检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医科大学学报 2018年第5期43卷 624-628页

作者：向进庹琳高庆祝杨翼梁利夏杰唐霓汪凯重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:构建编码磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)的基因PCK1重组腺病毒和基因敲除2种细胞模型,并初步观察PCK1过表达和敲除后对肝癌细胞迁移能力的影响。方法:PCK1 c DNA克隆到p AdTrackTO4载体,构建重... 详细信息

目的:构建编码磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)的基因PCK1重组腺病毒和基因敲除2种细胞模型,并初步观察PCK1过表达和敲除后对肝癌细胞迁移能力的影响。方法:PCK1 c DNA克隆到p AdTrackTO4载体,构建重组腺病毒质粒,在HEK293细胞中包装、扩增成高滴度重组腺病毒AdPCK1;利用CRISPR/Cas9系统在PLC/PRF/5肝癌细胞系中筛选出PCK1基因敲除的稳定细胞株。首先,在过表达模型将Huh7细胞设为2组:AdGFP组和AdPCK1组,AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组,AdPCK1组为感染腺病毒AdPCK1的实验组。在敲除模型设Parental组和KO组,Parental组是PLC/PRF/5细胞作为对照组,KO组是PCK1基因敲除稳定细胞株作为实验组。Western blot技术检测2种模型蛋白表达量,采用划痕实验观察细胞迁移能力,进一步经q RT-PCR检测影响肝癌细胞的迁移关键分子。结果:重组腺病毒AdPCK1构建成功,经Western blot鉴定PCK1在Huh7细胞中的表达。向导RNA(single guide RNA,sg RNA)寡核苷酸双链成功插入酶切后的Lenti CRISPR-V2质粒载体中且测序正确;经Western blot鉴定PCK1敲除的细胞株筛选成功。划痕结果显示,PCK1过表达模型在48 h的细胞迁移率为(66.300±0.383)%,与AdGFP组[(42.900±3.833)%]相比明显增加(t=10.540,P=0.000);PCK1敲除KO组在48 h的细胞迁移率为(59.40±5.68)%,与亲本细胞组[(79.00±5.20)%]相比明显减少(t=4.420,P=0.012)。q RT-PCR结果显示,PCK1过表达后,相较于对照组AdGFP,Cdh1相对表达量为2.733±0.501(t=5.989,P=0.004),相对表达增高;PCK1敲除后,相较于亲本细胞组,Cdh1相对表达量为0.664±0.017(t=34.290,P=0.000),相对表达减少。结论:PCK1过表达后可明显抑制肝癌细胞的迁移能力,而敲除后促进其迁移,证实PCK1可能作为抑癌基因参与肝癌的发生和发展。

关键词： PCK1 重组腺病毒 CRISPR/Cas9 肝癌迁移

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三种培养基分离骆驼刺内生细菌效果初探

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新疆医学 2019年第7期49卷 712-714页

作者：马燕张晓波熊文娟杨珊珊郑倩陈锋孙玉萍新疆医科大学第二附属医院检验科乌鲁木齐830063 新疆医科大学基础医学院病原生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第五附属医院检验科乌鲁木齐830000

目的比较不同培养基对骆驼刺内生细菌的分离效果,为内生细菌的分离培养选择合适的培养基。方法采集新疆荒漠地区骆驼刺植物种子,选用LB,TSA和R2A三种培养基对灭菌后的种子进行内生细菌分离纯化,并对内生细菌进行16S rDNA测序。结果从LB,... 详细信息

目的比较不同培养基对骆驼刺内生细菌的分离效果,为内生细菌的分离培养选择合适的培养基。方法采集新疆荒漠地区骆驼刺植物种子,选用LB,TSA和R2A三种培养基对灭菌后的种子进行内生细菌分离纯化,并对内生细菌进行16S rDNA测序。结果从LB,TSA,R2A培养基上分别纯化到6、8、3株内生细菌,从TSA上分离到的内生细菌的数量和种类最多,与其他两种培养基比较有统计学意义(P<0.01)。芽孢杆菌属细菌是三种培养基上的优势菌群。结论TSA对于骆驼刺内生细菌的分离效果较好,是分离骆驼刺内生细菌较适宜的培养基。

关键词：环境微生物培养基骆驼刺内生细菌分离效果

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一株骆驼刺内生真菌LTCY3的鉴定与抑菌活性初筛

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新疆医学 2019年第11期49卷 1084-1087页

