检索结果-内蒙古大学图书馆

人乳头状瘤病毒阴性的宫颈癌及其癌前病变中p16^(INK4A)蛋白表达和DNA倍体分析

中华病理学杂志 2006年第7期35卷 412-416页

作者：林贞花柳明沫赵祎玮吴群英刘双平金仁仙吉林省延边大学基础医学院病理学教研部吉林省延边大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室韩国高丽大学医科大学病理学教研室

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)感染阴性的宫颈癌及其癌前病变中p16INK4A蛋白表达和DNA倍体分析的临床病理学意义。方法应用PCR方法筛查出HPV感染阴性的20例慢性宫颈炎、20例宫颈上皮内瘤变(CIN)、3例宫颈腺上皮内瘤变(CGIN)、38例浸润性... 详细信息

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)感染阴性的宫颈癌及其癌前病变中p16INK4A蛋白表达和DNA倍体分析的临床病理学意义。方法应用PCR方法筛查出HPV感染阴性的20例慢性宫颈炎、20例宫颈上皮内瘤变(CIN)、3例宫颈腺上皮内瘤变(CGIN)、38例浸润性鳞状细胞癌(鳞癌)和15例浸润性腺癌作为研究对象。应用免疫组织化学(LSAB)染色方法检测p16INK4A蛋白在这些病变组织中的表达,并结合流式细胞仪DNA倍体分析探讨HPV阴性的宫颈癌的早期诊断和预后判定。结果p16INK4A蛋白特异性地表达在CIN和CGIN病变、鳞癌以及腺癌细胞的胞核和胞质中,而在正常鳞状上皮和腺上皮中没有任何阳性表达信号。另外,DNA异倍体在浸润性鳞癌和腺癌中的表达率明显高于CIN病变组(P<0．01)。在有淋巴结转移的浸润癌中DNA异倍体存在的百分率高于无淋巴结转移组,但尚未发现差异有统计学意义。在8例p16INK4A表达阴性的浸润性鳞癌中有2例表现为DNA异倍体。结论p16INK4A蛋白检测可以作为HPV感染阴性的宫颈鳞癌及腺癌的早期诊断指标,结合DNA倍体分析将对宫颈恶性肿瘤的诊断有重要的辅助意义。

关键词：宫颈肿瘤乳头状瘤病毒,人蛋白质p16

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酿酒酵母S期检查点通路上web2基因与rad53基因的位置关系

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第6期22卷 454-459页

作者：李新鸣孙黎光刘萍白抚生付玥宣忠信中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 辽宁省金秋医院神经内科沈阳110016

为探讨酿酒酵母(***)S期检查点通路上,web2(wantsE1Abadly2,web2)基因与rad53基因的上下游位置及相互作用关系,利用羟基脲(hydroxyurea,HU)分别阻断web2突变株和野生株细胞的DNA合成.采用pHA-rad53质粒救助实验测定质粒源性Rad53蛋白是... 详细信息

为探讨酿酒酵母(***)S期检查点通路上,web2(wantsE1Abadly2,web2)基因与rad53基因的上下游位置及相互作用关系,利用羟基脲(hydroxyurea,HU)分别阻断web2突变株和野生株细胞的DNA合成.采用pHA-rad53质粒救助实验测定质粒源性Rad53蛋白是否能救助web2突变株对羟基脲的敏感性;Western印迹及免疫共沉淀反应检测Rad53蛋白表达及磷酸化.结果显示,pHA-rad53质粒可以救助web2突变株的存活;Western印迹检测到web2突变株内质粒源性Rad53蛋白表达增强而且至少Rad53部分蛋白为磷酸化蛋白.说明在HU作用下,过表达并磷酸化的质粒源性Rad53蛋白可以救助web2突变株的S期检查点功能缺陷,在酿酒酵母S期检查点通路上web2基因位于rad53基因上游,可能直接参与将检查点信号传递至Rad53蛋白.

关键词： web2基因 rad53基因 S期检查点酿酒酵母

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慢性染铅对海马CA1区LTP及α-CaMKⅡ活性的抑制性影响

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中国应用生理学杂志 2006年第3期22卷 326-328页

作者：杨菁孙黎光宗志宏蔡葵王洪新中国医科大学基础医学院生物化学教研室辽宁沈阳110001 锦州医学院分子生物学及新药开发重点实验室辽宁锦州121004

目的:探讨慢性染铅对海马CA1区长时程增强(LTP)及钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(-αCaMKⅡ)活性的影响。方法:用同心圆电极刺激海马的Schaffer侧支,于CA1区用细胞外玻璃电极记录单脉冲刺激引起的锋电位群(PS),观察对照组及不同剂量染铅组大鼠... 详细信息

