检索结果-内蒙古大学图书馆

中华精神科杂志 2006年第3期39卷 182-185页

作者：廖峥嵘李英敏琦祖和薛越强杨鹏河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室石家庄050017 河北医科大学病理教研室石家庄050017 中国医学科学院基础所生化室

目的建立h载脂蛋白E_4(h-apo E_4)/h淀粉样前体蛋白(h-APP)双转基因鼠模型,探讨人apo E_4及人突变APP基因在脂质代谢及早老痴呆疾病(AD)中的作用。方法将h-apo E_4转基因鼠及h-APP转基因鼠交配,建立h-apo E_4/h-APP双转基因鼠。通过酶... 详细信息

目的建立h载脂蛋白E_4(h-apo E_4)/h淀粉样前体蛋白(h-APP)双转基因鼠模型,探讨人apo E_4及人突变APP基因在脂质代谢及早老痴呆疾病(AD)中的作用。方法将h-apo E_4转基因鼠及h-APP转基因鼠交配,建立h-apo E_4/h-APP双转基因鼠。通过酶法检测鼠血清胆固醇。Y迷宫检测鼠自发变换行为。结果经聚合酶链反应初选,Southern杂交进一步鉴定,获得h-apoE_4/APP双转基因鼠(10只)。h-apo E_4/h-APP转基因鼠血清胆固醇水平[9月龄(2.76±0.75)mmol/L,12月龄(3.35±1.23)mmol/L]明显高于同龄对照组鼠(10只)[9月龄(2.03±0.30)mmol/L,12月龄(2.16±0.50)mmol/L](P＜0.05),分别是同龄对照组鼠的1.3倍和1.2倍。12月龄h-APP转基因鼠和h-apo E_4转基因鼠血清胆固醇水平[h-APP鼠(2.38±0.37)mmol/L,h-apo E_4鼠(2.67±0.59) mmol/L]均明显高于同龄对照组鼠[(2.16±0.5)mmol/L](P＜0.05)。转基因鼠自发变换行为[h-apo E_4/h-APP(0.74±0.03)%,h-APP(0.80±0.05)%,h-apo E_4(0.72±0.07)%]与对照组鼠[(0.95±0.06)%]的差异有统计学意义(P＜0.01或＜0.05)。结论h-apo E_4基因与血清胆固醇水平有关,h-apo E_4基因及h-APP基因的异常表达对实验鼠的空间记忆能力有影响。

关键词：载脂蛋白E类淀粉样β蛋白前体小鼠,转基因胆固醇空间行为

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基质金属蛋白酶MMP-26能有效促进人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3浸润能力

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生物化学与生物物理进展 2006年第6期33卷 524-530页

作者：吴晓秋李玉侠付雅媛李殿俊 SANG Qing-Xiang 王雁玲哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室 Department of Chemistry and Biochemistry and Institute of Molecular Biophysics Florida State UniversityTallahasseeFL 32306USA

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少... 详细信息

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少.利用国际常用的人滋养层细胞模型——人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)作为体外实验模型,探讨MMP-26在人滋养层细胞浸润调节中的作用.将含有MMP-26全长cDNA的pCR3.1质粒转染到JEG-3细胞中,获得过量表达MMP-26基因的稳定细胞系JEG-3/MMP-26;细胞浸润分析表明JEG/MMP-26细胞的浸润能力较母本细胞明显增强;RT-PCR和明胶酶谱分析显示JEG-3/MMP-26细胞中MMP-9的表达和分泌水平提高;双荧光免疫细胞化学进一步显示MMP-26和MMP-9蛋白在细胞中有共定位现象.上述结果表明MMP-26能有效促进人滋养层细胞浸润,其作用可能是通过与其他MMP分子(如MMP-9)的协调来实现的.