作者：熊文娟张晓波马燕杨珊珊郑倩陈锋孙玉萍新疆医科大学第五附属医院检验科乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院病原生物学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第二附属医院检验科乌鲁木齐830063

目的一株骆驼刺内生真菌LTCY3的鉴定及抑菌活性初筛,为今后开发利用新的微生物资源提供科学依据。方法对一株从骆驼刺叶中分离获得的骆驼刺内生真菌(LTCY3)进行形态学观察,并利用ITS序列测定方法对其进行鉴定,用菌饼法检测其抑菌活性。... 详细信息

目的一株骆驼刺内生真菌LTCY3的鉴定及抑菌活性初筛,为今后开发利用新的微生物资源提供科学依据。方法对一株从骆驼刺叶中分离获得的骆驼刺内生真菌(LTCY3)进行形态学观察,并利用ITS序列测定方法对其进行鉴定,用菌饼法检测其抑菌活性。结果经序列测定和数据库比对,LTCY3被鉴定出为曲霉菌属(Aspergillus sp);抑菌结果发现LTCY3对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的抑菌圈的直径分别为15.00±0.52 mm、11.33±0.58 mm、11.67±0.20 mm和13.33±0.31 mm。结论本研究在药用植物骆驼刺中分离获得的一株曲霉属(Aspergillus sp)内生真菌对临床常见的致病菌具有潜在抑菌活性,且抑菌活性相对广泛,该研究对于植物内生菌的抑菌药物开发和利用提供了科学依据和研究基础。

关键词：内生真菌骆驼刺抑菌活性

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二甲双胍丁酸盐对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡与迁移能力的影响

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安徽医科大学学报 2018年第2期53卷 171-175页

作者：陈晴晴束军谢庆书沈继龙安徽医科大学第四附属医院呼吸内科合肥230022 安徽病原生物学省级实验室和人兽共患病安徽重点实验室(安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室) 合肥230032

目的研究不同浓度的二甲双胍丁酸盐(MFB)作用不同时间后对人肺腺癌细胞A549增殖、凋亡与迁移能力的影响。方法用梯度浓度(0、0.5、1、2、4、8 mmol/L)的MFB对离体培养的A549细胞进行处理,在作用24、48 h后,用MTT法检测MFB对A549细胞增... 详细信息

目的研究不同浓度的二甲双胍丁酸盐(MFB)作用不同时间后对人肺腺癌细胞A549增殖、凋亡与迁移能力的影响。方法用梯度浓度(0、0.5、1、2、4、8 mmol/L)的MFB对离体培养的A549细胞进行处理,在作用24、48 h后,用MTT法检测MFB对A549细胞增殖的抑制率;干预24、48 h后用流式细胞术分析A549细胞的凋亡率。用划痕实验分析MFB对A549细胞株迁移能力的影响。结果 MTT实验表明,MFB对A549细胞的增殖具有抑制作用,并且在一定浓度范围内呈现出浓度和时间依赖性(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示:实验组细胞凋亡率大于对照组(P<0.05),具有一定的时间和浓度依赖性(P<0.05)。划痕实验结果显示实验组细胞迁移率小于对照组,高浓度用药组细胞迁移率小于低浓度用药组(P<0.05),且药物作用48 h后细胞迁移率<24 h(P<0.05)。结论 MFB在体外能够抑制人肺腺癌A549细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,其强度可能与其浓度和作用时间有关。

关键词：二甲双胍丁酸盐肺腺癌增殖凋亡迁移

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地塞米松降解新基因的探讨

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中国生物工程杂志 2018年第1期38卷 15-24页

作者：张进斯丹杨致邦熊玉霞马廉举李津阳蒋仁举重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学药学实验教学中心重庆400016 重庆医科大学临床医学专业一系重庆400016

目的：探讨地塞米松降解代谢新基因,为构建高效、稳定的地塞米松降解基因工程菌提供思路。方法：根据新发现的地塞米松降解菌Burkholderia ***001（***001）全基因组测序和生物信息学分析,筛选疑似与地塞米松代谢相关的基因。提取***001... 详细信息

