检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤防治研究 2010年第11期37卷 1241-1244页

作者：王凤岐赵维明张诚金承俊张子健钟照华修有成哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科哈尔滨150010 哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室

目的探讨联合应用白细胞介素12(IL-12)质粒和吡柔比星(THP)对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法将人EJ膀胱癌细胞株裸鼠腋下接种,成瘤后设4组(每组6只):联合组于骨骼肌注射IL-12真核表达质粒pcAGGS-mIL-12和腹腔注射THP;IL-12组... 详细信息

目的探讨联合应用白细胞介素12(IL-12)质粒和吡柔比星(THP)对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法将人EJ膀胱癌细胞株裸鼠腋下接种,成瘤后设4组(每组6只):联合组于骨骼肌注射IL-12真核表达质粒pcAGGS-mIL-12和腹腔注射THP;IL-12组骨骼肌注射pcAGGS-mIL-12;THP组腹腔注射THP;对照组肌肉及腹腔注射0.9%氯化钠溶液,以上注射每周2次,共4次。观察各组裸鼠肿瘤大小变化。4周后处死荷瘤鼠。免疫组织化学法检测肿瘤内VEGF表达。ELISA法测定血液及肿瘤组织中IL-12和γ-干扰素(IFN-γ)的表达。结果联合组肿瘤生长明显抑制,瘤重及体积明显小于其他组。ELISA法表明IL-12组和联合组IL-12和IFN-γ都高表达。免疫组织化学法表明联合组VEGF基因表达量明显低于其他组(P<0.05)。结论联合应用IL-12真核表达质粒pCAGGS-mIL-12和THP,对人膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用明显强于单独应用IL-12和THP。

关键词：膀胱癌白细胞介素-12 吡柔比星基因治疗

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pCAGGs-miR-483重组质粒构建及miR-483转基因小鼠模型的建立

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中国生物化学与分子生物学报 2010年第5期26卷 478-483页

作者：马宁王曦迪乔瑜李福源杨宝峰吕延杰单宏丽郑晓飞高旭哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨150086 北京放射与辐射医学研究所北京100850

miR-483是近年发现的一种编码于胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因第2内含子的microRNA.研究表明,高脂饮食诱导的肥胖动物的心脏、肝脏及肝、肾肿瘤组织中miR-483表达异常,但其生物学功能尚待研究.建立稳定表达m... 详细信息

miR-483是近年发现的一种编码于胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因第2内含子的microRNA.研究表明,高脂饮食诱导的肥胖动物的心脏、肝脏及肝、肾肿瘤组织中miR-483表达异常,但其生物学功能尚待研究.建立稳定表达miR-483并能够传代的miR-483转基因小鼠是研究其功能的重要环节.利用特异miR-483克隆引物,以小鼠基因组为模版,经PCR获得pre-miR-483片段,通过重组构建pCAGG-miR-483重组质粒.该质粒可在真核细胞中稳定表达成熟miR-483.再利用原核显微注射法建立miR-483过表达转基因小鼠.利用实时PCR检测各组织miR-483含量.结果显示,miR-483转基因小鼠心肌、骨骼肌、肝脏等组织可过表达成熟miR-483.此外,miR-483转基因过表达小鼠较野生型小鼠体重降低,提示miR-483可能在发育、代谢等方面具有调节作用.miR-483转基因小鼠模型的建立为microRNA功能研究提供了在体研究的平台.