关键词：基质金属蛋白酶 JEG-3细胞细胞浸润人滋养层细胞

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蛙皮素和生长抑素对人胃癌BGC-823细胞生长的影响及受体后信息传递

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世界华人消化杂志 2006年第27期14卷 2684-2690页

作者：徐秀英赵金满姜若兰宗志宏中国医科大学第一临床医院消化科辽宁省沈阳市110001 中国医科大学基础医学院生化教研室辽宁省沈阳市110001

目的:观察蛙皮素(BBS)和生长抑素(SS)对人低分化胃癌细胞株BGC-823的生长调控作用,测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)含量、蛋白激酶C(PKC)活性及PKC亚型的表达,探讨受体后信息传导途径．方法:BGC-823细胞在含100 mL／L小牛血清的RPMI 1640培... 详细信息

目的:观察蛙皮素(BBS)和生长抑素(SS)对人低分化胃癌细胞株BGC-823的生长调控作用,测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)含量、蛋白激酶C(PKC)活性及PKC亚型的表达,探讨受体后信息传导途径．方法:BGC-823细胞在含100 mL／L小牛血清的RPMI 1640培养液中,于37℃,50 mL／L CO2条件下培养,分别加入不同浓度的BBS或SS,应用MTT法观察细胞的增殖程度．应用放射免疫分析方法测定细胞内cAMP含量,应用[γ-32p]ATP掺入外源性底物的方法测定PKC活性,应用Western blot方法分析PKC亚型α,β1,β,及ε的表达．结果:BBS能促进BGC-823细胞的生长,且与剂量呈正相关(r=0．878,P<0．05),这种促生长作用可被其受体拮抗剂所拮抗;BBS能促进细胞内cAMP的产生(r=0．68,P<0．01)及增加PKC活性,PKCα表达明显增加,而β1,β2及ε则无明显表达;SS能显著抑制BGC-823细胞的生长,呈剂量依赖关系(r=0．831,P<0．01);SS能显著抑制BBS的促细胞生长作用,但无明显的剂量依赖关系;SS可使细胞PKC活性明显下降,呈剂量依赖关系(r=-0．74,P<0．01)．结论:经特异性受体介导,BBS能促进胃癌细胞BGC-823的生长;其受体后信息传递途径可能涉及cAMP-PKA系统及DG-PKC系统, PKCα在BBS的受体后信息传递中可能起重要作用:SS可能通过降低PKC活性抑制BGC-823细胞的生长,同时可抑制BBS的促胃癌细胞生长作用．

关键词：蛙皮素生长抑素胃癌环磷酸腺苷蛋白激酶C

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大鼠胚胎期心脏Na^+通道基因SCN5A的表达

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哈尔滨医科大学学报 2006年第4期40卷 286-289页

作者：金剑峰董钦李凤兰陈诗慧马宁李晖哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究大鼠胚胎发育过程中,编码心肌组织电压门控Na+通道α亚单位SCN5A基因mRNA的表达和蛋白定位。方法大鼠胚胎期分7个时间点(E12.5-P1),提取心脏总RNA,RT-PCR和免疫组化方法分别检测SCN5A基因mRNA表达和蛋白定位。结果大鼠胚胎发育... 详细信息

目的研究大鼠胚胎发育过程中,编码心肌组织电压门控Na+通道α亚单位SCN5A基因mRNA的表达和蛋白定位。方法大鼠胚胎期分7个时间点(E12.5-P1),提取心脏总RNA,RT-PCR和免疫组化方法分别检测SCN5A基因mRNA表达和蛋白定位。结果大鼠胚胎发育期SCN5A基因mRNA表达呈动态模式,E12.5d(0.425±0.012)表达最少,E13.5d(0.532±0.012)和E14.5d(0.665±0.119)相对增加,E15.5d达到高峰(1.08±0.01),E17.5d(0.870±0.035)与E19.5d(0.855±0.057)相比略有降低,无显著性差别,提示胚胎发育后期表达量趋于平衡。出生后一天(P1)表达量(0.751±0.041)较胚胎期表达显著降低。除E17.5d与E19.5d比较无统计学意义外(P>0.05),其余组间比较均有统计学意义(P<0.001)。免疫组化结果显示,SCN5A蛋白表达高峰及在左、右心室肌及室间隔中表达持续时间各不相同,胚胎早期SCN5A蛋白在不同心腔表达相对均匀,后期在心外膜和心室左、右束支位置表达增强。结论SCN5A基因与大鼠胚胎心脏传导系统发生及其功能相关,Na+电流是形成胚胎发育中期心肌动作电位的主要成分。