目的：探讨地塞米松降解代谢新基因,为构建高效、稳定的地塞米松降解基因工程菌提供思路。方法：根据新发现的地塞米松降解菌Burkholderia ***001（***001）全基因组测序和生物信息学分析,筛选疑似与地塞米松代谢相关的基因。提取***001总RNA逆转录为c DNA,以c DNA为模板,利用PCR技术快速克隆经实时荧光定量PCR技术（RT-q PCR）验证筛选出的新基因,测序鉴定后连接原核表达载体p ET-28a-c（＋）,构建重组质粒p ET-28a-Ivd。将p ET-28a-Ivd转化感受态***001,高效液相色谱（HPLC）验证表达菌降解能力的提升。结果：从***001基因组中筛选出3个未知基因,分别为ORF05499、ORF05827、ORF06535,其表达产物分别为过氧化物还原酶、甾酮异构酶、异戊酰辅酶A脱氢酶;RT-q PCR分析显示,3个目的基因在地塞米松诱导后均有不同程度表达上调,基因ORF06535表达上调明显;在***001中过表达基因ORF06535,HPLC检测显示,表达菌对地塞米松磷酸钠和地塞米松的降解率可达到89.0%和80.0%,相比原菌***001有明显提升。结论：在***001中发现新的地塞米松降解相关基因ORF06535,并完成基因克隆和功能验证,为制备地塞米松及甾体激素污染的生物修复剂提供了新的基因信息。

关键词：伯克霍尔德菌地塞米松降解基因实时荧光定量 PCR

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金丝桃素对小鼠巨噬细胞内刚地弓形虫速殖子的增殖抑制作用

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中国人兽共患病学报 2018年第7期34卷 583-587页

作者：崔洁王旗杨小迪孙希萌汪瑞姜辉王守祥张敏魏明夏惠陈兴智沈继龙安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室安徽省人兽共患病重点实验室(安徽医科大学) 合肥230032 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院显微形态综合实验室蚌埠233030 安徽省血吸虫病防治研究所合肥230061 首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室北京100069

目的观察金丝桃素(Hypericin,Hy)对小鼠巨噬细胞内弓形虫的增殖抑制作用,为抗弓形虫天然药物的筛选提供线索。方法分离小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外Mφ感染稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫(RH-green fluorescent protein,RH... 详细信息

目的观察金丝桃素(Hypericin,Hy)对小鼠巨噬细胞内弓形虫的增殖抑制作用,为抗弓形虫天然药物的筛选提供线索。方法分离小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外Mφ感染稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫(RH-green fluorescent protein,RH-GFP)速殖子模型,观察不同剂量Hy的最佳作用效果。实验分4组:(1)A组(对照组),不加Hy;(2)B组(Mφ感染RH-GFP+100μg/mL Hy);(3)C组(Mφ感染RH-GFP+200μg/mL Hy);(4)D组(Mφ感染RH-GFP+400μg/mL Hy),分别在培养1、2和3h后利用荧光显微镜和流式细胞术观察计数感染的Mφ和游离速殖子在各药物浓度及各时间点的变化;透射电镜观察虫体超微结构的变化。结果与对照组相比,随着Hy浓度的增加和用药时间的延长,Mφ内速殖子数量明显减少,游离速殖子数量也显著减少,荧光强度逐渐降低;经药物组不同浓度Hy作用后,游离/Mφ内弓形虫的比值逐渐升高,至400μg/mL剂量作用3h后开始下降,游离与胞内速殖子比例的差异在同一时间段内均有统计学意义(P<0.05),但药物作用1h或2h各实验组之间无统计学差异(P>0.05),作用3h各浓度组之间差异有统计学意义(P<0.05),各实验组同一药物浓度下在孵育1、2和3h后效果增强(P<0.05)。透射电镜观察显示,随Hy作用时间延长,虫体逐渐出现肿胀,胞膜与基质之间空隙明显,空泡形成且增多、变大,胞膜断裂,内部结构溶解溢出。结论体外实验初步显示Hy呈剂量和时间依赖性地增强对Mφ内弓形虫速殖子增殖的抑制作用,可降低宿主细胞感染率,且对胞外速殖子有一定杀伤作用。

关键词：金丝桃素刚地弓形虫巨噬细胞抑制

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重庆市耐多药肺结核可疑患者药敏结果分析

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重庆医科大学学报 2018年第7期43卷 923-926页

作者：胡彦杨春卢楠刘洁刘英余锋平沈静朱大冕冯鑫王晓英重庆市结核病防治所结核病参比实验室重庆400050 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:通过分析重庆市耐多药肺结核(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)可疑患者药敏结果,为重庆市耐多药结核病的发现及控制提供参考和依据。方法:2014年7月至2016年2月重庆市39个区县573例MDR-TB可疑患者痰培养阳性分离株,采用... 详细信息

