达,Western Blot结果显示转染SP163的CHO（dhfr-）细胞表达干扰素λ1蛋白.通过细胞病变抑制实验,在转染细胞48h后的细胞培养液中检测到了干扰素λ1的抗病毒活性.结论本研究成功的在CHO（dhfr-）细胞中表达了干扰素λ1,表达的蛋白具有抗病毒活性,为进一步建立稳定表达干扰素λ1的细胞系提供了条件.

关键词：干扰素类细胞,培训的增强子元件(遗传学)

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人绒毛膜癌细胞JEG-3中SEPSECS、TRNAU1AP蛋白表达稳定性的分析

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现代生物医学进展 2013年第18期13卷 3407-3409页

作者：孙美娜赵汉东饶翀李凤兰李晖哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学临床医学院黑龙江哈尔滨150081

目的:通过测定人绒毛膜癌细胞JEG-3中SEPSECS、TRNAU1AP两蛋白的半衰期,分析JEG-3细胞内SEPSECS、TRNAU1-AP两蛋白表达的稳定性。方法:采用蛋白合成抑制剂放线菌酮作用于人绒毛膜癌细胞JEG-3,用MTT法确定放线菌酮对细胞的最适作用浓度,... 详细信息

目的:通过测定人绒毛膜癌细胞JEG-3中SEPSECS、TRNAU1AP两蛋白的半衰期,分析JEG-3细胞内SEPSECS、TRNAU1-AP两蛋白表达的稳定性。方法:采用蛋白合成抑制剂放线菌酮作用于人绒毛膜癌细胞JEG-3,用MTT法确定放线菌酮对细胞的最适作用浓度,之后用最适浓度的放线菌酮处理JEG-3,利用Western blot检测10个时间点SEPSECS、TRNAU1AP蛋白表达量,确定SEPSECS、TRNAU1AP蛋白半衰期。结果:CHX作用于细胞的最适浓度为0.1μg/mL,与对照组相比,SEPSECS蛋白表达量在4 h、8 h有显著性差异(P<0.01);而TRNAU1AP蛋白表达量在2 h、4 h有显著性差异(P<0.01)。结论:在JEG-3细胞中SEPSECS蛋白的半衰期可能为4 h～8 h,而TRNAU1AP蛋白的半衰期可能为2 h～4 h,前者半衰期明显大于后者,由此,可推测SEPSECS蛋白在JEG-3细胞中表达的稳定性要高于TRNAU1AP蛋白,同时也为进一步分析二者在其他肿瘤细胞的表达情况提供依据。

关键词： SEPSECS TRANU1AP CHX 蛋白半衰期

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天然牛黄对MODS大鼠保护作用的实验研究

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现代生物医学进展 2013年第16期13卷 3041-3044页

作者：曹佳周康康姜明山刘远莉曲艺林王秀宏哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院普外科黑龙江哈尔滨150086

目的:肠道内的消化酶在MODS发生发展过程中起着关键的作用,有研究发现非结合型胆红素可以灭活胰蛋白酶和糜蛋白酶。基于非结合型胆红素对消化酶的灭活作用,本研究主要探讨非结合型胆红素含量丰富的天然牛黄对多器官功能障碍综合症大鼠... 详细信息

目的:肠道内的消化酶在MODS发生发展过程中起着关键的作用,有研究发现非结合型胆红素可以灭活胰蛋白酶和糜蛋白酶。基于非结合型胆红素对消化酶的灭活作用,本研究主要探讨非结合型胆红素含量丰富的天然牛黄对多器官功能障碍综合症大鼠的保护作用。方法:通过腹腔注射无菌石蜡酵母多糖混悬液的方法制作MODS大鼠模型。观察天然牛黄对MODS大鼠的生理状态,生命体征,血气分析,多指标系列生化检测,二胺氧化酶水平,以及心肺肝肾重要脏器病理组织学检查的变化及影响。结果:天然牛黄治疗组大鼠生命体征,血气分析结果,生化指标,血清DAO水平与MODS模型组比较,体温、心率、呼吸检测结果显著降低;pH、PaO2、SO2、AB、BE值升高,PaCO2值降低;LDH、ALT、Cr值减少;DAO水平降低,均有显著差异(P<0.05),且心肺肝肾等组织病理变化也有明显改善。结论:天然牛黄能明显恢复石蜡酵母多糖混悬液造模方法引起的MODS大鼠生理状态,生命体征,能有效改善MODS大鼠脏器功能及病理形态,对MODS大鼠具有脏器保护作用。其机制可能是非结合型胆红素灭活消化酶所致,待进一步研究。

