检索结果-内蒙古大学图书馆

钙连蛋白(CNX)通过促进MHC Ⅰ表达增强CD8^(+)T细胞对结直肠癌细胞的杀伤作用

细胞与分子免疫学杂志 2022年第2期38卷 97-102页

作者：杨婷郑锦秀高书华成敏蓉薛宇彤邵莹李逸涵杨涛山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室山西太原030001 山西医科大学基础医学院药理学教研室山西太原030001 山西医科大学基础医学院病理山西太原030001 山西医科大学第一临床医学院山西太原030001 山西医科大学细胞生理学教育部重点实验室山西太原030001

目的分析钙连蛋白(CNX)在结直肠癌(CRC)的异常表达对免疫细胞杀伤作用的影响及分子机制。方法免疫组织化学染色检测组织芯片102对CRC及癌旁组织的CNX的表达;在人HCT-15细胞过表达CNX,在人SW480细胞采用小干扰RNA敲低CNX表达,Western blo... 详细信息

目的分析钙连蛋白(CNX)在结直肠癌(CRC)的异常表达对免疫细胞杀伤作用的影响及分子机制。方法免疫组织化学染色检测组织芯片102对CRC及癌旁组织的CNX的表达;在人HCT-15细胞过表达CNX,在人SW480细胞采用小干扰RNA敲低CNX表达,Western blot法检测主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)蛋白表达;将过表达CNX的慢病毒感染CT-26小鼠结肠癌细胞,并与脾脏分离的CD8^(+)T细胞共培养,利用细胞毒性试剂盒检测CD8^(+)T细胞对CT-26细胞的杀伤作用,ELISA检测γ干扰素(IFN-γ)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌的变化。结果CNX在结直肠癌组织的表达低于癌旁组织;HCT-15细胞过表达CNX后,MHCⅠ的蛋白水平升高:敲低SW480细胞CNX,MHCⅠ表达水平下降。过表达CNX可增强CD8T细胞对CT-26细胞的杀伤能力,且培养液上清中IFN-γ与TNF-α的含量增加。结论CNX可通过促进结直肠癌细胞MHCⅠ表达,增强CD8^(+)T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。

关键词：钙连蛋白(CNX) MHCⅠ CD8^(+)T细胞结直肠癌免疫逃逸

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OBE理念下学术型研究生医学分子生物学教学改革

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基础医学教育 2022年第1期24卷 24-28页

作者：闫萍李美宁弓韬张栋解军郭睿山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001

作为生命科学领域发展最为迅速的前沿学科,分子生物学在构建医学院校学术型研究生的知识体系、创新意识及科研素养培养中发挥着重要作用。为满足新医科人才培养的需求,文章依托产出导向教育(outcome-based education,OBE)理念,旨在培养... 详细信息

作为生命科学领域发展最为迅速的前沿学科,分子生物学在构建医学院校学术型研究生的知识体系、创新意识及科研素养培养中发挥着重要作用。为满足新医科人才培养的需求,文章依托产出导向教育(outcome-based education,OBE)理念,旨在培养学生科研课题设计能力和创新意识,借助信息化智慧教学平台,综合运用网络优质教学资源和虚拟仿真实验平台,开展探究式和讨论式新型教学模式改革,构建了适合地方医学院校学术型研究生培养的新型分子生物学课程体系。课程考核成绩和后期的学生科研成果随访显示,该新型教学模式获得良好成效,同时为新时期医学研究型复合人才的培养积累了成功经验。

关键词：医学分子生物学教学改革产出导向教育

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自噬介导的克唑替尼耐药对间变性淋巴瘤激酶阳性间变性大细胞淋巴瘤肿瘤干细胞样细胞亚群的影响及意义

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白血病．淋巴瘤 2022年第3期31卷 137-142页

作者：刘东哲商楚荃张宇彤深圳大学总医院血液肿瘤科深圳518055 Laboratory of Oncology and Pathology University of AlbertaEdmontonT6G 2R7Canada 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学实验室哈尔滨150081

