检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2007年第11期23卷 1061-1063页

作者：崔城赵鸿梅王雁邓欣于秉治中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 辽宁省人民医院检验科辽宁沈阳110016 中国医科大学实验技术中心三部辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:构建小鼠cdc25B蛋白特定序列的原核表达载体,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白。方法:采用PCR方法从小鼠cdc25B野生型及位点突变型蛋白编码序列中扩增出约360个碱基的片段,构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,... 详细信息

目的:构建小鼠cdc25B蛋白特定序列的原核表达载体,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白。方法:采用PCR方法从小鼠cdc25B野生型及位点突变型蛋白编码序列中扩增出约360个碱基的片段,构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导后进行融合蛋白表达。Western blot鉴定表达产物。结果:构建出带有GST标签的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中表达出相对分子质量(Mr)为40000的重组蛋白质,经Westernblot鉴定,可与GST单克隆抗体结合,发生特异性反应。结论:利用原核表达系统成功表达出小鼠cdc25B蛋白特定序列的蛋白质,为进一步探讨与其他蛋白相互作用提供了基础。

关键词：小鼠 cdc25B 原核表达

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大鼠溃疡性结肠炎实验模型中核因子-κBp65、COX-2的表达研究

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新疆医科大学学报 2007年第9期 921-924页

作者：郭霞吴桂霞哈木拉提·吾甫尔黄国虹武贵臻库热西·玉努斯新疆医科大学生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学生理教研室新疆医科大学基础医学院科研中心新疆医科大学生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830054

目的:探讨NF-κBp65、COX-2在溃疡性结肠炎发病和发展过程中的作用。方法:采用2,4-二硝基氯苯（DNCB）与乙酸复合灌肠法制备大鼠溃疡性结肠炎实验模型,实验动物分为正常组与溃疡性结肠炎模型组两组。采用半定量RT-PCR的方法,在mRNA水平... 详细信息

目的:探讨NF-κBp65、COX-2在溃疡性结肠炎发病和发展过程中的作用。方法:采用2,4-二硝基氯苯（DNCB）与乙酸复合灌肠法制备大鼠溃疡性结肠炎实验模型,实验动物分为正常组与溃疡性结肠炎模型组两组。采用半定量RT-PCR的方法,在mRNA水平上检测各组结肠组织NF-κBp65、COX-2的表达。结果:与正常组相比,溃疡性结肠炎模型组结肠组织中NF-κBp65、COX-2表达显著增高（P<0.05）。在模型组中,NF-κBp65活性与COX-2的表达水平呈正相关关系（P<0.05）。结论:在溃疡性结肠炎中,NF-κBp65的激活可能调控COX-2的表达升高,从而导致了溃疡性结肠炎发生、发展。

关键词：溃疡性结肠炎核因子-κBp65 环氧化合酶2

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β-catenin腺病毒载体的构建及鉴定

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重庆医科大学学报 2007年第6期32卷 561-564页

作者：毕杨黄佳祎吴明军张琴张任飞赵迎泽冯涛重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学研究所重庆400016

目的:构建人β-catenin基因的重组腺病毒载体,为进一步研究Wnt/Wingless信号通路在肿瘤发生发展中的作用机制奠定重要基础。方法:以含有β-catenin的pcmv-βNS-FC质粒为模板PCR获得目的基因,将目的基因定向克隆至腺病毒穿梭质粒构建阳... 详细信息

目的:构建人β-catenin基因的重组腺病毒载体,为进一步研究Wnt/Wingless信号通路在肿瘤发生发展中的作用机制奠定重要基础。方法:以含有β-catenin的pcmv-βNS-FC质粒为模板PCR获得目的基因,将目的基因定向克隆至腺病毒穿梭质粒构建阳性重组pAd track-β-catenin,并经PmeI线性化后在BJ5183细菌中与腺病毒骨架质粒pAd Easy-1同源重组获得β-catenin重组腺病毒载体,再将PacI线性化的腺病毒质粒转染HEK293细胞包装重组腺病毒。结果:PCR及酶切鉴定证实目的基因正确克隆至腺病毒质粒中,目的基因序列与GENEBANK报道一致,荧光显微镜可观察到GFP的表达。结论:成功构建pAd-β-catenin腺病毒质粒载体,并在HEK293细胞中包装出重组腺病毒。

关键词： β-catenin基因腺病毒载体 Wnt/Wingless信号通路肿瘤

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结合生物化学实际开展PBL教学实践

结合生物化学实际开展PBL教学实践

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首届全国生物化学与分子生物学教学研讨会

作者：魏金荣于爱鸣冯晨关一夫中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

为适应教学改革的需要,在2003级和2005级临床医学专业生物化学课中进行了PBL教学实践。结果表明:PBL教学模式能显著提高学生的学习兴趣,明显提高学生的整体素质,是一种非常受学生欢迎的教学模式。