目的:探讨慢性染铅对海马CA1区长时程增强(LTP)及钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(-αCaMKⅡ)活性的影响。方法:用同心圆电极刺激海马的Schaffer侧支,于CA1区用细胞外玻璃电极记录单脉冲刺激引起的锋电位群(PS),观察对照组及不同剂量染铅组大鼠于高频刺激(HFS)前后PS幅值的变化;同时以磷酸化抗体,用Western blots方法检测海马CA1区-αCaMKⅡ活性。结果:HFS后,对照组和低、中、高剂量染铅组的幅值分别为各自的HFS前的162.5%、105.2%、86.8%、83.0%,染铅组PS幅值变化率明显低于对照组(P<0.01);以对照组-αCaMKⅡ活性为100,则低、中和高剂量染铅组活性分别为62.0±3.7、50.8±4.0、43.3±4.1,和对照组相比P<0.01,具有显著性差异。结论:慢性染铅可抑制CA1区LTP形成,而这种抑制作用可能与铅使-αCaMKⅡ活性降低密切相关。

关键词：铅海马长时程增强钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ 学习记忆

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ERK1/2介导的bFGF对肝癌细胞系Bel-7402细胞增殖和凋亡的影响

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中国医科大学学报 2006年第5期35卷 451-453页

作者：刘萍孙黎光侯伟健于卉影中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 沈阳军区总医院医学实验科

目的:观察Ras-Raf-ERK1/2途径介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对肝癌细胞系Bel-7402细胞增殖和凋亡的影响,探讨bFGF及其信号转导途径与肝癌发生发展的关系。方法:以bFGF和PD98059处理Bel-7402细胞,流式细胞术检测细胞周期与凋亡情况... 详细信息

目的:观察Ras-Raf-ERK1/2途径介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对肝癌细胞系Bel-7402细胞增殖和凋亡的影响,探讨bFGF及其信号转导途径与肝癌发生发展的关系。方法:以bFGF和PD98059处理Bel-7402细胞,流式细胞术检测细胞周期与凋亡情况;MTT法检测细胞增殖情况;Western blot检测细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)的活化。结果:bFGF处理,诱导细胞进入S期[S期细胞比例(27.49±0.72)%→(42.45±1.06)%];细胞增殖比明显增加,且与bFGF水平成剂量依赖关系,bFGF浓度为25 ng/ml时细胞增殖比最高为129%;使无血清饥饿诱导的凋亡细胞比例下降[(28.89±3.13)%(→1.70±2.10)%];时、量效依赖性地诱导ERK1/2活性增高。ERK激活性蛋白激酶(MEK1)抑制剂PD98059可抑制bFGF的这些作用。结论:bFGF通过Ras-Raf-ERK1/2途径介导,加速肝癌Bel-7402细胞的细胞周期进程,促进细胞增殖,抵抗无血清饥饿诱导的凋亡。在肝癌发生发展过程中,bFGF信号传递发挥了重要的作用。

关键词：肝癌碱性成纤维细胞生长因子细胞外信号调节蛋白激酶增殖凋亡

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氢醌凝胶剂对酪氨酸酶的抑制作用

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中国医科大学学报 2006年第1期35卷 39-40页

作者：金睿张玉霞中国医科大学药学院药理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001

采用自制的稳定型氢醌凝胶剂,以氢醌凝胶剂对酪氨酸酶的抑制作用作为生化观察指标,观察到氢醌凝胶剂对酪氨酸酶的抑制率呈线性,氢醌凝胶剂稳定,对黄褐斑有显著治疗作用。

关键词：氢醌凝肢剂酪氨酸酶抑制作用

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人睾丸精子结合蛋白-His6融合蛋白在真核细胞中的表达及亲和纯化

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第5期22卷 553-556页

作者：宿文辉张杰张丽雁宗志红张哲于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 辽宁中医药大学职业技术学院临床护理教研室辽宁沈阳110101

目的:构建含有人睾丸精子结合蛋白基因(testisspermbindingprotein,tsbp)的真核表达载体pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp,并进行表达和纯化。方法:以克隆有tsbp全长cDNA序列的原核表达载体pGEX5X1/tsbp为模板,用PCR扩增tsbp,并通过DNA重组构建真核表达载体pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp。以重组体稳定转染HEK293细胞后,应用RTPCR、Westernblot和细胞免疫荧光技术检测His6tsbp融合蛋白的表达。选择高表达量的细胞克隆,扩增并用Ni2+NTA金属亲和层析柱(IMAC)从细胞裂解液中纯化融合蛋白His6tsbp,纯化产物的纯度用SDSPAGE和Westernblot进行鉴定。结果:成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp。以重组体转染HEK293细胞后,用RTPCR检测到tsbpmRNA的表达。细胞免疫荧光染色呈阳性反应,Westernblot检测到培养细胞中有融合蛋白His6tsbp的表达。经Ni2+NTA金属亲和层析柱分离纯化,得到纯化的重组蛋白His6tsbp。结论:构建了pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp真核表达载体,并在HEK293细胞中表达和亲和层析纯化,为下一步的研究奠定了基础。