关键词：心肌胚胎 SCN5A 基因表达

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胎鼠脊髓神经干细胞分离方法的比较

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现代生物医学进展 2006年第2期6卷 29-31页

作者：马红梅郭筠秋张洪艳汪美琪哈尔滨医科大学大庆校区基础部组胚教研室大庆163319 哈尔滨医科大学基础医学院组胚教研室

目的:比较机械法和胰酶消化法对胎鼠脊髓源神经干细胞增殖分化的影响。方法:分别用机械法和胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞,应用台盼蓝检测细胞成活率,用无血清培养技术培养神经干细胞,应用MTT法检测细胞分裂增殖能力,采用... 详细信息

目的:比较机械法和胰酶消化法对胎鼠脊髓源神经干细胞增殖分化的影响。方法:分别用机械法和胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞,应用台盼蓝检测细胞成活率,用无血清培养技术培养神经干细胞,应用MTT法检测细胞分裂增殖能力,采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化细胞。结果:机械法获得的细胞数量多于胰酶消化法。细胞经过培养其增殖能力机械法略强于胰酶消化法,但无统计学意义。培养形成的细胞球Nestin阳性,诱导分化后可见NSE和GFAP阳性细胞。结论:运用机械法比胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞方法简单,容易操作,经过培养细胞增殖能力较强。并可提供健康的细胞来源。

关键词：神经干细胞脊髓分离培养机械法胰酶消化法

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绝经后女性脂质代谢与雌激素受体基因多态性的关系研究

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临床荟萃 2006年第23期21卷 1711-1712页

作者：郝玉明郑红梅刘和娣赵长安佟晓旭刘凡祖秀光河北医科大学第二医院心内科河北石家庄050000 河北医科大学基础医学院生化教研室河北石家庄050017

绝经后女性患冠心病的危险性逐渐增高,过早停经的女性和双侧卵巢切除的女性冠心病患病危险性亦明显增加,而对绝经后妇女行雌激素替代治疗可明显降低其心血管事件和心血管疾病病死率。以上可提示雌激素对心血管系统具有保护性作用,但目... 详细信息

绝经后女性患冠心病的危险性逐渐增高,过早停经的女性和双侧卵巢切除的女性冠心病患病危险性亦明显增加,而对绝经后妇女行雌激素替代治疗可明显降低其心血管事件和心血管疾病病死率。以上可提示雌激素对心血管系统具有保护性作用,但目前仍不能完全理解雌激素对心血管系统的保护作用是否完全依赖经典的雌激素受体,也有报道认为还存在其他机制。但其基本机制至少有以下两点:①对脂质代谢的影响;②直接作用于血管壁。内源性和外源性雌激素均可使低密度脂蛋白胆固醇减低,使高密度脂蛋白胆固醇升高。另外,最近一项关于冠状动脉尸检标本的研究显示,绝经后女性雌激素受体表达的存在与冠状动脉粥样硬化的程度呈负相关。基于以上,我们做了雌激素受体两种多态性(pvuⅡ多态性和xbaⅠ多态性)与女性冠心病患者脂质代谢的关系研究。在以前的报道中,也曾见到雌激素受体基因多态性与血脂关系的研究,认为二者无相关性,但我们注意到其中女性所占比例甚小(病例组22例,对照组12例),故我们认为扩大样本量做进一步研究仍有必要。[第一段]

关键词：受体,雌激素基因多态性冠状动脉疾病危险因素

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阿尔茨海默病的免疫治疗

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国际免疫学杂志 2006年第1期29卷 5-7页

作者：马春王爱民朱长义（审校者）万杰医学院基础部解剖教研室淄博 255213 哈尔滨医科大学生化教研室 150086 万杰医学院基础部微免教研室

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最常见的痴呆性疾病,目前使用的药物治疗效果欠佳,免疫治疗为该病的治疗带来新的希望。主动免疫治疗虽在动物模型取得良好效果,但有少数AD病人诱发了脑膜脑炎。被动免疫治疗在动物模型和AD病人的效... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最常见的痴呆性疾病,目前使用的药物治疗效果欠佳,免疫治疗为该病的治疗带来新的希望。主动免疫治疗虽在动物模型取得良好效果,但有少数AD病人诱发了脑膜脑炎。被动免疫治疗在动物模型和AD病人的效果都是令人鼓舞的,但仍需继续观察是否有副作用,并面临抗体选择等诸多问题。现就以上几个方面的研究进展作一综述。