关键词：内含子microRNA 转基因小鼠宿主基因

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骨巨细胞瘤增殖细胞核抗原与bc1-2基因表达及凋亡的检测研究

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中华实验外科杂志 1999年第2期16卷 138-139页

作者：李月白李家谋王义生河南医科大学基础医学院生化教研室郑州450052 河南医科大学附属第一医院骨科

探讨骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）的细胞学性质、肿瘤发生以及生物学行为。方法用免疫组化（标记的链霉卵白素生物素──ＬＳＡＢ）法检测５１例ＧＣＴ中ＰＣＮＡ和ｂｃ１－２蛋白表达，并用ＴＵＮＥＬ法检测其凋亡细胞。结果全部标本ＰＣＮＡ... 详细信息

探讨骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）的细胞学性质、肿瘤发生以及生物学行为。方法用免疫组化（标记的链霉卵白素生物素──ＬＳＡＢ）法检测５１例ＧＣＴ中ＰＣＮＡ和ｂｃ１－２蛋白表达，并用ＴＵＮＥＬ法检测其凋亡细胞。结果全部标本ＰＣＮＡ阳性表达，随病理分级增加，ＰＣＮＡ表达有增高趋势。ｂｃ１－２在Ⅰ与Ⅲ级及Ⅰ与Ⅱ＋Ⅲ级间表达差异有显著性意义。ＧＣＴ中多为单核基质细胞凋亡，ＧＣＴ的凋亡率（ＡＩ）为０．８６％，各级间及ＰＣＮＡ标记指数间ＡＩ的差异无显著性意义，ＧＣＴ的ＡＩ与ｂｃ１－２表达呈显著负相关，ｂｃ１－２表达与否的ＡＩ差异有显著性。结论ＧＣＴ是以增殖为特征的肿瘤；ｂｃｌ－２在ＧＣＴ发生发展中可能起一定的作用。

关键词：骨巨细胞瘤骨肿瘤 bcl-基因 PCNA

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TNF-α转化酶酵母双杂交系统“诱饵”质粒的构建及鉴定

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中国应用生理学杂志 2008年第2期24卷 144-146,232页

作者：刘鑫于洪伟王凤丹王建醒王淑娟于晓光哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:构建酵母双杂交系统"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4... 详细信息

目的:构建酵母双杂交系统"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4 Two-Hybrid System 3中的自激活和毒性作用。结果:本实验成功构建了"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。结论:构建的诱饵质粒pGBKT7-TACE可应用在酵母双杂交系统中,为筛选小鼠cDNA文库中与TACE相互作用的蛋白奠定实验基础。

关键词： TNF-α转化酶酵母双杂交系统自激活作用

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酒精性股骨头坏死动物模型的制作和观察

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中华实验外科杂志 1998年第2期15卷 182-183,F002,F003页

作者：王玉堂王义生毛克亚李月白许振华河南医科大学附属第一医院骨科郑州450052 河南医科大学基础医学院生化教研室

目的制作酒精性股骨头坏死动物模型,探讨其发病机理。方法将80只家兔随机分为实验组和对照组各40只,采用灌胃法,实验组给烈酒(含乙醇45%)10ml/(kg·d),对照组给10%葡萄糖溶液loml/(kg·d),于1、2、3、6月分批处死,观察股骨头组... 详细信息

目的制作酒精性股骨头坏死动物模型,探讨其发病机理。方法将80只家兔随机分为实验组和对照组各40只,采用灌胃法,实验组给烈酒(含乙醇45%)10ml/(kg·d),对照组给10%葡萄糖溶液loml/(kg·d),于1、2、3、6月分批处死,观察股骨头组织学变化。结果灌酒后家兔股骨头软骨下骨髓内脂肪细胞增殖肥大,骨小梁变细稀疏,面积分数降低,骨细胞脂肪变性,空骨陷窝百分比升高(P〈0.01)。透射电镜下见骨细胞内大量脂质沉积。结论长期大量饮酒可导致股骨头缺血性坏死。

关键词：酒精性股骨头坏死动物模型制作股骨头缺血性坏死长期大量饮酒葡萄糖溶液组织学变化股骨头软骨发病机理 10ml 细胞增殖脂肪变性脂质沉积对照组实验组灌胃法骨髓内骨小梁骨细胞百分比细胞内家兔

