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哈尔滨医科大学学报 2008年第1期42卷 50-52,56,F0004页

作者：李强秦华东邹朝霞哈尔滨医科大学第二临床医学院普外四科哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)和P53蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义。方法应用组织芯片技术、免疫组织化学(S-P)法检测60例大肠癌标本,20例癌旁正常组织中PTTG和P53蛋白的表达水平。结果大肠癌组织和癌旁正常组织中PTTG和P53的阳性... 详细信息

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)和P53蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义。方法应用组织芯片技术、免疫组织化学(S-P)法检测60例大肠癌标本,20例癌旁正常组织中PTTG和P53蛋白的表达水平。结果大肠癌组织和癌旁正常组织中PTTG和P53的阳性表达率分别为75%和61.7%,明显高于其在正常大肠组织中的表达,差异具有显著性(P<0.01)。PTTG的过度表达与大肠癌的淋巴结转移、浸润深度、肿瘤直径有相关性(P<0.01,P<0.05),而与大肠癌的分化程度无关(P>0.05)。P53的过度表达与大肠癌的分化程度、浸润深度、肿瘤直径无关(P>0.05),仅与其淋巴结转移显著相关(P<0.05)。在大肠癌组织中PTTG与P53蛋白的表达呈正相关(r=0.495,P<0.01)。结论PTTG与P53蛋白在大肠癌组织中呈高表达,二者表达呈正相关,且均与淋巴结转移与否密切相关,说明二者可以结合起来作为判断大肠癌是否有潜在淋巴结转移的一项分子指标。

关键词：大肠癌垂体瘤转化基因 P53 免疫组织化学

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人乳腺癌中端粒酶结构表达的研究

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中国医科大学学报 2008年第3期37卷 369-370页

作者：郝凤进吴成举谢鑫袁莹阎静中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 辽宁中医药大学教学实验中心沈阳110034

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)、人端粒酶RNA亚基(hTR)和预后指标包括肿瘤的大小、分级、结节状态和患者年龄间的联系。方法RT-PCR检测92例人乳腺恶性肿瘤和10例良性肿瘤的hTERT和hTR的表达。结果hTR和hTERT的表达分别为62例(67.4%)... 详细信息

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)、人端粒酶RNA亚基(hTR)和预后指标包括肿瘤的大小、分级、结节状态和患者年龄间的联系。方法RT-PCR检测92例人乳腺恶性肿瘤和10例良性肿瘤的hTERT和hTR的表达。结果hTR和hTERT的表达分别为62例(67.4%)和76例(82.6%),与<40岁的人群比较,>40岁的人群hTR表达更显著,良性肿瘤中没有1例表达hTR,6例表达hTERT。hTR和hTERT的表达与肿瘤的分级、分期、淋巴结转移和病理分型呈显著相关,与肿瘤大小没有相关性,在76例hTERT阳性的患者中,均有不同程度的hTR表达阴性,在hTR阳性的患者中没有hTERT阴性。结论hTERT和hTR的表达同乳腺癌具有相关性;hTR比hTERT更能反映乳腺癌的发生情况。

关键词：端粒酶人端粒酶RNA亚基人端粒酶逆转录酶乳腺癌

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细胞死亡调控基因GRIM19重组腺病毒的构建及在恶性胶质瘤CHG-5细胞中的表达

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第三军医大学学报 2008年第23期30卷 2194-2197页

作者：姚声涛黄轶曾昭淳唐文渊重庆医科大学附属第一医院神经外科重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 附属儿童医院临床分子医学中心重庆400014

目的构建细胞死亡调控基因GRIM19(genes associated with retinoid-IFN-induced mortality 19)重组腺病毒载体,观察GRIM19对病毒包装细胞是否具有细胞毒作用,并验证其对脑胶质瘤CHG-5细胞的感染效率。方法采用PCR方法分别将GRIM19以及E... 详细信息