关键词：高等教育生物医学工程生物化学技术 PBL教学法

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肺癌与良性胸腔积液蛋白质双向电泳图谱差异分析

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中国医科大学学报 2007年第1期36卷 52-54页

作者：侯伟健吴广平贾兰玲王宏阎影中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院病理诊断中心中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第一研究室美国密苏里堪萨斯城大学医学院移植与癌免疫实验室

目的:建立肺癌与肺良性胸腔积液的双向电泳图谱,分析二者表达蛋白质的差异及特点。方法:利用固相pH梯度双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离肺癌和肺良性胸腔积液中的总蛋白质。凝胶经银染色后用PDQUEST6.2.1电泳分析软件对胸水中的蛋白质谱... 详细信息

目的:建立肺癌与肺良性胸腔积液的双向电泳图谱,分析二者表达蛋白质的差异及特点。方法:利用固相pH梯度双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离肺癌和肺良性胸腔积液中的总蛋白质。凝胶经银染色后用PDQUEST6.2.1电泳分析软件对胸水中的蛋白质谱进行分析,识别差异表达的蛋白质。结果:肺癌与肺良性胸腔积液的蛋白质组分布的基本框架很相似,并可发现二者之间有差异蛋白点;两种胸腔积液电泳图谱平均蛋白质点数分别为326±16和343±12,平均匹配点数为286±14和298±21,匹配率87.7%,86.9%.差异蛋白点82个,其中37个在肺癌胸腔积液中高表达,24个在肺癌胸腔积液中低表达。有17个点仅在良性胸腔积液表达,4个点仅在肺癌胸腔积液表达。结论:用双向电泳法得到了分辨率较高且重复率较好的肺癌与肺良性胸腔积液蛋白质组图谱,二者存在一些表达差异蛋白质。

关键词：双向电泳肺癌胸腔积液蛋白质组

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大鼠溃疡性结肠炎组织中c-fos与iNOS mRNA的表达

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新疆医科大学学报 2007年第9期 938-941页

作者：黄国虹黄静静哈木拉提·吾甫尔贺捷陈蓉库热西·玉努斯新疆医科大学基础医学院生物化学及与分子生物学教研室新疆医科大学基础医学院新疆地方病分子生物学重点实验室新疆医科大学基础医学院机能中心新疆医科大学基础医学院科研中心

目的:研究大鼠溃疡性结肠炎组织中iNOS与c-fos mRNA的表达与溃疡性结肠炎（UC）发生的关系。方法:建立大鼠溃疡性结肠炎模型,提取结肠组织总RNA,经半定量RT-PCR检测iNOS与c-fos mRNA的表达。结果:大鼠溃疡性结肠炎组织中iNOS mRNA表达... 详细信息

目的:研究大鼠溃疡性结肠炎组织中iNOS与c-fos mRNA的表达与溃疡性结肠炎（UC）发生的关系。方法:建立大鼠溃疡性结肠炎模型,提取结肠组织总RNA,经半定量RT-PCR检测iNOS与c-fos mRNA的表达。结果:大鼠溃疡性结肠炎组织中iNOS mRNA表达较正常结肠组织明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）;c-fos mRNA与正常组相比,无明显变化（P>0.05）。结论:大鼠溃疡性结肠炎模型中iNOS mRNA表达水平升高,证实iNOS与溃疡性结肠炎的发生有关;c-fos在mRNA水平与溃疡性结肠炎的发生无直接关系,推测c-fos蛋白可能与UC相关。

关键词：溃疡性结肠炎 iNOS c-fos

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国际英文医学班的教学问题与对策

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中华医学教育杂志 2007年第3期27卷 48-49页

作者：柏树令关一夫赵群潘峰李雪松李瑞佟雷中国医科大学基础医学院人体解剖学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室中国医科大学

涉外英文医学教育是近年来我国医学教育的新生事物。随着学历互认和我国在国际舞台上地位与作用的提升,许多外国学生来到我国学习医学,促进了我国医学英语教学的发展。笔者从国际英文医学班教学对象出发,从认识英文医学教学特殊性、制... 详细信息

涉外英文医学教育是近年来我国医学教育的新生事物。随着学历互认和我国在国际舞台上地位与作用的提升,许多外国学生来到我国学习医学,促进了我国医学英语教学的发展。笔者从国际英文医学班教学对象出发,从认识英文医学教学特殊性、制定教学策略、加强教学管理、提高教师素质等方面,分析了教学中存在的问题,提出了相应的对策。