目的探讨间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)中自噬介导的克唑替尼耐药对肿瘤干细胞样细胞亚群的影响。方法本课题组前期通过植入Sox2报告基因已将ALK+ALCL Karpas299细胞株分为报告基因非反应型(RU)细胞和报告基因反应... 详细信息

目的探讨间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)中自噬介导的克唑替尼耐药对肿瘤干细胞样细胞亚群的影响。方法本课题组前期通过植入Sox2报告基因已将ALK+ALCL Karpas299细胞株分为报告基因非反应型(RU)细胞和报告基因反应型(RR)细胞,其中RR细胞具备干细胞特性。通过慢病毒感染技术构建荧光标记的LC3过表达RR和RU细胞(分别为RR-LC3、RU-LC3),蛋白质印迹法及流式细胞术验证感染效率。RU-LC3和RR-LC3细胞使用不同浓度(0、250、500、1000 nmol/L)克唑替尼处理后,采用双信号流式细胞术检测RED、GEN信号(RED代表下一代远红色荧光蛋白TagFP635 mKate的红色信号B695,GEN代表来自pH敏感的GFP变体pHluorin的绿色信号B530),以RED/GEN表示自噬通量。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞自噬相关基因ULK1、WIPI1、LC3B mRNA表达水平。MTS法检测不同浓度(250、500、1000 nmol/L)克唑替尼联合氯喹(5、10μmol/L)对细胞存活的影响。结果成功构建过表达LC3的RR-LC3和RU-LC3细胞。250、500、1000 nmol/L克唑替尼诱导下,RU-LC3细胞中RED/GEN分别为1.135±0.017、1.453±0.017和1.755±0.021,RR-LC3细胞中分别为1.193±0.018、2.116±0.013和3.307±0.189,RU-LC3细胞和RR-LC3细胞中RED/GEN均呈剂量依赖性增加;相同浓度克唑替尼作用的RR-LC3细胞中RED/GEN均高于RU-LC3细胞,差异均有统计学意义(均P<0.01);表明RR-LC3细胞较RU-LC3细胞自噬通量变化大。未经克唑替尼处理时,RR细胞中ULK1、WIPI1、LC3B mRNA相对表达量均高于RU细胞(1.69±0.05比1.01±0.02,t=-1.62,P<0.01;1.24±0.04比1.03±0.05,t=-2.11,P<0.01;1.70±0.22比1.02±0.05,t=-1.74,P=0.033)。无氯喹作用时,RR细胞克唑替尼半数抑制浓度(IC_(50))高于RU细胞(950 nmol/L比709 nmol/L)。氯喹作用后,RU细胞IC_(50)无变化;RR细胞IC_(50)随氯喹浓度增加而降低。结论与RU细胞相比,具有肿瘤干细胞特征的RR细胞自噬反应更快速、强烈,这可能是其对克唑替尼耐药的重要原因之一。

关键词：淋巴瘤,大细胞,间变性间变性淋巴瘤激酶自噬肿瘤干细胞抗药性,肿瘤

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核酸检测技术进展及其在SARS-CoV-2核酸检测中的应用

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生物化学与生物物理进展 2021年第11期48卷 1290-1300页

作者：孟德豪张艳芬孙玉淼高旭马宁哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院检验科哈尔滨150000 黑龙江省基础医学研究所哈尔滨150086 哈尔滨医科大学北方转化医学研究合作中心哈尔滨150081 教育部中国遗传资源保护与疾病防控重点实验室哈尔滨150081 黑龙江省遗传改变模式动物重点实验室哈尔滨150081

2020年初至今,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情仍在全球多个国家流行,给全球公共卫生安全造成了严重威胁.中国在应对COVID-19的实践中,最先完成病毒核酸测序并共享序列信息,最早有效控制疫情蔓延、恢复生产,并在病毒作用人体机制研究、... 详细信息

2020年初至今,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情仍在全球多个国家流行,给全球公共卫生安全造成了严重威胁.中国在应对COVID-19的实践中,最先完成病毒核酸测序并共享序列信息,最早有效控制疫情蔓延、恢复生产,并在病毒作用人体机制研究、疫苗研发、中和性抗体发现等环节均处于世界前沿.其中,针对病毒核酸的检测工作——试剂盒研发、检测配套设备研制、10合1混检策略及相关政策制订,有效提高了疫情防控效率、保障了百姓健康.本文就严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测多种方法的原理、优劣势及其配套设备等进行综述.