关键词：天然牛黄 MODS 酵母多糖脏器功能非结合型胆红素

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SCN5A基因单核苷酸多态性位点H558R与慢型克山病合并高血压及其心电图特征的相关性研究

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中国地方病学杂志 2012年第4期31卷 377-380页

作者：姜山方传丰刘汉文舒畅程禾何娟李凤兰李晖哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150081

目的研究克山病地区人群SCN5A基因单核苷酸多态性（SNP）位点H558R与慢型克山病合并高血压以及慢型克山病合并高血压患者心律失常发生之间的关系。方法2006—2010年，在黑龙江省齐齐哈尔市富裕县，选取39例慢型克山病合并高血压患者作... 详细信息

目的研究克山病地区人群SCN5A基因单核苷酸多态性（SNP）位点H558R与慢型克山病合并高血压以及慢型克山病合并高血压患者心律失常发生之间的关系。方法2006—2010年，在黑龙江省齐齐哈尔市富裕县，选取39例慢型克山病合并高血压患者作为病例组，63例高血压患者作为对照组，应用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR—SSCP）分析以及PCR直接测序技术。检测病例组与对照组人群SCN5A基因的Exon12SNP位点H558R，并检查病例组与对照组的心电图特征，采用病例对照研究分析方法分析H558R与慢型克山病合并高血压以及慢型克山病合并高血压患者心电图特征之间的相关性。结果H558RTC基因型可能会降低慢型克山病合并高血压的发病风险[比值比（OR）=0．288，95％可信区间（a）：0．104～0．794，P=0．016]以及降低慢型克山病合并高血压患者发生QRS间期延长的风险（OR=0．061，95％CI：0．006～0．612，P=0．017）。结论SCN5A基因SNP位点H558R可能是慢型克山病合并高血压以及慢型克山病合并高血压患者发生QRS间期延长的易感因子。

关键词：克山病单核苷酸多态性 SCN5A基因心率失常

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转染PDCD5基因促进顺铂诱导前列腺癌细胞的凋亡作用

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肿瘤防治研究 2012年第1期39卷 32-35页

作者：刘磊玉赵彬佳惠秦玮陈媛媛林锋邹海峰于晓光哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081

目的探讨过表达细胞程序性死亡基因5(PDCD5)对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法 CCK-8法检测顺铂处理DU145细胞后对细胞生长增殖的影响;构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞系;Annexin V-FITC﹠PI双染... 详细信息

目的探讨过表达细胞程序性死亡基因5(PDCD5)对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法 CCK-8法检测顺铂处理DU145细胞后对细胞生长增殖的影响;构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞系;Annexin V-FITC﹠PI双染法检测细胞的凋亡率、电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果顺铂对DU145细胞的生长有抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;成功构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞;流式细胞术和电子显微镜都显示PDCD5联合顺铂(25μmol/L)促进细胞的凋亡作用比联合顺铂(10μmol/L)和单独使用顺铂明显,Western blot结果显示,顺铂联合PDCD5能明显降低Bcl-2的表达,而Bax的表达变化不明显。结论单独PDCD5过表达不引起DU145细胞的凋亡,但PDCD5能显著增强顺铂诱导DU145细胞凋亡的作用,其机制之一是通过降低Bcl-2/Bax的表达比率实现的。

关键词：顺铂细胞程序性死亡基因5 前列腺癌细胞凋亡

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