关键词： Alzheimer病免疫治疗

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人谷氧还蛋白1基因克隆及真核表达载体的构建

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哈尔滨医科大学学报 2006年第5期40卷 354-357页

作者：邹朝霞张春晶吴丽芳刘莹莹房绍红周宏博哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 齐齐哈尔医学院生化教研室黑龙江齐齐哈尔161042

目的从ECV304细胞中克隆谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)的cDNA序列并构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1。方法利用Trizol一步法从ECV304细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术从中获得Grx1的cD-NA,将质粒pcDNA3.1(+)进行双酶切、CIP处理并回收纯化,与纯化后的Grx1cDNA连接构成重组表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆鉴定并进行测序分析。结果经RT-PCR和测序鉴定,成功地克隆了人Grx1cDNA。结论从ECV304细胞中获得Grx1的cDNA,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-Grx1,对Grx1在体外表达、进一步研究其在氧化应激中的作用及其作用机制具有重要意义。

关键词：谷氧还蛋白1 基因克隆序列分析真核表达

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脑衍生的神经营养因子及其受体trk B在老年性大鼠耳蜗中的表达

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临床耳鼻咽喉科杂志 2006年第19期20卷 894-895页

作者：李玉茹刘得龙张媛媛王苹杜宝东哈尔滨医科大学第一临床医学院耳鼻咽喉科哈尔滨150001 大连市中心医院耳鼻咽喉科吉林大学基础医学院细胞生物学教研室吉林大学第一医院耳鼻咽喉

目的:探讨脑衍生的神经营养因子(BDNF)及其受体trk B在老年性大鼠耳蜗中的表达。方法:采用实时定量PCR的方法对正常老年大鼠(老年非耳聋组)与老年性耳聋大鼠(老年耳聋组)及非老年正常大鼠(对照组)耳蜗组织中的BDNF和trk BmRNA表达进行... 详细信息

目的:探讨脑衍生的神经营养因子(BDNF)及其受体trk B在老年性大鼠耳蜗中的表达。方法:采用实时定量PCR的方法对正常老年大鼠(老年非耳聋组)与老年性耳聋大鼠(老年耳聋组)及非老年正常大鼠(对照组)耳蜗组织中的BDNF和trk BmRNA表达进行定量分析。结果:定量分析结果显示,老年耳聋组耳蜗神经元和毛细胞中BDNF的表达比对照组明显减少(P<0.01);老年非耳聋组BDNF的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。表达于神经元的trkB在老年耳聋组、老年非耳聋组和对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:老年性大鼠耳蜗中BDNF的表达与老年性大鼠耳聋的发病机制可能密切相关。

关键词：聋老年性耳蜗脑衍生的神经营养因子

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抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定

抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定

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2006第六届中国药学会学术年会

作者：武正华唐晓波王志刚纪宏宇于磊刘慧文朱大岭哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学附属二院药学部哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学基础医学院组胚教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室

目的:制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(human carboxylesterases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法:以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb... 详细信息

目的:制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(human carboxylesterases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法:以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb效价、Western blot鉴定抗体特异性、免疫组化染色法对抗体相应的抗原进行组织定位。用免疫沉淀及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF),搜索数据库鉴定mAb对应的抗原。结果:获得1株可持续、稳定分泌抗hCE-Ⅱ的mAb的杂交瘤细胞系。杂交瘤细胞分泌的mAbIg亚类(型)为IgG1(κ),腹水mAb的效价达1×10-7。Western blot分析显示,在Mr为62000处有1条清晰的条带。免疫组化染色显示,该mAb可与肝细胞的浆蛋白结合(hCE-Ⅱ存在于肝细胞浆内微粒体),而不与血管平滑肌细胞内蛋白结合。该mAb免疫沉淀物的Mr为62000,与hCE-Ⅱ的Mr相符。对免疫沉淀的蛋白质进行质谱鉴定证实,该mAb对应的抗原为hCE-Ⅱ。结论:制备出的鼠抗hCE-Ⅱ的mAb效价高、特异性良好,为进一步研究hCE-Ⅱ的功能及其在肝癌等癌症的诊断和治疗中的作用提供了工具。

关键词：人羧酸酯酶-Ⅱ 单克隆抗体基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

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