关键词：新型冠状病毒核酸检测 CRISPR

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诱导小鼠白色脂肪来源的SVF分化为米色脂肪细胞的方法初探

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现代生物医学进展 2023年第10期23卷 1822-1828页

作者：蒋硕陈思远孟轩羽刘迪晖梁小弟新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院机能中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学附属肿瘤医院病理科新疆乌鲁木齐830011

目的:探究将小鼠白色脂肪来源的SVF细胞诱导为米色脂肪细胞的方法,为米色脂肪的研究提供细胞模型。方法:分离培养小鼠脂肪组织来源的SVF细胞,观察其细胞形态及生长特性,分别用鸡尾酒法和米色脂肪诱导法处理细胞,在诱导的第0、2、4、6、8... 详细信息

目的:探究将小鼠白色脂肪来源的SVF细胞诱导为米色脂肪细胞的方法,为米色脂肪的研究提供细胞模型。方法:分离培养小鼠脂肪组织来源的SVF细胞,观察其细胞形态及生长特性,分别用鸡尾酒法和米色脂肪诱导法处理细胞,在诱导的第0、2、4、6、8、10天收取细胞样品进行Western blot和RT-qPCR实验,油红O染色观察不同时间点培养皿中的脂质生成情况,并对针对脂滴大小定量。结果:实验分离的SVF细胞随着接种时间的延长逐渐呈长梭形,在+接种120 h后有呈螺旋式生长的趋势。Western blot和RT-qPCR结果显示两种诱导方法皆使过氧化物酶体增殖物受体γ(Peroxisomeproliferator activated receptor γ,PPARγ)和CCAAT-增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteins α,C/EBPα)基因表达升高(P<0.05),油红O染色结果显示,在两种方法的诱导下,脂质生成水平无差异,但与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法的脂肪细胞脂滴面积明显减少(P<0.05),并且小体积脂滴所占百分比较高。Western blot和RT-qPCR结果显示,与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法使解偶联蛋白1(Uncoupling protein 1,UCP1)和含PR结构域蛋白16(PRD1-BF1-RIZ1 homologous domain containing 16,PRDM16)基因表达升高(P<0.05)。结论:与鸡尾酒法相比,该方法能够成功诱导SVF细胞向米色脂肪细胞分化,脂滴具备米色脂肪特征,并表达米色脂肪标记基因。

关键词： SVF细胞米色脂肪细胞 UCP1 PRDM16 鸡尾酒诱导法

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水痘-带状疱疹病毒RAA检测方法的建立及初步应用

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第6期37卷 631-636页

作者：刘昊泽王瑞晨张维嘉姚晓慧付士红聂凯李樊殷启凯何英王环宇扈瑞平许松涛内蒙古医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室呼和浩特010110 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京102206

目的建立水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)的重组酶等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)快速检测方法。方法通过全球共享数据库下载VZV全基因组序列进行比对分析,针对四个保守基因分别设计特异性引物与探针并筛... 详细信息