关键词： tsbp 基因克隆融合蛋白真核表达金属亲和层析

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低氧导致培养心肌细胞Na^+通道基因SCN5A mRNA表达改变

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医学分子生物学杂志 2006年第3期3卷 190-193页

作者：陈诗慧李晖石广森李凤兰金剑峰范启明刘宇张振明马宁哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨市150086

目的研究低氧培养大鼠心肌细胞Na+通道基因SCN5A mRNA表达的变化,并探讨其与丙二醛(M alond ialhyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide d ismutase,SOD)活性的关系。方法培养大鼠心肌细胞,检测各组培养液氧分压。用RT-PCR检测SCN5A ... 详细信息

目的研究低氧培养大鼠心肌细胞Na+通道基因SCN5A mRNA表达的变化,并探讨其与丙二醛(M alond ialhyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide d ismutase,SOD)活性的关系。方法培养大鼠心肌细胞,检测各组培养液氧分压。用RT-PCR检测SCN5A mRNA表达,检测培养液MDA含量和细胞SOD活性。结果与对照组相比:SCN5A mRNA相对表达量低氧1 h和6 h组显著增高(P<0.001)、低氧12 h和24 h组显著降低(P<0.001);MDA含量显著增高而SOD活性显著降低。结论心肌细胞Na+通道基因SCN5A在低氧1 h和6 h mRNA表达上调,而在低氧12 h和24 h mRNA表达下调,且与脂质过氧化和SOD相关。

关键词：心肌细胞低氧 Na^+通道 SCNSA 基因表达脂质过氧化

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人谷氧还蛋白1基因克隆及真核表达载体的构建

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哈尔滨医科大学学报 2006年第5期40卷 354-357页

作者：邹朝霞张春晶吴丽芳刘莹莹房绍红周宏博哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 齐齐哈尔医学院生化教研室黑龙江齐齐哈尔161042

目的从ECV304细胞中克隆谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)的cDNA序列并构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1。方法利用Trizol一步法从ECV304细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术从中获得Grx1的cD-NA,将质粒pcDNA3.1(+)进行双酶切、CIP处理并回收纯化,与纯化后的Grx1cDNA连接构成重组表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆鉴定并进行测序分析。结果经RT-PCR和测序鉴定,成功地克隆了人Grx1cDNA。结论从ECV304细胞中获得Grx1的cDNA,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-Grx1,对Grx1在体外表达、进一步研究其在氧化应激中的作用及其作用机制具有重要意义。

关键词：谷氧还蛋白1 基因克隆序列分析真核表达

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Caspase介导的Fas凋亡途径

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世界华人消化杂志 2006年第36期14卷 3439-3442页

作者：王玉孙黎光夏春辉中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁省沈阳市110001 齐齐哈尔医学院黑龙江省齐齐哈尔市161042

凋亡是导致细胞死亡的调节性生理过程.Fas在各种疾病和细胞凋亡的发生中起到首要作用.Caspase为半胱氨酸蛋白酶家族,是凋亡的中心调节者,一旦Caspase-8,10被激活,引起Caspase的断裂及激活下游的Caspase-3,6,7,作用于Bcl-2家族某些成员如... 详细信息

凋亡是导致细胞死亡的调节性生理过程.Fas在各种疾病和细胞凋亡的发生中起到首要作用.Caspase为半胱氨酸蛋白酶家族,是凋亡的中心调节者,一旦Caspase-8,10被激活,引起Caspase的断裂及激活下游的Caspase-3,6,7,作用于Bcl-2家族某些成员如Bad、一些骨架蛋白和RB蛋白等并使其断裂,从而导致细胞凋亡.本文重点讨论了Caspase-3,-8的激活机制及其在Fas诱导细胞凋亡中的作用.

关键词： caspase家族 Fas 细胞凋亡

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降钙素基因相关肽对血管内皮细胞凋亡的保护作用

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齐齐哈尔医学院学报 2006年第2期27卷 133-134页

作者：赵守琪于晓光潘洪明王淑英齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室

目的观察降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-relatedpeptide;CGRP)对高浓度葡萄糖(高糖)诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用。方法用MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果当CGRP浓度为10-8mol/L时,高糖对细胞的损伤已明显... 详细信息

目的观察降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-relatedpeptide;CGRP)对高浓度葡萄糖(高糖)诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用。方法用MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果当CGRP浓度为10-8mol/L时,高糖对细胞的损伤已明显得到保护。高糖组细胞活力为60%,而CGRP处理组细胞活力为80%。流式细胞术检测结果显示,CGRP处理组细胞凋亡率明显下降。结论CGRP可对高糖诱导的内皮细胞凋亡起到保护作用。

关键词：血管内皮细胞细胞凋亡降钙素基因相关肽

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