检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2016年第4期32卷 404-409页

作者：高旭马宁王大勇张赫张艳芬徐亚贺军徐书会霍亚丽杜智敏哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二临床医学院实验诊断教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所哈尔滨150081

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶... 详细信息

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。

关键词： CRISPR/Cas9 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3亚型遗传改变小鼠纯合子

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一种斑马鱼原始造血髓系细胞突变体的研究

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南方医科大学学报 2011年第5期31卷 755-760页

作者：颜广刘伟戴朝霞王鹍刘靖赵灵凤黄志斌陈小辉马宁孟萍许孟畅温子龙张文清南方医科大学基础医学院细胞生物教研室广东广州510515 香港科技大学生化系

目的斑马鱼原始造血髓系细胞突变体1276的表型鉴定及性状分析。方法利用化学诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲诱变野生型AB斑马鱼雄鱼的精原细胞,突变基因组保留传代,采用中性红染液对F3代的胚胎进行细胞化学染色,筛选原始造血髓系细胞突变体。... 详细信息

目的斑马鱼原始造血髓系细胞突变体1276的表型鉴定及性状分析。方法利用化学诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲诱变野生型AB斑马鱼雄鱼的精原细胞,突变基因组保留传代,采用中性红染液对F3代的胚胎进行细胞化学染色,筛选原始造血髓系细胞突变体。并通过细胞化学染色及检测不同谱系血细胞标记基因在不同发育阶段的mRNA及蛋白的表达水平,对其中之一突变体1276进行表型鉴定及性状分析。结果成功筛选1296个F2家族,2140个突变基因组,发现中性红染色信号异常突变体12个。突变体1276在原始造血阶段,中性红染色全身信号缺失,小胶质细胞标记基因apoe表达缺失,巨噬细胞标记基因l-plastin,头部表达减少,背主动脉壁腹侧区域表达正常,粒细胞、红细胞均未见异常;在定向造血阶段,巨噬细胞仍存在异常,但粒细胞、红细胞、淋巴细胞以及造血干细胞均未见明显异常。结论突变体1276在原始造血阶段,巨噬细胞存在功能障碍,以及不同程度发育及迁徙异常;在定向造血阶段这一性状并未得到代偿。

关键词：斑马鱼突变体 N-乙基-N-亚硝基脲诱变筛选中性红原始髓系造血巨噬细胞小胶质细胞

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RNase保护法同时检测黄体生成素受体及17α－羟化酶的mRNA

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生物化学与生物物理进展 1995年第5期22卷 455-459页

作者：时宇史凌云梁克珊张志文北京医科大学基础医学院生理系北京师范大学生物系河北省职工医学院生化教研室

睾酮是组织中主要雌激素雌二醇的前体，在卵巢内睾酮绝大部分转为雌二醇．睾酮的生成直接受垂体的黄体生成素和睾酮合成的限速酶１７α羟化酶的调控．用液相杂交的方法，同时检测了卵巢组织中黄体生成素受体和１７α－羟化酶的基因表达... 详细信息

睾酮是组织中主要雌激素雌二醇的前体，在卵巢内睾酮绝大部分转为雌二醇．睾酮的生成直接受垂体的黄体生成素和睾酮合成的限速酶１７α羟化酶的调控．用液相杂交的方法，同时检测了卵巢组织中黄体生成素受体和１７α－羟化酶的基因表达，并摸索出了最适条件．为今后进一步研究卵巢的功能，提供了新的手段．

关键词：黄体生成素受体 17a-羟化酶 RNase保护测定

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喉癌颈淋巴结抗肿瘤免疫状态的研究

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中华耳鼻咽喉科杂志 2004年第4期39卷 223-226页

作者：张杰武徐晋赵雪松贾深汕哈尔滨医科大学附属肿瘤医院头颈外科 150040 哈尔滨医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学教研室

目的　通过对肿瘤引流淋巴结中增生性滤泡反应和树突状细胞 (dendriticcell,DC)浸润密度进行定量分析 ,探讨其在喉癌患者抗肿瘤免疫反应中的作用。方法　重新制备 4 7例行选择性颈淋巴结清扫术的喉癌患者的 15 7枚颈淋巴结石蜡切片 ,用... 详细信息