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鼠转化生长因子-β1基因的克隆及其在成骨细胞中的表达

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中华实验外科杂志 2000年第4期17卷 344-345页

作者：郑启新刘勇杜靖远屈伸曾晖郭晓东同济医科大学附属协和医院骨科武汉430022 同济医科大学基础医学院生化教研室

目的　克隆鼠转化生长因子 β1(TGF β1)基因并研究其在转染的成骨细胞中表达情况。方法　采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)可从大鼠淋巴细胞中扩增出 1.2Kb特异性片段 ,经酶切鉴定证实为鼠TGF β1cDNA。将此片段插入 5 .4Kb的 pc... 详细信息

目的　克隆鼠转化生长因子 β1(TGF β1)基因并研究其在转染的成骨细胞中表达情况。方法　采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)可从大鼠淋巴细胞中扩增出 1.2Kb特异性片段 ,经酶切鉴定证实为鼠TGF β1cDNA。将此片段插入 5 .4Kb的 pcDNA表达载体 ,构建得到 6 .6Kb的pcDNA TGF β1重组质粒。应用脂质体介导的基因转移技术将TGF β1表达载体导入鼠成骨细胞 ,48h后用SABC法进行瞬时表达的检测。结果　 48h后转染的成骨细胞具有明显鼠TGF β1基因的表达产物。结论　将构建的TGF β1表达载体转入鼠成骨细胞 ,48h后可获得TGF β1的高效表达。

关键词：转化生长因子-β1 分子克隆基因表达成骨细胞

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人血管内皮细胞生长因子的cDNA克隆及其在兔成骨细胞中的表达

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中华骨科杂志 2000年第2期20卷 99-102页

作者：杨述华杨操许伟华李进张银钢屈伸同济医科大学附属协和医院骨科武汉430022 同济医科大学基础医学院生化教研室

目的　获得人VEGF1 65cDNA并构建其真核表达载体 ,探讨应用血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因治疗骨科各种疾患的可行性。方法　采用巢式 (poly merasechainreaction ,PCR )技术。从HL60细胞中扩增出人... 详细信息

目的　获得人VEGF1 65cDNA并构建其真核表达载体 ,探讨应用血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因治疗骨科各种疾患的可行性。方法　采用巢式 (poly merasechainreaction ,PCR )技术。从HL60细胞中扩增出人血管内皮生长因子 (hVEGF1 65)cDNA ,并将这一cDNA克隆至 pcDNA3 真核表达载体上 ,构建成为 pCD -hVEGF1 65重组质粒。并对cDNA片段进行了限制性酶切分析及DNA测序分析。应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入兔成骨细胞后 ,用链酶亲合素 -生物素 -酶复合物法 (streptavidin -biotin -enzymecomplex ,SABC)进行瞬时表达的检测。结果　经酶切鉴定及基因测序证实 ,克隆的基因片段为人VEGF1 65cDNA ,重组质粒pCD -hVEGF1 65转染成骨细胞后 ,免疫组化检测有VEGF表达。结论　我们成功地克隆了人VEGF1 65基因 ,为进一步研究VEGF基因治疗骨缺血性坏死、骨缺损及骨折的修复打下了基础。

关键词：血管基因扩增基因表达 cDNA VEGF 成骨细胞

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重组人成骨生长肽的表达、纯化和活性的研究

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第4期20卷 467-472页

作者：余琼周凌云林雪松徐建永王淑静刘兴汉哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室

将人工合成的人成骨生长肽基因 (hOGPgene) ,与质粒pTYB2 重组 ,转化大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3) .经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,融合蛋白在E .coli中得到表达 .菌体经超声破碎 ,一步亲和层析纯化得到重组人成骨生长肽 (rec... 详细信息