目的建立水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)的重组酶等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)快速检测方法。方法通过全球共享数据库下载VZV全基因组序列进行比对分析,针对四个保守基因分别设计特异性引物与探针并筛选出最佳组合,通过引物与探针浓度梯度筛选出最佳反应体系,建立荧光型RAA检测方法。用VZV阳性质粒标准品与梯度稀释的临床样本评价方法的灵敏度,以最低检出极限浓度的阳性质粒标准品进行重复实验评价方法的重复性,以其他病毒核酸评价方法的特异性,同时用本方法和荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qPCR)对临床样本进行检测并对检测结果进行比较。结果本方法筛选出针对开放阅读框架(open reading frame,ORF)28基因的引物对F2/R2与探针P2为最佳组合;考虑到成本因素,最佳引物浓度为500 nmol/L,最佳探针浓度为280 nmol/L;最低检出极限为101拷贝/μL,最低可检测到Ct值为36.027的临床阳性样本;重复实验的检测结果一致;该方法与其他病毒核酸无交叉反应;临床阳性样本的检出率为93.33%,与qPCR检测结果几乎完全一致。结论本方法操作简便、灵敏度高、特异性强、对实验条件要求低、检测结果直观可视,在20 min内就能够检测出样本中的VZV核酸,是一种可以被临床检测考虑的VZV快速检测方法。

关键词：重组酶等温扩增水痘-带状疱疹病毒检测

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凹侧撑开预矫形技术治疗重度僵硬性脊柱侧凸的早期研究

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骨科 2023年第2期14卷 132-137页

作者：薛旭红张麒赵胜张艳东王世雄席凡辉葛贵喧郭伟杰山西医科大学第二医院骨科太原030001 山西医科大学第二临床医学院太原030001 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030606

目的研究凹侧撑开预矫形技术治疗重度僵硬性特发性脊柱侧凸的早期疗效和安全性。方法回顾性分析2020年1月至2022年12月山西医科大学第二医院收治并进行手术治疗的重度僵硬性脊柱侧凸的8例病人的临床资料。手术均采用凹侧撑开预矫形后... 详细信息

目的研究凹侧撑开预矫形技术治疗重度僵硬性特发性脊柱侧凸的早期疗效和安全性。方法回顾性分析2020年1月至2022年12月山西医科大学第二医院收治并进行手术治疗的重度僵硬性脊柱侧凸的8例病人的临床资料。手术均采用凹侧撑开预矫形后双侧依次上棒二次矫形的手术方法。分别测量术前、术后及末次随访时的影像学参数包括主弯Cobb角、次弯Cobb角、胸椎后凸角(TK)、腰椎前凸角(LL)、主弯顶椎偏距(AVT)、躯干偏移(TS)。结果病人随访(9.0±6.3)个月(1~16个月)。术前主弯Cobb角:97.4°±10.0°,次弯Cobb角:55.6°±8.4°,TK:50.4°±20.3°,LL:62.7°±6.3°,AVT:(7.64±1.55)cm,TS:(2.00±1.93) cm;术后即刻主弯Cobb角:25.8°±8.1°,次弯Cobb角:21.0°±12.0°,TK:24.9。±9.6°,LL:31.6°±11.9°,AVT:(2.34±1.45) cm,TS:(1.26±0.63) cm;末次随访主弯Cobb角:21.2°±9.1°,次弯Cobb角:22.4°±16.1°,TK:32.8°±12.0°,LL:37.6°±14.0°,AVT:(2.41±0.81) cm,TS:(1.6±1.4) cm。除TS外,上述其他指标术后即刻、末次随访时的数值与术前比较,差异有统计学意义(P<0.05),但术后即刻与末次随访时的数值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。1例术后7个月出现迟发性感染,遂进行手术清创以及内固定取出术后再愈合。结论采用凹侧撑开预矫形治疗重度脊柱侧凸能够获得满意的矫形效果,且出血少,术中及术后神经系统并发症发生率低,是一种安全有效且实用的治疗方法。

关键词：重度特发性脊柱侧凸凹侧预矫形二次矫形

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FDFT1依赖肿瘤免疫微环境促进结肠癌细胞的生长

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第三军医大学学报 2021年第24期43卷 2648-2655页