目的构建细胞死亡调控基因GRIM19(genes associated with retinoid-IFN-induced mortality 19)重组腺病毒载体,观察GRIM19对病毒包装细胞是否具有细胞毒作用,并验证其对脑胶质瘤CHG-5细胞的感染效率。方法采用PCR方法分别将GRIM19以及EGFP基因亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,在BJ5183(pAdeasy)菌内同源重组,筛选阳性克隆,酶切测序鉴定,线性化后转染293T细胞进行包装、扩增、纯化,PCR检测病毒上清,TCID50法测定病毒滴度并感染CHG-5细胞后Western免疫印迹法验证GRIM19蛋白表达。结果连接重组后经酶切和测序法筛选出pAd-GRIM19;转染293T包装细胞,观察到绿色荧光蛋白(GFP)明显表达,细胞生长状态良好,未见明显细胞毒作用。Ad-GRIM19及Ad-EGFP初纯病毒经氯化铯梯度离心纯化最终获得约5×1010U/ml与8×1010U/ml滴度的重组病毒;将其体外感染胶质瘤CHG-5细胞,均能达到90%左右的感染率,Western免疫印迹法表明Ad-GRIM19感染组GRIM19蛋白表达明显升高。结论成功构建了携带GRIM19基因的重组腺病毒,为体内外进一步研究GRIM19对脑胶质瘤的作用奠定了基础。

关键词： GRIM19 腺病毒胶质瘤细胞 CHG-5

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生物化学实验教学改革初探

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2008年第5期10卷 570-572页

作者：卜友泉廖飞王咏梅左渝萍曾昭淳宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

对近年来国内生物化学实验教学改革的现状进行了回顾，并以此为基础，结合生物化学实验教学中存在的问题，对生物化学实验教学的内容、实验考核办法等进行了初步改革和小范围试点，取得了良好的效果，为进一步建立更为完善的面向21世纪... 详细信息

对近年来国内生物化学实验教学改革的现状进行了回顾，并以此为基础，结合生物化学实验教学中存在的问题，对生物化学实验教学的内容、实验考核办法等进行了初步改革和小范围试点，取得了良好的效果，为进一步建立更为完善的面向21世纪的医学生物化学实验教学新体系奠定了良好的基础。

关键词：生物化学实验教学教学改革

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Visfatin转录调控的生物信息学分析

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重庆医科大学学报 2008年第3期33卷 334-336页

作者：曾建涛王继红重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:分析Visfatin基因可能的转录启动子区段及转录因子结合位点。方法:检索网上数据库资料,获得Visfatin的转录本信息;运用CpG/CpGReport/Isochore和FirstEF对Visfatin基因进行CpG岛分析和第一外显子预测;利用PromoterScan等程序对Visf... 详细信息

目的:分析Visfatin基因可能的转录启动子区段及转录因子结合位点。方法:检索网上数据库资料,获得Visfatin的转录本信息;运用CpG/CpGReport/Isochore和FirstEF对Visfatin基因进行CpG岛分析和第一外显子预测;利用PromoterScan等程序对Visfatin的启动子进行预测。再用Matlspector、TFSEARCH和Match预测潜在的调控元件及转录因子结合位点。结果:目前已知的Visfatin转录本中,5'UTR区最长的序列为NM_005746;Visfatin基因属于典型的CpG岛相关基因,在NM_005746的5'上游229bp到798bp内很可能存在启动子,在该区域内发现了一些重要的顺式作用元件。结论:NM_005746的5'上游229bp到798bp内存在一些重要的顺式作用元件.通过实验确认这些转录因子结合位点有重要意义。

关键词： Visfatin 转录调控生物信息学

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利用球孢链霉菌发酵液消化双歧杆菌细胞壁提取质粒的研究

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中国微生态学杂志 2008年第6期20卷 527-528页

作者：罗耀玲黄雪萍武向梅丁嵩涛马永平宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的寻找一种经济适用的提取双歧杆菌质粒的方法。方法利用球孢链霉菌发酵产生的变溶菌素来消化双歧杆菌细胞壁,提取质粒,并与商业化溶菌酶法比较。结果球孢链霉菌发酵液与溶菌酶均成功提取到质粒。结论利用球孢链霉菌发酵液提取质粒经... 详细信息

目的寻找一种经济适用的提取双歧杆菌质粒的方法。方法利用球孢链霉菌发酵产生的变溶菌素来消化双歧杆菌细胞壁,提取质粒,并与商业化溶菌酶法比较。结果球孢链霉菌发酵液与溶菌酶均成功提取到质粒。结论利用球孢链霉菌发酵液提取质粒经济简便。

关键词：球孢链霉菌变溶菌素双歧杆菌质粒

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产肠毒素大肠杆菌定居因子Ⅰ基因克隆与表达

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重庆医科大学学报 2008年第7期33卷 814-816页