将人工合成的人成骨生长肽基因 (hOGPgene) ,与质粒pTYB2 重组 ,转化大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3) .经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,融合蛋白在E .coli中得到表达 .菌体经超声破碎 ,一步亲和层析纯化得到重组人成骨生长肽 (recombinanthumanosteogenicgrowthpeptide ,rhOGP) .体外实验证明 :rhOGP对成纤维细胞 (NIH3T3)的增殖有促进作用 .体内实验证明 :rhOGP加速兔移植骨成活 ,使血清中碱性磷酸酶活性增高 ,骨钙素增高 .重组人成骨生长肽促进成骨。

关键词：成骨生长肽融合蛋白亲和层析活性成骨

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分子医学时代下临床医学生知识结构嬗变的哲学思考

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医学与哲学（A） 2008年第6期29卷 61-63页

作者：李盛张嘉宁大连医科大学基础医学院生化教研室辽宁大连116044

分子医学时代理,医学与自然科学和社会科学的交汇、融合,为医学带来了前所未有的革命性变化。临床医学生应针对医学的发展趋势调整知识结构,重视专业外的知识汲取,加强自然科学知识学习,注重人文素质培养。成为具有精深专业知识,扎实自... 详细信息

分子医学时代理,医学与自然科学和社会科学的交汇、融合,为医学带来了前所未有的革命性变化。临床医学生应针对医学的发展趋势调整知识结构,重视专业外的知识汲取,加强自然科学知识学习,注重人文素质培养。成为具有精深专业知识,扎实自然科学底蕴、严密思维能力、深厚人文素养、开放知识结构的优秀医学专业人才。

关键词：分子医学医学伦理学知识结构临床医学生

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饲料脂肪酸组成对大鼠胃肠等肿瘤生成的影响

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营养学报 1999年第3期21卷 288-292页

作者：周少波陈炳卿王蓬勃王桂杰哈尔滨医科大学营养与食品卫生教研室哈尔滨150001 汕头大学医学院生理教研室佳木斯大学医学院生化教研室

目的：　研究脂肪酸组成对甲基亚硝基脲（ＭＮＵ）诱导的大鼠结肠等肿瘤生成的影响。方法：　雄性ＳＤ大鼠喂以用牛油、豆油、紫草油、玉米油和鱼油按不同比例调配，含脂肪量为１５％的半合成饲料，分５组。各组脂肪酸组成... 详细信息

目的：　研究脂肪酸组成对甲基亚硝基脲（ＭＮＵ）诱导的大鼠结肠等肿瘤生成的影响。方法：　雄性ＳＤ大鼠喂以用牛油、豆油、紫草油、玉米油和鱼油按不同比例调配，含脂肪量为１５％的半合成饲料，分５组。各组脂肪酸组成为：１组以牛油为主富含饱和脂肪酸；２组以豆油为主富含亚油酸，１组和２组基本不含有ｎ３系列多不饱和脂肪酸；３组以紫草油为主富含亚油酸，α和γ亚麻酸，ｎ６／ｎ３脂肪酸之比为４．５３；４组以鱼油为主富含ｎ３系列多不饱和脂肪酸，ｎ６／ｎ３脂肪酸之比为０．７３；５组为混合油组，ｎ６／ｎ３脂肪酸之比为１．９５。对照组和实验组分别经腹腔注射磷酸盐生理盐水缓冲液和３０ｍｇ／ｋｇ．ｂｗ的ＭＮＵ，每周一次，共６次，喂养１８０天。实验期控制了影响肿瘤产生的因素。结果：１、２和３组产生的结肠肿瘤均显著高于４组（Ｐ＜０．０５），也相对高于５组（Ｐ＞０．０５）；１、２、３和５组产生的胃肿瘤也相对地高于４组，但是，各组之间无显著的统计学差异。除了４组和１组外，其它各组在其它部位也产生了肿瘤。结论：　ＭＮＵ能诱导喂以不同脂肪酸组成的大鼠产生以结肠癌为主的癌症；饲?

关键词：脂肪酸组成结肠肿瘤胃肿瘤甲基亚硝基脲

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