目的:通过分析重庆市耐多药肺结核(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)可疑患者药敏结果,为重庆市耐多药结核病的发现及控制提供参考和依据。方法:2014年7月至2016年2月重庆市39个区县573例MDR-TB可疑患者痰培养阳性分离株,采用比例法进行4种一线抗结核药物和6种二线抗结核药物的药敏试验,对药敏结果进行统计分析。结果:573例MDR-TB可疑患者的MDR-TB检出率为25.0%,明显高于单耐药结核病(single drug-resistant tuberculosis,SDR-TB)检出率(9.6%)及多耐药结核病(poly drug-resistant tuberculosis,PDR-TB)检出率(8.0%)(P<0.001)。高危人群MDR-TB检出率为26.6%(130/488),明显高于新患者的15.3%(13/85)(P=0.026)。高危人群中,复治失败患者MDR-TB检出率最高,为42.1%(16/38),其次为初治失败患者,为40.0%(18/45)。结论:重庆市耐多药肺结核可疑患者MDR-TB检出率高,耐多药肺结核防控形势严峻。高危人群尤其是复治失败和初治失败患者应该作为耐多药肺结核筛查的重点人群。

关键词：结核分枝杆菌耐多药高危人群药敏试验重庆市

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医学微生物实验室文化建设探索

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基础医学教育 2018年第5期20卷 368-371页

作者：邢效瑞杨闽楠信彩岩宋章永西南医科大学基础医学院病原生物学与免疫学实验室泸州646000 西南医科大学基础医学院病原生物学教研室

近年来随着学校不断投入,西南医科大学医学微生物实验室硬件条件得到极大改善,为了保持实验室的可持续发展,如何加强实验室文化建设变得尤为迫切。通过分析实验室文化的内涵,确定医学微生物实验室文化建设的目标与原则;最后,从精神文化... 详细信息

近年来随着学校不断投入,西南医科大学医学微生物实验室硬件条件得到极大改善,为了保持实验室的可持续发展,如何加强实验室文化建设变得尤为迫切。通过分析实验室文化的内涵,确定医学微生物实验室文化建设的目标与原则;最后,从精神文化建设、物质文化建设、行为文化建设等方面规划医学微生物实验室文化建设路径。实验室文化建设可以有效解决目前实验室发展中的突出问题,提升实验室发展水平,保证实验室建设的可持续性。

关键词：医学微生物学实验室建设文化建设

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医学微生物学虚拟仿真实验平台建设初探

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基础医学教育 2018年第2期20卷 137-140页

作者：杨闽楠邢效瑞王光西年四季叶迎春西南医科大学基础医学院病原生物学教研室泸州646000 西南医科大学基础医学院病原生物学与免疫学实验室

针对医学微生物实验教学存在的问题,文章初步探索虚拟仿真技术应用于医学微生物实验教学的可行性方案。将虚拟技术与现实教学有效结合,充分发挥虚拟平台的优势,从而不断深入进行医学微生物实验教学改革,丰富基础医学教育手段,培养学生... 详细信息

针对医学微生物实验教学存在的问题,文章初步探索虚拟仿真技术应用于医学微生物实验教学的可行性方案。将虚拟技术与现实教学有效结合,充分发挥虚拟平台的优势,从而不断深入进行医学微生物实验教学改革,丰富基础医学教育手段,培养学生自主学习积极性,提高学生创新能力。

关键词：医学微生物学实验教学虚拟仿真

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细菌群体感应与多样性关系的研究进展

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贵州医科大学学报 2019年第5期44卷 509-512页

作者：牛雪可康颖倩贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地暨贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025

生态环境中的微生物群落存在多样性演变,该多样性演变过程中的微生物群体通过资源消耗间接发生的剥削竞争及直接作用损害的干扰竞争发挥重要作用,在两种竞争中调节并响应其分子信号的细菌群体感应(QS),能影响并调节微生物群落中不同微... 详细信息

生态环境中的微生物群落存在多样性演变,该多样性演变过程中的微生物群体通过资源消耗间接发生的剥削竞争及直接作用损害的干扰竞争发挥重要作用,在两种竞争中调节并响应其分子信号的细菌群体感应(QS),能影响并调节微生物群落中不同微生物的数量及种类,进而影响整个微生物群落的结构及多样性。本文对近年来微生物群落多样性与QS的相关研究进展进行综述。

关键词：剥削竞争干扰竞争群体感应微生物群落多样性生物膜

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