作者：黄雪萍王勇罗耀玲冉丹霞马永平宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenio escherichia coli,ETEC)定居因子CFA/Ⅰ,检测重组表达的ETEC CFA/Ⅰ。方法:以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA/Ⅰ重组载体,表达产物用SDS-PAGE鉴定,免疫原性实验验证。结... 详细信息

目的:在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenio escherichia coli,ETEC)定居因子CFA/Ⅰ,检测重组表达的ETEC CFA/Ⅰ。方法:以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA/Ⅰ重组载体,表达产物用SDS-PAGE鉴定,免疫原性实验验证。结果:成功构建了pBV220-CFA/Ⅰ重组载体,表达产物的分子量与天然蛋白相同,动物免疫试验表明重组菌具有免疫原性。结论:CFA/Ⅰ基因的成功克隆为今后的ETEC CFA/Ⅰ候选疫苗研制奠定了基础。

关键词：产肠毒素大肠杆菌质粒pBV220 定居因子抗原Ⅰ

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大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位在婴儿双歧杆菌中的表达

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中国微生态学杂志 2008年第2期20卷 113-115页

作者：罗耀玲王勇黄雪萍冉丹霞马永平宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的将大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位(LTB)克隆到表达载体pBV220,使LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中稳定表达。方法将LTB基因克隆到表达载体pBV220中,再分别转化大肠埃希菌DH5α和婴儿双歧杆菌,使之表达,表达产物用SDS-PAGE鉴定。... 详细信息

目的将大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位(LTB)克隆到表达载体pBV220,使LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中稳定表达。方法将LTB基因克隆到表达载体pBV220中,再分别转化大肠埃希菌DH5α和婴儿双歧杆菌,使之表达,表达产物用SDS-PAGE鉴定。并通过家兔肠袢实验验证表达蛋白的安全性。结果LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中均可稳定表达,毒性实验证明LTB保留轻微的毒性。结论稳定表达LTB的双歧杆菌为今后的口服疫苗佐剂奠定了基础。

关键词：大肠埃希菌双歧杆菌 pBV220 LTB

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基础医学专业生物化学课程教学改革初探

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中华医学教育杂志 2008年第2期28卷 43-44页

作者：鲁云霞张胜权陈兵周胤安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032

本文根据基础医学专业人才的培养目标，对基础医学专业生物化学课程的理论和实验教学进行了改革，即采用特定的专业教材结合临床医学的基础知识，尽量扩大学生的知识面，强化课堂教学效果，加大双语教学力度，让学生早日进入实验室参与... 详细信息

本文根据基础医学专业人才的培养目标，对基础医学专业生物化学课程的理论和实验教学进行了改革，即采用特定的专业教材结合临床医学的基础知识，尽量扩大学生的知识面，强化课堂教学效果，加大双语教学力度，让学生早日进入实验室参与科研等，取得了一定的效果。

关键词：基础医学专业生物化学理论与实验教学教学改革

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塞来希布对胃癌细胞增殖抑制作用

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中国公共卫生 2008年第5期24卷 523-525页

作者：聂海祺罗姚佳文涛孙黎光李剑平中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室中医科大学辽宁省疾病预防控制中心辽宁省血液中心

目的观察塞来希布对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进胃癌BGC-823细胞的增殖抑制影响,探讨塞来希布抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法不同浓度组的塞来希布作用于经25 ng/ml bFGF作用后的胃癌BGC-823细胞,用蛋白印迹(western blot)分析法... 详细信息

目的观察塞来希布对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进胃癌BGC-823细胞的增殖抑制影响,探讨塞来希布抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法不同浓度组的塞来希布作用于经25 ng/ml bFGF作用后的胃癌BGC-823细胞,用蛋白印迹(western blot)分析法检测环氧化酶-2(COX-2)、核转录因子-κB(NF-κB)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达变化。结果25 ng/ml bFGF通过PKB信号转导通路能增强胃癌BGC-823细胞中COX-2、NF-κB、VEGF蛋白的表达,对胃癌BGC-823细胞有促增殖作用,呈时间依赖性(P<0.01)。不同浓度组的塞来希布对经25 ng/ml bFGF作用的胃癌BGC-823细胞中COX-2、NF-κB、VEGF蛋白的表达均有抑制作用(P<0.01)。结论塞来希布对bFGF促进BGC-823胃癌细胞的增殖有一定的抑制作用。

关键词：塞来希布 BGC-823细胞碱性成纤维细胞生长因子增殖

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