目的　通过对肿瘤引流淋巴结中增生性滤泡反应和树突状细胞 (dendriticcell,DC)浸润密度进行定量分析 ,探讨其在喉癌患者抗肿瘤免疫反应中的作用。方法　重新制备 4 7例行选择性颈淋巴结清扫术的喉癌患者的 15 7枚颈淋巴结石蜡切片 ,用抗S 10 0、CD4 5RO和CD2 0单克隆抗体免疫组化抗生物素生物素过氧化物酶复合物 (avidin biotinperoxidase,ABC)法显示DC和增生性滤泡的分布并检测其密度。根据增生性滤泡反应的特点进行分型研究。结果　增生型滤泡反应的程度与类型和DC浸润密度有明显的相关性。术后生存 5年以上的患者淋巴结中滤泡计数和DC浸润密度明显多于生存期少于 5年者 (P <0 0 0 1)。无淋巴结转移组患者淋巴结中的滤泡计数和DC浸润密度较有转移组亦有明显增加 (P <0 0 0 1)。具有T细胞增生型滤泡反应的患者比T细胞非增生型患者有较高的 5年生存率 (P <0 0 1)和较低的淋巴结转移率 (P <0 0 5 )。结论　颈淋巴结中增生性滤泡反应和树突状细胞的浸润反映了机体免疫系统的抗肿瘤潜能。树突状细胞的浸润密度和增生性滤泡反应的程度及分型反映了该患者的抗肿瘤免疫状态 ,可以共同作为预后判定的重要指标。

关键词：喉癌颈淋巴结转移免疫学预后树突状细胞增生性滤泡反应

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补肾填精方防治阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆损害的分子机制

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中国临床康复 2002年第5期6卷 665-666页

作者：赵长安李恩薛伟彩河北医科大学基础医学院生化教研室河北石家庄050017

目的探讨补肾填精方防治铝致阿尔茨海默病(AD)的分子机制。方法用长期腹腔注射AlCl3复制大鼠动物模型,用RT-PCR检测端脑皮质beta-淀粉样前体蛋白mRNA异构体-APP695mRNA水平,用Y电迷宫仪检测大鼠的学习记忆能力。结果模型组大鼠端脑皮质A... 详细信息

目的探讨补肾填精方防治铝致阿尔茨海默病(AD)的分子机制。方法用长期腹腔注射AlCl3复制大鼠动物模型,用RT-PCR检测端脑皮质beta-淀粉样前体蛋白mRNA异构体-APP695mRNA水平,用Y电迷宫仪检测大鼠的学习记忆能力。结果模型组大鼠端脑皮质APP695mRNA的表达水平明显升高(P<0.05),学习记忆能力明显降低(P<0.05)。中药干预后,端脑皮质APP695mRNA表达较模型组明显降低(P<0.01),学习记忆能力明显提高(P<0.05)。结论端脑皮质APP695mRNA表达水平升高与学习记忆能力减低明显相关,通过抑制端脑皮质APP695mRNA的过量表达是补肾填精方防治AD模型大鼠学习记忆能力损害的机制之一。

关键词：阿尔茨海默病大鼠 APP695mRNA 补肾填精方中医药疗法

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胆汁泡蛋白ELISA检测法的建立与初步临床应用

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上海医学 2000年第6期23卷 341-344页

作者：蔡端项建斌张延龄马保金王丽影上海医科大学附属华山医院外科教研室 200040 上海医科大学基础医学院生化教研室

目的　建立胆汁泡蛋白快速检测法 ,筛选有效的胆石症防治手段。方法　获取 33.5kd胆汁泡蛋白 ,通过微量抗原免疫法获得高效价抗体 ,建立ELISA标准曲线 ;并应用ELISA法测定正常人、胆石症患者胆汁和血清中泡蛋白含量 ,同时观察不同溶石... 详细信息

目的　建立胆汁泡蛋白快速检测法 ,筛选有效的胆石症防治手段。方法　获取 33.5kd胆汁泡蛋白 ,通过微量抗原免疫法获得高效价抗体 ,建立ELISA标准曲线 ;并应用ELISA法测定正常人、胆石症患者胆汁和血清中泡蛋白含量 ,同时观察不同溶石防石药物如利胆冲剂、胆酸钠等对泡蛋白的影响。结果　建立了ELISA标准曲线 ,其曲线方程为Y =0 .0 35X(r=0 .99) ;正常人胆汁和血清中 33.5kd泡蛋白含量都明显较胆固醇结石患者低 (0 .0 0 7± 0 .0 0 3)mg/mlvs(0 .0 5 0± 0 .0 11)mg/ml,(0 .0 15± 0 .0 10 )mg/mlvs(0 .0 45± 0 .0 2 1)mg/ml,P <0 .0 5 ;利胆冲剂治疗 2周后 ,胆汁和血清泡蛋白含量显著降低 ,而对照组和胆酸钠治疗组未见明显变化。结论　在不同人群胆汁泡蛋白的含量差异有显著性 ;利胆冲剂等溶石防石药物能降低胆汁和血清 33.5kd泡蛋白含量 ,改变胆汁致石性。