作者：罗娜张大鹏缪洪明代荣阳西南医科大学基础医学院四川泸州646000 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的研究法呢基二磷酸酯法呢基转移酶1 (farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1)对结肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞MC-38体内体外生长的影响。方法通过GEPIA数据库分析275例CRC样本和349例正常组织样本中FDFT1的表达量,通过数据库分析人CRC中FDFT1的免疫组化表达水平。使用慢病毒介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)构建FDFT1沉默的CRC细胞系MC-38,得到稳定低表达FDFT1的MC-38细胞系(sh-FDFT1组)和空载对照细胞系(sh-NC组),Western blot、RT-qPCR验证敲低效果。CCK-8实验、流式细胞术、Transwell实验分别观察敲低FDFT1对MC-38细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。采用C57BL/6小鼠、重度免疫缺陷NCG小鼠构建CRC腹腔种植转移模型,利用C57BL/6小鼠构建皮下移植瘤模型,14 d后观察沉默FDFT1对小鼠肿瘤生长情况的影响。结果数据库分析结果显示CRC组织中FDFT1的表达较正常组织高(P<0.05),免疫组化结果显示CRC病人FDFT1高表达。沉默FDFT1对MC-38细胞增殖、凋亡及迁移均没有明显影响;在C57BL/6小鼠CRC腹腔种植转移模型和皮下移植瘤模型中均发现沉默FDFT1后显著抑制肿瘤生长(P<0.05)。NCG小鼠腹腔种植转移模型显示沉默FDFT1后肿瘤生长没有差异(P>0.05)。结论 FDFT1在体内促进CRC细胞生长依赖于肿瘤免疫微环境。

关键词：法呢基二磷酸酯法呢基转移酶1 结肠癌免疫微环境 MC-38

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SARS-CoV-2重组S1和S蛋白疫苗诱导保护性免疫的研究

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中国生物工程杂志 2022年第5期42卷 106-116页

作者：钱曼云王继伟李颢泽王瑞华刘云李亚峰山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 南京诺唯赞生物科技股份有限公司南京210000 山西医科大学第五临床医学院(山西省人民医院)中心实验室太原030012 肾脏病山西省重点实验室太原030012 山西医科大学微生态研究院太原030001

目的:评价新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组S1蛋白和S蛋白疫苗对SARS-CoV-2的免疫保护效果。方法:将SARS-CoV-2重组S1蛋白和S蛋白分别联合氢氧化铝佐剂以0.1μg/只、1μg/只、5μg/只、10μg/只不同剂量接种6~8周BALB/c纯系健康雌性小鼠。... 详细信息

目的:评价新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组S1蛋白和S蛋白疫苗对SARS-CoV-2的免疫保护效果。方法:将SARS-CoV-2重组S1蛋白和S蛋白分别联合氢氧化铝佐剂以0.1μg/只、1μg/只、5μg/只、10μg/只不同剂量接种6~8周BALB/c纯系健康雌性小鼠。第二次免疫后采血通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IgG抗体效价,通过假病毒中和试验比较免疫小鼠血清对SARS-CoV-2野生型株(WT)、英国株(B.1.1.7)、巴西株(P.1)、印度株(B.1.617.2)、Mu毒株(B.1.621)和南非株(501Y.V2-1)六种假病毒毒株中和活性效价,取脾细胞通过酶联免疫斑点技术(ELISpot)检测免疫小鼠的细胞免疫水平。结果:SARS-CoV-2重组S和S1蛋白都能诱导小鼠产生较强的IgG抗体水平。免疫S1蛋白的小鼠血清对SARS-CoV-2野生型株、英国株、巴西株有明显的中和活性,免疫S蛋白的小鼠血清除了对SARS-CoV-2野生型株、英国株、巴西株有明显中和活性之外,对印度株也有明显的中和活性,两种蛋白质免疫的小鼠血清均对野生型株中和效果最强。S蛋白免疫的小鼠脾细胞能够显著诱导出γ干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)的产生。S蛋白诱导产生的IgG抗体、中和抗体、细胞免疫水平均高于S1。结论:SARS-CoV-2重组S蛋白疫苗能够诱导产生较强的保护性免疫应答。

关键词：新型冠状病毒 S蛋白 S1蛋白新型冠状病毒突变株保护性免疫应答

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刚地弓形虫致密颗粒蛋白3基因缺陷虫株的构建及毒力鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2025年