关键词：国际英文医学班医学课程教学方法

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铝暴露对哺乳期大鼠海马中钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ含量及活力的影响

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环境与健康杂志 2007年第11期24卷 899-901页

作者：郝凤进谢鑫朴贤玉中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 辽宁中医药大学教学实验中心辽宁沈阳110032 齐齐哈尔医学院基础医学院黑龙江齐齐哈尔161042

目的研究慢性铝暴露对哺乳期大鼠海马中钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)含量及活力的影响,探讨铝暴露损害学习、记忆的作用机制。方法将清洁级孕期Wistar大鼠随机分为对照组、低剂量和高剂量组,每组6只。仔鼠出生后第1天,分别用含有0,0... 详细信息

目的研究慢性铝暴露对哺乳期大鼠海马中钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)含量及活力的影响,探讨铝暴露损害学习、记忆的作用机制。方法将清洁级孕期Wistar大鼠随机分为对照组、低剂量和高剂量组,每组6只。仔鼠出生后第1天,分别用含有0,0.2%和0.4%AlCl3的蒸馏水喂养母鼠。仔鼠出生后第21天(哺乳期结束),测定其全血和脑组织中的铝含量、海马中CaMKⅡ含量及活力。结果高、低剂量组仔鼠血铝和脑铝含量均高于对照组,经q检验,差异有统计学意义(P<0.05);且血铝及脑铝含量均随着铝暴露浓度的升高而升高。高、低剂量组仔鼠海马中α-CaMKⅡ的含量及活力均低于对照组,经q检验,差异有统计学意义(P<0.05);且α-CaMKⅡ的含量及活力均随着铝暴露浓度的升高而降低。结论铝暴露使仔鼠海马中α-CaMKⅡ的蛋白表达和活力降低,可能是造成学习、记忆功能损害的原因之一。

关键词：铝钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ 学习记忆

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大鼠IL-6基因siRNA表达载体的构建

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新疆医科大学学报 2007年第9期 932-934页

作者：阿孜古力·克热木龙梅哈木拉提·吾甫尔纳斯尔阿吉·买买提艾力黄静静库热西·玉努斯新疆医科大学高职学院机能教研室新疆医科大学基础医学院机能中心新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室新疆医科大学基础医学院生物化学及分子生物学教研室

目的:构建具有特异性阻断大鼠白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）基因的小干扰RNA（small interfe-rening RNA,si RNA）表达载体。方法:应用si RNA设计软件在大鼠IL-6基因的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,并设计合成两条互补小发夹... 详细信息

目的:构建具有特异性阻断大鼠白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）基因的小干扰RNA（small interfe-rening RNA,si RNA）表达载体。方法:应用si RNA设计软件在大鼠IL-6基因的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,并设计合成两条互补小发夹结构的DNA序列,经退火后形成双链DNA片段,采用基因克隆技术,将其克隆到pSilencerTM1.0-U6的载体中,转化DH5α大肠杆菌,提取质粒,酶切方法和测序法对重组体进行鉴定。结果:酶切和测序结果表明,成功构建了大鼠IL-6基因的si RNA表达载体。结论:成功构建了si RNA表达载体,为今后利用RNAi技术在大鼠动物模型上研究疾病的发病机理、药物作用靶点提供先进的技术平台。

关键词： IL-6 siRNA pSilencerTM1.0-U6载体

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促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1相互作用的筛选和鉴定

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第三军医大学学报 2007年第6期29卷 482-485页

作者：张翠莉杨晓明成海恩刘涛王应雄重庆医科大学公共卫生学院生殖医学系遗传学教研室重庆400016 军事医学科学院放射医学研究所北京100850 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 第三军医大学西南医院全军感染病研究所重庆400038

目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu-Smac/DIABLO。②pDB... 详细信息

目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu-Smac/DIABLO。②pDBLeu-Smac/DIABLO诱饵质粒转化酵母MaV203,Western blot检测融合蛋白在酵母中的正确表达,自激活作用的检测并确定抑制His基础表达的3AT浓度。③对成人肝cDNA文库的筛选。选择能同时激活His、Ura、LacZ3个报告基因的克隆为阳性,利用回转实验和GST-pull down对阳性克隆进行鉴定。结果成功构建pDBLeu-Smac/DIABLO载体,转化酵母细胞MaV203,无细胞毒性,无自激活作用,3AT浓度为25mmol/L。经回转实验和GST-pull down证实了线粒体促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1之间具有相互作用。结论Smac/DIABLO可能通过与核受体NR4A1的相互作用来影响核受体NR4A1对细胞生存或者凋亡的调控。

关键词： Smac/DIABLO NR4A1 酵母双杂交

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