关键词：酶联免疫法胆汁泡蛋白胆结石诊断

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胆碱对乌头碱和哇巴因所诱发的心律失常的保护作用

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中国药理学通报 2012年第10期28卷 1447-1451页

作者：刘艳戚汉平解晶赵华陈巍陈立朋张秀菊杜娟蒋雅楠李咏梅哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院黑龙江大庆163000 哈尔滨医科大学附属第二医院心血管外科黑龙江哈尔滨150000

目的探讨胆碱对乌头碱和哇巴因所诱发的心律失常的保护作用。方法大鼠和豚鼠分别注射乌头碱或哇巴因制备心律失常模型,观察预先给予低剂量(5 ***-1)和高剂量(20 ***-1)的胆碱对心律失常的保护作用。结果给予胆碱可明显对抗乌头碱或哇巴... 详细信息

目的探讨胆碱对乌头碱和哇巴因所诱发的心律失常的保护作用。方法大鼠和豚鼠分别注射乌头碱或哇巴因制备心律失常模型,观察预先给予低剂量(5 ***-1)和高剂量(20 ***-1)的胆碱对心律失常的保护作用。结果给予胆碱可明显对抗乌头碱或哇巴因所诱发的心律失常,表现为明显延迟心律失常的出现,推迟动物死亡时间等。高剂量胆碱对心律失常的保护作用优于低剂量。结论胆碱对心律失常具有保护作用,高剂量的作用优于低剂量。

关键词：心律失常胆碱保护作用 4-DAMP M3型乙酰胆碱受体乌头碱哇巴因

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持续高应激状态对心脏心钠素基因表达影响的研究

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白求恩医科大学学报 1999年第5期25卷 574-576页

作者：张家颖闫晓凯李晓林洪敏长春白求恩医科大学基础医学院生化教研室130021

目的：研究持续高应激状态对大鼠心脏内分泌的影响。方法：利用Ｄｏｔｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交技术检测心室及心房组织中ＡＮＦｍＲＮＡ含量。结果：实验组大鼠心房ＡＮＦｍＲＮＡ含量增加... 详细信息

目的：研究持续高应激状态对大鼠心脏内分泌的影响。方法：利用Ｄｏｔｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交技术检测心室及心房组织中ＡＮＦｍＲＮＡ含量。结果：实验组大鼠心房ＡＮＦｍＲＮＡ含量增加，在心室则减少。结论：高应激状态下，大鼠心脏心钠素基因表达在心房增强，在心室则减弱。

关键词：高应激状态心钠素基因表达心脏

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胃石的诊断与治疗

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中华放射学杂志 1992年第11期26卷 779-780页

作者：赵国库周翔 130021，白求恩医科大学第一临床医学院放射科白求恩医科大学基础医学院生化教研室

我科近年来对11例食山楂、柿子、桃子后形成的胃石,经口服发泡剂治疗,除2例未来复查不知结果外,余均消失。现报告如下:临床及治愈经过见附表。

关键词：胃柿石症诊断

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高应激状态大鼠心肌损伤的血清酶学研究及超微结构分析

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白求恩医科大学学报 1999年第4期25卷 375-377页

作者：阎晓凯张莲芝洪敏长春白求恩医科大学基础医学院生化教研室130021

目的：研究不同时间、强度高应激状态与大鼠心肌损伤的关系。方法：血清心肌酶活力测定和利用电镜技术观察大鼠心肌超微结构。结果：随应激状态时间延长、强度增加，血清心肌酶（ＬＤＨ、ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＧＯＴ）活力短时... 详细信息

目的：研究不同时间、强度高应激状态与大鼠心肌损伤的关系。方法：血清心肌酶活力测定和利用电镜技术观察大鼠心肌超微结构。结果：随应激状态时间延长、强度增加，血清心肌酶（ＬＤＨ、ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＧＯＴ）活力短时间刺激升高，然后逐渐下降，心肌超微结构短期刺激为代谢亢进的变化，以后呈逐渐加重的损伤性改变。结论：高应激状态能够引起大鼠心肌损伤。

关键词：高应激状态心肌损伤血清酶超微结构

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