作者：王佩豪吴敏敏都建安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室感染性疾病研究中心安徽医科大学人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽医科大学第一附属医院检验科

目的构建刚地弓形虫ME49株致密颗粒蛋白3（dense granule protein 3,GRA3）基因缺陷虫株并鉴定其毒力。方法利用规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 [clustered regularly interspaced short palindromic repeats（C RISPR）/CR... 详细信息

目的构建刚地弓形虫ME49株致密颗粒蛋白3（dense granule protein 3,GRA3）基因缺陷虫株并鉴定其毒力。方法利用规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 [clustered regularly interspaced short palindromic repeats（C RISPR）/CRISPR-associated protein9,CRISPR/Cas9]技术构建基因缺陷虫株。使用E-CRISPR软件设计向导RNA（guide RNA,gRNA）,利用Q5定点突变试剂盒突变pSAG1::Cas9-U6::sgUPRT质粒上的gRNA,构建pSAG1::Cas9-U6::sgGRA3质粒。构建一个含有GRA3基因上游序列、乙胺嘧啶抗性基因二氢叶酸还原酶胸苷酸合酶（dihydrofolate reductase-thymidylate synthase,DHFR-TS）和GRA3基因下游序列的GRA3基因供体质粒,并通过PCR扩增出GRA3基因供体DNA。将pSAG1::Cas9-U6::sgGRA3质粒和GRA3基因供体DNA电穿孔转染野生型刚地弓形虫ME49速殖子,电转后的虫株悬液接种于人包皮成纤维（human foreskin fibroblast,HFF）细胞中,并用乙胺嘧啶进行筛选,获得乙胺嘧啶抗性虫株后进行单克隆筛选,采用PCR和Western blotting鉴定弓形虫GRA3基因缺陷单克隆株ME49Δgra3,采用Western blotting检测弓形虫ME49Δgra3株中GRA3蛋白表达水平。将新鲜裂解的弓形虫ME49株和ME49Δgra3株速殖子各1 000个加入接种有HFF细胞的12孔板中,置于37℃含5%CO2的细胞培养箱中培养7d,以结晶紫染液染色法计数空斑数量。采用吉姆萨染色法对弓形虫ME49株和ME49Δgra3株速殖子感染的HFF细胞染色,计数细胞中含有1、2、4个和>4个弓形虫纳虫泡数量的细胞。比较弓形虫ME49株和ME49Δgra3株感染的C57BL/6小鼠35 d存活率。结果 PCR扩增发现,DHFR-TS基因上、下游同源臂条带在弓形虫ME49Δgra3株中均成功扩增,ME49株未扩增出相应条带;GRA3基因条带在弓形虫ME49株中成功扩增,ME49Δgra3株未扩增出GRA3基因条带但扩增出含DHFR-TS基因的条带。Western blotting检测发现,弓形虫ME49Δgra3株中未见GRA3蛋白表达。弓形虫ME49株平均形成（352.67±26.39）个空斑、ME49Δgra3株平均形成（235.00±26.29）个空斑,差异有统计学意义（t=5.472,P<0.01）。吉姆萨染色结果显示,弓形虫ME49株感染的HFF细胞中,纳虫泡内至少含有4个弓形虫速殖子的比例为（75.67±2.52）%,高于ME49Δgra3株感染组的（59.67±2.31）%（t=8.113,P<0.01）;纳虫泡内含有1个或2个弓形虫速殖子的比例为（24.33±2.52）%,低于ME49Δgra3株感染组的（40.33±2.31）%（t=-8.113,P<0.01）。感染弓形虫ME49株和ME49Δgra3株的小鼠分别自感染后第8、9天开始死亡,感染后第35 d存活率分别为10%（1/10）和70%（7/10）,差异具有统计学意义（χ2=6.762,P<0.01）。结论成功构建了刚地弓形虫ME49Δgra3株,GRA3蛋白可能增强弓形虫ME49株毒力。

关键词：刚地弓形虫致密颗粒蛋白3 基因缺陷规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白9 毒力

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